透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞Caspases蛋白表达的影响

目的：研究透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞凋亡的影响及其机制。方法：吖啶橙染色法观察透骨草提取物对SKOV-3细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SKOV一3细胞Caspas-es蛋白表达的影响。结果：37．8μg／ml透骨草提取物作用于SKOV-3细胞24h后,SKOV-3细胞形态不规则,细胞核固缩、呈月牙形紧贴在核膜周围。SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白表达明显低于与对照组（P〈0．05）,表明透骨草提取物可下调SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白的表达。结论：透骨草提取物可以通过Caspases依赖途径诱导SKOV-3细胞凋亡。     

沙蟾毒精诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其机制的研究

目的观察沙蟾毒精诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用。方法用M,rr法观察沙蟾毒精对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响：通过荧光染色、流式细胞分析等方法观察沙蟾毒精对细胞凋亡的影响：RT—PCR和Westernblot分析沙蟾毒精对Bcl-2、Bax、p53和p21等基因和蛋白表达的影响。结果沙蟾毒精对人肝癌SMMC-7721细胞的生长有明显的抑制作用,24h半数抑制剂量（IC50）为0．415μg／mL。细胞周期结果显示,人肝癌SMMC-7721细胞经不同浓度的沙蟾毒精处理后,G／M期细胞数量增加,而Go／G,期细胞数明显减少。RT—PCR和Westernblot结果显示,人肝癌SMMC-7721细胞经沙蟾毒精处理后,Bax的表达升高,而bcl-2的表达降低（P〈0．05）。结论沙蟾毒精可能通过线粒体凋亡途径诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡。     

参夏合剂影响Ang11诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞凋亡和Caspase-3表达的研究

目的：观察参夏合剂对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡和Caspase-3表达的影响,探讨参夏合剂防治动脉粥样硬化的作用机制。方法：培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,经Angl／诱导后,随机分为模型组、参夏合剂低剂量组、高剂量组、DMSO对照组,分别给予相应药物干预后,采用原位末端标记技术检测凋亡细胞（TUNEL）,用免疫组化法检测Caspase-3的表达。结果：①血管平滑肌细胞凋亡率：空白对照组的VSMC未出现细胞凋亡,模型组细胞凋亡较空白对照组显著增高（P〈0．05）。参夏高、低剂量组亦出现细胞凋亡,但明显低于模型组（P〈0．01或P〈0．05）。②Caspase-3表达情况：模型组的Caspase-3表达与空白对照组无显著差异;参夏合剂高、低剂量组的Caspase-3蛋白表达均明显低于模型组（P〈0．05）;且随着参夏舍剂浓度的增加,Caspase-3蛋白表达呈下降趋势。结论：AngII通过促进细胞凋亡作用而诱发动脉粥样硬化过程,参夏合剂可通过调节细胞凋亡和Caspase-3表达发挥抗动脉粥样硬化作用。     

姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用

目的观察姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用及其机制。方法取相同代的SK—N—SH细胞随机分为正常对照组、模型组、姜黄提取物低浓度（20μmol／L）组、姜黄提取物中浓度（40μmol／L）组、姜黄提取物高浓度（80μmol／L）组。用分光光度法检测姜黄提取物对细胞外SOD、MDA的影响,通过MTT比色法检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Westernblot检测法检测细胞Caspase-3蛋白的表达情况。蛄果与模型组比较,姜黄提取物各组细胞存活率升高（P〈0．01）,姜黄提取物各组SK—N—SH细胞培养液内的MDA水平均明显降低（P均〈0．01）,而SOD水平均明显升高（P均〈0．01）,同时Caspase-3活性受到抑制。结论姜黄提取物能够通过抗氧化作用抑制Na2S2O4对SK—N—SH细胞凋亡作用。     

