伊贝沙坦对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡及相关基因Bax、Bcl-2和P53表达的影响

为探讨血管紧张素 1型受体拮抗剂伊贝沙坦对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响 ,同时检测凋亡相关基因Bax、Bcl 2和P5 3蛋白表达的变化。选用 13周龄自发性高血压大鼠 2 0只 ,随机分为 2组 :伊贝沙坦组大鼠服用伊贝沙坦 [5 0mg (kg·d) ],另一组大鼠不用药物作为高血压对照 (自发性高血压大鼠组 ) ,另设同源正常血压大鼠 10只作为正常对照 (WKY组 )。共观察 15周 ,每两周测血压和体重一次 ,实验结束时称左心室重量。应用原位标记检测技术观察高血压大鼠左心室心肌细胞凋亡的变化 ,并用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因Bax、Bcl 2和P5 3的蛋白表达。结果发现 ,(1)实验终结时 ,伊贝沙坦组血压明显低于自发性高血压大鼠组 (12 8± 5mmHg比193± 8mmHg ,P <0 .0 1) ,略高于WKY组 (12 1± 6mmHg) ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。 (2 )自发性高血压大鼠组凋亡指数明显高于WKY组 (1.5 9± 0 .38比 0 .33± 0 .11,P <0 .0 1) ;Bax蛋白表达指数明显高于WKY组 (1.76± 0 .31比0 .5 9± 0 .11,P <0 .0 1) ;Bcl 2蛋白表达无明显差异 (0 .88± 0 .2 6比 0 .82± 0 .19) ,Bcl 2 Bax比率亦明显低于WKY组(0 .5 3± 0 .17比 1.4 1± 0 .34,P <0 .0 1)。 (3)伊贝沙坦组心肌细胞凋亡指数低于自发性高血压大鼠组 (0 .5 6     

伊贝沙坦和咪哒普利逆转自发性高血压大鼠心肌肥厚中细胞凋亡的变化

目的 观察伊贝沙坦和咪哒普利在自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚逆转过程中细胞凋亡的变化,探讨其可能机制与意义。方法 选13周龄SHR 30只,随机均分为3组,即伊贝沙坦治疗组(SHR-I组)、咪哒普利治疗组(SHR-M组)和非治疗对照组(SHR组),另设同源正常血压大鼠10只(WKY组)作为对照。饲养13周后,伊贝沙坦组大鼠服用伊贝沙坦50mg·kg~(-1)·d~(-1),咪哒普利组服用咪哒普利3mg·kg~(-1)·d~(-1),治疗15周,每2周测血压、体重1次,治疗结束时称左心室重量,放免法检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(Aug Ⅱ)浓度。应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的带荧光的dUTP缺口末端原位标记法(Tunel)检测各组大鼠左室心肌细胞凋亡的变化。结果(1)28周时,SHR组血压、左室重量指数〔(3.56±0.38)×10~(-3)〕、心肌细胞横径[(17.38±1.21)μm]、血浆和心肌AugⅡ[分别为(387.72±26.21)pg/ml、(16.83±2.72)ng/g]均高于 WKY组(P<0.05),SHR-Ⅰ组和SHR-M组血压、左室重量指数[(2.57±0.43)×10~(-3)、(2.49±0.36)×10~(-3)]、心肌细胞横径[(14.24±0.83)、(13.79±0.77)μm]明显低于SHR组(P<0.01),SHR-I组血浆和心肌AngⅡ[(681.12±34.48)、(28.51±3.62)ng/g]显著高于SHR组(P < 0.01),SHR-M组血浆和心肌AugⅡ低于SHR组(P<0.01);(2)与SHR组     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左心室心肌肥厚及心肌细胞凋亡的影响

