退变兔髓核细胞和正常髓核细胞生物学特性的比较

目的探讨退变和正常兔髓核细胞的不同生物学特性。方法分离和培养原代兔椎间盘髓核细胞,体外传至第5代使其发生退变,细胞分成原代髓核细胞组(原代)和第5代退变细胞组(退变),用倒置显微镜和HE染色观察其形态学变化,用番红O染色观察糖胺聚糖的变化,用Ⅱ型胶原免疫组织化学观察Ⅱ型胶原的变化。结果原代兔髓核细胞在体外传至第5代后,细胞由类软骨细胞样的星形或多角形变为梭形或纤维长条形。番红O染色显示,退变组红色平均染色面积显著低于原代(P<0.05),免疫组织化学染色显示,退变组棕黄色平均染色面积显著低于原代(P<0.05)。结论原代兔髓核细胞在体外传到第5代时由类软骨细胞样变成纤维细胞样,且糖胺聚糖和Ⅱ型胶原的含量显著下降,为进一步构建体外髓核细胞退变模型提供了依据。     

退变兔髓核细胞和正常髓核细胞生物学特性的比较

目的探讨退变和正常兔髓核细胞的不同生物学特性。方法分离和培养原代兔椎间盘髓核细胞,体外传至第5代使其发生退变,细胞分成原代髓核细胞组（原代）和第5代退变细胞组（退变）,用倒置显微镜和HE染色观察其形态学变化,用番红O染色观察糖胺聚糖的变化,用Ⅱ型胶原免疫组织化学观察Ⅱ型胶原的变化。结果原代兔髓核细胞在体外传至第5代后,细胞由类软骨细胞样的星形或多角形变为梭形或纤维长条形。番红O染色显示,退变组红色平均染色面积显著低于原代（P〈0．05）,免疫组织化学染色显示,退变组棕黄色平均染色面积显著低于原代（P〈0．05）。结论原代兔髓核细胞在体外传到第5代时由类软骨细胞样变成纤维细胞样,且糖胺聚糖和Ⅱ型胶原的含量显著下降,为进一步构建体外髓核细胞退变模型提供了依据。     

构建兔髓核细胞诱导人骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的体外模型

背景:目前尚缺乏诱导骨髓间充质干细胞向髓核细胞转化的体外模型.目的:建立兔髓核细胞诱导人骨髓间充质干细胞分化为类髓核细胞的体外模型,为髓核细胞体内移植培养种子细胞提供实验依据.设计、时间及地点:对比观察,于2008-08/2009-03在青岛大学医学院附属医院骨科研究所和中心实验室完成.材料:8周龄新西兰大白兔2只用于兔髓核细胞的分离培养:人椎间盘髓核组织为术中取自16岁先天性脊柱侧弯患者T_(12)L_1、L_(1.2)椎间盘髓核组织,患者家属知情同意.人骨髓间充质干细胞株为广州赛业生物科技有限公司产品.方法:将人骨髓间充质干细胞和兔髓核细胞新式分层共培养(应用去掉挂臂、膜孔为0.4 μm的小室,膜底与贴壁细胞相接触,膜上下两种细胞比例为50%:50%)7 d,同时设立传统的分层培养(带有挂臂的小室)组、单独人骨髓间充质干细胞培养组和髓核细胞培养组为对照.主要观察指标:反转录-聚合酶链反应和Western blot检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达.结果:传统分层培养组及单独人骨髓间充质干细胞培养组不表达蛋白聚糖和Ⅱ型胶原.新式分层培养组、单独髓核细胞培养组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA表达均高于传统分层培养组、单独人骨髓间充质干细胞培养组(P＜0.01).新式分层培养组与单独髓核细胞培养组比较及传统分层培养组与单独人骨髓间充质干细胞培养组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:新式分层培养人骨髓间充质干细胞能较高的表达蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,接近椎间盘未退变人的髓核细胞表达水平,表明成功建立兔髓核细胞诱导人骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的体外模型,为椎间盘退变的细胞治疗奠定了基础.     

