两种离心方法制备手工血小板的比较

目的：比较两种离心方法（富浆法和白膜法）对制备手工血小板的影响。方法：两种方法各取100袋400 ml的6 h之内采集的新鲜全血,富浆法是先以1630×g/min,温度22℃,离心7 min,分离出富小板血浆后,再以2 800×g/min,离心12 min,制备成血小板。白膜法是先以2800×g/min,温度22℃,离心12 min,分离出白膜层和血浆,然后再以700×g/min,离心7 min制备成血小板。结果：富浆法制备的血小板含量高。而白膜法制备的手工血小板含量相对较低。结论：两种离心方法制备手工血小板相比较,富浆法制备的血小板符合国家标准,但制备过程中要轻拿轻放,防止混入过多的红细胞。     

应用顶底袋保留白膜法制备浓缩血小板

目的 应用半自动血细胞分离机,用顶底袋保留白膜法制备浓缩血小板,并与传统的手工白膜回浆法制备浓缩血小板比较.方法 采集（ACD抗凝全血400 ml为1个制备单位）10个制备单位用顶底袋收集血液、半自动分离机制备浓缩血小板作为实验组,10个制备单位用白膜回浆法制备浓缩血小板作为对照组,比较两组血小板回收率.结果 实验组全血中血小板总数为（7.62＆#177;1.45）＆#215;1010/单位,对照组为（7.78士1.72）＆#215;1010/单位,两组收集的白膜均为（55＆#177;3）克、加入血浆（60～65）克,总体积约120 ml.实验组白膜中血小板数占全血血小板数（93＆#177;1）％,对照组为（72＆#177;1）％,白膜血浆混悬液经过轻离心后,红细胞沉淀、血小板悬浮在上层血浆中,每单位得到浓缩血小板（55.6＆#177;2.5） ml,试验组血小板,回收率为（72＆#177;1）％,对照组血小板回收率为（56土1）％,两组数据差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 顶底袋保留白膜法制备浓缩血小板的回收率优于传统手工白膜回浆法工艺.     

改良白膜法制备汇集浓缩血小板的临床应用

目的本研究旨在改进手工制备浓缩血小板方法，提高血小板制备质量。方法在白膜法的基础上，延长血小板解聚时间，汇集多人份白膜层，第2次离心时采用二元无聚梯度离心原理，收集血小板。结果7份按本法制备的汇集浓缩血小板（10U／袋），其血小板计数、血小板回收率及白细胞、红细胞混入量、容量分别为（2．90±0．32）×10^11、（66±4）％、（4．2±1．9）×10^8／袋、（7．2±2．3）×10^9／袋、250～300ml。结论本法制备的手工血小板回收率较高，质量指标全部超过全血和成分血国家质量标准，适宜血站推广应用。     

白膜法汇集浓缩血小板的研究进展

手工分离制备浓缩血小板有富含血小板血浆法（PRP法）和白膜法（BC法）2种。BC法制备的血小板被欧洲许多国家广泛应用，其优点在于：白细胞含量少、血小板膜表面CD62p的表达率及糖分解率显著降低、pH保持恒定等。目前，白膜法汇集浓缩血小板的辐照、过滤、洗涤、病毒灭活、冰冻保存已成为输血界研究的焦点。血小板膜微粒衍生物的制备研究也已初见成效。     

去白膜法分离血小板的研究进展

目前,浓缩血小板的手工分离制备方法有:富含血小板血浆法(PRP法)和去白膜法(BC法)2种。我们就去白膜法分离血小板的研究进展做一综述。1富含血小板血浆法分离制备血小板(PRP法)20世纪70—80年代,富含血小板血浆法为血小板分离制备的标准方法。此方法是先将全血经轻离心后分离制     

