核因子-κB介导脂多糖诱导急性肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的探讨核因子(NF)-κB在脂多糖诱导大鼠急性肺损伤过程中对肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法采用腹腔注射脂多糖(LPS)致大鼠脓毒症急性肺损伤模型。取健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180~220g,采用随机数字表法,分为对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(L组,n=30)、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)溶剂对照组(P组,n=6),PDTC治疗组(LP组,n=30)。各组分别给予腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)(C和P组)或LPS(L和LP组);P组和LP组在PBS或LPS注射前15min,给予腹腔注射PDTC 100mg/kg。C组和P组腹腔注射PBS后的16h,L组和LP组注射LPS后的16h后各取6只大鼠检测其肺湿/干重比(W/D);C组和P组腹腔注射PBS后的16h,L组和LP组注射LPS后的4h(T1)、8h(T2)、16h(T3)、24h(T4)和48h(T5)时各取6只大鼠经处理后采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(MPO)和白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot法检测肺组织HMGB1的表达水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织的病理变化。结果与C组比较,L组肺组织W/D、BALF中MPO和IL-6水平明显升高(P0.01),病理切片显示严重肺组织损伤,T2~T4时肺组织中HMGB1的表达水平明显升高(P0.05);使用PDTC治疗后,与L组比较,肺组织W/D、BALF中MPO和IL-6水平明显降低(P0.01),病理示肺损伤程度明显减轻;T2~T4时肺组织HMGB1表达水平明显降低(P0.05)。结论在脂多糖诱导急性肺损伤中,被激活的NF-κB通过介导晚期炎症因子HMGB1的表达来参与急性肺损伤的发生与发展过程。     

富氢液对脂多糖致小鼠急性肺损伤的影响

目的 评价富氢液对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤的影响.方法 成年雄性C57BL/6小鼠32只,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=8):对照组(C组)、富氢液组(H2组)、急性肺损伤组(ALI组)和急性肺损伤+富氢液组(ALI+ H2组).ALI组和ALI+ H2组分别雾化吸入LPS25 μg(溶于PBS中)制备ALI模型,C组和H2组分别雾化吸入无菌PBS 50μl.H2组和ALI+H2组雾化吸入PBS或LPS后1和12 h时腹腔注射0.6 mmol/L富氢液5 ml/kg.LPS或PBS处理后24 h时,机械通气15 min,行动脉血气分析,计算氧合指数.然后收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度,计数中性粒细胞(PMN).采用ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和高迁移率族蛋白1(HMGB1)的浓度.然后处死小鼠,取肺组织,行病理学损伤评分,测定湿重/干重(W/D)比、髓过氧化物酶(MPO)和caspase-3的活性,计算细胞凋亡指数(AI).结果 与C组比较,H2组氧合指数、BALF总蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度和PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3的活性以及AI差异均无统计学意义(P＞0.05),ALI组和ALI+H2组氧合指数降低,BALF蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度、PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3 的活性以及AI均升高(P＜0.05);与ALI组比较,ALI+ H2组氧合指数升高,BALF总蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度、PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3的活性以及AI均降低(P＜0.05).结论 富氢液可减轻LPS致小鼠急性肺损伤,可能与其抗炎和抗凋亡作用有关.     

