淫羊藿苷对大鼠间充质干细胞骨向分化过程中转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2表达的影响

背景:淫羊藿苷作为补肾中药淫羊藿的主要有效成分,能够有效促进间充质干细胞向成骨细胞分化.目的:观察淫羊藿苷在诱导间充质干细胞骨向分化过程中对转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2表达的影响,阐释其可能的诱导机制.方法:运用全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞:以20 mg/L淫羊藿苷作为间充质干细胞药物干预浓度,根据干预条件的不同将实验分为;空白组、经典组(加经典成骨诱导剂)、淫羊藿苷组、淫羊藿苷+经组:ELISA法检测各组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达.结果与结论:经典组、淫羊蓍苷组、淫羊藿苷+经组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2值均高于空白组(P<0.05):各组第7天的转化生长因子β1,值高于14,21 d(P<0.01),各组不同诱导时间骨形态发生蛋白2值之间相比差异无显著性意义(P>0.05).提示上调转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达量可能是淫羊藿苷诱导各组促进间充质于细胞骨向分化的作用机制之一.     

淫羊藿苷抑制钛颗粒诱导的炎症反应

背景：体外实验表明,淫羊藿苷可抑制脂多糖诱导的急性肺炎,其抗炎作用在磨损颗粒存在的条件下是否依然有效？目的：通过体内外实验相结合的方法探讨淫羊藿苷对磨损颗粒诱导炎症反应的调控作用。方法：①体内实验：将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,钛组和钛＋淫羊藿苷组采用钛诱导小鼠颅骨无菌炎症模型,对照组、淫羊藿苷组也进行相同手术过程,但不植入钛,淫羊藿苷组、钛＋淫羊藿苷组建模当天灌胃给予淫羊藿苷200 mg/（kg·d）,对照组、钛组灌胃给予等量的安慰剂,2周后酶联免疫吸附实验、定量RT-PCR检测肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β蛋白或mRNA的表达量。②体外实验：将小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7分别与核因子кB受体配体、核因子кB受体配体＋淫羊藿苷、核因子кB受体配体＋钛颗粒及核因子кB受体配体＋钛颗粒＋淫羊藿苷共培养72 h,ELISA检测培养基上清中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β水平,RT-PCR分析肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β基因mRNA表达。结果与结论：①体内实验：在钛颗粒存在的条件下,口服淫羊藿苷可明显减少颗粒诱导的炎症细胞浸润,使炎性增厚的骨膜变薄,抑制颅骨标本中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β的表达。②体外实验：经钛颗粒刺激后,细胞培养基中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β质量浓度显著增加,细胞中相应mRNA表达量上调,而经淫羊藿苷干预后这两种炎性因子在蛋白和基因水平的表达量显著下调。结果表明淫羊藿苷在体内外均可显著抑制钛颗粒诱导的炎症反应。     

不同浓度淫羊藿苷修复骨损伤：争议与探索

背景：作为淫羊藿主要有效成分之一的淫羊藿苷,对于骨损伤后的修复具有重要作用。淫羊藿苷在体内的持续有效浓度对于骨损伤的修复至关重要。 目的：综述近年国内外淫羊藿苷对于骨修复的研究进展,探讨淫羊藿苷的药理活性浓度。 方法：第一作者应用计算机检索2000年1月至2013年10月PubMed数据（http：//www.ncbi.nlm. nih.gov/PubMed）及CNKI中国期刊全文数据库（http：//www.cnki.net/）有关淫羊藿苷对骨组织修复作用,或者与淫羊藿苷治疗骨损伤的相关基础研究文献。英文检索词＂icariin,concentration,bone＂;中文检索词＂淫羊藿苷,浓度,骨＂。排除重复性研究,共检索到76篇相关文献,44篇文献符合纳入标准。 结果与结论：利用淫羊藿苷的有效活性成分联合缓释支架材料,可以诱导骨髓间充质干细胞成骨分化,增强成骨细胞活性,抑制破骨细胞的吸收,从而起到修复骨组织的作用。淫羊藿苷促进细胞分化作用虽已得到肯定,但是否具有促进细胞增殖作用还存在一定的争议。研究发现,淫羊藿苷的药理活性浓度从10-8到10-5 mol/L不等,总体来看,10-8-10-5 mol/L应该是淫羊藿苷发挥其最佳药理活性可能出现的区间,但目前临床试验尚未开展,具体的持续给药浓度还不确定,这些都需要进一步研究探索。     