白膜富集法制备浓缩血小板方法的优化及质量评价

目的优化白膜富集法制备浓缩血小板的离心制备条件,并对其质量进行评价。方法第1次离心：选择4档转速、4个离心时间组合成16组离心条件,对满足血小板得率血小板初产品进行CD62p表达率及再表达率检测;第2次离心：3档转速、3个离心时间组成9组离心条件,对所得血小板终产品进行血小板得率、白细胞残留量、红细胞残留量检测。结果第1次离心共有4组离心条件所得血小板得率达到国家标准,其中2 400 r/min（1 861 g）、15 min离心条件所得血小板初产品CD62p表达率最低,CD62p再表达率最高,与其他3组比较差异有显著性（P〈0.01）;第2次离心：仅1 100 r/min（391g）、6 min所得血小板得率、白细胞残留率、红细胞残留率符合国家标准。结论第1次2 400 r/min、离心15 min;第2次1 100r/min、离心6 min制备的血小板在满足国家标准的同时,血小板损伤最低,功能储备最佳。     

不同方法制备浓缩血小板中细胞因子含量的测定

应用白膜法及富含血小板血浆法从全血中分离浓血小板，然后进行血小板及血细胞计数，于２２℃振荡下保存７ｄ，检测ＩＬ－１β，ＩＬ－６及ＩＬ－８的含量，结果发现，ＢＣ－ＰＣ法制备的浓缩血小板比ＰＲＰ法有较低的残留白细胞及细胞因子水平。     

全血成分分离机最佳参数的设定和影响因素分析

目的应用全血成分分离机采用白膜法制备浓缩血小板,寻找分离机的最佳参数。方法选择不同的运行参数制备血小板,对血小板及红细胞回收率进行比较,分析重新离心和轻微脂肪血对回收率的影响。结果确定参数posdetl（光电探头第1次探测的位置,决定富含血小板血浆层的转移量）为4时,血小板回收率最高约为70％,重新离心对血小板回收率无影响,轻微脂肪血的血小板回收率偏低。结论posdetl为4是白膜法机器分离血小板的最佳参数。     

复方电解质注射液作添加液汇集血小板的研究

目的探讨复方电解质注射液作添加液（PAS）汇集多人份混合血小板的可行性。方法从400ml全血中分离白膜层（BC）,容量40～45ml,于22℃±2℃静置过夜,将ABO同型的6袋白膜汇集,加200ml复方电解质注射液稀释白膜,稀释后的白膜在温度22℃±2℃的离心机中,以900r／min离心10min。上层富含血小板悬液经白细胞过滤器去除白细胞,并转移到血小板保存袋内,即制备成1个成人治疗量的PAS汇集BC—PCs。结果共制备10个成人治疗量的PAS汇集BC—PCs,其容量、血小板含量、WBC混入量、RBC混入量分别为：（293±22）ml、（3．01±0．29）×10^11、（1．1±0．2）×10^6、（5．9±1．3）×10^3。保存8d后的pH、低渗休克反应率（HSR）、形变能力（ESC）、CD62P表达率、AnnexinV结合率分别为7．10±0．05、（65．6±7．1）％、（7．1±1．6）％、（27．4±3．3）％、（12．0±1．4）％。结论复方电解质注射液作为添加液汇集血小板的方法可行。     

新白膜法与富浆法制备浓缩血小板的质量比较

目的分析新白膜法与富浆法制备浓缩血小板的质量差异。方法将采集的40袋400ml全血随机分为两组:新白膜法制备组和富浆法制备组,对分离出的浓缩血小板进行红细胞混入量、p H值、血小板计数检测比较。结果新白膜法制备组血小板计数显著高于富浆法制备组,二者存在统计学显著性差异(P0.05),两种制备方法的红细胞混入量及p H值无显著性差异(P0.05)。结论新白膜法分离出的浓缩血小板质量优于富浆法分离出的浓缩血小板。     

乙二胺四乙酸盐对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响

目的 探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响.方法 对38名血小板数量正常的体检者抽取静脉血标本,分别使用EDTA-K2、肝素钠抗凝20min、肝素钠抗凝20 min加入EDTA-K2、肝素钠抗凝60 min加入EDTA-K2的抗凝标本,进行计数及血涂片瑞氏染色观察.结果 肝素钠抗凝静脉血血小板计数结果为（93.7±32.18）× 109/L;EDTA-K2抗凝血血小板计数结果为（210＋58.39）×109/L.组间差异有统计学意义（t=16.74,P＜0.001）.肝素钠抗凝静脉血静置20min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（212.05 ＋60.20）× 109/L;与EDTA-K2抗凝血结果（210＋58.39）× 109/L比较,组间差异无统计学意义（t=1.844,B0.05）.肝素钠抗凝静脉血静置60 min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（56.74＋ 15.33）× 109/L,与EDTA-K2抗凝血结果（210t58.39）× 109/L比较,组间差异有统计学意义（t=22.88,P＜0.001）.结论 EDTA-K2钙离子螯合剂可可逆性地使初发聚集的血小板解聚.     