目的:研究丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠(SHR)左心室心肌肥厚及心肌细胞凋亡的影响。方法:将60只8周龄SHR随机分为3组,即空白对照组(第8 W时处死)、丹参酮ⅡA处理组[1 ml/(kg·d)]和溶剂对照组[1 ml/(kg·d)],每组15只大鼠(各组均另留5只为备用)。丹参酮ⅡA处理组和溶剂对照组继续喂养至18 W后测定SHR的收缩压和左心室质量指数(LVMI);左心室组织经苏木素伊红(HE)染色后拍照,应用全自动形态测量仪测定心肌细胞的直径和表面积;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)测定心肌细胞凋亡率,同时运用蛋白免疫印迹(Western-blot)测定心肌组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和p53的表达水平。结果:(1)与溶剂对照组(18 W)比较,丹参酮ⅡA处理组(18 W)SHR的LVMI[(3.23±0.24)mg/g vs(4.58±0.68)mg/g]、细胞的直径[(16.13±1.77)μm vs(27.15±3.52)μm]、表面积[(230.23±69.37)μm2 vs(490.12±118.96)μm2]和心肌细胞凋亡率[(7.45±1.78)%vs(10.61±2.77)%]均降低,差异均有统计学意义(P均0.01);(2)蛋白相对表达水平[经内参还原型辅酶Ⅱ(NAPDH)校正后以Bcl-2/NAPDH、Bax/NAPDH、p53/NAPDH表示]:与溶剂对照组(18 W)比较,丹参酮ⅡA处理组(18 W)SHR的Bcl-2/NAPDH升高(0.97±0.31vs0.40±0.11),Bax/NAPDH降低(0.37±0.15 vs1.81±0.44)和p53/NAPDH降低(0.83±0.18 vs2.72±0.28),差异均有统计学意义(P均0.05或0.01)。而丹参酮ⅡA处理组(18 W)与空白对照组(8 W)比较,上述指标均无明显变化,差异均无统计学意义(P均0.05)。结论:丹参酮ⅡA能抑制SHR左心室心肌肥厚的发生,同时能降低心肌细胞凋亡的程度,提示丹参酮ⅡA可能通过上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、p53蛋白表达来调节心肌细胞的凋亡水平。     

自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡与左心室功能的关系

目的观察自发性高血压大鼠(SHR)增龄过程中心肌细胞凋亡的分布特点和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax]表达的变化,分析心肌细胞凋亡与左心室结构功能及凋亡相关蛋白的关系。方法购进12周龄雄性SHR 36只、WKY大鼠30只,分笼饲养,分别在14、28、45、66、84、102周应用超声心动图评价左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF),组织学观察心内膜下及心外膜下的心肌细胞凋亡情况,Western blot定量检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax水平。结果 (1)SHR的LVMI随增龄而增加,LVEF在14～66周龄差异无统计学意义,在84～102周龄时出现明显下降;(2)SHR心肌细胞凋亡指数随周龄增加而增加,其中心内膜下心肌细胞凋亡指数(APOI-endo)在66周龄显著增加且高于同周龄WKY组(9.83±3.97比4.03±2.06,P0.05),而心外膜下心肌细胞凋亡指数(APOI-epi)在84周龄时才出现显著增加(P0.05);SHR组在66周龄时Bax/Bcl-2明显高于WKY组(3.98±0.80比0.29±0.06,P0.05),102周龄时更为显著(10.54±1.60比0.70±0.13,P0.05)。(3)心肌细胞凋亡指数与LVMI呈正相关(r=0.83,P0.01),与LVEF值在66～102周龄呈负相关(r=-0.81,均P0.01),与Bax/Bcl-2呈正相关(r=0.79,P0.01)。结论 SHR增龄过程心肌细胞凋亡的增加与左心室重构及收缩功能不全相关,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2增高与心肌细胞凋亡指数的增加相关。     

厄贝沙坦对高血压心肌细胞凋亡影响的实验研究

本研究用特异性血管紧张素Ⅱ 1型 (AT1 )受体拮抗剂厄贝沙坦干预以观察其对心肌细胞凋亡的影响 ,探讨高血压心肌细胞凋亡的可能机制。1 材料与方法 :( 1)实验动物及分组 :选用 13周龄的自发性高血压大鼠 (SHR) 2 0只 ,随机分为SHR组和厄贝沙坦治疗组 (SHR I组 )。雌雄各半 ,2组间体重、血压无显著性差异。另选 13周龄同源WKY大鼠 10只 (雌雄各半 )作为正常对照组。 ( 2 )治疗药物及给药方法 :SHR I组以厄贝沙坦 (江苏恒瑞制药厂 ) 5 0mg·kg- 1 ·d- 1 溶入特制饮水器中。药物浓度每日根据饮水量和体重调整。连续用药 15周。其余两…     