淫羊藿苷可抑制正畸致牙根的吸收

背景：淫羊藿的主要成分之一淫羊藿苷对破骨细胞有抑制作用。目的：进一步验证淫羊藿苷对大鼠上颌第1磨牙近中根已形成的牙根吸收的影响。方法：建立大鼠左侧上颌正畸致牙根吸收模型,分别在左侧第1磨牙的颊侧骨膜上局部分别注射200 mg/kg的淫羊藿苷(淫羊藿苷组)或生理盐水(阳性对照组),所有大鼠的右侧上颌为阴性对照组,即不放置矫治器也不注射药物。测量安放矫治器前后双侧第1磨牙近中面到对侧上颌切牙远中面的距离,用扫描电镜观察拔除后双侧上颌第1磨牙的近中根的近中面。结果与结论：淫羊藿苷组大鼠上颌磨牙向近中移动量明显少于阳性对照组(P <0.05)。扫描电镜观察显示：淫羊藿苷组为散在小的吸收陷窝,阳性对照组牙根表面出现大量较大的吸收陷窝,并相互连成片状,与阴性对照组的光滑牙根面形成鲜明对比。说明淫羊藿苷可以抑制正畸致牙根吸收的发生,同时也减少了矫治力作用下磨牙的移动量。     

钛微粒对成骨细胞护骨素基因表达的调控

目的:探讨磨损微粒引起假体周围骨溶解过程中的骨保护能力,为人工关节假体松动的机制及预防研究打下基础。方法:M G-63细胞在无酚红的M EM培养基中单层培养,采用不同浓度细胞可吞噬钛微粒(粒径小于3μm对其进行24h干预或采用0.05%钛微粒干预0h、12h、24h、36h及48h,半定量R T-PC R观察其对护骨素)(OPG基因表达的影响。结果:随着钛微粒浓度及刺激时间逐渐增加,O PG m R N A表达上调逐渐增加。结论:在假体)松动病理过程中,骨保护能力增加,虽然其增加程度不及骨溶解,但为干预假体松动提供了基础。     

CRTER杂志“硬组织工程”栏目关于“人工关节假体”的组稿内容：本刊学术部

骨基质明胶防治人工关节无菌性松动的实验研究 人工关节磨损钛微粒诱导破骨的分子生物学机制 改良大鼠气囊模型在人工关节假体松动研究中的应用     

淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死的作用

背景:研究表明中药淫羊藿可以改善激素性股骨头坏死的症状,但具体的作用机制尚未阐明.目的:探讨淫羊藿提取液治疗激素性股骨头坏死的初步效果.方法:清洁级SD成年雄性大鼠建立激素性股骨头坏死大鼠模型后,分别给予0.4,0.2 g/mL淫羊藿提取液或生理盐水干预,并设立未造模的空白对照组.干预8周后,检测各组大鼠血液三酰甘油、总胆固醇的变化情况,解剖出股骨头并切片光镜下观察骨密度变化情况,计算空骨陷窝比率,进行组间比较.结果与结论:与空白对照组相比,模型组股骨头疏松,易于凿切,血脂升高,骨小梁变细、稀疏,空骨陷窝率增高,髓腔脂肪细胞增多;而淫羊藿高、低剂量组的上述病变情况有不同程度减低,以淫羊藿高剂量组病变程度最低.结果表明,淫羊藿提取液能够改善激素性股骨头坏死血流变因素,改善脂肪代谢紊乱,促进堆积脂肪代谢的作用;还能够促进体外成骨细胞增殖及分化成熟,抑制破骨细胞活性、促进股骨头骨再生,改变股骨头内环境向好的方向转变,防治激素引起的骨质疏松,为淫羊藿治疗激素性股骨头坏死提供了初步理论依据.     

