自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶在肿瘤细胞三维培养中的应用

背景:已有研究表明培养在三维环境中的细胞,其基因表达模式和生物学活动更接近生命有机体.目的:拟采用自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶建立乳腺癌细胞MDA-MB-231的三维培养体系以揭示自组装纳米短肽在肿瘤细胞三维培养中的作用.设计,时间及地点:体外观察实验,于2006-09/2007-12在四川大学华西医院纳米生物医学技术与膜生物学研究所细胞学实验室完成.材料:RADA16-Ⅰ由美圈BD公司提供:人乳腺癌细胞株MDA-MB-231由中国科学院上海细胞生物学研究所提供.方法:利用圆二色谱仪、原子力显微镜、流变仪对三维培养基质RADA16-Ⅰ水凝胶进行材料表征.通过F-肌动蛋白及细胞核的荧光复染来揭示细胞在三维环境中的细胞形貌.利用钙黄绿素AM对活细胞进行荧光染色,观察细胞在三维基质中的存活力.主要观察指标:①RADA16-Ⅰ的二级结构,纳米纤维网络,凝胶流变性质.②MDA-MB-231在三维培养中的细胞表型,细胞活性.结果:①自组装短肽RADA16-Ⅰ形成了纳米纤维网络结构,纤维直径20～50 nm,具有类似体内细胞外基质的结构,形成基质凝胶后可模拟体内的细胞微环境,用于细胞的三维培养.②MDA-MB-231细胞在三维基质中生长呈现出纺锤状的细胞形貌,在基质中的生存状态均较好,细胞与材料具有较好的生物相容性.结论:自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ有良好的结构与性能,能充分支持MDA-MB-231细胞的三维培养.     

自组装多肽纳米纤维水凝胶在细胞三维培养中的应用及特征

背景：自组装多肽类材料因其独特的设计及良好的生物相容性和可降解性在众多三维支架材料中脱颖而出。目的：综述RADA类离子互补型自组装多肽支架材料的结构和功能化设计,从细胞三维培养方面探讨多肽类材料作为细胞载体材料在细胞治疗中的应用前景。方法：由作者通过PubMed、Web of science数据库及CNKI数据库检索有关自组装多肽水凝胶的相关文献,检索词为“self-assembly peptide, tissue engineering;自组装多肽,组织工程”,检索文献量总计224篇,纳入包含多肽材料设计、功能化多肽材料、多肽材料用于细胞三维培养方面的研究,最终纳入48篇。结果与结论：从物理结构角度讲,多肽材料可以在生理环境中自组装成具有纳米级纤维和较高孔隙率的水凝胶,最大程度上模拟细胞外基质的结构,保障细胞生存在一个真正的三维环境中。从生物功能角度讲,多肽材料可以根据不同需求复合特异性的生物活性短肽片断,赋予材料一定的细胞特异性,可以促进细胞的黏附、增殖或分化。     

降钙素基因相关肽诱导藻酸钙凝胶复合脂肪干细胞的成骨细胞分化

背景：降钙素基因相关肽已被证实具有诱导成骨细胞分化作用,但其是否可使三维培养下的脂肪干细胞向成骨细胞分化构建组织工程骨的相关报道少见。
　　目的：探讨外源性降钙素基因相关肽诱导兔脂肪干细胞复合藻酸钙凝胶三维培养成骨分化的可行性。
　　方法：取新西兰兔双侧腹股沟区皮下脂肪垫,Ⅰ型胶原酶消化离心贴壁法分离培养脂肪干细胞,取第3代与海藻酸钠混合制备凝胶,于24孔板分组培养：对照组加入含10-2 mol/Lβ-甘油磷酸钠、10-7 mol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、体积分数10%胎牛血清的DMEM/F-12骨诱导培养基,实验组在此基础上再加入1.5μg/L降钙素基因相关肽进行诱导培养。于诱导不同时间点MTT法检测细胞增殖,RT-PCR法检测诱导细胞Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA的表达,并检测碱性磷酸酶及钙离子浓度。
　　结果与结论：兔脂肪干细胞的增殖曲线呈“S”型,实验组诱导1,3,5,7,14,21 d 的 A 值高于对照组(P<0.05);诱导2周后两组细胞碱性磷酸酶、茜素红染色均阳性,但实验组钙结节较对照组明显增多。实验组诱导7,14 d的Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA表达均强于对照组。实验组诱导1,2,3,4周的碱性磷酸酶活性及钙离子浓度均高于对照组(P<0.05)。结果表明降钙素基因相关肽能诱导复合藻酸钙凝胶的脂肪干细胞向成骨细胞分化。     

