预防性使用刺五加皂甙对海马伞切割后大鼠学习记忆功能的改善作用

目的 观察预防性使用刺五加皂甙(ASS)对切割海马伞的大鼠学习记忆功能的影响及胆碱能神经元的变化.方法 将27只SD大鼠随机分为ASS预防组、ASS治疗组和对照组,每组9只.在行右侧海马伞切割后,对照组每天腹腔注射生理盐水0.5 mL/100 g,ASS治疗组每天腹腔注射ASS 100 mg/kg(共6周);ASS预防组连续2周每天预先腹腔注射ASS 100 mg/kg后行右侧海马伞切割术,术后继续注射4周.切割海马伞术后第7、8周,分别进行避暗回避试验和跳台试验.术后第9周取大鼠切割海马伞侧隔区切片行还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶-黄递酶(NADPH-d)组织化学染色及胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组织化学染色,分析一氧化氮合成酶(NOS)及ChAT阳性神经元数量、面积和周径.结果 ASS预防组大鼠在避暗回避试验中的探索次数和滞留时间,在跳台试验中的主动回避阳性率及总回避阳性率均优于ASS治疗组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);ASS治疗组大鼠避暗回避试验中的滞留时间明显长于对照组(P＜0.05).ASS预防组大鼠切割侧隔区的NOS和ChAT阳性神经元数量、面积及周径均显著大于治疗组和对照组(P＜0.05);ASS治疗组大鼠切割侧隔区的NOS和ChAT阳性神经元面积和周径均明显大于对照组(P＜0.05).结论 预防性使用ASS对切割海马伞大鼠的认知障碍有一定的改善作用,可能是通过保护基底前脑隔区胆碱能神经元而实现的.     

中药方剂对切割海马伞大鼠学习、记忆的保护作用

目的：研究以党参、黄芪、何首乌、山萸肉等益肾健脑、益气养血为主方的中医药对切割海马伞大鼠学习、记忆力的影响以及对隔区胆碱能神经元的保护作用。方法：实验组和对照组动物切割海马伞前后分别用中药煎剂和自来水灌胃,术后第３、４周行避暗回避试验和跳台试验,最后灌注固定动物,取隔区切片作ＣｈＡＴ免疫组化和ＮＯＳ组化染色,显微镜下记数切割海马伞侧内侧隔核和斜角带垂直支ＣｈＡＴ和ＮＯＳ阳性神经元数,并观察胞体和纤     

慢性铝中毒对大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元的影响

目的：从慢性铝中毒大鼠海马CA3区胆碱乙酰转移酶（Choline Acetytransferase,ChAT）变化的角度,探讨铝的神经毒性作用机制。方法：40只4～5月龄SD大鼠,随机分为铝中毒组和正常对照组,采用尼氏染色及ChAT免疫组化染色,计数阳性细胞,用细胞形态学计量方法测量ChAT阳性产物的平均光密度。结果：铝中毒组大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元减少,合成的乙酰胆碱（Acetychdine,Ach）也减少。结论：铝可对大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元产生神经毒性作用。     

大鼠创伤性脑损伤后神经元的凋亡及NOS、NGF-R、bcl-2、ChAT阳性神经元的变化

目的 :探讨脑损伤后不同时相皮质、海马、隔区神经元凋亡及NOS、NGF -R、bcl-2、ChAT阳性神经元数量的变化。方法 :采用大鼠自由落体脑损伤模型 ,伤后不同时间取脑片作Nissl染色 ,TUNEL染色 ,NADPH -d组化和NGF -R、bcl-2、ChAT免疫组化染色。结果 :Nissl染色可见损伤侧海马CA2、CA3区锥体细胞层细胞稀疏、排列紊乱。损伤区周围皮质凋亡细胞于伤后 1天已十分明显 ,伤后 3天达到高峰 ;损伤侧海马伤后 1天CA1区即出现凋亡细胞 ,伤后 5天达到高峰 ,主要见于CA3区及齿状回 (DG ) ;损伤侧隔区于伤后 4天开始出现凋亡细胞 ,7天时达高峰。损伤区周围皮质NOS阳性神经元数量伤后 1天即有大量增加 ;损伤侧海马伤后 1天NOS阳性神经元数量开始增加 ,伤后 4天达高峰 ,正常侧海马NOS阳性神经元数量也有增加 ;损伤侧隔区NOS阳性神经元数量于伤后 4天有明显增加增加的NOS细胞以iNOS为主。损伤侧海马NGF -R阳性神经元于伤后 1天开始增加 ,伤后 5天达高峰。损伤侧海马伤后 1天bcl-2阳性神经元数量即下降 ,伤后 3天下降至最低点。损伤侧隔区ChAT阳性神经元于伤后 4天开始减少 ,7天时减至最低点。结论 :大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质和损伤侧海马、隔区神经元凋亡数量的变化与伤后时程有关。伤后神经元iNOS、NGF -R的表?     

