类肝素结合性表皮生长因子在人子宫内膜植入窗期的表达和意义

探讨类肝素结合性表皮生长因子 (HB-EGF)在人正常子宫内膜中的表达特点 ,评估其在子宫内膜的生长、分化及在植入窗期介导胚泡着床中的作用。采用免疫组织化学方法检测 5 6例正常子宫内膜 (1 6例增殖期 ,1 3例分泌早期 ,1 5例分泌晚期 ,1 2例植入窗期 )中 HB-EGF的表达及定位。结果 :HB-EGF在人各期子宫内膜均有表达 ,在植入窗期或分泌中期子宫内膜上皮细胞和间质细胞表达最强 ,并定位于腺上皮和腔上皮细胞表面 ,呈顶浆分泌状。结论 :HB-EGF存在于人各期子宫内膜 ,在植入窗期明显高表达可能参与介导胚泡着床 ,并与间质细胞的生长、分化有关 ,利于子宫内膜蜕膜化 ,为胚泡着床做准备。     

正常月经周期子宫内膜瘦素和瘦素受体的表达

目的　探讨瘦素和瘦素受体系统在正常月经周期子宫内膜表达特点及其意义。　方法　应用免疫组织化学方法检测 60例正常月经周期子宫内膜瘦素和瘦素长受体蛋白的表达。原位杂交技术测定 2 5例子宫内膜瘦素和瘦素长受体mRNA。　结果　瘦素蛋白在子宫内膜腺体和间质呈阳性或强阳性表达 ,月经周期各期间无显著差异 ;瘦素长受体蛋白在子宫内膜间质中呈弱阳性或阴性表达 ,月经周期各期间无显著差异 ;瘦素长受体蛋白在子宫内膜腺体的表达分泌期显著高于增殖期 (P <0 .0 0 1 )。瘦素和瘦素长受体mRNA在增殖期和分泌期子宫内膜的腺体和间质中均呈阳性表达。　结论　瘦素长受体蛋白在分泌期子宫内膜腺体表达增强 ,有可能在孕卵着床过程中发挥作用     

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。     

淋巴细胞对子宫内膜蜕膜化及胚胎着床的影响

目的　探讨淋巴细胞对子宫内膜蜕膜化及胚胎着床的影响。　方法　分离育龄妇女增殖晚期子宫内膜间质细胞 ,加入雌二醇 (E2 )、孕酮 (P)使蜕膜化后 ,加入人非孕及早孕外周血淋巴细胞与小鼠第 4天胚胎共培养 ,观察间质细胞及胚胎的孵化、粘附、扩展生长情况 ,并测定培养液中泌乳素 (PRL)含量。　结果　早孕淋巴细胞对子宫内膜蜕膜化有明显促进作用 ,特异性促进PRL分泌 (P <0 .0 5 )。淋巴细胞能促进胚胎在子宫内膜间质细胞的孵化、粘附、扩展性生长 ,早孕组胚胎扩展生长率显著高于非孕组 (P <0 .0 5 )。　结论　早孕淋巴细胞可能通过促进E2 、P激素调节蜕膜化的子宫内膜分泌PRL而促进胚胎着床。     

原位杂交检测孕酮受体mRNA在周期子宫内膜的表达

应用地高辛标记的探针进行原位杂交，检测周期内膜各组分的孕酮受体（ＰＲ）ｍＲＮＡ的表达。内膜取自子宫肌瘤患者，子宫全切术后即取内膜及部分肌层，储于液氮。据月经史及形态表现将内膜分为三期：增殖、分泌早期及中晚分泌期。结果显示，ＰＲｍＲＮＡ在子宫内膜的表达有明显的组织／细胞差异。基质细胞普遍表达ＰＲｍＲＮＡ，增殖期与分泌期比较无明显差异。中晚分泌期内膜腺体细胞ＰＲｍＲＮＡ的表达极低甚至不表达，且无明显的表浅及深层的表达差异。提示子宫内膜孕酮受体至少在腺体上可能存在转录水平的调节。     

