瘢痕疙瘩组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达

目的:胰岛素样生长因子-1瘢痕疙瘩的病理过程密切相关,胰岛素样生长因子结合蛋白3是与胰岛素样生长因子-1结合的调节蛋白,探讨胰岛素样生长因子结合蛋白3在瘢痕疙瘩形成中的作用.方法:实验于2004-04/07在长海医院中心实验室完成.18份被检测标本中包括瘢痕疙瘩6份,肥厚性瘢痕6份,成人正常皮肤组织6份.用免疫组织化学的方法和半定量反转录-聚合酶链反应的方法从蛋白和核酸两个水平检测胰岛素样生长因子结合蛋白3在不同的组织内的表达情况.结果:免疫组化结果显示,瘢痕疙瘩组胰岛素样生长因子结合蛋白3染色阳性面积明显大于正常皮肤组,差异有显著性意义(t=39.52,P＜0.01).反转录-聚合酶链反应结果显示胰岛素样生长因子结合蛋白3 mRNA在瘢痕疙瘩中的表达明显高于正常皮肤标本,差异有显著性意义(t=18.19,P＜0.01).结论:胰岛素样生长因子结合蛋白3在瘢痕疙瘩组织中的表达明显增加,提示其参与了瘢痕疙瘩的形成过程.     

瘢痕疙瘩的治疗

瘢痕疙瘩虽然历史久远 ,但在治疗方面仍然是整形外科的难题之一。由于难以控制其复发 ,到目前为止国内外还没有一种非常满意的治疗方法。瘢痕疙瘩是人类所特有的 ,加之目前尚不能制作满意的生物模型 ,使其实验研究工作进展缓慢。就目前所知理论 ,有效的治疗方法是去除病变 ,并通过抑制成纤维细胞的增殖及其胶原的合成、分泌或沉积来预防其复发。其治疗方法有手术、药物注射、放射治疗、激光、硅凝胶、加压及冷冻等多种 ,但单一的治疗方法疗效均不理想 ,目前较统一的主张是多种方法联合应用 ,进行综合治疗才能取得较好的疗效。现就近年来有关…     

瘢痕疙瘩组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达

目的:胰岛素样生长因子-1瘢痕疙瘩的病理过程密切相关,胰岛素样生长因子结合蛋白3是与胰岛素样生长因子-1结合的调节蛋白,探讨胰岛素样生长因子结合蛋白3在瘢痕疙瘩形成中的作用。方法:实验于2004-04/07在长海医院中心实验室完成。18份被检测标本中包括瘢痕疙瘩6份,肥厚性瘢痕6份,成人正常皮肤组织6份。用免疫组织化学的方法和半定量反转录-聚合酶链反应的方法从蛋白和核酸两个水平检测胰岛素样生长因子结合蛋白3在不同的组织内的表达情况。结果:免疫组化结果显示,瘢痕疙瘩组胰岛素样生长因子结合蛋白3染色阳性面积明显大于正常皮肤组,差异有显著性意义(t=39.52,P<0.01)。反转录-聚合酶链反应结果显示胰岛素样生长因子结合蛋白3mRNA在瘢痕疙瘩中的表达明显高于正常皮肤标本,差异有显著性意义(t=18.19,P<0.01)。结论:胰岛素样生长因子结合蛋白3在瘢痕疙瘩组织中的表达明显增加,提示其参与了瘢痕疙瘩的形成过程。     

曲安奈德局部注射治疗瘢痕疙瘩34例报告

目的探讨曲安奈德局部注射治疗瘢痕疙瘩的临床疗效.方法选择34例门诊患者,均采用瘢痕内注射.结果1次治愈33例,2次治愈1例,总有效率100%.结论曲安奈德是一种有效治疗瘢痕疙瘩的药物.     

瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶活性及相关基因的表达

背景：研究发现人端粒酶催化亚单位在瘢痕疙瘩组织中有高表达。目的：拟进一步验证瘢痕疙瘩成纤维细胞中端粒酶活性及端粒酶催化亚单位、bcl-2mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达及其在瘢痕疙瘩发生、发展中的意义。设计、时间及地点：单一样本观察。于2005—03／2006-01在解放军第二军医大学长海医院整形外科完成。对象：实验标本取自8例瘢痕疙瘩标本和8例正常皮肤标本。提供者对实验知情同意。方法：取瘢痕疙瘩边缘突起发红的部分，按组织块法培养原代成纤维细胞，取第三四代的细胞用于实验。主要观察指标：用PCR-ELISA方法测定瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞端粒酶活性；用反转录-聚合酶链反应的方法检测培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞人端粒酶催化亚单位、bcl-2mRNA的表达情况。结果：①PCR-ELISA结果表明：瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶括性明显高于正常皮肤成纤维细胞．其差异有非常显著性意义（P〈0．01）。②反转录-聚合酶链反应结果显示：端粒酶催化亚单位和bcl-2mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中有较强的表达．在正常皮肤成纤维细胞中表达较弱．前者显著高于后者（P〈0．01）。结论：瘢痕疙瘩成纤维细胞中端粒酶活性明显增高。推测人端粒酶催化亚单位mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的高表达与端粒酶活性密切相关。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量的改变及其意义

【目的】了解增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中胶原蛋白含量及组成的改变。【方法】以羟脯氨酸测定反映Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白总量。SDS PAGE电泳分离proα1 (Ⅰ )及 proα1 (Ⅲ )链 ,考马斯亮蓝染色 ,图像分析仪计算Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白比。【结果】增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中胶原蛋白含量相近 ,分别为 (0 .988± 0 .1 4 1 )mmol/L和 (1 .1 0± 0 .1 5 9)mmol/L ,均明显高于正常瘢痕和正常皮肤 ;瘢痕疙瘩Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白比值为1 1 .4 91± 1 .2 2 3,高于增生性瘢痕、正常瘢痕和正常皮肤 ,而增生性瘢痕与正常瘢痕和正常皮肤相近。【结论】增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中各型胶原蛋白表达强度的不一致性 ,对阐明增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理及对两者的鉴别具有一定的潜在价值     

烧伤瘢痕疙瘩根治性治疗的探讨

烧伤瘢痕疙瘩手术治疗复发率甚高。本科室1999～2009年采用瘢痕疙瘩切除及植皮、切口缘皮内注射确炎舒松A的方法治疗30例,收到良好效果,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料选择1999～2009年本科室治疗瘢痕疙瘩30例,其中男10例,女20例,年龄4～45岁,平均22.3岁。烧伤瘢痕疙瘩面积最大80cm2,最小为3cm2,平均15cm2。其好发部位是耳廓、耳前、下颌、颈部、胸骨柄部、肩峰、上臂及手足等。常表现为局部痛痒感,内衣摩擦、阴雨天及部分女患者月     

人白细胞介素24mRNA在瘢痕疙瘩中的表达及意义

目的:从基因水平测量瘢痕疙瘩组织中白细胞介素24的表达水平,探讨白细胞介素24在瘢痕疙瘩发生、发展过程中的作用和意义。方法:实验于2005-10/2006-09在广东医学院整形外科研究所完成。①选取2004-06/2005-10广东医学院附属医院整形外科收治的患者,瘢痕疙瘩标本12例,正常瘢痕标本10例,行巨乳缩小、除皱术、植皮等患者正常皮肤标本12例,患者均知情同意且自愿捐献标本,实验经医学伦理委员会批准。标本取材部位为颜面、前胸、四肢等,切取后液氮保存。②低温条件下切取秤量组织,采用Trizol法提取总RNA。电泳鉴定总RNA完整性,并统一调整总RNA含量为10g/L,-70℃储存。RT-PCR二步法合成cDNA。③以正常皮肤、正常瘢痕为对照,以GAPDH作为扩增内参照基因,将正常皮肤、正常瘢痕和瘢痕疙瘩各类标本总RNA反转录的cDNA模板浓度调整相对一致进行扩增反应。以白细胞介素24mRNA与GAPDHmRNA的光密度积分值之比作为各类组织标本中白细胞介素24的相对含量,比较白细胞介素24mRNA在正常皮肤、正常瘢痕及瘢痕疙瘩组织中的表达情况。结果:①各类组织标本中总RNA抽提结果:正常皮肤、正常瘢痕和瘢痕疙瘩组织中抽提总RNA经甲醛变性凝胶电泳后显示较清晰的18s和28s条带,经紫外分光光度计测定A260/A280≈2.0。②各类组织标本中白细胞介素24mRNA的表达:白细胞介素24和GAPDH基因表达产物通过RT-PCR方法得到的特异性DNA片段长度分别为173bp和577bp。瘢痕疙瘩的白细胞介素24mRNA与GAPDHmRNA的吸光度比值明显低于正常皮肤、正常瘢痕(0.577±0.113,1.070±0.185,1.139±0.195;t=7.436×10-8～4.745×10-8,P均<0.01),正常皮肤与正常瘢痕白细胞介素24mRNA的相对表达量基本一致(t=0.405,P>0.05)。结论:瘢痕疙瘩的形成可能与白细胞介素24在组织中的表达降低有关。提示采用基因疗法提高早期瘢痕疙瘩中白细胞介素24的含量与活性,可能为瘢痕疙瘩的康复治疗提供有效途径。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的非手术治疗