可注射温敏淫羊藿苷壳聚糖水凝胶促进家兔桡骨骨折的愈合

背景：淫羊藿可显著促进体外培养成骨细胞的增殖、分化和成熟,刺激骨形成。目的：观察可注射温敏淫羊藿苷壳聚糖水凝胶修复家兔桡骨骨折愈合的效果。方法：麻醉下将36只兔左右桡骨截断,随机分为实验组、对照组和空白组,前两组分别在骨折端周围注入可注射温敏携淫羊藿苷壳聚糖水凝胶、壳聚糖水凝胶,空白组骨折区未注入任何材料。结果与结论：3组骨折均于术后6剧时愈合。X射线片显示,术后2,4,6周,实验组骨折修复区单位面积平均灰度值及成骨细胞计数均明显高于对照组、宅白组（P〈0．05）,且实验组成骨细胞增生活跃。说明可注射温敏携淫羊藿苷壳聚糖水凝胶具有促成骨活性,可促进骨折愈合。     

纤维蛋白凝胶促进大鼠间充质干细胞的成骨分化

背景：纤维蛋白是一种天然的可生物降解、组织相容性好的高分子材料,是一种能促进细胞和外源性生长因子释放的载体,其中血纤维蛋白稳定因子ⅩⅢ已证明有利于未分化的间充质干细胞在高度交联的凝胶支架内迁移,并且促进这些细胞的增殖与分化能力。目的：观察大鼠间充质干细胞在纤维蛋白凝胶内的行为。方法：无菌条件下分离大鼠胎肢细胞获得间充质干细胞,取第3代细胞分别接种于0,5,10,20 g/L纤维蛋白凝胶内,用倒置相差显微镜和激光扫描共聚焦显微镜分析细胞在凝胶内的形态学变化;酶标仪和Von Kossa染色分析碱性磷酸酶活性和钙盐沉积。结果与结论：5 g/L低浓度纤维蛋白凝胶有利于细胞形态的发生,20 g/L高浓度凝胶有利于细胞的成骨分化。20 g/L纤维蛋白凝胶碱性磷酸酶活性高于对照组,10和20 g/L浓度纤维蛋白凝胶矿化结节出现在21至28 d,而对照组无矿化结节出现。提示大鼠间充质干细胞的形态与成骨分化依赖于纤维蛋白凝胶浓度,提示纤维蛋白凝胶有助于间充质干细胞的成骨分化。     

柚皮苷纳米纤维膜载药量影响成骨细胞的增殖和分化

背景：多数研究认为,单纯的引导性骨再生膜只是起到了机械性阻挡和隔离作用,不具备主动诱导作用。大量研究显示柚皮苷可促进多种成骨样细胞的增殖和分化。目的：制各载有柚皮苷的引导性骨再生膜,并研究一定电纺参数下的最佳载药剂量。方法：以聚己内酯与聚乙二醇-b-聚己内酯为材料,通过静电纺丝技术制各含0（对照）,0．1,1,10,100g／L柚皮苷的纳米纤维膜,扫描电镜观察膜的表面形态。将MC3T3．E1成骨细胞接种于含不同质量浓度柚皮苷的纳米纤维膜上,以扫描电镜观察细胞,膜复合体的表面形态,以噻唑蓝法检测细胞的增殖能力,以碱性磷酸酶活性检测评估细胞的分化能力。结果与结论：当柚皮苷质量浓度为0．1,1,10g／L时,纳米纤维表明光滑,直径均一,呈纵横交错的三维网状结构。当柚皮苷质量浓度100g／L时,纳米纤维膜表面有较多膨大的珠状结构,直径均一性较差。与对照组比较,含10g／L柚皮苷的纳米纤维膜能显著促进成骨细胞的增殖（P〈0．05）．含1,10g／L柚皮苷的纳米纤维膜均能显著促进成骨细胞的碱性磷酸酶活性（P〈0．05）,并且以含10g／L柚皮苷的纳米纤维膜组作用最明显。表明载柚皮苷的引导性骨再生纳米纤维膜能促进成骨细胞的增殖和分化,10g,L为柚皮苷的最佳载药剂量。     