人工关节松动的生物学因素：细胞因子和人工关节骨溶解

影响人工关节远期寿命的最主要原因是远期松动。而大量的证据表明松动的主要元凶是磨损颗粒引起的假体周围的骨溶解。在骨溶解过程中，细胞因子对成骨细胞、破骨细胞的发生、分化、成熟、死亡起着重要的调节作用。这些细胞因子主要包括：白介素1，肿瘤坏死因子(TNF)，前列腺素等。磨损颗粒释放入关节腔后，首先被巨噬细胞吞噬，巨噬细胞不仅本身分泌因子作用于成骨细胞、破骨细胞，其本身可能也参与骨溶解过程。解决骨溶解的基本策略是减少交界组织处磨损颗粒的数目和增加骨一植入物界面的完整性。通过药物可以阻止某些细胞因子如TNF的分泌，进而达到预防无菌性松动的目的。     

依那西普对钛颗粒诱导小鼠骨溶解及破骨细胞增殖的影响

目的:已证实肿瘤坏死因子α在人工关节无菌性松动和类风湿关节炎的发病机制中均发挥重要的作用.依那西普作为肿瘤坏死因子α拮抗剂在治疗类风湿关节炎中疗效显著.拟通过实验观察依那西普对钛颗粒诱导小鼠骨溶解及破骨细胞增殖的影响,为依那西普防治人工关节无菌性松动提供实验依据.方法:实验于2007-02/2007-08在宁夏医学院生殖及遗传学重点实验室和宁夏医学院附属医院病理学实验室完成.①60只BALB/C小鼠随机分为6组,每组10只.分别为空白对照组,单纯钛处理组,20,50,100,200 μg/kg依那西普 钛处理组.实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求.依那西普由美国Wyeth公司提供(生产批号:P321686);钛金属颗粒由美国Zimmer公司提供.②建市钛颗粒骨吸收模型,其中空白对照组行原位缝合,不置入钛颗粒.依那两普各组分别在第0,2,4,6,8天腹腔注射不同剂量的依那两普(20,50,100,200 μg/kg).10 d后取出颅骨,行常规苏木精-伊红染色,了解骨吸收情况.抗酒石酸酸性磷酸酶染色计算破骨细胞数最.结果:苏木精-伊红染色结果为单纯钛处理组骨吸收明显增加,骨小梁结构紊乱及骨质疏松,破骨细胞的形态变大,数目变多;依那西普干预组上述表现减轻,尤以200 μg/kg剂量为明显.与空白对照组相比,单纯钛处理组可明显增加骨溶解(P＜0.001)及破骨细胞生成(P＜0.001);与单纯钛处理组相比,依那西普各组可减少骨溶解(P＜0.05)及破骨细胞牛成(P＜0.05),尤以200 μg/kg剂量最为明显(P＜0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶染色与苏木精-伊红染色结果相符.结论:依那两普可抑制钛颗粒诱导的骨溶解及破骨细胞的增埴,有望成为预防人工关节无菌性松动的药物.     

淫羊藿苷对MK-801致精神分裂症小鼠模型的影响

目的研究中药淫羊藿的主要有效成分淫羊藿苷对精神分裂症动物模型的影响。方法小鼠腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801(0.3 mg/kg,0.6 mg/kg,1.2 mg/kg)制备精神分裂症小鼠模型。应用旷场行为红外检测系统观察小鼠的活动性,确定制备精神分裂症的最佳剂量。40只小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药利培酮组(0.1 mg/kg)、淫羊藿苷组(50 mg/kg),每组10只。阳性药利培酮组和淫羊藿苷组灌胃相应药物;除正常对照组外,其他组腹腔注射0.1 ml MK-801溶液0.6mg/kg造模。测定各组小鼠210 min内的活动总距离和在中心区的活动距离。结果模型组活动总距离和中央区活动距离与正常对照组相比显著延长(P0.001);阳性药利培酮组两指标均短于模型组(P0.05);淫羊藿苷组活动总距离短于模型组,但无显著性差异(P=0.065),中央区活动距离短于模型组(P=0.037)。淫羊藿苷组与阳性药利培酮组活动总距离和中央区活动距离比较均无显著性差异(P0.05)。结论淫羊藿苷能够改善精神分裂症模型小鼠的阴性症状,可能改善其阳性症状,有利于治疗精神分裂症。     