120例腰椎间盘突出症行椎间盘髓核摘除术后的护理

腰椎间盘突出症是骨科常见病,约占门诊腰腿痛病人的10％左右。一部分患者需行手术治疗。其目的是彻底解除神经压迫使病人完全康复。我院自1993～1994年对120例重症腰椎间盘突出症患者通过部分椎板切除,行椎间盘髓核摘除术,取得较好的疗效,现将护理体会报告如下。 1 临床资料 男78例,女42例,年龄23岁～65岁,平均40.5岁。病程最短3个月,最长22年,平均3.5年。所有病人有腰骶痛病史,通过手术治疗和精心的护理,使患者在10～40天痊愈出院,经随访,6个月可正常工作。 2 护理 2.1 术前护理 2.1.1 心理护理 由于病程较长,反复发作,该病患者求医心切,入院后要求尽快手术,以解除痛苦。手术后担心术后效果,并对术后长期卧床。生活不能自理而顾虑重重。因此术前应对患者安慰和鼓励,对患者提出的疑问及时给予解答。讲清手术的必要性及手术后的效果。使患者消除顾虑,增强战胜疾病的信心,积极主动配合治疗。 2.1.2 训练病人床上排尿,以免术后排尿困难。患者术前预先练习在床上排尿,术后一般均能自行排尿。     

抽吸法诱导兔椎间盘退变模型的病理及影像表现

背景:椎间盘退变的病理生理学机制至今尚未明了,需要构建更稳定和简便易得的椎间盘退变模型,观察其病理及影像表现,揭示其内在因素.目的:实验希望通过病理学及影像学枪测,来验证利用抽吸法构建兔椎间盘退变模型的可行性、以及造模的简便和稳定性.材料:10月龄健康新西兰大耳白兔42只,雌雄不拘,随机分为对照组和实验组各21只.速眠新由长春市军需大学兽医研究所提供.方法:设两组兔椎间盘高度指数均为100%.利用21G皮肤穿刺针分别在实验组白兔L4-5单节段刺入,抽吸髓核8～12mg造模;对照组不做处理.造模完毕,两组兔分别于4,12,20周各取7只进行指标检测.主要观察指标:利用椎间盘高度指数百分比、X射线片、MRI及Alcian blue组织染色观察退变椎间盘的变化.结果:4,12,20周实验组退变椎间盘高度指数百分比分别为(81.0±3.2)%,(75.0±2.5)%,(71.0±1.8)%,与对照组相比差异有显著性意义(P＜0.05).退变椎间盘T2加权像信号明显降低,Alcian blue组织染色显示退变椎间盘组织中聚集蛋白多糖含量明显降低.结论:抽吸法构建兔椎间盘退变模型简便可靠,其退变过程的病理及影像表现与人椎间盘退变过程的病理及影像表现十分相似.     

小切口椎板开窗髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症142例

目的:探讨腰椎间盘突出症(LDH)病变节段分布及小切口椎板开窗髓核摘除术的疗效。方法:对行小切口椎板开窗髓核摘除术治疗的142例腰椎间盘突出症患者的临床资料进行回顾性研究。结果:病变部位好发于L4～5和L5～S1,以单节段为主,其次是双节段,三节段和四节段很少见。L3～4、L4～5和L5～S1发病的平均年龄分别为(57.0±2.0)、(46.4±2.9)和(42.8±2.8)岁。中央型、后外侧型、突出型、脱出型、游离型和合并侧隐窝狭窄者好转率分别是70.0%、74.1%、69.1%、74.7%、77.9%和76.0%。结论:LDH大部分发生在低位腰椎,随着年龄的增长,有向高位发展的趋势。小切口椎板开窗髓核摘除术对各种类型的LDH疗效确切。     

基质金属蛋白酶1在不同程度退变腰椎间盘髓核与纤维环中的表达及意义

背景：基质金属蛋白酶在椎间盘退变中通过影响基质合成及降解导致基质成分紊乱及功能的改变。目的：观察基质金属蛋白酶1在人类退变腰椎间盘组织中的表达变化。方法：获取经手术治疗腰椎间盘突出症患者椎间盘标本30份,突出型、脱出型、游离型各10份,分离髓核与纤维环,设为实验组;腰椎损伤致椎体骨折切除椎间盘10份设为对照组。应用免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶1在椎间盘中髓核与纤维环细胞中的表达。结果与结论：①苏木精-伊红染色显示,对照组椎间盘标本纤维环仍保持着致密的板层结构,实验组椎间盘组织多呈纤维化样改变。②两组髓核细胞中基质金属蛋白酶1表达均高于纤维环细胞中的表达。③实验组突出型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于对照组（P〈0.01）,脱出型和游离型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于突出型（P〈0.01）。     

