γ—干扰素转基因对过敏原导致的小鼠肺嗜酸性粒细 …

目的：探讨腺病毒介导的小鼠γ－干扰素在小鼠哮喘模型肺上皮细胞内的转基因表达对过敏原所致的嗜酸性粒细胞浸润的作用。方法：Ｃ５７小鼠经卵蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）腹腔致敏和气道吸入激发建立哮喘模型，４８ｈ后收获小鼠肺泡灌洗液（ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ ｌａｖａｇｅ，ＢＡＬ）和小鼠肺；哮喘模型在ＯＶＡ激发前４８ｈ，在其气道内给予带有γ－干扰素的复制缺陷腺病毒（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ－ｄｅｆ     

幽门螺杆菌在不同培养基上生长情况的比较

探讨灵芝多糖（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　ｌｕｃｉｄｕｍ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ Ｂ, ＧＬ－Ｂ）对小鼠腹腔巨噬细胞（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅ,ＰＭ）、肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ａｌｐｈａ, ＴＮＦα）、肿细胞 γ干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－γ,ＩＦＮγ）的产生及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法;采集小鼠ＰＭ和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清。生物法测定ＴＮＦα。ＥＬＩＳＡ测定ＩＦＮγ;ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ的表达。结果：ＧＬ－Ｂ２５～４００ｍｇ·Ｌ~（－１）使正常小鼠ＰＭ培养上清中ＴＮＦα的活性升高,并呈剂量依赖关系,２４ ｈ达高峰,７２ ｈ后开始减少。 ＧＬ－Ｂ对小鼠 ＰＭ的 ＴＮＦα ｍＲＮＡ表达有显著促进作用。ＧＬ－Ｂ１２．５～２００ｍｇ~（－１）明显增加正常小鼠脾细胞培养上清中ＩＦＮγ产生。２４ｈ内随培养时间的延长而增加,４８ ｈ后开始减少。ＧＬ－Ｂ对ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达有促进作用。结论：灵芝多糖ＧＬ－Ｂ明显促进小鼠ＰＭ及脾细胞 ＴＮＦα和 ＩＦＮβ ｍＲＮＡ的表达,增加 ＴＮＦα和 ＩＦＮβ的产生。     

免疫介导的再生障碍性贫血小鼠脾细胞中肿瘤坏死因子基因表达的研究

以前的研究证明多数再障患者血清ＴＮＦ升高，本文用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测免疫介导的再障小鼠脾细胞中ａ－ＴＮＦ ｍＲＮＡ的表达和用ＥＬＩＳＡ检测脾细胞诱生ＴＮＦ的量的改变，结果显示：再障组小鼠的ＴＮＦ ｍＲＮＡ水平和脾细胞诱生的ａ－ＴＮＦ的量均比正常组者明显降低。这一结果提示免疫介导的再障小鼠血清ＴＮＦ的升高与脾细胞无关。     

灵芝多糖（GL—B）对肿瘤坏死因子α和γ干扰素产生及其mRNA表 …

探讨灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞,肿瘤坏死因子α,脾细胞γ干扰素的产生及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法;采集小鼠ＰＭ和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清。生物法测定ＴＮＦα,ＥＬＩＳＡ测定ＩＦＮγ;ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ的表达。结果;ＧＬ－Ｂ２５－４００ｍｇ．Ｌ＾－１使正常小鼠ＰＭ培养上清中ＴＮＦα活性升高,并呈剂量依赖关系,２４ｈ在高峰,７２ｈ后开始减少。     

转γ-干扰素基因大鼠肝细胞模型的建立

目的：使用多聚阳离子脂质体载体（ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ）在体外建立转γ干扰素（ＩＦＮγ） 基因的大鼠肝细胞模型。方法：利用ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ在体外将ＩＦＮγ基因转染大鼠肝细胞。分别以ＲＴＰＣＲ 和ＥＬＩＳＡ方法检测所转ＩＦＮγ基因在大鼠肝细胞的转录和表达情况。结果：以ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ为载体的ＩＦＮγ基因转染大鼠肝细胞后,可被有效的转录并产生具有生物活性的ＩＦＮγ。结论：ＩＦＮγ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达。这可能为细胞因子的免疫治疗提供一种新途径。     