内质网应激介导成骨细胞凋亡在骨溶解骨组织中的作用及机制

背景：磨损微粒能够在体外诱导成骨细胞凋亡,但是发生骨溶解的骨组织中是否也存在成骨细胞的凋亡以及骨组织中的成骨细胞凋亡信号通过何种途径进行传导目前尚不清楚。目的：分析内质网应激反应在骨溶解骨组织中成骨细胞凋亡和骨溶解发生发展中的作用。方法：制备磨损微粒诱导骨溶解动物模型。实验分为4组：空白对照组只接受PBS的刺激;磨损微粒组只接受纳米合金粉末悬液的刺激;内质网应激阳性对照组接受纳米合金粉末＋毒胡萝卜素的刺激;内质网应激抑制组接受纳米合金粉末悬液及造模后当时、造模后1,2,3和5 d分别腹腔注射4-苯基丁酸。通过甲苯胺蓝染色、苏木精-伊红染色和碱性磷酸酶染色观察骨溶解的病理变化;分析骨溶解颅骨组织中成骨细胞分化成熟情况;Western Blot 方法检测骨溶解颅骨组织内内质网应激反应标志蛋白的表达变化;TUNEL 和 Caspase-3免疫组织化学方法检测骨溶解颅骨组织内成骨细胞的凋亡情况。结果与结论：磨损微粒能够在体外诱导小鼠颅骨骨溶解的发生、加重炎症细胞的浸润以及抑制成骨细胞分化成熟,同时磨损微粒还可以上调成骨细胞内质网应激反应标志蛋白以及促进骨溶解骨组织中成骨细胞的凋亡。经内质网应激抑制剂（4-苯基丁酸）的治疗后,骨溶解症状明显缓解,骨侵蚀和炎症浸润显著降低,成骨细胞的分化成熟得到改善,凋亡的成骨细胞急剧减少,内质网应激标志蛋白的表达逐渐减弱。表明内质网应激反应参与骨溶解的形成并在骨溶解的发生发展中发挥重要作用。提示内质网应激可作为一种新的治疗靶点,为临床逆转或治疗骨溶解和无菌性松动提供新的思路和方法。     

In vivo analysis of the effects of CoCrMo and Ti particles on inflammatory responses and osteolysis

Metal wear particles play a major role in periprosthetic osteolysis and aseptic loosening in patients with total joint arthroplasty. The ability to induce osteolysis depends on the size, shape, dose, and type of the particles. However, much remains unknown regarding which type of metal particles are most reactive. We compared the inflammatory response and bone loss induced by two metal wear particles, cobalt–chromium–molybdenum (CoCrMo) and titanium (Ti), in a mouse calvaria model of osteolysis. We found that CoCrMo particles caused markedly greater bone resorption than Ti particles, according to three-dimensional images of the calvariae. CoCrMo particles activated more functional osteoclasts by significantly increasing the expression of the osteoclast-specific gene tartrate-specific acid phosphatase (Trap), calcitonin receptor (Ctr), and nuclear factor of activated T cells c1 (Nfatc1), and induced a greater increase in the ratio of receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL)/osteoprotegerin (OPG) than Ti particles. CoCrMo particles also induced a stronger local inflammatory response, markedly increasing the expression and secretion of tumor necrosis factor-α and interleukin-1β compared with Ti particles. Therefore, CoCrMo particles induced a more severe inflammatory response and greater osteolysis than Ti particles in vivo.

CoCrMo particles induced a more severe inflammatory response and greater osteolysis than Ti particles in vivo in mice.     