高迁移率族蛋白1参与脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征时中性粒细胞的凋亡

目的 探究脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)时高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)参与中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMN)凋亡延迟的相关机制及正丁酸钠(sodium butyrate,SB)的干预效果. 方法 采用随机数字表法将90只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(NS组,6只)、内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致伤组(LPS组,42只)、HMGB1抑制剂SB干预组(SB组,42只),LPS组、SB组又分为7个时相点(LPS致伤后0.5、1、2、6、12、24、48 h),每个时相点6只动物.LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg;SB组,腹腔注射LPS 5 mg/kg后0.5 h静脉注射SB,每次剂量500 mg/kg;NS组,腹腔注射生理盐水1 ml.LPS组、SB组于LPS注射后各时点,颈静脉取血检查PMN,取血后左肺灌洗收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测;于LPS注射12h时点(NS组大鼠留取颈静脉血、收集BALF、取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测),3组大鼠收集左肺BALF后,取右肺下叶检测肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D),取右肺上叶进行病理组织学检查;于24、48 h时点,LPS组、SB组取右肺下叶检测肺组织W/D、取右肺上叶进行病理组织学检查. 结果 与NS组比较,LPS组肺组织中HMGB1 mRNA表达量明显增高,24 h达最大值,差异有统计学意义(P＜0.05);SB组的HMGB1 mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS组BALF中凋亡早期PMN表达量与NS组类似,但凋亡晚期PMN变化则不同,LPS组外周血中凋亡晚期PMN细胞高于NS组(P＜0.05),LPS组BALF中凋亡晚期PMN细胞均低于NS组(P＜0.05).LPS 12 h组BALF的PMN百分比明显高于NS组[(49.1±6.8)、(2.7±0.5)],差异有统计学意义(P＜0.01).LPS组肺组织光镜下可见肺泡腔水肿,支气管壁中发现PMN浸润,肺泡壁毛细血管扩充血.LPS24 h组肺组织的W/D明显高于NS组[(6.71±0.12)、(4.18±0.26)],差异有统计学意义(P＜0.05).SB干预组的HMGB1 mRNA表达量减少,早期凋亡率类似,SB组的BALF晚期凋亡率高于同时点LPS组的BALF,SB外周血组晚期凋亡低于同时点LPS外周血组,差异有统计学意义(P＜0.05).SB组BALF的PMN百分比、肺组织病理损伤程度、W/D均低于LPS组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在大鼠ARDS中,HMGB1 mRNA表达较晚,但持续时间长,SB对HMGB1有潜在的治疗作用,HMGB1可能参与PMN凋亡机制的调节.     

糖皮质激素受体对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制

目的 探讨糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在内毒素急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用及机制.方法 SD雄性大鼠84只,随机数字表法分为5组:Control组,仅注射生理盐水;脂多糖(lipopoIysaccharide,LPS)组,经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;地塞米松(dexamethasone,DEX)+LPS组,注射LPS前30 min腹腔注射Dex 6 mg/kg;米非司酮(RU486)组,皮下注射GR拮抗剂RU486 20 mg/kg,90 min后经尾静脉注射生理盐水;RU486+Dex+LPS组,按照上述顺序分别注射RU486、Dex和LPS.Control组和RU486组6 h后,其余3组分别在1、3、6 h各时间点处死.检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(brobehoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度,肺水系数(1ung index,LI),肺组织的病理变化,凋亡指数(apoptosis index,AI)以及肺组织中p38MAPK的活化状态及表达.结果 与Control组BALF中蛋白浓度(49±5)g/L、LI(2.36±0.14)、AI(12.0±1.7)%相比,LPS组分别为(77±9)g/L、5.93±0.44、(43.9±3.1)%(P＜0.05),HE染色显示肺组织炎症和损伤严重.与LPS组相比,Dex+LPS组分别为(54±4)g/L、3.77±0.48、(32.7±2.7)%(P＜0.05),且肺组织损伤程度减轻,应用GR抑制剂RU486后,Dex的肺保护作用消失.另外,LPS组肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达与Control组相比显著升高(P＜0.05);与LPS相比,Dex+LPS组p-p38MAPK表达下调(P＜0.05),而RU486+Dex+LPS组的表达上调(P＞0.05).结论 糖皮质激素受体在内毒素导致的急性肺损伤中发挥着重要的作用.激素活化的GR可能通过抑制p38MAPK的活化/磷酸化抑制肺组织细胞的凋亡,缓解肺损伤的程度.     