Luminex液相蛋白芯片用于研究着床窗期子宫内膜和早孕蜕膜基质细胞的细胞因子的表达谱

目的探索着床窗期子宫内膜和早孕期蜕膜基质细胞的细胞因子谱表达及其对胚胎着床和早期妊娠的可能影响。方法获取着床窗期子宫内膜基质细胞(ESC)和早孕期蜕膜基质细胞(DSC)进行体外培养,采用Luminex液相蛋白芯片技术检测细胞培养上清液中15种细胞因子:肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、颗粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、颗粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白因子-1(MCP-1)、受调节激活的正常T细胞排泌的因子(RANTES)和γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)的含量变化,比较两者表达的差异。结果DSC分泌多种细胞因子,与ESC相比,其中TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IP-10、GM-CSF、G-CSF、MIP-1α、RANTES表达下调,有极显著差异(P<0.001);IL-4表达上调,有显著差异(P<0.01);MCP-1、IL-2和IL-12表达无明显变化。不同时期表达的细胞因子之间存在复杂的相关关系。结论从着床窗期子宫内膜到早孕期蜕膜基质细胞表达的细胞因子谱的水平发生变化,可能对调控胚胎着床和维持早期妊娠起着重要作用。     

子宫内膜息肉中雌、孕激素受体的表达

目的检测子宫内膜息肉雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达,探索子宫内膜息肉形成的原因及机制。方法子宫内膜息肉48例为观察组,正常子宫内膜36例为对照组,采用免疫组化SP法,行半定量分析,检测ER、PR的表达。结果增殖期的息肉组织中PR表达的评分结果为(2.89±2.16),低于增殖内膜的评分(4.04±1.73),差异有统计学意义(P<0.05);分泌期的内膜息肉中ER表达的评分结果为(3.80±1.64),高于分泌期内膜中的评分(2.64±1.45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论增殖期的子宫内膜息肉中PR的表达降低及分泌期的息肉中ER表达增高可能参与了子宫内膜息肉的形成及发展。     

子宫内膜整合素αvβ3表达与体外受精-胚胎移植反复种植失败的相关性研究

目的研究整合素αvβ3在人各时期子宫内膜及蜕膜组织的表达,并探讨其与体外受精-胚胎移植（IVF-ET）反复种植失败的相关性。方法以40例IVF-ET治疗反复种植失败的患者为研究对象,以40例因男性因素行卵胞浆内单精子注射（ICSI）治疗的患者及5例正常孕早期患者作为对照,获取患者各个时期的子宫内膜及蜕膜组织,采用免疫组织化学法检测整合素αvβ3蛋白的定位和表达,并对所获得的结果应用Image-ProPlus6．0图像分析软件测定阳性反应强度。结果整合素αvβ3蛋白定位于子宫内膜腺上皮细胞和腔上皮细胞的细胞浆;增殖早、中、晚期及分泌早期内膜上均无表达,分泌中期、晚期内膜明显表达,蜕膜中表达最强（P〈0．05）。反复种植失败患者子宫内膜整合素αvβ3的表达同样存在周期性变化,但其在分泌中、晚期的表达要明显弱于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论整合素αvβ3在正常子宫内膜组织中的表达呈现明显周期依赖性,与胚胎种植密切相关;而其在IVF—ET反复种植失败患者种植窗期子宫内膜组织中的表达明显减弱,可能是导致胚胎种植失败的原因之一。     

子宫内膜热休克蛋白表达与不明原因不育症的相关性研究

目的 :探讨不明原因不育症与热休克蛋白 ( HSP)表达的关系。方法 :对 72例不明原因不育症 (不育症组 )和 3 4例 (对照组 )子宫内膜作常规染色 ,行组织学分类 ;酶联免疫吸附测定 ( EL ISA)法检测血清抗精子抗体 ( As Ab) ;免疫组织化学染色 ( S-P法 )标记HSP70和 HSP90α在子宫内膜中的表达。结果 :HSP70阳性表达在不育症及对照组子宫内膜分别为 65 %及 3 8% ( P<0 .0 5 ) ;血清 As Ab阳性及阴性患者中分别为 81 %及 3 0 %( P<0 .0 1 )。 HSP90α阳性表达在不育症及对照组子宫内膜分别为 5 4%及 47% ( P>0 .0 5 ) ;血清 As AB阳性及阴性患者中分别为 69%及 2 4% ( P<0 .0 1 )。结论 :不明原因不育症患者子宫内膜 HSPs的高表达可能是一种自身免疫应激反应     