原位杂交法检测切割穹窿海马伞大鼠海马中PEBP mRNA的表达

目的：探讨切割穹窿海马伞侧大鼠海马与正常侧海马中PEBP mRNA的表达差异。方法：取6只大鼠,于切割右侧穹窿海马伞后第7d,应用寡核苷酸探针原位杂交技术观察PEBP mRNA在切割侧和正常侧海马中的表达差异。结果：切割侧锥体细胞层和齿状回颗粒层PEBP mRNA阳性细胞数量与正常侧比较无明显差异（P〉0.05）,但切割侧的杂交信号强于正常侧（P〈0.05）;而在齿状回门区和颗粒下层,切割侧PEBP mRNA阳性细胞数量多于正常侧,杂交信号也强于正常侧（P〈0.05）。结论：结合本课题组以往的工作,切割穹窿海马伞后海马内PEBP mRNA的表达上调,可能与海马内神经干细胞向胆碱能神经元的分化有关。     

EGb761对SAM P/8小鼠基底前脑胆碱能神经元和学习记忆的影响

[目的]观察银杏叶提取物(EGb761)对加速老化鼠P/8(SAM-P/8)基底前脑隔区胆碱能神经元的保护作用和学习记忆功能的影响,为其临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供科学依据.[方法]选用3月龄雄性SAM-P/8小鼠28只,采用随机数表将其分为EGb761组、HAT组和老年组;另选3月龄雄性SAM-P/8小鼠10只,作为年轻组.EGb761组饮水中加入0.08%EGb761,HAT组HAT用量为每只每日0.0125 mg.动物喂养期为6.0～6.5个月.用避暗法测试小鼠学习记忆行为,并对隔区切片用胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组化染色,并对ChAT阳性神经元进行计数和图像分析.[结果]老年SAM-P/8小鼠MS-DB区ChAT神经元明显受损.Egb761对MS-DB区ChAT神经元损害有显著改善作用,主要表现在ChAT神经元数量的增加和ChAT阳性物质的增加(灰度值的降低),这种改善作用与HAT无显著性差异.相关分析结果表明ChAT阳性神经元数量与小鼠避暗试验测得的STL和STS分别呈显著正相关和负相关(P＜0.05或P＜0.01).[结论]EGb761有促进SAM-P/8鼠脑胆碱能系统的作用,这可能是其改善SAM-P/8小鼠学习记忆能力的神经保护作用机制之一.     

电针对老年性痴呆大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用

目的探讨电针对老年性痴呆(Alzheimer’sdisease,AD)大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法36只SD老龄大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和电针治疗组,采用穹隆-海马伞损伤法制作大鼠AD模型。电针治疗组施以电针百会、涌泉、太溪、血海等穴。采用放射免疫法检测脑中隔区胆碱乙酰转移酶(cholineacetyltransferase,ChAT)活性,免疫组化法检测海马CA3区神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)和c-fos蛋白的表达。结果电针治疗组ChAT活性高于模型组;电针治疗组NGF和c-fos蛋白的表达较模型组增加。结论电针对AD模型大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用可能与促进c-fos合成及诱导海马NGF的表达相关。     