不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 研究不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4(6% HES 130/0.4)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 72只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为6组(n=12),对照组(C组)经尾静脉注射生理盐水30 ml/kg;肺损伤组(L组)经尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg;不同剂量6%HES130/0.4组分别经尾静脉注射6%HES 130/0.4 7.5 ml/kg(H1组)、15 ml/kg(H2组)和30 ml/kg(H3组),1 h后再经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;H4组经尾静脉注射6%HES 130/0.4 30 ml/kg.各组给药速率均为0.2ml/min.注射LPS后4 h行动脉血气分析,气管插管.每组取6只大鼠,测定肺组织微血管通透性指数(PMPI);每组取6只大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肺组织病理学.结果 与L组比较,H2组血清TNF-α、IL-1β、MDA浓度和肺组织MPO活性降低,血清IL-10浓度和SOD活性升高,H1组IL-1β浓度降低,H1组、H2组和H3组PMPI、BALF蛋白浓度和W/D均降低(P＜0.05);与H2组比较,H1组和H3组血清TNF-α、MDA浓度和肺组织MPO活性升高,血清SOD活性、IL-10浓度降低,H3组血清IL-1β浓度升高(P＜0.05).H1组、H2组和H3组较L组肺组织损伤较轻,其中H2组损伤最轻.结论 15 ml/kg6%HES 130/0.4预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制炎性因子释放、减少肺内中性粒细胞聚集和氧自由基生成、改善肺微血管通透性有关.     

蜕皮甾酮对急性肺损伤大鼠肺组织中Toll样受体4及肺表面活性蛋白A表达的影响

目的：观察蜕皮甾酮（EDS）对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织中TNF-α、肺表面活性蛋白A（SP-A）、Toll样受体4（TLR4）表达的影响,并探讨其机制.方法：将40只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、LPS组、EDS低（20 mg/kg）、中（30 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量治疗组（n=8）.腹腔注射LPS（10 mg/kg）诱导大鼠ALI模型,3个EDS治疗组于建模1 h后予不同剂量的EDS腹腔注射,其余两组注射等体积生理盐水.24 h后,取肺组织,用光学显微镜观察各组肺组织病理学改变;用Western blot测定肺表面活性蛋白A（SP-A）、Toll样受体4（TLR4）的表达;用ELISA测定各组肺组织中TNF-α含量,RT-PCR检测TNF-α mRNA表达水平.结果：肺组织病理学观察显示：LPS组可见肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,而EDS治疗组肺损伤明显改善,效果随EDS剂量的增加而增加.与正常对照组比较,LPS组肺组织的SP-A蛋白表达明显降低（P〈0.05）,而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显增加 （P〈0.05）.与LPS组相比较,不同剂量EDS治疗组肺组织SP-A蛋白表达均增加（P〈0.05）,而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显降低（P〈0.05）,其中EDS高剂量组比中、低剂量组效果明显 （P〈0.05）.结论：蜕皮甾酮对LPS诱导大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制TLR4通路来降低肺组织中TNF-α炎性因子的表达,并促进抗炎物质SP-A释放有关.     

不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响

目的评价不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响。方法健康清洁级SD雄性大鼠48只,6～8周龄,采用随机数字表法分为四组:气管切开保留自主呼吸的假手术组(A组)、机械通气模型组(B组)、瘦素10μg/kg组(C组)和瘦素50μg/kg组(D组),每组12只。采用10%水合氯醛3.5 ml/kg麻醉大鼠,疼痛反射消失后C组腹腔注射瘦素10μg/kg,D组腹腔注射瘦素50μg/kg,A、B组腹腔注射等容量生理盐水,注射后即刻进行气管切开,插管机械通气。A组气管插管后保留自主呼吸,B、C、D组机械通气建立VILI模型,参数设置:V_T 20 ml/kg,RR 80次/分,I∶E 1∶1,FiO_2 21%,PEEP 0 mmHg,通气时间4 h。分别于基础状态、通气结束时抽取股动脉血进行血气分析。通气结束后放血处死大鼠,在4℃下取肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF),光镜下进行中性粒细胞计数,采用ELISA法测定TNF-α、IL-6、IL-1β浓度;取肺组织称重,计算肺湿干重比(W/D);观察肺组织病理改变并进行病理评分;采用Western blot检测肺组织研磨液中NF-κB p65含量。结果与A组比较,B、C、D组W/D、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织NF-κB p65含量明显升高(P0.01)。与B组比较,C、D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。与C组比较,D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。结论瘦素可降低大鼠机械通气肺损伤中炎性因子的表达水平,减轻肺损伤,50μg/kg较10μg/kg作用明显。     