骨桥蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人正常月经周期子宫内膜的表达。方法采用免疫组织化学法对51例人正常月经周期子宫内膜OPN蛋白质进行定位和定量检测,Western blotting法测定增殖期及分泌期OPN蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测18例人正常月经周期子宫内膜增殖期及分泌期OPN mRNA的表达。结果OPN蛋白质主要分布在正常子宫内膜腺上皮细胞,增殖早期、中期无表达,增殖晚期出现,分泌中期、晚期表达最强。月经期子宫内膜腺上皮细胞表达较强。OPN mRNA表达分泌期强于增殖期(P<0.05)。Western blotting检测结果显示正常子宫内膜组织中存在OPN蛋白,分泌期含量较高。结论OPN蛋白质及mRNA在正常子宫内膜中的表达呈现明显周期依赖性。分泌中、晚期表达增强提示其可能参与胚胎着床。     

不明原因反复自然流产妇女植入窗期子宫内膜形态及雌孕激素受体的表达

目的 探讨不明原因反复自然流产（URM）与植入窗期子宫内膜发育程度以及雌、孕激素受体（ER、PR）表达之间的相关性。方法应用光学显微镜、扫描电镜观察URM（试验组）24例生育妇女（对照组）22例子宫内膜组织学,胞饮小泡密度;免疫组织化学分析ER、PR的表达。结果URM组子宫内膜黄体期缺陷（LPD）的发生率明显高于对照组,胞饮小泡密度低于对照组,子宫内膜上皮细胞核及基质细胞核中PR的表达量也低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。两组子宫内膜ER的表达未见统计学差异。结论URM子宫内膜LPD发生率高,胞饮小泡密度明显低于正常生育妇女,提示植入窗期子宫内膜发育滞后可能是导致胚胎着床障碍、反复自然流产的原因之一。在性激素分泌正常的URM妇女中,子宫内膜PR表达下降,对孕激素反应不足可能是导致内膜形态发育滞后的原因。     

HOXA11在人子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及与不育的关系

目的检测HOXA11蛋白在正常月经周期子宫内膜、早孕蜕膜和不明原因不育子宫内膜组织中的表达,探讨HOXA11与不明原因不育及雌孕激素受体(ER、PR)表达的相关性。方法采用免疫组织化学和Western-Blot方法对38例正常子宫内膜、15例早孕蜕膜和19例不明原因不育子宫内膜组织中HOXA11、ER及PR的表达。结果HOXA11蛋白在子宫内膜腺上皮和基质细胞均有表达,以分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜表达量较高;在不育内膜的表达量显著降低(P<0.05);ER、PR在各组表达量的变化与HOXA11相同,即分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜的表达量较高,而在不育内膜的表达量显著下降(P<0.05)。结论HOXA11基因在着床期子宫内膜的分化、发育以及着床后妊娠的维持起一定作用;HOXA11表达量下降与ER、PR表达量降低相关;HOXA11表达下降或缺失可能是女性不明原因不育的原因之一。     