腺病毒介导的β—半乳糖苷酶在小鼠气道上皮的转基因表达

目的：以β－半乳糖苷酶基因为标志基因研究重组复制缺陷腺病毒在 小鼠肺内气道上皮细胞中的转基因表达。方法：带有LacZ表达基因的重组复制缺陷腺病毒（AdCMVLacZ）,经鼻腔吸入法和气管内注射法两种途径分别感染小鼠肺组织,此后在不同时间取小鼠肺组织经多聚甲醛固定后,以X-gal染色。石蜡包埋切片后用核固红复染。结果：β－半乳糖苷酶经重组复制缺陷腺病毒AdCMVLacZ感染小鼠气道和肺泡上皮细胞,并高效表达目的基因,表达时间可长达31天,重复感染后仍可表达13天。结论：重组复制缺陷腺病毒可携带外源性基因在小鼠气道上皮细胞内进行高效、稳定和较为长期的转基因表达。     

头孢地秦对细胞因子及细胞因子mRNA表达的影响

目的：探讨头孢地秦对正常及金黄色葡萄球菌感染的败血症小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭ）肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）与白细胞介素６（ＩＬ６）分泌及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法：采集小鼠ＰＭ，体外给药，分离细胞培养上清。生物检测法测定ＴＮＦα，ＥＬＩＳＡ法测定ＩＬ６；ＲＴＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ的表达。结果：头孢地秦使正常小鼠ＰＭ培养上清中ＴＮＦα的活性降低，使金黄色葡萄球菌感染小鼠ＰＭ４８ｈ培养上清中ＴＮＦα活性升高。２００ｍｇ／Ｌ的头孢地秦对正常小鼠ＰＭ的ＴＮＦαｍＲＮＡ表达有显著抑制作用，但对感染小鼠ＴＮＦαｍＲＮＡ表达没有明显影响。头孢地秦抑制正常小鼠ＰＭ４８ｈ培养上清中ＩＬ６的产生，明显增加金黄色葡萄球菌感染小鼠ＰＭ培养上清中的ＩＬ６。头孢地秦对ＩＬ６ｍＲＮＡ表达的影响与细胞因子的改变一致。结论：头孢地秦对正常和感染状态下小鼠ＴＮＦα和ＩＬ６产生的影响不同，其对ｍＲＮＡ表达的影响与细胞因子的检测结果一致     

头孢地秦对细胞因子及细胞因子mRNA表达的影响

目的：探讨头孢地对正常及金黄色葡萄球菌感染的败血症小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭ）肿瘤坏死因子与白细胞介素６（ＩＬ－６）分泌及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法：采集小鼠ＰＭ，体外给药，分离细胞培养上清。生物检测法测定ＴＮＦα，ＥＬＩＳＡ法测定ＩＬ－６；ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ的表达。结果：头孢地秦使正常小鼠ＰＭ培养上清中ＴＮＦα的活性降低，使金黄色葡萄球菌感染小鼠ＰＭ４８ｈ２上清中ＴＮＦα活性升高。２００ｍ     

MIF基因修饰的FBL3红白血病细胞的生物学性质

目的：研究巨噬细胞游走抑制因子（ＭＩＦ）基因修饰的ＦＢＬ３红白血病细胞的生物学性质变化,为探讨其体内诱导抗肿瘤免疫反应的作用奠定基础。方法：以腺病毒介导,将ＭＩＦ基因导入小鼠ＦＢＬ３红白血病细胞,观察其体外生物学性质变化。将ＭＩＦ基因修饰的ＦＢＬ３细胞（ＭＩＦ－ＦＢＬ３）接种小鼠体内,观察其致瘤性和局部病理学变化,同时检测细胞因子ｍＲＮＡ表达。结果：腺病毒能有效地将ＭＩＦ基因导入ＦＢＬ３细胞,ＭＩ     