肝细胞生长因子对体外培养的人退变髓核细胞生物学活性影响

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对体外培养的人退变髓核细胞的生物学作用。方法收集人退变髓核组织标本,分离培养髓核细胞;免疫组化染色观察HGF受体在髓核细胞中表达;设立不同浓度HGF组(0ng/ml,5ng/ml,50ng/ml,500ng/ml),采用MTT法测细胞生长曲线,筛选HGF最佳作用浓度;选取第3代髓核细胞,实验分HGF组、HGF+胰岛素样生长因子(IGF)组、IGF组、对照组,RT-PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9mRNA表达;流式细胞术测定细胞增殖的周期。结果免疫组化显示髓核细胞表达HGF受体;MTT法提示不同浓度HGF对体外培养的人退变髓核细胞均有明显的促增殖作用,与对照组相比差异均有统计学意义,50ng/ml是实验中HGF的最佳作用浓度;HGF、HGF+IGF、IGF刺激后髓核细胞进入增殖期比例增加,同时促进髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9mRNA表达量增加,其中HGF+IGF效果更为显著。结论人退变髓核细胞存在HGF受体;HGF对体外培养的人退变的髓核细胞有促增殖作用,可以促进细胞外基质表达;HGF与IGF联合作用效果优于两者单独作用。     

人工髓核置换治疗腰椎间盘突出症初步报道

目的为提高疗效和减少手术创伤,采用小切口开窗减压人工髓核置换治疗腰椎间盘突出症并观察临床效果。方法41例患者采用小切口开窗减压髓核摘除后植入人工髓核治疗腰椎间盘突出症。结果41例患者术后下肢主诉症状完全缓解;6例患者仍有轻微的感觉异常;8例患者伸拇肌力以及4例患者腓骨长短肌肌力由Ⅳ级恢复至Ⅴ级,4例患者伸拇肌力由Ⅲ级恢复至Ⅳ级;6例患者残存轻微腰痛,1例患者出现中度腰痛,通过固定、服用消炎镇痛药后症状缓解。结论该手术操作简单,有切口小,手术时间短,不增加患者痛苦,疗效确切,后遗症少。     

成人退变腰椎间盘髓核组织中端粒酶表达及意义

目的探讨端粒酶在成人退变腰椎间盘髓核组织中的表达及与腰椎间盘髓核组织退变的关系。方法 8例腰椎间盘退行性病变患者(观察组),取手术摘除退变椎间盘髓核组织,8例腰椎骨折患者(对照组),取手术摘除非明显退变腰椎间盘髓核组织,采用免疫组织化学法检测2组端粒酶阳性表达情况,ELISA法检测端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量,Spearman相关法分析观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素的相关性。结果观察组髓核组织端粒酶阳性表达率(2.1%)低于对照组(4.3%)(P<0.05),髓核组织端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量吸光度值(7.62±0.98、59.45±6.32、3.31±0.38)低于对照组(15.52±0.94、69.33±5.86、4.64±0.29)(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维(r=0.488,P<0.001)、硫酸软骨素(r=0.673,P<0.001)表达均呈正相关。结论端粒酶参与了腰椎间盘髓核组织的退变过程,且端粒酶表达下调,Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素表达降低。     

兔腰椎前柱间盘切除后髓核组织对椎体间植骨融合的影响

背景：文献报道腰椎融合治疗腰椎疾病,有近20%不能达到有效的融合,出现治疗后疼痛、椎间隙塌陷、迟发性后凸畸形等一系列并发症。目的：进一步验证兔腰椎前柱结构切除后髓核组织对椎体间植骨融合效果。方法：健康成年日本大耳白兔36只,随机分为3组,每组12只。①剥离前纵韧带＋植骨组在L3间盘水平剥离前纵韧带,使其与 L3间盘前缘形成间隙,植入同种异体髂骨。②切除1/3间盘组织＋植骨组切除 L3前1/3间盘组织,终板间植入同种异体髂骨,缝合同剥离前纵韧带＋植骨组。③切除1/3间盘组织＋内固定组在切除1/3间盘组织＋植骨组的基础上行前柱的内固定。结果与结论：生物力学测定：剥离前纵韧带＋植骨组治疗后12周融合节段垂直拉伸力明显优于其他2组,能够承受更强的外界拉伸力。腰椎侧位X射线检查：切除1/3间盘组织＋植骨组12周植入骨块吸收,椎间隙无新生骨长入;切除1/3间盘组织＋内固定组12周椎间有连续骨桥形成;剥离前纵韧带＋植骨组12周完全骨性融合。组织学观察：切除1/3间盘组织＋植骨组12周未见骨组织生成;切除1/3间盘组织＋内固定组12周少量的成熟骨小梁及成骨细胞;剥离前纵韧带＋植骨组12周大量成熟骨小梁及骨细胞,重塑后的板状骨及哈弗氏结构。结果证实腰椎前柱的稳定性对椎体间植骨融合的效果有显著的影响,切除前1/3间盘组织后,游离的间盘、髓核物质影响了植入骨融合,有效地恢复前柱稳定性能够促进椎体间植骨融合,但仍不能达到有效融合。     