硫喷妥钠对内毒素诱导小鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的研究硫喷妥钠对内毒素（LPS）诱导小鼠肺组织NF-κB的表达的影响。方法雄性昆明小鼠24只，随机分为4组（n=6）：对照组（C组）、LPS组（L组）、硫喷妥钠处理组（L＋T组）、单纯硫喷妥钠处理组（T组）。C组腹腔注射生理盐水1ml／ks；L组腹腔注射LPS5mg／kg；L＋T组腹腔注射LPS5mg／kg 20min时再注射1％硫喷妥钠注射液60mg/kg；T组单纯腹腔注射1％硫喷妥钠注射液60mg／kg。在注射LPS后3h放血处死小鼠，立即开胸取肺。免疫蛋白印迹法测定肺组织NF-κB p65的表达；酶联免疫吸附法测定肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量。结果与C组相比，L、L＋T组肺组织NF-κB p65表达增加，L、L＋T、T组肺组织，TNF-α、IL-1β含量上升（P〈0．05）；与L组相比，L＋T、T组肺组织NF-κB p65表达降低，肺组织TNF-α，IL-1β含量降低（P〈0．05）。结论硫喷妥钠通过下调小鼠LPS诱导的肺组织NF．KB065表达，降低了TNF-α及IL-1β的释放。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对新生大鼠内毒素性急性肺损伤时NF-κB活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对新生大鼠内毒索性急性肺损伤时NF-kB活性的影响.方法 健康新生Wistar大鼠30只,雌雄不拘,日龄7 d,体重18～21 g,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素3 mg/kg的方法制备急性肺损伤模型,P组腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.5 mg/kg,30 min后制备模型,C组腹腔注射等容量生理盐水.于腹腔注射内毒素4 h时处死大鼠取肺,称重后计算肺湿,干重比,电镜下观察肺组织病理学结果,采用免疫组织化学法检测NF-kB p65的表达水平,采用酶联免疫吸附法测定TNF-α、IL-1 β及IL-10的含量.结果 与C组比较,ALI 组和P组肺湿/干重比、TNF-α、IL-1β、IL-10含量及NF-KB p65表达水平升高(P＜0.05);与ALI 组比较,P组肺湿/干重比、TNF-α、IL-1β、IL-10含量及NF-kBp65表达水平降低(P＜0.05).病理学结果显示:P组肺组织损伤程度较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过抑制肺组织NF-kB活化,降低炎性反应,减轻新生大鼠内毒素性急性肺损伤.     

热休克蛋白抑制剂格尔德霉素衍生物在机械通气肺损伤中的作用研究

目的探讨热休克蛋白（heat shock protein，HSP）90抑制剂格尔德霉素衍生物（17-dimethvlaminoethvlamino-17-demethoxygeldanamycin，17-DMAG）对机械通气肺损伤的保护作用及其作用机制。方法28只7周-9周的清洁级ICR雄性小鼠，按完全随机分组方法随机分为4组（每组7只）：对照组（CON组）、机械通气组（VEN组）、17-DMAG组和17-DMAG＋机械通气组（17-DMAG＋VEN组）。机械通气4h后或CON组与17-DMAG组麻醉插管后检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中蛋白浓度、细胞数量变化以及肺组织湿／干重比（wet-to-dry weight ratio，W／D），观察肺组织病理改变，并用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测肺组织白细胞介素（interleukin,IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）以及高迁移率族蛋白1（high mobility groupbox1，HMGB1）的含量。结果BALF中蛋白浓度和细胞数量：VEN组分别为（0．29±0．05）g／L和（2．84±0．55）个／ml，与CON组比较明显升高（P〈0．01）；17-DMAG＋VEN组分别为（0．22±0．03）g／L和（1．99±0．44）个／ml，与VEN组比较显著下降（P〈0．01）。VEN组肺组织W／D（5．14±0．19）与CON组（4．65±0．15）比较，差异有统计学意义（P〈0．01），17-DMAG＋VEN组肺组织W／D（4．79±0．14）与VEN组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。17-DMAG预处理能显著减轻通气诱导的肺组织病理损伤。机械通气4h可诱导肺组织中IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白表达显著升高，17-DMAG预处理可显著减轻机械通气诱导的HMGB1表达：17-DMAG＋VEN组（15．4±3．0）ms／g与VEN组（18．9±2．5）mg／s比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论17-DMAG可能通过抑制炎症因子HMGB1的蛋白表达，减轻肺水肿，而在机械通气肺损伤中发挥保护作用。     