Preparation, storage and quality control of platelet concentrates

Patients with thrombocytopaenia need transfusions of platelet concentrates to prevent or stop bleeding. A platelet transfusion should provide platelets with good functionality. The quality of platelet concentrates (PCs) is affected by the preparation method and the storage conditions including duration of storage, type of storage container, and storage solution (plasma or an additive solution). Different in vivo and in vitro techniques can be used to analyse PCs. Platelets can be collected by apheresis technique, and from whole blood using either the buffy-coat or the platelet-rich plasma method. PCs can be gamma irradiated to prevent occurrence of graft-versus-host disease in the recipient. Pathogen inactivation procedures have been developed to prevent transmission of bacteraemia.     

Reducing white cells in platelet units

White cells (WBCs) constitute a significant contaminant of platelet concentrates (PCs). Various technologies, including apheresis and filtration, are currently being developed to minimize the carryover of WBCs into platelets. The aim is to reduce contamination of less than 10(8) WBCs per platelet unit. As part of quality control monitoring of the blood bank operations, the centrifugation protocols employed in the preparation of platelet-rich plasma (PRP) have been evaluated for their impact on the WBC content of the PCs. The WBC content, which is expressed throughout the PRP volume as well as in the PC, reflects the degree of braking. For example, after centrifugation (2500 rpm, 4 min) of whole blood into packed red cells (RBCs) and PRP, braking-induced mixing increases the WBC content of the expressed PRP. Variations in the braking rates of the centrifuges used also correlate with the WBC carryover into packed platelets. An alternative centrifugation protocol to minimize WBC carryover is suggested. Whole blood is centrifuged at 2500 rpm for 1.5 minutes (rather than 4 min) and allowed to stop with no braking. This procedure adds some 3 minutes to the total centrifugation time, but the relative integral of this centrifugation program is approximately 50 percent smaller than that of the normally employed centrifugation protocol (with braking). It was observed that the WBC content throughout the expressed PRP, or in the entire PC, is reduced by about 75 percent. These results show that an effective method of significantly decreasing the WBC content of platelet units is simply to prepare PRP with reduced centrifugation time and with the braking programs disengaged.     

两步法分离人脐血单个核细胞的最佳条件

背景：如何获得较为纯化、高活性的干细胞,目前未见深入研究报告,也未见一个标准化操作流程方案。目的：探讨两步法分离人脐血单个核细胞最佳分离条件。方法：观察羟乙基淀粉在20,30,40,50,60,70min不同时间沉淀脐血中红细胞的效果;使用人淋巴细胞分离液,分别在800,700,600,500,400g/min,离心30,25,20min的条件下分离人脐血单个核细胞。结果与结论：6%羟乙基淀粉沉淀脐血60min效果最好;使用密度为（1.0770±0.0001）g/mL人淋巴细胞分离液,在4℃条件下以700g/min离心力,离心30min,洗涤3次,这样获得的人脐血单个核细胞效果最好,所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较少,人脐血单个核细胞的细胞得率及活力比较高。提示应用羟乙基淀粉沉淀和人淋巴细胞分离液分离两步法,在最佳时间条件下可提高脐血干细胞的回收率。     