“河车助孕方”对不育症子宫内膜雌激素受体、孕激素受体、增殖细胞核抗原及血管内皮生长因子的影响

目的 :探讨补肾调经中药治疗不育症的机理。方法 :应用免疫组织化学方法 ,观察服用“河车助孕方”前、后增殖晚期子宫内膜雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)、增殖细胞核抗原 (PCNA)及血管内皮生长因子 (VEGF )表达的变化 ,并以服药前作为自身对照。结果 :服药前 ER、PR、PCNA、VEGF在子宫内膜腺上皮细胞核的表达分别为 0 .18± 0 .3 9、0 .88± 0 .3 8、1.76± 0 .5 0、0 .15± 0 .2 9;在内膜间质细胞核的表达分别为 0 .71±0 .44、0 .79± 0 .47、1.12± 0 .47、0 .2 6± 0 .3 6;服药后在子宫内膜腺上皮细胞核的上述各项表达分别为 2 .12± 0 .40、2 .3 2± 0 .3 5、3 .15± 0 .49、1.79± 0 .44 ,与服药前比较 ,P均 <0 .0 0 1;在内膜间质细胞核的表达分别为 1.5 3± 0 .41、1.88± 0 .3 8、2 .18± 0 .5 0、2 .0 6±0 .3 9,与服药前比较 ,P均 <0 .0 0 1;服药后子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞的 PCNA、VEGF表达亦明显增强。结论 :补肾调经中药“河车助孕方”可增加子宫内膜 ER、PR的合成 ,并使激素依赖性的 PCNA、VEGF表达增强 ,从而促进内膜正常生长、发育 ,有效地改善不育症患者子宫内膜的微环境。     

米非司酮对子宫内膜整合素亚单位α4和β3表达的影响

为探讨米非司酮对与子宫内膜接受性建立相关的整合素的影响。对 1 9例正常生育妇女进行两个连续月经周期的前瞻性、自身对照研究。应用免疫组织化学方法检测口服米非司酮前后种植窗期子宫内膜整合素亚单位α 4(1 9例 )和β 3 (9例 )、以及孕激素受体 (PR,1 9例 )表达的情况 ,应用 HSCORE评分作半定量分析 ,用非参数 Wilcoxon检验作统计学处理。结果 :种植窗期正常子宫内膜腺体及血管内皮表达整合素亚单位 α4和β3 ;黄体中期服用米非司酮 5 0 mg,明显降低整合素亚单位 α4和 β3、以及 PR在子宫内膜腺体的表达。提示损害子宫内膜接受性是米非司酮用于紧急避孕的机制之一 ;整合素亚单位 α4和 β3在子宫内膜腺体的表达受孕激素的调节。米非司酮降低整合素亚单位 α4和 β3在子宫内膜腺体的表达可能与其降低腺体 PR的表达有关     

整合素αvβ3和骨桥蛋白在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达

目的探讨整合素αvβ3和骨桥蛋白（OPN）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者植入窗期子宫内膜的表达。方法选取15名典型PCOS患者（其中7例为自主排卵,8例为促排卵）为PCOS组,同期选择15例月经周期规律妇女为对照组。阴道超声监测排卵,排卵日测定子宫内膜分型及厚度;免疫组织化学技术测定植入窗期的子宫内膜整合素αvβ3和骨桥蛋白的表达;放射免疫法测定内膜活检当天的血清雌二醇（E2）和孕酮（P）的浓度。结果与对照组比较,PCOS组植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均显著下调（P〈0．01）,两者之间不伴有比例的失调;排卵日子宫内膜厚度两组无显著差异（P〉0．05）;子宫内膜分型有显著性差异（P〈0．05）;血清E2水平显著高于对照组（P〈0．01）,E2／P比值亦显著高于对照组（P〈0．05）,而P显著低于对照组（P〈0．01）。结论PCOS患者植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均下调,子宫内膜容受性降低,影响了胚泡着床。     

血管内皮生长因子对哺乳动物生殖的调节

睾丸间质细胞和支持细胞产生的血管内皮生长因子 ( VEGF)可能以旁分泌形式调节精子发生的微环境并影响精子发生。VEGF可能影响卵泡内血管通透性和血管发生 ,并参与排卵过程。胚胎着床期着床胚泡处的腔上皮细胞和腔上皮下的基质细胞中 VEGF表达明显增加。子宫增殖期间 VEGF表达的不断增加和 VEGF受体 2的高表达可能与月经后子宫内膜重建时快速的毛细血管增生有关。     