脐带间充质干细胞对CoCrMo磨损微粒诱导的小鼠颅骨溶解的影响

目的:探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)通过抑制炎症反应在CoCrMo磨损微粒(CoCrMo wear particles,CoPs)诱导的小鼠颅骨溶解动物模型中的保护作用。方法:使用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、能谱分析(energ ydispersive spectroscopy,EDS)、X射线衍射仪(X-ray diffraction,XRD)探测CoPs的形貌、粒径分布、化学成分百分比以及物相成分分析。使用微型计算机断层扫描(micro-computed tomography,Micro-CT)和三维重建分析来对小鼠颅骨骨质丢失程度进行影像学和定量的分析。通过甲苯胺蓝染色、苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)鉴定小鼠颅骨组织骨溶解的组织学差异。使用ELISA检测试剂盒对CoPs诱导的无菌性松动的小鼠模型的骨膜组织中的炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达差异进行鉴定。结果:CoPs主要由C、Cr7C3、Mo2C、Co和CoMoO4组成,并在SE M和TE M中表现为表面较为光滑的球状。为探究hUCMSCs对CoPs诱导小鼠颅骨骨溶解的影响,首先利用Micro-CT扫描小鼠颅骨样本,结果显示:相比于单次hUCMSCs注射组,多次hUCMSCs注射组能明显改善骨质丢失的情况。与单次hUCMSCs注射组相比,多次hUCMSCs注射组HE染色和甲苯胺蓝染色显示颅骨的骨丢失较轻且范围较小,TRAP染色显示破骨细胞活性较低。小鼠颅骨骨膜中的TNF-α表达呈现出hUCMSCs的剂量依赖性降低。结论:hUCMSCs在CoPs诱导的小鼠颅骨溶解动物模型中发挥保护作用,而调节小鼠颅骨骨膜组织的炎症反应水平可能是hUCMSCs影响磨损微粒诱导的无菌性松动的一种调节机制。     

人工全髋关节置换后33例翻修原因解析

背景：人工髋关节置换后出现感染、假体松动、假体磨损断裂、骨溶解、复发性脱位等并发症的数量逐渐增多,最终导致行全髋关节翻修。 目的：分析人工全髋关节置换后进行翻修的原因和治疗措施。 方法：对33例患者全髋关节翻修的原因、假体选择、骨缺损处理及康复进行分析研究。其中髋臼有21例行普通金属杯加内衬置换、8例行大头臼杯置换、4例行聚乙烯臼杯置换。股骨柄有15例行普通柄（11例应用骨水泥固定）置换、18例行加长柄置换（9例应用骨水泥、6例为组合型柄）。 结果与结论：33例患者全部获得随访,翻修后随访24-60个月,平均随访36.5个月;翻修后伤口愈合良好,假体固定可靠,未再次出现感染脱位患者;髋关节功能均得到了较大的改善,Harris评分：翻修前平均为37.1分,翻修后平均为91.3分。中短期临床随访结果示,若翻修手术指征正确,骨缺损处理得当,翻修假体选择正确,行一期人工全髋关节翻修可以获得良好的临床疗效。     

消除人工髋关节应力遮挡等问题的理论分析与研究

背景：为减小应力遮挡采用了很多的方案，经过几十年的试验与应用，至今未能取得重大的进展。起源于股骨和金属柄结合为固定柄的根源，引发了骨质吸收等严重问题，这种应力遮挡效应产生于骨的异常应力和异常应变的作用，且受诸多因素的制约，找不到有效而适用的方法解决。 目的：为使金属柄不传导应力是消除应力遮挡的关键，选择初级多孔层方案作为研究的对象，彻底改造它的外貌和内在的质量，采取有效的措施制造高级多孔层，是消除应力遮挡的基础，能解决初级多孔层引发的隐患和部分劣势。 方法：采用相等直径的钴铬钼合金小球为制造高级多孔层结构件的方案，其结构件作用在股骨上使柄与骨分离，作用在领平面上由股骨距截骨面固定柄，这些结构件有能力消除人工髋关节上全部的应力遮挡。 结果与结论：高级多孔层是用相等直径（1.00-1.29 mm）的钴铬钼合金小球，在其表面镀以高性能的中间层合金，作有序紧密排列，经由活性扩散焊工艺连接而成。全部孔隙的孔径均为155-200μm，且均匀分布，供骨单元长入。实施金属材料合金化、合金表面陶瓷化，并控制磨损颗粒的大小和数量等办法能解决多孔层周围的骨溶解、金属溶解及其纯金属钴、铬微粒的毒性、癌变和白血病等问题。理论根据的规定是先除去柄刚度的作用，让骨柄分离成为消除应力遮挡的前提，让股骨距截骨面长入领平面上焊接的结构件孔隙中，能固定柄是消除应力遮挡的根本，这两者共同的作用可以达到消除股骨中应力遮挡的目的，而髋臼窝上的应力遮挡较容易消除。     