血小板计数和血小板平均体积在新生儿败血症的意义

目的：了解新生儿败血症血小板计数（BPC）和平均体积（MPV）的变化,分析其临床意义。方法：收集52例符合新生儿败血症确诊标准的患儿临床资料,比较败血症发生前后BPC及MPV相关变化;根据病原菌分为革兰阴性菌（G-）组和革兰阳性菌（G＋）组,根据转归分为存活组和死亡组,进行上述相关参数分析。结果：败血症患儿血小板减少发生率53．8％;发病后与发病前相比,BPC显著降低,MPV增加（P％0．05）。G～组与G＋组相比,血小板减少发生率显著升高（63．89％：31．25％）;BPC平均水平明显降低[（109．83±71.02）×10^9／L：（164．5±85．23）×10^9/L],且最低点水平显著降低[（75．31±42．87）×10^9：（112．06±58．18）×10^9]。死亡组BPC和MPV较存活组降低[（59．91±28．83）×10^9：（144．49±78．80）×10^9]、[（9．61±0．98）：（11．22±1．27）fl]。结论：血小板减少和MPV增加与新生儿败血症相关,能较好地反映病情及预后。     

Preparation and storage of platelet concentrates

A technique of platelet concentrate preparation and storage is presented which permits the maximum number of viable and functional platelets to be preserved for periods of 72 hours. Although the storage conditions must be followed precisely, the method is nevertheless simple to perform and does not require specialized expensive equipment. Critical factors include: 1) preparation of the platelet concentrates with an initial centrifugation of 1000 × g for 9 minutes and a second centrifugation of 3000 × g for 20 minutes (86%+/− 1 platelet yield), 2) a storage bag composed of either Fenwal's PL-146 or McGaw plastic, 3) constant gentle mixing, 4) a 70 ml residual plasma volume, and 5) room temperature storage (22 C +/− 2). In Vivo platelet recovery after 72 hours of storage at room temperature averaged 46 per cent +/− 3 and survival was 7.9 days +/− 0.3 (81% of fresh platelet viability). The function of these platelets as measured by the correlation between bleeding time and platelet count after transfusion of pooled platelets into unimmunized, aplastic thrombocytopenic recipients was as good as that of fresh platelets. Both viability and function of concentrated platelets stored at 4 C are severely compromised.     

高浓度胰岛素水平对阿司匹林抑制的血小板聚集率的影响

目的 研究高浓度的胰岛素是否影响阿司匹林抑制的血小板聚集率.方法 将制备的4组等体积的富含血小板血浆（PRP）分别加入0,30,100和300μU/ml的胰岛素,37℃的环境下孵育3 min,再将上述每一组的PRP分成等体积的4个组,分别加入0,75,150和300 μmol/L的阿司匹林,于37℃的环境下继续孵育30 min.用血小板聚集仪检测各组的血小板最大聚集率.结果 不同浓度胰岛素组之间有显著差异（F=4.056,P=0.008）.300 μU/ml胰岛素浓度的富含血小板血浆,在不同浓度阿司匹林0,75,150和300 μmol/L的孵育下,血小板最大聚集率分别为（87.62±6.23）％,（60.85±16.24）％,（55.28±16.48）％和（49.36±16.77）％,均高于相应对照组的血小板最大聚集率（83.82±8.35）％,（48.80±21.35）％,（45.04±21.44）％,（38.90±21.70）％和30 μU/ml胰岛素组的血小板最大聚集率（84.64±8.09）％,（48.13±19.27）％,（44.30±20.50）％和（35.30±16.81）％,其差异有统计学意义（P＜0.05）;而其他浓度的胰岛素组间比较,差异则无统计学显著性意义.结论 血小板暴露于高浓度的胰岛素（300 μU/ml）环境中,将会减弱阿司匹林对血小板的抗聚集效应.     

原发性高血压患者GMP-140的研究—附62例报告

目的：探讨原发性高血压（essential hypeaension,EH）患者外周血中血小板仪颗粒膜蛋白-140（platelet alpha granule membrane protein-140,GMP-140）水平及其单个核细胞中GMP-140基因的表达情况。方法：采用ELISA法测定62例EH患者（EH组）和30名健康体检者（对照组）外周血血清GMP-140含量,用逆转录-PCR法检测外周血单个核细胞中GMP-140mRNA的表达情况。结果：EH组外周血血清GMP-140为（190±70）μ/L,明显高于对照组的（122±50）μg/L（P〈0.01）;EH组单个核细胞GMP-140mRNA表达水平为0.58±0.17,与对照组0.26±0.11比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：EH患者存在GMP-140水平升高,外周血单个核细胞的GMP-140mRNA表达上调可能是EH患者外周血GMP-140含量增高的机制之一。