不同浓度透明质酸水凝胶的细胞相容性

背景：水凝胶呈半凝固的胶体状态,可以实现细胞的三维立体培养,消除普通培养皿中出现的“接触抑制”现象,从而提高培养效率,透明质酸水凝胶作为三维培养基质在干细胞和组织工程研究领域的应用已有报道. 目的：探讨透明质酸水凝胶浓度的改变对其基本性能以及对大鼠骨髓间充质干细胞三维培养形态和增殖的影响. 方法：制备4,8,12 g/L的透明质酸水凝胶,观察其凝胶时间、溶胀率、降解速率以及黏弹性;用这3种浓度透明质酸水凝胶包封骨髓间充质干细胞进行三维培养,并以普通培养皿的二维培养作对照.通过激光扫描共焦显微镜观察不同培养条件下骨髓间充质干细胞的形态,采用细胞计数法描绘骨髓间充质干细胞在不同浓度透明质酸水凝胶内的生长曲线. 结果与结论：对于4-12 g/L 的透明质酸水凝胶,其浓度越大,凝胶时间越短,溶胀率越低,降解速率越慢,水凝胶弹性强度越大（P 〈0.05）.激光扫描共焦显微镜见骨髓间充质干细胞在透明质酸水凝胶内呈立体圆球形,与二维培养时呈现的梭形明显不同;同时,细胞计数结果显示骨髓间充质干细胞在透明质酸水凝胶内的增殖率高于二维培养,并以8 g/L透明质酸水凝胶的促增殖作用最明显（P〈0.05）.可见不同浓度的透明质酸水凝胶性能存在差异,对大鼠骨髓间充质干细胞的生长、增殖也有影响,8 g/L 的透明质酸水凝胶更适合大鼠骨髓间充质干细胞的三维培养.     

聚乳酸/羟基磷灰石纳米复合物对MC3T3-E1细胞增殖活性的影响

背景：研究表明聚乳酸/羟基磷灰石复合材料与自然骨结构和性能相似,具有骨传导性和良好的生物相容性。 目的：观察聚乳酸/羟基磷灰石纳米复合物与成骨细胞株MC3T3-E1的生物相容性。 方法：分别采用普通完全培养基（对照组）与聚乳酸/羟基磷灰石纳米复合物浸提液（实验组）培养第3代成骨细胞株MC3T3-E1,培养3,5,7 d,采用CCK-8法检测细胞的吸光度值;在培养第7,14天检测细胞碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原、核心结合因子α1/成骨特异性转录因子表达。将聚乳酸/羟基磷灰石纳米复合物与第3代成骨细胞株MC3T3-E1共培养,培养7,14 d细胞骨架染色及扫描电镜观察细胞在支架材料上的形态。 结果与结论：随着时间的延长,成骨细胞株MC3T3-E1的吸光度值明显增加,两组细胞吸光度值比较差异无显著性意义。实验组培养第7天细胞碱性磷酸酶活性高于对照组（P ＜0.05）,培养第14天细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、核心结合因子α1/成骨特异性转录因子表达高于对照组（P ＜0.05）。种植7 d后细胞在材料上贴附生长,细胞呈多角形;种植14 d 后细胞较7 d 前数目明显增多,且完全伸展,呈多角形和梭形。表明聚乳酸/羟基磷灰石纳米复合物对成骨细胞有良好的生物相容性,无细胞毒性。     

纳米壳聚糖对MC3T3-E1成骨细胞生长的影响

背景：已有体内急性毒理实验证实,壳聚糖纳米微囊的半数致死量高于2000 mg/kg,但其具体致病机制目前尚不明确。
　　目的：分析纳米壳聚糖作为骨替代材料对MC3T3-E1成骨细胞生长及大鼠肝、肾等器官生理功能的影响。方法：将MC3T3-E1成骨细胞分别在含0(对照)、10 mg/L、100 mg/L、1 g/L、10 g/L纳米壳聚糖的DMEM培养液中培养,检测各组细胞A值。透射电镜观察10 g/L纳米壳聚糖溶液培养MC3T3-E1成骨细胞24 h后的细胞形态变化。采用PBS制备10 g/L纳米壳聚糖悬浮液,分别以166.67,16.67 mg/kg经腹腔注射至SD大鼠体内4周,每周3次,正常对照组注射等量生理盐水,血清生化指标分析大鼠肝、肾功能,病理切片观察组织形态学改变、炎症细胞浸润情况。
　　结果与结论：与对照组比较,10 mg/L、100 mg/L、1 g/L、10 g/L的纳米壳聚糖溶液均抑制MC3T3-E1细胞的生长(P<0.05)。透射电镜见团聚的壳聚糖存在于MC3T3-E1细胞浆中,细胞表面的伪足形成,细胞膜呈波浪状起伏,细胞核变性、碎裂及固缩。与正常对照组比较,注射纳米壳聚糖悬浮液两组大鼠血尿素氮、Na+水平均有明显升高(P<0.05),高剂量组K+水平明显降低(P<0.01);肝脏、肾脏均出现组织细胞凋亡现象,高剂量组凋亡更加明显。表明纳米壳聚糖可导致细胞凋亡,超过一定剂量可造成肾功能受损,对机体生理功能造成影响。     