利多卡因后处理对大鼠肺缺血／再灌注损伤的影响

目的研究利多卡因后处理对大鼠肺缺血／再灌注损伤（lung ischemia／reperfusion injury,LI／RI）的作用并探讨其可能的机制。方法80只SD大鼠按随机数字表法分为4组,每组20只：假手术组（Sham组）、缺血,再灌注组[（ischemia／reperfusion,VR）组]、单纯缺血后处理组[（ischemic preconditioning,IPC）组]、利多卡因后处理组（Lidocaine组）。采用夹闭左肺门45min、然后复灌2h的方法建立在体肺棵模型。Lidocaine组再灌注即刻开始以4mg·kg-1·h-1泵入利多卡因,持续再灌注2h。观察肺组织病理学改变,检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中肺表面活性蛋白A（pulmonary surfatcantassociated proteinA,SP-A）、肺组织SP-AmRNA和SP-A的浓度。结果肺组织病理学观察发现Lidocaine组的肺水肿和白细胞渗出较I／R组明显减轻。再灌注后Lidocaine组与IPC组BALF中SP-A的浓度分别为（8．68±0．41）和（6．56±0．38）,明显高于I／R组（4．42±0．21）,差异有统计学意义（P〈0．05）;肺组织SP-AmRNA的浓度分别为（1．49±0．12）和（1．26±0．10）,明显高于I／R组（1．05扣．11）,差异有统计学意义（P〈0．05）;肺组织SP-A的浓度分别为（72．5±2．9）和（41．3±3．1）,明显高于I／R组（26．8±2．3）,差异有统计学意义（P〈0．05）;Lidocaine组与IPC组比较,BALF中SP-A、肺组织SP-AmRNA和SP-A的浓度明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论利多卡因后处理可使大鼠I／R肺中SP-A的表达上调、分泌增加,可减轻肺水肿,且效果优于单纯IPC,对在体大鼠LI／RI有保护作用。     

脐带间充质干细胞对创伤后早期急性肺损伤作用的研究

目的：探讨脐带间充质干细胞（UCMSC）对创伤后急性肺损伤（ALI）早期的作用.方法：采用撞击后静脉注射脂多糖的二次打击方法复制创伤后ALI家兔模型.24只家兔随机分为正常对照组（正常饲养）、ALI组（复制ALI模型）和UCMSC组（伤前30 min静脉注射UCMSC 1×106个）,每组8只.各组动物于伤后0、1.5、3和6 h测定血浆TNF-α含量;伤后6 h测定PaO2,支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、补体C3a和C5a、白蛋白含量及中性粒细胞计数,肺湿/干重比值（W/D）,免疫组织化学法观察肺组织中TNF-α蛋白的表达,光镜下观察肺组织病理学变化.结果：与正常对照组比较,ALI组PaO2下降,其余各检测指标均明显升高,镜下见肺泡壁破坏,肺泡腔渗出和出血,肺组织TNF-α表达增强.伤前给予UCMSC能提高ALI动物的PaO2,不同程度降低外周血TNF-α及BALF中TNF-α[（0.72±0.70）μg/L比（1.82±0.60）μg/L]、C3a[（0.28±0.07）μg/L比（0.45±0.03）μg/L]、C5a[（0.08±0.01）μg/L比（0.19±0.03）μg/L]、白蛋白含量[（69.0±9.7）mg/L比（102.0±14.9）mg/L]和中性粒细胞计数[（229.0±21.4）×106/L比（298.0±36.8）×106/L],降低肺W/D,抑制肺组织TNF-α蛋白表达,减轻肺泡的损伤程度.结论：UCMSC能减少ALI时组织及血浆TNF-α的含量,减轻肺泡损伤程度,在一定程度上对早期创伤后急性肺损伤起保护作用.     