目的：总结增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的多种治疗技术的疗效及适应证；分析和归纳如何合理应用诸多治疗技术于不同类型增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。资料来源：应用计算机检索Medline 1995-01／2004-12相关瘢痕治疗的文章，检索词“hypertrophic scars，keloids，Pressure therapy，Corticosteroid injection，Silicone gel sheeting，Radiotherapy，Lasertherapy，Cryotherapy”并限定文章语言种类为English。资料选择：对资料进行初步审查，纳入标准：①临床随机对照研究。②临床观察报告。排除标准：①综述文献、Meta分析类文献。②重复研究。资料提炼：共收集到39篇有关增生性斑痕或瘢痕疙瘩非手术治疗的文献，21篇符合纳入标准。对不同治疗方法的疗效，副作用、作用机制进行归纳。资料综合：瘢痕分类包括成熟瘢痕、非成熟瘢痕或前瘢痕、线性增生性瘢痕、广泛增生性瘢痕、瘢痕疙瘩。治疗方法有压力治疗、皮质类固醇激素注射治疗、硅胶膜和水凝胶敷料治疗、激光治疗、射线治疗、冷冻治疗、黏性纸带治疗。目前所有预防和治疗增生性瘢痕的措施都基本相同，而这些措施在创伤愈合后早期应用以预防增生性瘢痕比增生性瘢痕形成后进行治疗反应性要好，杰出的创伤外科修复技术对预防增生性瘢痕非常关键。结论：增生性瘢痕和瘢痕疙瘩目前尚无特效的治疗方法，不同类型的瘢痕和瘢痕的不同病程需要采用多种治疗方法综合治疗。     

瘢痕疙瘩基因治疗研究进展

瘢痕疙瘩是皮肤组织在烧伤或轻微损伤后机体修复过程中结缔组织异常增生所形成的肿块,其特点是瘢痕范围超过原皮损区域且向周边正常组织浸润,在早期常伴有明显的炎性浸润带,因此又称为瘢痕瘤.它的治疗一直是临床上的难点.本文就近年来瘢痕疙瘩的基因治疗研究进展作一综述.     

茎环引物fqRT-PCR检测心肌梗死后重构患者血清miRNA-21的表达及其临床意义

目的建立茎环引物实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（fqRT-PCR）检测微小RNA（miRNA）的定量检测方法。方法选择300例心肌梗死患者作为心肌梗死组,心肌梗死组患者根据病情再分为急性组、亚急性组及慢性组;同期选取100例健康体检者作为对照组。采用茎环引物fqRT-PCR、金纳米-分子信标fqRT-PCR检测其血清miRNA-21表达水平。结果急性期、慢性期心肌梗死患者血清miRNA-21表达水平高于亚急性期和对照组（P〈0.05）,亚急性期患者的血清miRNA-21表达水平高于对照组（P〈0.05）。茎环引物fqRT-PCR检测miRNA-21,最低检出102 copies/μL的稀释标本,而金纳米-分子信标fqRT-PCR最低检出105 copies/μL的稀释标本。茎环引物fqRT-PCR与金纳米-分子信标fqRT-PCR检测miRNA-21比较,节约464个引物,节省时间208min。结论茎环引物fqRT-PCR检测miRNA具有快速、灵敏、重复性好,可用于临床定量分析miRNA。     