血管生成素-2及其受体在子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的观察血管生成素-2(Ang-2)与酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)在子宫内膜异位症(EMs)患者子宫内膜中的表达,探讨其在EMs的发生发展过程中的具体作用。方法选取本院2012年1月至2013年12月收治的70例EMs患者为研究组,选取同期70例非EMs患者为对照组,分别取材两组的内膜组织,应用免疫组织化学染色法测定Ang-2、Tie-2的表达状况。结果 (1)Ang-2主要定位在细胞质中,主要表达于腺上皮细胞与血管内皮细胞,间质细胞中可见少量表达。Tie-2主要定位在腺上皮细胞胞浆中,少数定位在间质细胞与血管内皮细胞中。(2)研究组患者中Ang-2、Tie-2阳性表达率分别为75.7%和72.9%,显著高于对照组(分别为42.9%和38.6%)(P0.05)。Ang-2在EMs患者增殖期的阳性表达率(67.5%)显著低于分泌期(86.7%)(P0.05);Tie-2在EMs患者增殖期的阳性表达率(87.5%)显著高于分泌期(53.3%)(P0.05)。结论 Ang-2、Tie-2在EMs患者内膜组织中均有较高表达,提示其参与EMs的发生发展。     

白介素-1β对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌基质金属蛋白酶-9及细胞黏附分子-1的影响

目的 研究白介素-1β（IL-1β）对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌金属蛋白酶-9（MMP-9）及细胞黏附分子-1（ICAM-1）的影响.方法 离体培养着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞,用IL-1β作为处理因素,通过免疫组织化学SP法对子宫内膜上皮细胞MMP-9、ICAM-1蛋白的表达进行检测.结果 随着IL-1β浓度的增加,原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9及ICAM-1表达量均呈浓度依赖性升高（P〈0.05）.结论 一定水平的IL-1β可以促进子宫内膜上皮细胞MMP-9及ICAM-1的分泌,有利于胚胎着床.     

控制性超排卵对子宫内膜容受性的影响及干预措施

正常子宫内膜仅在一个极短的关键时期允许胚胎着床,称为“植入窗”或“种植窗”[1].种植窗期,在体内多种激素特别是卵巢激素调控下,子宫内膜的形态学超微结构、特定基因表达、蛋白分泌等方面都发生时空特异性的系列改变,使子宫内膜的容受性达到最佳状态,以利于胚胎的定位、粘附和着床.控制性超促排卵(COH)改善和推动了辅助生殖技术的发展,该过程中,通过促排卵药的使用可以获得较多枚卵子,但是,这些药物有可能会影响人体多种内源性激素的分泌和平衡,使雌、孕激素异常分泌,干扰种植窗内膜的形态、功能,从而影响子宫内膜容受性,进而影响胚胎的着床,降低妊娠率[2,3].     

不明原因复发性流产患者子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因的表达

目的探讨不明原因复发性流产(URSA)与子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因表达的关系。方法采用原位杂交技术,以HOXA-10反义核苷酸为探针检测51例URSA患者及38例正常生育(NF)组的分泌期子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10 mRNA的表达水平,并以灰度阳性单位(PU值)表示。结果NF组子宫内膜分泌早期HOXA-10mRNA表达的PU值腺体为(6.66±0.11),间质为(6.76±0.15);分泌中期分别为(10.95±0.90)及(11.46±1.08);分泌晚期分别为(11.05±1.12)及(11.54±1.10);蜕膜组织分别为(11.55±1.14)及(11.93±1.92);分泌中晚期及蜕膜组织的PU值显著高于分泌早期。URSA组不同时期子宫内膜及早孕蜕膜组织中HOXA-10 mRNA的表达水平基本一致,无明显的分泌中晚期及早孕期峰,并且分泌中晚期及早孕蜕膜组织的PU值明显低于NF同期组。两组各期腺体和间质的PU值无显著差异。结论子宫内膜HOXA-10基因在分泌中晚期及早孕蜕膜组织中的高表达可能和孕卵着床及妊娠维持密切相关,其表达缺陷可能是导致URSA发生的重要原因之一。