双能量CT虚拟去钙成像评估腰椎间盘退变

目的 分析双能量CT(DECT)虚拟去钙(VNCa)成像评估腰椎间盘退变(IDD)的可行性.方法 回顾性分析37例接受腰椎DECT和MR检查的慢性腰痛患者,根据改良Pfirrmann分级(mPG)标准对MRI所示椎间盘进行分级,评估IDD程度;对DECT数据行后处理,获得线性融合CT图像(相当于常规CT)和VNCa灰度...     

腰椎动态植入物内固定系统治疗腰椎间盘突出症的早期疗效

背景：目前,对保守治疗无效的椎间盘突出症常用方法是经后正中入路髓核摘除、神经根管减压和刚性融合内固定,由此引起相邻节段的退变和腰椎生理活动受限是临床所面对的问题;而非融合固定的传统后正中入路则由于存在切口大、剥离广、腰背肌的失神经支配等缺点。 目的：观察经Wiltse入路腰椎动态稳定植入物内固定系统治疗腰椎间盘突出症的疗效,并与传统后方入路的疗效进行比较。 方法：纳入因腰椎间盘突出症于2011年1月到2013年1月分别在武汉大学人民医院行腰椎间盘摘除＋腰椎动态稳定系统固定的患者46例,其中经传统后方入路25例,Wiltse入路21例。 结果与结论：46例患者均获得随访,随访时间7-31个月,平均（13.8±2.4）个月。Wilste入路组患者切口长度、内固定中失血和内固定后引流均低于传统后方入路组（P〈0.05）;但2组患者内固定后1周和6个月目测类比评分与手术时间比较差异无显著性意义（P〉0.05）。X射线显示所有患者内固定物位置良好,无松动或断裂。提示Wiltse入路腰椎动态植入物内固定系统治疗腰椎间盘突出的早期疗效与传统后方入路接近。     

髓核细胞移植抑制椎间盘退变

背景：近年来,椎间盘细胞移植和椎间盘移植修复椎间盘退变研究取得较大的进展。目的：探讨髓核细胞的体外培养方法以及髓核细胞移植在抑制椎间盘退变研究中的作用。方法：通过数据库检索的方式探讨髓核细胞移植抑制椎间盘退变的研究。髓核细胞的主要功能是产生胶原和蛋白聚糖,改进髓核细胞的培养方法,使培养后的髓核细胞数量增多,合成和分泌细胞外基质增加,通过髓核细胞移植来修复退变的椎间盘。结果与结论：通过三维小球聚集培养、微载体旋转立体培养等方法可以使髓核细胞数量增多,肝细胞生长因子对髓核细胞增殖产生促进作用。髓核细胞移植可以恢复退变椎间盘高度,促进退变椎间盘内蛋白多糖和Ⅱ型胶原的生物合成和分泌。随着对椎间盘退变研究的不断深入,髓核细胞移植对退变椎间盘可能是一种重要的治疗手段。     