乳腺癌组织中PSAmRNA的表达及临床意义

目的　探讨PSAmRNA在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤组织中的表达及其在乳腺癌发生发展中的意义。方法　以β actin作为内部参照半定量RT PCR方法检测 35例乳腺癌组织、12癌旁乳腺组织和 10例乳腺纤维瘤中PSAmRNA的表达。结果　在乳腺癌组织中PSAmRNA阳性表达率为 5 4 2 8% ,癌旁乳腺组织中为 83 3% ,乳腺纤维瘤中为 90 0 %。乳腺癌组织中PSAmRNA阳性表达率明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤者 ,差异有显著性 (P =0 0 4 1)。而且PSAmRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤组织 ,差异有显著性 (t=5 394、4 6 32 ,P均 =0 0 0 0 )。结论　乳腺癌组织中PSAmRNA的表达水平低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤 ,表达下调。     

前列腺癌组织中前列腺特异性膜抗原基因表达的临床意义

目的检测前列腺特异性膜抗原(PSMA)基因在前列腺癌组织中的表达,并探讨其意义。方法利用半定量(RT-PCR)法检测52例前列腺癌组织及35例前列腺增生组织中PSMA的表达。结果 (1)PSMA在前列腺癌及前列腺增生组织中的阳性表达率分别为84.6%(44/52)及68.6%(24/35),虽然前列腺癌组织中PSMA表达阳性率高于前列腺增生组织,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。PSMA mRNA半定量结果在两组间存在差异,癌组织中PSMA的表达量明显高于增生组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)PSMA基因表达量与肿瘤的分化程度有关,分化程度越低,表达量越高,高分化前列腺癌与低分化前列腺癌间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PSMA在前列腺癌中的表达与肿瘤的分化程度有关,且高于前列腺增生组织,提示PSMA可作为判断预后及分化程度的指标。     

反转录聚合酶链式反应法检测端粒酶催化蛋白亚单位mRNA

目的：研究端粒酶催化蛋白亚单位（hTERT)mRNA在肿瘤组织中的表达情况,建立一种恶性肿瘤诊断的新方法。方法：提取肿瘤组织总RNA,用反转录聚合酶链式反应（RT－PCR）法进行检测。结果：76例各型肿瘤组织中66例阳性,5例恶性胸腹水全部阳性。结论：RT－PCR法检测hTERTmRNA是一种灵敏、简便的恶性肿瘤辅助诊断的新方法。     

利用SYBR Green Ⅰ实时定量RT-PCR方法检测白血病患者RbAp46基因的表达

目的探讨白血病患者骨髓细胞RbAp46基因的表达水平.方法建立实时定量RT-PCR方法,利用SYBR Green Ⅰ染料检测140例急性白血病(AL)、13例慢性粒细胞白血病(CML)慢性期和7例CML急变期患者以及32例非白血病患者骨髓细胞RbAp46基因的表达水平.结果初诊与复发AL患者骨髓中RbAp46基因表达水平的M估计值分别为178.23和213.65,明显高于完全缓解组和对照组(分别为85.89和88.08);CML慢性期组M估计值为58.27,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而CML急变期组M估计值为173.24,明显高于CML慢性期组和对照组.98例初诊AL中除M2、M4亚型M估计值(62.63,130.67)与对照组相比差异无统计学意义外,余均明显高于对照组.初诊AL中RbAp46基因表达水平与bcr/abl、PML-RARα、mdrl基因的表达无相关性,但与WT1基因的表达水平呈正相关,与AML1/ETO融合基因表达呈负相关.结论RbAp46在AL初诊、复发及CML急变期患者骨髓细胞中高表达,可能参与白血病的发生.     

血小板源性生长因子-DD对肾小球系膜细胞JAK/STAT信号途径的影响

目的 探讨血小板源性生长因子-DD(PDGF-DD)对肾小球系膜细胞JAK/STAT信号途径的影响.方法 将实验用人肾小球系膜细胞分成对照组、PDGF-DD组(20μg/L)和PDGF-DD+AG490组(20 μg/L PDGF-DD+10 μmol/L AG490).采用免疫组化、蛋白印迹法、反转录聚合酶链反应等方法观察PDGF-DD对肾小球系膜细胞p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS1和SOCS3的蛋白及mRNA表达的影响.结果 PDGF-DD刺激后肾小球系膜细胞p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS1和SOCS3表达增强,AG490抑制上述蛋白的表达(P＜0.05或＜0.01).结论 PDGF-DD能够激活肾小球系膜细胞JAK/STAT信号途径,促进系膜细胞增殖.     