褪黑素对卡因酸介导大鼠海马神经元毒性的影响

目的 探讨褪黑素对腹腔注射卡因酸介导大鼠海马神经元损害的影响。方法 将大鼠随机分成3组，实验组给予腹腔注射卡因酸，治疗组给予腹腔注射卡因酸和褪黑素，对照组给予腹腔注射等体积磷酸缓冲液(PBS)；3天后以尼氏染色法检测大鼠海马神经元，DNA缺口末端标记（TUNEL)法检测海马神经元凋亡。结果 大鼠海马神经元计数，尼氏染色实验组及治疗组明显少于对照组(P＜0．01)，治疗组明显高于实验组(P＜0．01)；TUNEL染色阳性细胞数治疗组明显低于实验组(P＜0．01)。结论 褪黑素对腹腔注射卡因酸介导大鼠海马神经元凋亡具有保护作用。     

猫基底前脑内胆碱能神经元的分布、形态特征及隔——海马投射

本文用胆碱乙酰化酶(choline acetyltransferase ChAT)免疫组化法观察了猫基底前脑内胆碱能神经元的分布及细胞形态特征,并研究了在切断一侧伞一穹窿后,隔区胆碱能神经元消失情况。含有胆碱能神经元的核包括:内侧隔核、斜束带核、隔袱核、尾核、苍白球、下丘脑视前区和外侧区及冠状回邻近的皮质区。核中细胞呈多角形、卵圆形、梭形或三角形。以中型(20-25μm)和小型(<20μm)为常见,偶有大型的(>25μm)。切断一侧伞—穹窿后,术侧内侧隔核和斜束带垂直部胆碱能神经元比健侧的明显减少(P<0.01),说明此处胆碱能神经元发支经伞—穹窿投射至海马。     

大鼠创伤性脑损伤的神经生长因子治疗

目的 :探讨脑室灌注NGF对大鼠创伤性脑损伤后神经元的凋亡和认知功能的影响。方法 :采用大鼠自由落体脑损伤模型 ,在创伤后不同时间从损伤侧侧脑室分别灌注NGF和人工脑脊液 ,一半动物于伤后第 5天取脑切片 ,Nissl染色 ,TUNEL染色 ,并用NADPH -d组化染色及NGF -R、bcl-2、ChAT免疫组化染色。另一半动物于伤后 1月时行避暗回避试验和跳台试验。结果 :Nissl染色见损伤给药组损伤侧海马各区细胞排列整齐 ,仅部分细胞出现轻微肿胀变性。与损伤对照组比较 ,损伤给药组损伤区周围皮质及损伤侧海马凋亡细胞明显减少 ,损伤给药组损伤区周围皮质、两侧海马及损伤侧隔区iNOS阳性神经元数量明显减少 ,损伤给药组损伤侧海马NGF -R阳性神经元数量亦减少、bcl-2阳性神经元数量有所增加、损伤侧隔区ChAT阳性神经元丢失不明显。与损伤对照组相比 ,损伤给药组避暗回避试验探索次数减少、滞留时间延长 ,跳台试验主动回避及总回避阳性率增高。结论 :大鼠创伤性脑损伤后使用神经生长因子脑室灌注治疗 ,可能通过对神经元iNOS、NGF -R的表达抑制和bcl-2的表达促进作用阻遏损伤区神经元凋亡的发生     

银杏叶提取物对点燃模型幼鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶活性的影响

目的研究银杏叶提取物（EGb）对点燃模型幼鼠学习记忆等认知功能,对大鼠海马乙酰胆碱酯酶（AChE）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）活性的影响。方法21、35日龄SD大鼠各40只,经初筛后随机分为生理盐水对照组、点燃对照组及EGb大、中、小剂量治疗组,采用戊四氮（PTZ）诱导幼鼠点燃模型,以Y型电迷宫及生化检测方法,观察用药前后大鼠学习记忆功能和海马AChE、ChAT活性的变化。结果EGb呈剂量依赖性显著改善实验大鼠的学习记忆能力,并显著抑制海马AChE活性、增强ChAT的活性。结论EGb可以通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善发育期癫痫大鼠学习记忆功能。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠血液、睾丸组织中内皮素和一氧化氮水平的影响