^125I放射性粒子植入联合椎体成形椎弓根钉棒内固定治疗胸腰椎转移瘤

背景：目前椎体成形和椎管减压内固定是治疗脊柱转移瘤的常用方法,^125 I 放射性粒子植入控制肿瘤的临床疗效也已得到研究证实,但是关于上述3种方法的综合治疗的临床研究很少。目的：比较采用^125 I 放射性粒子植入联合椎体成形椎弓根钛合金钉棒内固定与单纯椎体成形椎弓根钛合金钉棒内固定治疗胸腰椎转移瘤在疼痛控制、内固定后体力恢复状态及脊髓神经功能改善等方面的差异,评价125 I放射性粒子植入联合治疗方案的临床应用价值。方法：选择2009年10月至2013年3月于深圳市人民医院脊柱外科手术治疗的胸腰椎转移瘤患者,以脊柱后路胸腰椎钛合金钉棒置入内固定系统,并根据其是否联合^125 I放射性粒子植入分为实验组与对照组。观察记录各组钛合金钉棒内固定前及内固定后2周,内固定后1,6,12个月的脊髓神经功能改善情况。结果与结论：所有患者均获得随访,随访时间7-29个月,平均15.8个月,脊柱后路胸腰椎钛合金钉棒内固定系统未发生松动断裂,骨水泥分布良好,实验组患者未发现放射性粒子移位及放射性脊髓损伤,随访期内未见病椎局部肿瘤明显复发扩散。实验组患者内固定后目测类比疼痛评分、行为状态评分较对照组明显改善（P〈0.05）,而2组患者内固定后Frankel分级均分别较内固定前明显改善,2组间神经功能改善情况差异无显著性意义（P 〉0.05）。说明125I放射性粒子植入联合椎体成形椎弓根钛合金钉棒内固定治疗脊柱转移瘤缓解癌性疼痛的效果更为明显。     

髋假体置入后假体周围松动骨质的病理学变化

背景：磨损颗粒是导致假体周围骨质溶解的重要潜在性因素之一,但引起假体周围骨溶解的原因及其发展过程尚未完全清楚。目的：复习人工关节置换后翻修病例的病理切片,分析病理检查在人工关节置换后感染诊断中的价值。方法：由第一作者检索1990/2008 PubMed数据及万方数据库有关髋假体置入后假体周围松动以及假体松动周围骨质的病理学变化方面的文献。结果与结论：人工假体与骨空隙的产生导致界膜充填,磨损微粒刺激界膜释放炎性细胞因子导致骨溶解而出现假体松动,如果尽可能地减少活动中产生的磨损碎屑可减少炎性递质的释放;减少由充填性界膜向溶骨性界膜的转变,就可从生物学角度降低人工髋关节置换后假体松动的发生率。     

红霉素、阿仑膦酸钠抑制磨损颗粒对小鼠巨噬细胞分泌白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的影响