内毒素性肺损伤外周血中性粒细胞CD11b表达的意义

目的：探讨内毒素血症大鼠外周血中性粒细胞（PMN）表面CD11b表达与内毒素性肺损伤的关系。方法：大肠杆菌E-Coli O111B4 4mg／kg尾静脉注射制备大鼠内毒素血症动物模型。112只大鼠随机分为对照组（静脉注射等量生理盐水）及内毒素注射后1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组,每组16只动物。在相应时间点放血处死动物,分别取股静脉血、肺组织及进行支气管肺泡灌洗,测定肺组织湿／干重（W／D）比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性和支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白定量等肺损伤指标。流式细胞仪测定外周血PMN表面CD11b表达。另取16只大鼠,内毒素注射后2h时测定外周血PMN表面CD11b表达,24h时放血处死,测定上述指标。结果：①大鼠内毒素血症可以造成明显的急性肺损伤,表现为肺组织W／D比值、MPO活性和BALF总蛋白明显增高,分别在2h、8h和2h显著高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,峰值分别出现在内毒素注射后12h、24h和12h;②大鼠内毒素性肺损伤时,外周血PMN表面CD11b表达水平在早期（1h）明显升高（与对照组比较,P〈O．05）,在2h达到峰值,之后逐渐降低;③外周血CD11b表达峰值明显早于肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白等肺损伤指标的峰值出现时间;④同一动物2h时外周血PMN表面CD11b的表达水平与其24h时肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白含量呈显著正相关（r分别为0．78、0．77和0．73,P〈0．05）。结论：内毒素性肺损伤中,外周血CD11b表达升高可能有助于内毒素性肺损伤的早期诊断,并可能预示以后的肺损伤程度。     

气管滴注法与雾化吸入法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较

目的：比较脂多糖（LPS）气管滴注法与雾化吸入法建立的小鼠急性肺损伤（ALI）模型,确立更为有效的小鼠肺损伤建模方法。方法20只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水（NS）气管滴注组、NS雾化吸入组、LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组。分别采用气管滴注法和雾化吸入法建立肺损伤模型,5 h后进行小鼠肺湿重/干重（W/D）比值测定、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量测定、细胞分类计数及炎性细胞因子检测。结果与对照组相比,LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组小鼠肺W/D比值,BALF中总蛋白浓度,TNF-α、IL-6、MCP-1和IL-1β等多项炎性细胞因子以及中性粒细胞数目均显著升高（P均＜0.05）;NS气管滴注组较NS雾化吸入组炎症背景高;LPS气管滴注组较LPS雾化吸入组各项肺部炎症指标组内差异大。结论雾化吸入方法对于建立小鼠ALI模型更有效。     