目的:探讨银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠血液、睾丸组织中内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平的影响.方法:将SD大鼠分为三组:正常对照组、糖尿病组、EGb治疗组.EGb治疗5 w后,分别测定三组大鼠血液中葡萄糖、胰岛素、ET和NO水平以及睾丸组织中ET、NO水平和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果:EGb治疗组与糖尿病组大鼠比较血糖明显降低(P＜0.01),血清胰岛素水平轻度升高(P＞0.05).各组大鼠血浆中ET水平无明显差异(P＞0.05),血浆NO水平糖尿病组显著高于对照组,而EGb治疗组明显低于糖尿病组(P＜0.05).睾丸组织中ET水平糖尿病组显著高于对照组(P＜0.05),EGb治疗组低于糖尿病组(P＞0.05);EGb治疗组大鼠睾丸组织中N0水平、NOS和iNOS活性显著低于糖尿病组(P＜0.01和P＜0.05).结论:EGb可通过降低糖尿病大鼠血液中葡萄糖和NO水平及睾丸组织中ET、N0水平和NOS活性,从而减轻糖尿病对睾丸组织所造成的损害.     

银杏叶提取物对环孢素A慢性肾毒性的拮抗作用

目的 探讨银杏叶提取物(EGb)对环孢素A(CsA)所致慢性肾毒性的拮抗作用及其机制.方法 将无特定病原体动物(SPF级)的雄性大鼠随机分为对照组、小剂量CsA组(皮下注射CsA25 mg·kg-1·d-1)、大剂量CsA组(皮下注射CsA 50 mg·kg-1·d-1)、小剂量CsA+EGb治疗组(皮下注射CsA 25 mg·kg-1·d-1,EGb 300 mg·kg-1·d-1灌胃)、大剂量CsA+EGb治疗组(皮下注射CsA50 mg·kg-1·d-1,EGb 300 mg·kg-1·d-1灌胃).给药4周后测定各组大鼠的体重、尿量、24 h尿蛋白定量、肾功能,并行肾脏病理检查,肾组织匀浆测定丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC),过氧化氢酶(CAT),还原型谷胱甘肽(GSH).结果 4个实验组的尿量、24 h尿蛋白定量、肾间质纤维化评分,MDA水平均显著高于对照组(P值均<0.05),内生肌酐清除率(Ccr)、T-AOC、CAT和GSH水平均显著低于对照组(P值均<0.05).与小剂量CsA组相比,大剂量CsA组的MDA水平显著增高(P<0.05),T-AOC水平显著降低(P<0.05).与大剂量CsA组相比,大剂量GsA+EGb治疗组的24 h尿蛋白定量、肾间质纤维化评分、MDA水平显著降低(P值均<0.05),Ccr、T-AOC、CAT和GSH水平显著升高(P值均<0.05).与小剂量CsA组相比,小剂量GsA+EGb治疗组的24 h尿蛋白定量、肾问质纤维化评分显著降低(P值均<0.05),Ccr、T-AOC、CAT和GSH水平显著升高(P值均<0.05).结论 氧化应激是导致CsA肾毒性的主要原因之一,EGb能拮抗氧化应激反应,从而降低CsA肾毒性.     

银杏叶滴丸对不同衰老小鼠肝MDA、SOD影响的研究

目的：探讨银杏叶滴丸对自然衰老小鼠和D-半乳糖水衰老模型小鼠MDA含量、SOD活性的影响。方法：设正常对照组、自然衰老对照组及干预组、D-半乳糖模型对照组及干预组,干预组给予银杏叶滴丸,对照组给予蒸馏水。取各组肝组织匀浆,按试剂盒说明测定MDA、SOD活性。结果：各组肝匀浆中MDA均低于其对照组、SOD均高于其对照组（P〈0.05）。D-半乳糖干预组SOD活性、MDA含量与正常对照组相比差异无显著性（P〉0.05）,其余各组均低于正常对照组（P〈0.05）。结论：银杏叶滴丸具有抗氧化作用,进而延缓衰老。     

银杏叶提取物对急性心肌梗死大鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞的保护作用.方法:雄性SD大鼠30只,随机均分为假手术组(A组)、AMI组(B组)和EGb761组(C组).C组腹腔注射EGb761(20 mg/kg),A组和B组腹腔注射等容量的生理盐水,每天1次,共3天.实验大鼠于第3天开胸,A组冠脉下穿线但...     