伊贝沙坦对原发性高血压患者细胞因子水平的影响

目的　观察伊贝沙坦对原发性高血压 (EH)患者血清多种细胞因子的影响。方法　观察 32例 1、2级 EH患者在服用伊贝沙坦治疗前及 2周后血压、肿瘤坏死因子 α(TNF- α) ,白细胞介素 - 1(IL- 1)、白细胞介素 - 6 (IL- 6 )、干扰素 r(IFN- r)的变化 ,并与 30例健康对照组比较。结果　 32例 EH患者治疗前 TNF-α、IL - 1、IL - 6明显高于对照组(P<0 .0 1) ,IFN- r明显低于对照组 (P<0 .0 1) ;经伊贝沙坦治疗 2周后 ,血压显著下降 (P<0 .0 1) ,TNF-α、IL - 1、IL - 6明显低于治疗前 (P<0 .0 1) ,IFN - r较治疗前明显升高 (P<0 .0 1)。结论　 EH患者应用伊贝沙坦治疗后 IL - 1、IL- 6、TNF- α水平下降 ,IFN- r升高 ,提示伊贝沙坦可能有直接抗炎作用。     

伊贝沙坦对男性轻中度高血压患者性功能的影响

目的观察伊贝沙坦对男性轻中度高血压患者性功能的影响。方法入选45例未治疗的高血压患者,年龄(44.7±4.5)岁,血压水平为收缩压(SBP)≥140mmHg且<180mmHg和(或)舒张压(DBP)≥90mmHg且<110mmHg,给予伊贝沙坦(150～300)mg/d,治疗12周。观察治疗前后血压、性功能变化及不良反应。结果伊贝沙坦治疗12周后,血压明显下降(P<0.01),增加了国际勃起功能指数(17.3±2.8vs18.3±2.4,P<0.05)和每月性交次数(5.7±1.9vs7.6±1.8,P<0.01)。不良反应仅2例患者略感头晕。结论伊贝沙坦降压疗效确切,不良反应少,可改善男性性功能。     

伊贝沙坦对男性轻中度高血压患者性功能的影响

目的观察伊贝沙坦对男性轻中度高血压患者性功能的影响.方法入选45例未治疗的高血压患者,年龄(44.7±4.5)岁,血压水平为收缩压(SBP)≥140 mm Hg且＜180 mm Hg和(或)舒张压(DBP)≥90 mm Hg且＜110 mm Hg,给予伊贝沙坦(150～300)mg/d,治疗12周.观察治疗前后血压、性功能变化及不良反应.结果伊贝沙坦治疗12周后,血压明显下降(P＜0.01),增加了国际勃起功能指数(17.3±2.8 vs 18.3±2.4,P＜0.05)和每月性交次数(5.7±1.9vs 7.6±1.8,P＜0.01).不良反应仅2例患者略感头晕.结论伊贝沙坦降压疗效确切,不良反应少,可改善男性性功能.     

伊贝沙坦治疗轻、中度原发性高血压疗效观察

目的通过伊贝沙坦(国产)与缬沙坦(合资)的对比研究来评价伊贝沙坦对轻、中度原发性高血压的降压疗效和安全性.方法53例轻、中度原发性高血压患者被随机、双盲分为两组,经口服安慰剂2周后,分别每日口服1次伊贝沙坦75～150mg(伊贝沙坦组)或缬沙坦80～160mg(缬沙坦组),治疗4周,观察用药前后坐位血压、心率变化,对比用药前后血生化、血尿常规检查结果,记录患者用药后的不良反应.结果治疗4周后,伊贝沙坦组舒张压降低13.3±8.7mmHg(1mmHg＝0.133kPa)缬沙坦组舒张压降低16.5士9.3mmHg.两组治疗后与治疗前相比,血压下降有非常显著差异(P＜0.01),心率变化、血生化及血尿常规检查结果比较无显著差异(P＞0.05).总有效率及不良反应发生出率两组间比较均无显著差异(P＞0.05).结论口服伊贝沙坦75～150mg,每日1次,对轻、中度原发性高血压降压疗效确切,患者耐受性好.     

Effect of Angiotensin II on Striatal Dopamine Release in the Spontaneous Hypertensive Rat

We have previously demonstrated that angiotensin II stimulates the release of dopamine from the normotensive rat striatum via the AT₁ receptor. In this study, the effect of angiotensin II-stimulated striatal dopamine release in the spontaneous hypertensive rat was compared to normotensive controls. In the spontaneous hypertensive rat, angiotensin II stimulated dopamine release to 169±13% (P<0.05) in the experimental period, with levels remaining high in the recovery phase, 158±16% (P<0.05). This effect was not significantly different from the response in normotensive controls, in which angiotensin II stimulated dopamine release to 149±18% (P<0.05) in the experimental period, with the effect also persisting through the recovery period, 244±62% (P<0.05). Thus, despite reports of increased activity of the brain angiotensin II and dopamine systems in the spontaneous hypertensive rat, there is no evidence of abnormal regulation of the striatonigral dopamine system.     