缺血后处理对鼠在体肺缺血-再灌注损伤炎症反应作用的实验研究

目的 探讨缺血后处理对大鼠在体肺缺血-再灌注损伤中炎症反应的影响。 方法 将40只SD大鼠随机分成假手术组 （S组）、缺血-再灌注30 min组 （I/R-30组）、缺血-再灌注120 min组 （I/R-120组）、缺血后处理30 min组 （IPO-30） 和缺血后处理120 min组 （IPO-120）,每组8只。S组完成左侧开胸手术操作,肺门过阻断带,但肺门未阻断;I/R组拉紧肺门阻断带阻断左肺门,造成左肺缺血1 h,然后松开阻断带再灌注30 min和120 min （即I/R-30组和I/R-120组）;IPO组在1 h的缺血之后再灌注开始前先进行10 s的缺血及10 s的再灌注（共3个循环,持续1 min）,然后是与I/R组同样的30 min和120 min的长时间持续灌注（即IPO-30组和IPO-120组）。测定各组肺组织中白细胞介素10（IL-10） 及血浆可溶性细胞间粘附分子1 （sICAM-1） 的水平。观察肺组织的病理形态变化并进行弥漫性肺泡损伤（DAD） 评分。 结果 I/R-30组和I/R-120组血浆中sICAM-1水平比S组显著升高［（2.140±0.250） μg/L vs. （0.944±0.188） μg/L,P=0.003; （2.191±0.230） μg/L vs. （0.944±0.188） μg/L,P=0.003］,肺组织中IL-10水平亦明显高于S组［（15.922±0.606） pg/mg pro vs. （7.261±0.877） pg/mg pro,P=0.037; （17.421±1.232） pg/mg pro vs. （7.261±0.877） pg/mg pro,P=0.042］,组织损伤明显。缺血后处理干预后,IPO-30组和IPO-120组血浆sICAM-1水平与相应I/R组各时间点相比显著降低 ［（1.501±0.188） μg/L vs. （2.140±0.250） μg/L,P=0.038; （1.350±0.295） μg/L vs. （2.191±0.230） μg/L,P=0.005］,而IL-10水平显著升高［（20.950±1.673） pg/mg pro vs. （15.922±0.606） pg/mg pro,P=0.008; （25.334±1.173） pg/mg pro vs. （17.421±1.232） pg/mg pro,P=0.006］,DAD评分显著降低［6.8±1.4 vs. 11.5±1.9,P=0.007;7.5±1.6 vs. 13.2±1.7,P=0.005］,肺组织损伤较I/R组显著减轻。 结论 缺血后处理可能通过抑制炎症反应从而减轻肺缺血-再灌注损伤。     

抑制低氧诱导因子-1α表达对小鼠肠缺血／再灌注所致肺损伤的影响

目的探讨通过低氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1α,HIF—1α）抑制剂YC-1预先抑制该基因表达对肠缺血,再灌注（ischemia／reperfusion,I／R）致急性肺损伤的影响。方法6周～8周龄健康雄性C57BL／6小鼠36只,采用随机数字表法随机分为3组（每组12只）：假手术组（S组）、I／R组和I／R±YC—I预处理组（YC—I组）。YC-1组于术前10min腹腔注入YC-1（1mg／kg）,采用夹闭C57BL／6小鼠肠系膜前动脉45min后再灌注6h的方法造成肠YR损伤模型,取小鼠肺标本称重后计算肺湿干重比,苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后观察肺组织病理学改变,分光光度法测定髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性、酶联免疫吸附测定法检测肺组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素（interleukin,IL）-1β表达,反转录-PCR法检测HIF-1α、Toll样受体4（toll—likereceptor4,TLR4）mRNA的表达。结果与I／R组比较,预先抑制HIFqct表达使肺实质水肿及中性粒细胞浸润聚集减少,肺组织病理学损伤减轻,肺湿干重比显著降低（RnOI）,MPO活性下调[（1．88±0．82）u／g],TNF-α[（187±20）ng／L）]、IL一1β[（536±54）ng／L）]、HIF-1α、TLR4mRNA的表达水平下降（P〈0．05）。结论YC-1预处理可使肺组织TLR4mRNA表达下调,抑制肠I／R肺组织中促炎细胞因子的释放,明显减轻小鼠肠I／R后急性肺损伤。     

sTREM-1在内毒素诱导急性肺损伤早期的作用及意义

目的观察sTREM-1在内毒素诱导急性肺损伤早期的作用及意义。方法建立小鼠内毒素肺损伤的模型,酶联免疫吸附法检测肺组织以及血浆中sTREM-1、抗炎因子IL-10以及其他促炎因子IL-1β、IL-6。结果 sTREM-1具有与抗炎因子IL-10相同的动力学改变（r=0.99,P〈0.01）,且血浆中IL-1β/sTREM-1、IL-6/sTREM-1分别与组织中相应的比值正相关（r〉0.90,P〈0.01;r〉0.80,P〈0.01）,血浆中IL-1β/sTREM-1和IL-6/sTREM-1之间以及组织中相应的比值之间均呈正相关（r=0.80,P〈0.01;r=0.80,P〈0.01）。结论 sTREM-1作为抗炎因子在LPS诱导的ALI过程中发挥保护肺组织的作用,而且血浆内sTREM-1与其他促炎因子形成的促炎/抗炎比值的检测可用于肺组织内炎症反应状态的评价。