IGF1R反义非编码RNA在肝癌中的差异化表达

目的 检测胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)反义非编码RNA(IGF1RAIN RNA)在肝癌及正常肝组织中的差异,验证其作为肝癌特征性标记物的可能。方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IGF1RAIN RNA在30例肝癌癌瘤组织、癌旁组织以及16例肝血管瘤及肝囊肿术后切缘旁正常肝组织中的表达;结合患者临床及病理资料,分析其含量和肝癌的关系。结果 肝癌癌瘤中IGF1RAIN RNA含量明显比癌旁及正常肝组织低(P<0.05);不同癌瘤大小、癌瘤分化程度以及肝癌肿瘤病理学分期患者IGF1RAIN RNA表达存在差异(P<0.05)。结论 IGF1RAIN RNA的含量在肝癌的明显降低,它可能是一种肝癌早期诊断的标记物。     

环氧化酶2抑制剂塞来昔布诱导 NB4细胞凋亡的研究

目的：研究环氧化酶2（COX-2）选择性抑制剂塞来昔布对髓性白血病细胞株 NB4凋亡的影响,探讨塞来昔布诱导细胞凋亡的机制。方法RT-PCR 检测不同细胞系中 COX-2 mRNA 表达,MTT 法检测 NB4细胞增殖抑制,DNA Ladder 试验分析NB4细胞 DNA 片段化,流式细胞术检测 NB4细胞 Bcl-2蛋白的表达。结果与未加药处理组相比,不同浓度塞来昔布作用后DNA Ladder 片段随浓度的增加而更为明显。不同用药组25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L 塞来昔布组 Bcl-2蛋白表达率分别为（71．69±1．65）％、（34．51±2．53）％和（29．28±2．38）％,与空白对照组 Bcl-2蛋白表达率为85．34±2．89％相比,50μmol/L、100μmol/L 塞来昔布组 Bcl-2蛋白明显下降（P ＜0．05）。结论COX-2选择性抑制剂塞来昔布通过下调 NB4细胞 Bcl-2蛋白表达致诱导其凋亡。     

胰岛素抵抗人群皮下脂肪组织中脂肪甘油三酯脂酶和激素敏感性脂肪酶表达减低

目的 通过检测胰岛素抵抗人群皮下脂肪组织中脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)的表达,探讨脂肪动员异常与胰岛素抵抗的关系及在胰岛素抵抗中的作用.方法 选则本院择期行腹腔镜胆囊切除术的住院患者55例,根据胰岛素抵抗指数,将患者分为胰岛素敏感组27例和胰岛素抵抗组28例.在手术过程中取皮下脂肪组织.采用半定量逆转录聚合酶链反应测定脂肪组织中ATGL、HSLmRNA的表达,采用Westernblot法测定脂肪组织中ATGL、HSL蛋白的表达.结果 胰岛素抵抗组的体质量指数、腰臀比、血清甘油三酯、血清空腹胰岛素及游离脂肪酸水平均明显高于胰岛素敏感组,体质量指数25.31±1.54 vs 23.11±1.03,腰臀比0.98±0.24 vs 0.75±0.15,甘油三酯(1.98±0.56)mmol/L VS(1.04±0.24)mmol/L,空腹胰岛素(25.87±14.21)mU/LVS(11.15±4.67)mU/L.游离脂肪酸(1.35±0.46)mmol/L vs (0.66±0.23)mmol/ L(P<0.01).胰岛素抵抗组皮下脂肪组织中ATGL mRNA和蛋白表达均明显低于胰岛素敏感组,0.92±0.13 vs 2.03±0.21、1.03±0.08 vs 1.98±0.11(P<0.01);HSL mRNA和蛋白表达也均明显低于胰岛素敏感组,1.35±0.21 vs 1.64±0.12、1.25±0.09 VS 1.42±0.15(P<0.01).ATGL的蛋白表达与空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数及游离脂肪酸呈负相关(r=-0.235、-0.356和-0.214,P<0.01或<0.05);HSL 的蛋白表达与空腹胰岛素、游离脂肪酸和腰臀比呈负相关(r=-0.185、-0.246和-0.145,P<0.01或<0.05).结论 胰岛素抵抗状态时皮下脂肪组织中ATGL和HsL的表达减低.