华夏小葱含药血清对缺糖缺氧心肌细胞凋亡的影响

目的:研究华夏小葱含药血清对缺糖缺氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:采用差速贴壁法体外分离心肌细胞.调整细胞数随机分为4组:正常组、模型组、华夏小葱30%含药血清组、50 μg/ml依那普利组.采用MTT比色法检测细胞活力,分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,流式细胞仪分析细胞早期凋亡的变化.结果:华夏小葱30%含药血清组与模型组比较,SOD有明显上升,MDA有明显下降(P均＜0.05),其调亡率和依那普利组比较,无显著差异(P＞0.05).结论:华夏小葱30%含药血清可以使缺糖缺氧心肌细胞SOD活性增加,MDA含量降低,并能抑制缺糖缺氧心肌细胞的凋亡.     

过表达miR-29a对大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨microRNA-29a (miR-29a)对大鼠心肌细胞凋亡的调控作用.方法 体外培养新生SD大鼠心肌细胞,合成人miR-29a的拟似物(mimic).用Lipofectamine RNAiMAX转染miR-29a的mimic进入心肌细胞,转染48 h后用荧光定量PCR方法检测心肌细胞miR-29a的表达变化,流式细胞仪检测细胞凋亡水平变化,Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9前体的表达变化.结果 心肌细胞转染miR-29a的mimic 48 h后,心肌细胞中miR-29a的表达水平较对照组明显升高(P＜0.05);心肌细胞的凋亡水平也明显升高,凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9前体的含量则明显下降(P＜0.05).结论 在大鼠心肌细胞中过表达miR-29a能促进心肌细胞凋亡,其机制可能是通过Caspase-3和Caspase-9途径起作用.     

血管紧张素Ⅱ／1型受体拮抗剂对心肌细胞凋亡影响及机制

目的探讨血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）／1型受体拮抗剂（AT1 R Irbeartan）对心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法采用TUNEL方法检测凋亡细胞数，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Caspase-9mRNA表达改变。结果随着时间延长10^-7mol／L AngⅡ显著增加凋亡心肌细胞数量；同时心肌细胞Caspase-9mRNA表达增加。10^7mol／L AngⅡ＋10^-5mol／L Irbesartan干预组凋亡心肌细胞数及Caspase-9mRNA表达受到抑制。结论血管紧张素Ⅱ可以诱导乳鼠心肌细胞凋亡。其作用可能通过1型受体介导，Irbesartan能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡。AngⅡ诱导心肌细胞凋亡与Caspase-9激活相关。     

减阻剂改善自发性高血压大鼠主动脉重塑

目的减阻剂(DRP)是一种可以减少流体阻力、增加流体剪切应力的线性高分子化合物,本实验观察静脉应用DRP对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉重塑的影响。方法 24只8周龄雄性SHR随机分为3组:SHR+生理盐水组(SHR+NS组)、SHR+10 mg/L DRP组、SHR+20 mg/L DRP组,隔日给予静脉注射NS或不同剂量的DRP;8只年龄匹配的雄性Wistar大鼠(WR)作为对照组(WR+NS组),给予静脉注射NS。实验开始前及每20天记录大鼠体重、尾动脉收缩压、心率。60天后大鼠麻醉后心脏取血,酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清内皮素(ET)水平。处死大鼠,分离大鼠升主动脉,石蜡包埋,HE染色观察主动脉形态结构,免疫组织化学法检测主动脉内皮素1(ET-1)表达。结果 SHR各组间体重、心率无显著差异。SHR+20 mg/L DRP组血压较SHR+NS组明显降低(P0.05),而SHR+10 mg/L DRP组与SHR+NS组血压无统计学差异。与SHR+NS组相比,SHR+10mg/L DRP组及SHR+20 mg/L DRP组血清ET水平显著降低,差异具有统计学意义。主动脉HE染色显示,与WR+NS组相比,SHR+NS组主动脉中膜厚度明显增厚(P0.05);静脉应用DRP后,与SHR+NS组相比,SHR+10mg/L DRP组、SHR+20 mg/L DRP组主动脉中膜厚度均显著降低(P0.05);SHR+10 mg/L DRP组、SHR+20mg/L DRP组与WR+NS组之间主动脉中膜厚度无统计学差异。主动脉免疫组织化学染色显示,ET-1在血管内皮及中层平滑肌均有表达,SHR大鼠主动脉表达明显高于WR大鼠;经静脉应用DRP后,SHR+10 mg/L DRP组、SHR+20 mg/L DRP组主动脉ET-1较SHR+NS组显著降低,SHR+10 mg/L DRP组与SHR+20 mg/L DRP组之间主动脉ET-1无显著差异。结论静脉应用DRP可改善SHR主动脉重塑,其机制可能与DRP通过增加主动脉内血液剪切应力抑制了ET-1表达有关,减阻剂可能为治疗高血压引起的主动脉重塑提供新的思路。     