桂枝浸出物对小鼠巨噬细胞内α—TNF基因表达的影响

目的：检测小鼠应用桂枝浸出物后腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ含量的变化。方法：雌雄小鼠随机分组，口服给药后制备巨噬细胞涂片。克隆人ＴＮＦ－ＤＮＡ的ＰＧＥＭ－１质料转化Ｅｃｏｌｉ ＪＭ１０３，选择培养扩增。随机引物法制备地高辛标记的探针，利用原位杂交技术检测巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ的表达。结果：抗肿瘤中草药桂枝等浸出物可增强小鼠腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ表达。结论：分子生物学的方法与手段     

脑溢安对大鼠脑出血后神经生长因子和白细胞介素—1β表达 …

目的：观察脑出血后神经生长因子（ＮＧＦ）和白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）的表达及中药制剂脑溢安的干预作用。方法：用Ⅶ型胶原酶于脑内定位注射诱导大鼠脑出血模型,通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交与ＥＬＩＳＡ方法检测出血后脑内ＮＧＦ与ＩＬ－１βｍＲＮＡ及其蛋白的表达与含量。结果：大鼠脑出血后第１ｄＮＧＦ与ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达增加,第２ｄＮＧＦｍＲＮＡ下降至正常组水平,第４ｄ、７ｄ低于正常组水平;ＩＬ－１βｍＲ     

不同激活剂对巨噬细胞肿瘤坏死因子－α产量及其基因表达的作用

研究γ－干扰素（ＩＦＮ－γ），ＴＮＦ－α和脂多糖（ＬＰＳ）或它们的联合应用诱导巨噬细胞产生ＴＮＦ－α及其ｍＲＮＡ表达的作用。ＬＰＳ和ＴＮＦ－α均能诱导巨噬细胞ＴＮＦ－α合成并伴随着ｍＲＮＡ表达。ＩＦＮ－γ虽能诱导ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达，却未能检测到其蛋白质合成．．ＩＦＮ－γ能协同ＴＮＦ－α增加ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达水平，而不能增加其蛋白质合成。ＩＦＮ－γ能协同ＬＰＳ增加ＴＮＦ－γｍＲＮＡ表达水平和蛋白质合成。     

脑缺血再灌流后大鼠海马脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子 mRNA的表达

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７２ｈ时进行神经元尼氏小体染色。结果：脑缺血后，海马ＣＡＩ区神经元大量死亡，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达于６ｈ开始增加，７２ｈ恢复正常。２４ｈ时齿状回ＢＤＮＦｍＲＮＡ和ＣＮＴＦｍＲＮＡ的表达均增     

大鼠肺和脑组织中一氧化氮合成酶mRNA表达的研究

以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂法法观察了３种一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）即脑ＮＯＳ（ｂＮＯＳ）内皮ＮＯＳ（ｅＮＯＳ）和巨噬细胞ＮＯＳ（ｍａｃＮＯＳ）在大鼠肺和脑组织中ｍＲＮＡ的表达情况，结果显示：肺组织存有ｅＮＯＳ和ｍａｃＮＯＳｍＲＮＡ表达，其ｍＲＮＡ杂交带分子大小分别为４．８ｋｂ和４．５ｋｂ脑组织只有ｂＮＯＳｍＲＮＡ表达，其杂交带分子大小为１０．５ｋｂ，提示３种ＮＯＳ基因结构各异，且其在大鼠肺和脑组织中的     

大鼠肺和脑组织中一氧化氮合成酶mRNA表达的研究

以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法观察了３种一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）即脑ＮＯＳ（ｂＮＯＳ）、内皮ＮＯＳ（ｅＮＯＳ）和巨噬细胞ＮＯＳ（ｍａｃＮＯＳ）在大鼠肺和脑组织中ｍＲＮＡ的表达情况。结果显示：肺组织存有ｅＮＯＳ和ｍａｃＮＯＳｍＲＮＡ表达，其ｍＲＮＡ杂交带分子大小分别为４．８ｋｂ和４．５ｋｂ；脑组织只有ｂＮＯＳｍＲＮＡ表达，其杂交带分子大小为１０．５ｋｂ。提示３种ＮＯＳ基因结构各异，且其在大鼠肺和脑组织中的分布和表达亦不相同。     