背景：阿仑膦酸钠的抗骨吸收作用是通过其对破骨细胞的抑制作用完成的,近年亦有报道证实红霉素有直接抑制破骨细胞的作用。目的：观察阿仑膦酸钠和红霉素抑制钛颗粒刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素1,6的作用。方法：分离、培养小鼠腹腔巨噬细胞,14h后分为红霉素组及阿仑膦酸钠组,每组分为6个亚组。红霉素组：A组：仅为巨噬细胞;B组：巨噬细胞＋钛颗粒;C组：巨噬细胞＋钛颗粒＋红霉素1μg/L;D组：巨噬细胞＋钛颗粒＋红霉素10μg/L;E组：巨噬细胞＋钛颗粒＋红霉素100μg/L;F组：巨噬细胞＋钛颗粒＋红霉素1000μg/L。阿仑膦酸钠组分组及剂量同红霉素组。培养24h后,用酶联免疫法检测细胞培养上清液中白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度。结果与结论：B组白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度明显高于其他组（P〈0.05）,F组白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度明显低于C组（P〈0.05）。同剂量阿仑膦酸钠和红霉素组间差异无显著性意义（P〉0.05）。提示钛颗粒可以刺激巨噬细胞分泌大量的白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α,红霉素、阿仑膦酸钠能够呈剂量依赖型地有效抑制钛颗粒诱导的巨噬细胞分泌白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α。     

乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡的干预作用

背景：前期研究发现,乌司他丁对RANKL诱导RAW264.7细胞活化为成熟破骨细胞具有一定的抑制作用,并可降低基质金属蛋白酶9的表达,但其对聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥促成骨细胞凋亡效应是否有干预作用尚不清楚。 目的：探讨乌司他丁对骨水泥颗粒诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡及Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA表达的影响。 方法：取第六七代生长状态良好的MC3T3-E1鼠前成骨细胞,分4组培养,骨水泥组加入1 g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液;高、低剂量乌司他丁组在加入1g/L 的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥悬液后,再分别加入5000,500 U/mL的乌司他丁;设置单独培养的细胞为空白对照。MTT法检测细胞增殖活性,茜素红染色检测细胞矿化程度,流式细胞仪检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素、基质金属蛋白酶2 mRNA的表达。 结果与结论：与空白对照组比较,骨水泥抑制了MC3T3-E1细胞增殖活性（P＜0.05）,促进了细胞凋亡（P＜0.05）,在加入不同浓度乌司他丁后,细胞增殖活性逐渐增强（P＜0.05）,凋亡率降低（P＜0.05）,且呈剂量时间依赖关系;骨水泥降低了细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素表达（P ＜0.05）,升高了基质金属蛋白酶2表达（P ＜0.05）,在加入5000 U/mL乌司他丁后,细胞基质金属蛋白酶2表达降低,Ⅰ型胶原、骨钙素表达升高（P＜0.05）。骨水泥组无矿化结节,其他组均有矿化结节形成。结果表明乌司他丁对骨水泥诱导MC3T3-E1鼠前成骨细胞凋亡具有一定的抑制作用,可促进成骨细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素的生成,并降低基质金属蛋白酶2的表达水平。     

人工全髋关节置换患者关节滑液中MCP-1和IL-8的表达水平及其与骨质溶解、关节磨损关系的探讨

目的研究人工全髋关节置换患者关节滑液中白介素8（IL-8）和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达水平,探讨其与人工关节周围骨质溶解及关节磨损之间的相关性。方法酶联免疫吸附法（ELISA）检测15例陶瓷-陶瓷、16例金属-金属材质人工关节置换组和10例对照组中MCP-1和IL-8的表达水平,扫描电子显微镜和x-射线分析人工关节周围骨质溶解及磨损微粒的水平。结果与对照组相比,陶瓷-陶瓷及金属-金属人工关节置换患者关节滑液中大量表达MCP-1及IL-8,且金属-金属人工关节置换组关节滑液中MCP-1的水平明显高于陶瓷-陶瓷组;金属-金属组中有8例患者发生了骨质溶解,陶瓷-陶瓷组中未检测到骨质溶解;MCP-1与骨质溶解及关节磨损微粒之间相关性较差,而IL-8与骨质溶解及关节磨损微粒的产生存在一定的相关性。结论人工关节存在促使大量MCP-1及IL-8表达,且IL-8大量产生能引起金属-金属人工关节周围发生骨质溶解及产生磨损微粒,表明有可能通过触发炎症反应引起骨质溶解诱导的人工关节松动,提示具有作为人工关节松动标记物的潜力,同时为人工关节无菌性松动防治提供新的思路。