Suppressive Effect of Herbal Medicine Saikokeishito on Acinar Cell Apoptosis in Rat Spontaneous Chronic Pancreatitis

Background/Aims: Chronic pancreatitis is characterized by acinar destruction and fibrosis. We previously reported that apoptosis is involved in acinar destruction in chronic pancreatitis in the WBN/Kob rat. This study aimed to elucidate the antiapoptotic effect of Saikokeishito (TJ-10). Methods: Fourweek-old male WBN/Kob rats were fed a special pellet diet (MB-3) with or without TJ-10 (80 mg/100 g body weight) for 20 weeks. Pancreas was histopathologically examined every 4 weeks, and the expression of apoptosis-related factors such as Fas and Fas ligand (FasL) mRNA and protein was analyzed with RT-PCR, in situ hybridization and immunohistochemistry. Apoptosis was detected with a TUNEL method. Results: In untreated WBN/Kob rats, chronic pancreatitis developed at 12 weeks and progressed with marked acinar cell destruction at 16 weeks. The expression of Fas and FasL peaked at 12 and 20 weeks. An apoptotic index in acinar cells correlated to the expression of Fas and FasL mRNA. However, in the TJ-10-treated rats, the rate of pancreatic acinar cell destruction, the apoptotic index at 12–20 weeks, and the expression of Fas and FasL at 12 and 20 weeks decreased significantly compared to those in untreated rats. Conclusion: These results suggest that TJ-10 has a therapeutic effect on chronic pancreatitis by the suppression of acinar cell apoptosis via the Fas/FasL system.     

厄贝沙坦对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及c-fos mRNA表达的作用

目的在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察厄贝沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的作用,并研究其对心肌细胞c-fos mRNA表达的影响.方法应用细胞培养技术培养新生大鼠心肌细胞,胰酶消化,差数贴壁法体外分离培养大鼠心肌细胞.分干预组和对照组,前者用血管紧张素Ⅱ刺激心肌细胞肥大,厄贝沙坦进行干预;厄贝沙坦进行干预30 min后,加入血管紧张素Ⅱ刺激心肌细胞;采用相差显微镜测量细胞大小,测定心肌细胞3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标;用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌细胞c-fos mRNA的表达.结果血管紧张素Ⅱ作用24 h后,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞直径增大(29.2±3.1)μm,高于对照组(18.9±1.3)μm(P＜0.05);厄贝沙坦抑制血管紧张素Ⅱ介导的心肌细胞直径增大(20.3±2.1比29.2±3.1)μm(P＜0.05).血管紧张素Ⅱ作用24 h后,心肌细胞合成速率血管紧张素Ⅱ组(1 951±141)较对照组(1 123±121)计数/min·孔明显增加(P＜0.01),厄贝沙坦对正常心肌细胞蛋白质合成没有影响(1 217±105)计数/min·孔,但能抑制血管紧张素Ⅱ刺激的心肌蛋白质合成速率的增加(1 145±142)计数/min·孔(P＜0.01).在培养液中加入血管紧张素Ⅱ作用30 min后,心肌细胞c-fos mRNA表达明显增加(0.921±0.104,P＜0.01),预先加入厄贝沙坦作用30 min,可阻断血管紧张素Ⅱ的作用(0.336±0.052,P＜0.01).结论厄贝沙坦可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其机制可能与厄贝沙坦抑制了心肌细胞c-fos mRNA的表达有关.