骨形态发生蛋白2诱导C2C12和MC3T3-E1的成骨分化与自噬

背景：一系列研究表明自噬与分化有密切联系;骨形态发生蛋白2是诱导C2C12、MC3T3-E1成骨分化经典途径,是研究成骨分化过程的理想模型。目的：观察自噬与骨形态发生蛋白2诱导细胞株C2C12、MC3T3-E1成骨分化的关系。方法：Real-Time PCR检测MC3T3-E1与C2C12在骨形态发生蛋白2（100μg/L）诱导培养3 d后成骨与自噬相关指标变化。碱性磷酸酶染色检测不同浓度3-甲基腺嘌呤（0,1,5,10 mmol/L）对骨形态发生蛋白2（100μg/L）诱导培养7 d MC3T3-E1与C2C12成骨指标碱性磷酸酶变化,Western Blot检测C2C12和MC3T3-E1在骨形态发生蛋白2（100μg/L）诱导不同时间点（0,12,24,48,72,96 h）LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白表达水平。结果与结论：在骨形态发生蛋白2诱导细胞株 C2C12、MC3T3-E1成骨分化过程中,诱导自噬相关 mRNA与蛋白水平均有增高趋势,且自噬相关蛋白LC3水平增高与时间相关。同时,抑制自噬成骨分化过程中碱性磷酸酶表达水平降低。因此,自噬与骨形态发生蛋白2诱导细胞株C2C12、MC3T3-E1成骨分化过程有密切关系。     

乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡的干预作用

背景：前期研究发现,乌司他丁对RANKL诱导RAW264.7细胞活化为成熟破骨细胞具有一定的抑制作用,并可降低基质金属蛋白酶9的表达,但其对聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥促成骨细胞凋亡效应是否有干预作用尚不清楚。 目的：探讨乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡及Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA表达的影响。 方法：取第六七代生长状态良好的MC3T3-E1鼠前成骨细胞,分4组培养,骨水泥组加入1 g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液;高、低剂量乌司他丁组在加入1g/L 的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液后,再分别加入5000,500 U/mL的乌司他丁;设置单独培养的细胞为空白对照。MTT法检测细胞增殖活性,茜素红染色检测细胞矿化程度,流式细胞仪检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA的表达。 结果与结论：与空白对照组比较,骨水泥抑制了MC3T3-E1细胞增殖活性（P＜0.05）,促进了细胞凋亡（P＜0.05）,在加入不同浓度乌司他丁后,细胞增殖活性逐渐增强（P＜0.05）,凋亡率降低（P＜0.05）,且呈剂量时间依赖关系;骨水泥降低了细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素表达（P ＜0.05）,升高了基质金属蛋白酶2表达（P ＜0.05）,在加入5000 U/mL乌司他丁后,细胞基质金属蛋白酶2表达降低,Ⅰ型胶原、骨钙素表达升高（P＜0.05）。骨水泥组无矿化结节,其他组均有矿化结节形成。结果表明乌司他丁对骨水泥诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡具有一定的抑制作用,可促进成骨细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素的生成,并降低基质金属蛋白酶2的表达水平。     

Viability and neuronal differentiation of neural stem cells encapsulated in silk fibroin hydrogel functionalized with an IKVAV peptide

Three‐dimensional (3D) porous scaffolds combined with therapeutic stem cells play vital roles in tissue engineering. The adult brain has very limited regeneration ability after injuries such as trauma and stroke. In this study, injectable 3D silk fibroin‐based hydrogel scaffolds with encapsulated neural stem cells were developed, aiming at supporting brain regeneration. To improve the function of the hydrogel towards neural stem cells, silk fibroin was modified by an IKVAV peptide through covalent binding. Both unmodified and modified silk fibroin hydrogels were obtained, through sonication, with mechanical stiffness comparable to that of brain tissue. Human neural stem cells were encapsulated in both hydrogels and the effects of IKVAV peptide conjugation on cell viability and neural differentiation were assessed. The silk fibroin hydrogel modified by IKVAV peptide showed increased cell viability and an enhanced neuronal differentiation capability, which contributed to understanding the effects of IKVAV peptide on the behaviour of neural stem cells. For these reasons, IKVAV‐modified silk fibroin is a promising material for brain tissue engineering. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