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。     

透骨草提取物对人肺癌A549细胞凋亡及其PUMA/Bcl-2/Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人肺癌A549细胞PUMA(P53上调凋亡调空因子)、Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2)、Caspase-3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3)蛋白表达的影响,从凋亡诱导的角度探讨透骨草提取物抑制A549细胞增殖的作用机制。方法:将A549细胞分为实验组和对照组;吖啶橙染色观察透骨草提取物对A549细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对A549细胞PUMA、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响。结果:吖啶橙染色结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞皱缩,胞核固缩、呈边集,出现凋亡小体。免疫组化检测结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞PUMA蛋白显著高于对照组(P0.05),而Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达显著低于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物对A549细胞具有凋亡诱导作用,机制与促进A549细胞PUMA蛋白表达、抑制Bcl-2和Caspase-3蛋白表达有关。     

槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡及其凋亡通路的影响

目的:研究槲皮素体外对人肝癌细胞凋亡及其凋亡通路的影响。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测凋亡率和细胞周期;应用ELISA法检测细胞上清液中Caspase-3、Caspase-9及Survivin的含量。结果:槲皮素(10-320μmol.L-1)体外可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并具有浓度和时间依耐性;在40-160μmol.L-1浓度下,槲皮素可诱导SMMC-7721细胞凋亡;将细胞阻滞在G2-M期;使Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量显著增加,而Survivin蛋白表达显著减少。结论:槲皮素抑制人肝癌SMMC-7721细胞的作用机制与诱导细胞凋亡和将细胞周期阻滞在G2-M期有关,其凋亡通路涉及Caspase途径。     

芪术方诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡机制研究

目的:探讨芪术方(QZP)诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制。方法:以不同浓度的QZP干预人肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布情况,RT-PCR法检测AKT1、AKT2、Caspase-9mRNA的表达;蛋白质印迹法检测p-AKT、PTEN蛋白表达。结果:QZP能阻滞人肝癌细胞SMMC-7721从G0/G1期进入S期,并诱发细胞凋亡;能抑制AKT1、AKT2表达,提高Caspase-9表达,且跟浓度呈正比例关系。结论:QZP能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡和阻滞细胞周期,其机制可能为促进人肝癌细胞SMMC-7721 PTEN表达的增加,使得PI3K/AKT信号通路激活受阻,同时抑制p-AKT、AKT1、AKT2的表达,激活下游Caspase-9促凋亡分子的表达,从而为PI3K/AKT信号通路介导细胞凋亡这一设想提供了理论依据。     

凉血化瘀方对急性肝损伤大鼠线粒体和内质网应激凋亡途径的影响

目的观察凉血化瘀方对大鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其机制。方法SD健康雄性大鼠50只,随机分为正常对照组,D一氨基半乳糖（GalN）＋脂多糖（LPS）模型组,凉血化瘀方高、中、低剂量治疗组。末次给药后1h除正常组外其余4组按0．1midl0g腹腔注射D—GalN（50mg／mL）加LPS（0．48~tg／mL）,造成大鼠急性肝损伤模型。用HE染色,观察肝组织病理变化;电镜观察肝细胞形态及结构;TUNEL法检测肝细胞凋亡;Westernblot检测细胞凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3、Bcl-2、Chop的表达情况。结果各剂量凉血化瘀方均改善肝组织病理损伤;凉血化瘀方各剂量组细胞凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3、Chop的表达下调（P均〈0．05或0．01）,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,肝细胞形态改善明显。结论凉血化瘀方能抑制肝细胞凋亡。机制主要与调控线粒体和内质网应激途径诱导的细胞凋亡相关。     