神经干细胞在体外诱导向胆碱能神经元定向分化后移植治疗脊髓损伤

目的 研究神经干细胞向胆碱能神经元定向分化后对脊髓横断损伤的修复作用.方法 采用GFP转基因孕鼠(E 12～14d)的海马分离、培养神经干细胞并诱导其向胆碱能神经元方向分化.SD成年大鼠以显微剪横断脊髓制成SCI模型.将SD大鼠18只分为3组:A组注入DMEM/F12培养液;B组注入神经于细胞的细胞液,C组注入在体外定向诱导为胆碱能神经元的细胞液;3组实验动物均于细胞移植后采用B B B评分法定期评估运动功能.于移植后第8周末,取出相应的脊髓阶段,行ChAT免疫组织化学染色,光镜观察.结果 从海马分离的细胞群具有自我更新能力,表达nestin,胎鼠骨骼肌提取液可以诱导这些细胞中的11.8%分化成为胆碱能神经元,与对照组差异明显.B组和C组所有大鼠BBB评分在移植细胞3周以后明显高于A组(P＜0.05),C组所有大鼠BBB评分在移植细胞4周以后明显高于B组(P＜0.05).在移植第8周末,冰冻切片中可见ChAT染色阳性细胞.结论 神经干细胞可以在体外诱导向胆碱能神经元定向分化,定向分化后移植应用在脊髓横断损伤治疗中,可明显改善运动功能.     

银杏叶片对衰老大鼠大脑皮层环腺苷酸反应元件结合蛋白表达的影响

目的 研究银杏叶片对衰老大鼠皮层核转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(pCREB)表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠分为青年对照组、老年对照组和银杏叶组.银杏叶组大鼠每日灌胃银杏叶片,其余两组动物灌胃等量蒸馏水,共8周.Morris水迷宫实验观察大鼠空间记忆变化,western blot检测皮层CREB、pCREB表达.结果 (1)与青年对照组(9.6±2.88,41.55±6.30)比较,老年大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数(6.8±2.49)、平台象限停留时间(34.92±4.56)减少(P＜0.05);与老年对照组比较,EGb组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和平台象限停留时间(9.4±2.63,41.0±6.68)延长(P＜0.05).(2)老年对照组大鼠皮层CREB、pCREB表达水平分别为(0.70±0.21,0.13±0.05),低于青年对照组(1.07 ±0.33,0.26±0.04),差异具有显著性(P＜0.05);与老年对照组比较,银杏叶组大鼠皮层CREB、pCREB表达升高(1.02±0.18,0.18±0.02) (P＜O.05).结论 银杏叶片可能通过上调老年大鼠大脑皮层CREB、pCREB表达改善空间学习和记忆功能.     

Effects of extract of Ginkgo biloba with venlafaxine on brain injury in a rat model of depression

Background Recent studies have indicated that chronic stress may give rise to brain damage,which is related to the genesis of depression. The purpose of this study is to investigate the effects of extract of Ginkgo biloba (EGb) and venlafaxine on depression. Methods Rats were treated with chronic and comprehensive stress to create a depression model. Immunohistochemistry was used to detect the expression of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in the hippocampal CA3 neurons of rats treated with different drugs. Behavioral changes of these rats were also examined.Results The expression of BDNF in the hippocampal CA3 neurons of the depression model decreased with a reduction in exploring behavior and a significant increase in fecal production. The expression of neuron nitricoxide synthase (nNOS) protein also increased in the rats compared to normal controls. The rats treated with EGb and venlafaxine showed an increase in expression of BDNF and exploring behavior compared to untreated rats, but a decrease in nNOS and fecal production. Conclusions Rats sustain damage to the brain after being subjected to chronic and comprehensive stress. Our research has indicated that combined EGb with venlafaxine enhances the protection of neurons and decreases damage to the brain, while relieving the side effects of synthetic antidepressants.