前成骨细胞MC3T3-E1在梯度TiO2涂层修饰钛上的增殖与分化

目的:为改善纯钛的生物活性,对其表面进行梯度氧化钛生物活性涂层修饰,观察前成骨细胞MC3T3-E1在梯度氧化钛涂层修饰的钛上的黏附、增殖、形态和分化,评价该梯度涂层的生物活性。方法:实验于2006-03/12在清华大学生物膜与膜生物工程国家重点实验室完成。①梯度涂层的制备:先用阳极氧化的方法在纯钛上制备一层致密的氧化钛膜,而后在该致密膜上用微弧氧化法生成一层多孔的氧化钛膜。②细胞接种:将前成骨细胞MC3T3-E1接种到梯度涂层修饰的钛试件上(梯度改性试件),未修饰的钛和只有一层氧化钛修饰的钛试件也同样接种细胞作为参照。③观察指标:接种3h和6h后用MTT的方法检测细胞的黏附情况;培养3d后用扫描电镜观察细胞的生长形态;分别在培养7,14和21d后用MTT的方法分析MC3T3-E1细胞的增殖情况;将接种细胞的3种试件放于诱导培养基中,诱导培养28d后通过检测碱性磷酸酶的活性来分析细胞向成骨细胞的分化情况。结果:①接种3h后,在未修饰的钛和氧化改性试件上黏附的细胞数相近,比在梯度改性试件上的黏附细胞数要少;6h后在梯度改性试件上的细胞数的增加更显著,是未修饰的钛上细胞数的1.5倍。②培养3d后扫描电镜观察到细胞在所有材料上都能够正常生长,细胞在3种材料上的形态比较相似,都表现出正常MC3T3-E1细胞的形态。③MC3T3-E1细胞在所有试件上都随时间而有所增殖。在梯度改性试件上的细胞数最高,未修饰的钛上的细胞数最少,在7d的差别不是很明显,而第21天时梯度改性试件上的细胞数是纯钛上细胞数的4倍。④在诱导培养基中培养28d后,在梯度改性试件上培养的MC3T3-E1细胞的碱性磷酸酶活性是最高的,是纯钛试件的2倍。结论:MC3T3-E1细胞在梯度改性试件上的黏附、增殖和分化都是3种试件中最好的,表明梯度氧化钛涂层修饰的钛比纯钛或只有一层氧化钛修饰的钛都具有更好的生物活性。     

骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中长链非编码RNA的作用

背景：人类长链非编码RNA是现今的研究热点,已有研究报道其在肿瘤发生中的作用机制,但其在成骨分化方面的机制并不明确。目的：观察人类长链非编码RNA在经骨形态发生蛋白2诱导小鼠C3H10T1/2细胞成骨分化中的作用,并探讨其分子机制。方法：首先进行碱性磷酸酶染色和成骨指标基因检测。对C3H10T1/2细胞在骨形态发生蛋白2诱导下的成骨分化过程长链非编码RNA表达变化进行芯片分析。采用高通量测序比较骨形态发生蛋白2诱导组和未经骨形态发生蛋白2诱导组的表达变化,筛选出表达下降的基因。过表达相应长链非编码RNA后观察对骨形态发生蛋白2诱导成骨分化的影响。结果与结论：骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2细胞导致碱性磷酸酶活性增加。骨形态发生蛋白2诱导72 h后,碱性磷酸酶、Id1、骨钙素、Runx2、sp7表达上升（P〈0.05）。未诱导C3H10T1/2细胞与骨形态发生蛋白2诱导细胞芯片杂交后结果比较,下降达1.5倍的长链非编码RNAs有24条,其中只有AK035085有内含子。与未过表达AK035085的对照组相比,骨形态发生蛋白2诱导72 h后AK035085过表达的C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶、Id1、骨钙素、Runx2、sp7表达均下降（P〈0.05）。提示骨形态发生蛋白2可刺激C3H10T1/2细胞发生成骨分化,AK035085可能对C3H10T1/2细胞的成骨分化存在抑制作用。     

3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响

背景:3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能。目的:体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响。方法:将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态。结果与结论:在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组(2D培养组)(P<0.05);扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长。表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期。     

3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响

背景：3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能。目的：体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响。方法：将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态。结果与结论：在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组（2D培养组）（P〈0.05）;扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长。表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期。