MR体素内不相干运动弥散加权成像及T2 mapping评估腰椎间盘退行性变

目的 观察MR体素内不相干运动弥散加权成像(IVIM-DWI)及T2 mapping技术评估腰椎间盘退行性变(IVDD)的价值。方法 前瞻性纳入19例下腰部疼痛患者和31名健康志愿者,采集L1~S1椎体矢状位T2WI、T2 mapping及IVIM-DWI;根据Pfirrmann标准进行IVDD分级,观察不同分级及不同层面椎间盘T2值及其对应上、下位椎体IVIM参数的差异,并进行相关性分析,评价其诊断价值。结果 不同Pfirrmann分级椎间盘之间,前纤维环(AAF)、髓核(NP)和后纤维环(PAF)T2值差异及对应下位椎体表观弥散系数(ADC)差异均有统计学意义(P均＜0.05),不同层面椎间盘NP、PAF的T2值差异均有统计学意义(P均＜0.05)。椎间盘PAF的T2值与其上、下位椎体ADC呈正相关(r=0.128、P=0.043,r=0.148、P=0.019);椎间盘Pfirrmann分级与AAF、NP及PAF的T2值均呈负相关(r=－0.187、P=0.003,r=－0.579、P＜0.001,r=－0.401、P＜0.001),与其上、下位椎体慢ADC(ADC_slow)均呈正相关(r=0.196、 P=0.002,r=0.126、P=0.046);椎间盘层面位置(L_1-2→L₅-S₁)与NP及PAF的T2值均呈负相关(r=－0.183、P=0.004,r=－0.356、P＜0.001),而与其上、下位椎体ADC_slow呈正相关(r=0.196、P=0.003,r=0.126、P=0.026)。结论 IVIM-DWI及T2 mapping技术用于评估IVDD具有一定潜在价值,以椎间盘T2值及其对应下位椎体ADC的价值较高。     

3.0TMRI弥散加权成像评价腰椎间盘退变原因的价值

背景：MR 弥散加权成像对水分子的扩散运动敏感,能早期了解椎间盘纤维环和髓核的含水量改变,从而明确其退变程度。 目的：通过对109例腰椎间盘的弥散加权成像进行前瞻性研究,旨在提高应用MRI中弥散加权成像序列对椎间盘退变程度和早期变性诊断的认识。 方法：采用Siemens Verio 3.0T 超导磁共振仪。常规平扫包括矢状位T1WI序列及T2WI抑脂序列;弥散加权成像采用SE-EPI序列行矢状位扫描,取b值为800s/mm2,层厚、间距和显示野同T2WI抑脂序列扫描。根据Pfirrmann等的椎间盘退变分级标准,采用盲法在矢状位T2WI上对符合纳入标准的109例545个腰椎间盘进行分级。将弥散加权成像数据传至工作站,并对表观扩散系数图像进行测量,得到表观扩散系数值。分别画出L1/2-L5/S1椎间盘的感兴趣区,记录数据。 结果与结论：年龄与椎间盘退变分级存在明显相关性,年龄越大高级别数量越多。椎间盘表观扩散系数值影响因素分析：男性与女性各椎间盘表观扩散系数值之间差异无显著性意义（P〉0.05）。L1-S1各椎间盘年龄与表观扩散系数值之间存在负相关（P 〈0.05）;椎间盘评级与表观扩散系数值之间存在负相关（P 〈0.05）。提示通过对表观扩散系数值的研究,弥散加权成像将会成为椎间盘退行性变诊断、特别是椎间盘早期退变、无创评价治疗效果及预后判断的重要技术手段。     

犬椎间盘退变超声显像的初步实验研究

目的:明确应用超声显像评价椎间盘退变的可行性,为临床应用奠定基础。方法:对13只不同年龄犬腰骶部椎间盘进行离体超声扫查,根据椎间盘退变的病理基础对超声图像进行分析并将其分级。结果:超声图像大致分为4级退变阶段,纤维环与髓核在每个退变阶段的声像图上均有不同的特点。结论:超声能够清晰显示椎间盘组织的内部结构信息,反映其进行性退变的病理结构改变。     

腰椎间盘突出可回纳性的临床研究

目的：从生物力学方面研究腰椎间盘突出部分的可回纳性，指导经皮腰椎间盘切除术（PLD）的病例选择，方法：对166例行PLD治疗的病例做了生物力学的前瞻性研究。研究轴位牵拉直腿抬高试验和下蹲抱膝，前屈背伸试验与临床疗效的相关性。结果：轴位牵拉健侧下肢状态下患侧直腿抬高时坐骨神经牵拉痛减轻者，行PLD治疗的疗效优于轴位牵拉健侧下肢患侧直腿抬高时坐骨神经牵拉痛仍存在或加重者，下蹲抱膝前曲时患侧下肢放射痛减轻或立位前曲时下肢疼痛减轻，同时背伸时疼痛仍然存在或略有加重者，这类患者的PLD疗效高。结论：轴位牵拉直腿抬高试验和下蹲抱膝，前屈背伸试验有助于术前合适病例的选择，对提高临床疗效有一定的指导意义。