内含子增强脂质体介导的转基因表达

目的 观察内含子对脂质体介导的转基因表达的影响。方法 首先构建含的含子ｉｎｔｒｏｎＡ、ＩＬ－２基因、ＩＦＮ－γ基因的质料表达载体，然后经阳离子脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＮＥ介导转染小鼠成纤维细胞ＮＨ３Ｔ３。生物活性法检测ＩＬ－２基因或ＩＦＮ－γ基因表达水平。结果 含内含子的载体其ＩＬ－２或ＩＦＮ－γ基因表达水平。结果 含内含子的载体其ＩＬ－２或ＩＦＮ－γ表达水平高于不含内含子的载体（Ｐ〈０．０５）     

脑缺血再灌流后大鼠海马脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子mRNA的表达

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７２ｈ时进行神经元尼氏小体染色。结果：脑缺血后，海马ＣＡ１区神经元大量死亡，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达于６ｈ开始增加，７２ｈ恢复正常。２４ｈ时齿状回ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达高于ＣＡ１区。ＣＮＴＦｍＲＮＡ表达于１２ｈ开始持续增加。结论：脑缺血再灌流损伤后，海马ＢＤＮＦｍＲ－ＮＡ和ＣＮＴＦｍＲＮＡ的表达均增加。ＢＤＮＦ可能有利于齿状回神经元耐受缺血，ＣＮＴＦ可能在局部发挥神经营养作用     

脐血单个核细胞IL—12和IFN—γ表达的观察

本文探讨新生和脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）白细胞介素１２（ＩＬ－１２）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）基因表达水平；观察重组ＩＬ－１２地ＣＢＭＣＩＦＮγ基因表达的影响。采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ＿ＰＣＲ）测定８例新生儿ＣＢＭＣＩＬ－１２ｐ４９ＲＮＡ和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，用ＥＬＩＳＡ法测新一儿ＣＢＭＣ细胞培养上清液中ＩＦＮ－γ浓度。结果显示：新生儿ＣＢＭＣ一外受刺激后表达的Ｉ国２ｐ４０ｍＲＮＡ、Ｉ     

白血病抑制因子mRNA在早孕期小鼠子宫内膜的表达规律和组 …

目的 研究白血病抑制因子（ＬＩＦ）ｍＲＮＡ在早孕期小鼠子宫内膜的表达规律及ＬＩＦ蛋折的组织定位。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ半定量法测定ＬＩＦ ｍＲＮＡ的表达;用免疫组化ＡＢＣ法测定ＬＩＦ蛋白的组织学定位。结果 ＬＩＦ ｍＲＮＡ在早孕期小鼠子宫内膜呈时序性规律表达,孕早期升高,第４天达到高峰,比未孕期明显增高（Ｐ〈０．０１）,此后下降,到孕第７天降到孕前水平;ＬＩＦ蛋白主要定位在子宫内膜腺上皮和腔上皮,且     

免疫介异的再生障碍性贫血小鼠脾细胞中肿瘤坏死因子基因表述的研究

以前的研究征明多数再障患者血清ＴＮＦ升高。本文用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测免疫介导的再障小鼠脾细胞α－ＴＮＦｍＲＮＡ的表达和用ＥＬＩＳＡ检测脾细胞诱生ＴＮＦ的量的改变。结果显示：再障组小鼠的ＴＮＦｍＲＮＡ水平和脾细胞诱生的α－ＴＮＦ的旦均比正常组者明显降低。（Ｐ＜０．００１），这一结果提示免疫介异的再障小鼠血清ＴＮＦ的升高与脾细胞无关。