芦荟大黄素通过Bax/Caspase-3 信号通路调控肝癌细胞自噬作用研究

目的：探讨芦荟大黄素通过B 淋巴细胞癌-2 基因（Bcl-2） 相关X 蛋白（Bax） /半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） 信号通路调控肝癌细胞自噬的作用。方法：选用肝癌SMMC-7721 细胞,设置SMMC-7721 组、5 氟尿嘧啶组、芦荟大黄素低、高剂量组（低、高剂量组）。5 氟尿嘧啶组加入5 氟尿嘧啶至终浓度为80 μg/mL,低、高剂量组加入芦荟大黄素至终浓度分别为100 μg/mL、200 μg/mL。以上各组每孔设6 个平行样,培养72 h。试验结束后,采用MTT 法测定细胞增殖水平,吖啶橙染色观察细胞自噬水平,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,RT-PCR 法及Western-blot 法测定细胞Bax、Caspase-3 基因和蛋白水平。结果：与SMMC-7721 组比较,其余各组细胞存活率降低（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与低剂量组比较,高剂量组存活率降低（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与5 氟尿嘧啶组比较,低、高剂量组细胞存活率升高（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论：芦荟大黄素能明显抑制肝癌SMMC-7721 细胞增殖,诱导该细胞发生自噬和凋亡,且其机制与芦荟大黄素能促进Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达有关。     

透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR信号通路的影响

目的：研究透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞H3k/Akt/mTOR蛋白表达的影响,探讨透骨草提取物对SKOV-3细胞作用的分子机制.方法：免疫组化法检测透骨草提取物对SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白表达的影响.结果：37.8 μg/mL透骨草提取物作用于SKOV-3细胞24h后,SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白表达明显低于与对照组（P＜0.05）,表明透骨草提取物可下调SK-OV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白的表达.结论：透骨草提取物可能通过PI3k/Akt/mTOR途径抑制SK-OV-3细胞增殖.     

透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的:探讨透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞体外增殖的影响。方法:用不同浓度的透骨草提取物分别处理肿瘤细胞,采用MTT法和集落形成试验观察透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果:3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P<0.05)。3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞集落形成率与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌胞Hela细、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞增殖有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性。     

透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖的影响,探讨透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖影响的分子机制。方法:MTT法检测透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖的影响,荧光显微镜观察透骨草提取物对SWⅢ-C细胞形态的影响,免疫组化方法检测SWⅢ-C细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:6.25~100μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P0.05),而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SWⅢ-C细胞的半数抑制浓度(IC50)为38.36μg/mL。荧光显微镜下可见,38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞,体积缩小,细胞核固缩、呈新月状且边集。38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物可以抑制人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖,诱导SWⅢ-C细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

透骨草提取物的抑菌效果研究

透骨草分别以水和乙醇为溶剂进行提取,再将提取液浓缩后,配成不同浓度的溶液,选择纸片法对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、表面葡萄球菌、福氏杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎球菌、大肠杆菌等进行抑菌试验,结果表明,透骨草不同浓度的水和乙醇提取物上述菌种均有较强的抑制作用。     

白藜芦醇致敏TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡及其相关机制的研究

目的研究白藜芦醇对TRAIL诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响及其机制。方法培养人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照组、TRAIL干预组、Res+TRAIL干预组,进行DNA末端原位标记(TUNEL)染色法作凋亡分析;Western Blot检测白藜芦醇对SMMC-7721细胞Survivn表达的影响。结果对照组SMMC-7721细胞的凋亡指数为(1.78±0.49)%,TRAIL干预组凋亡指数为(9.86±0.53)%,Res+TRAIL干预组中25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度Ros凋亡指数分别为(11.30±0.80)%,(20.89±0.69)%和(27.78±1.88)%。除Res+TRAIL干预组(25μmol/L)与TRAIL干预组比较无显著性差异(P0.05),其余各组之间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。Western Blot测定结果显示:25μmol/L Ros处理组Survivin/β-actin的值与对照组相比无统计学差异(P0.05);50μmol/L和100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较对照组显著降低(P0.01);100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较50μmol/L显著降低(P0.01)。结论 TRAIL对SMMC-7721细胞有凋亡诱导作用;Res对TRAIL诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡有致敏作用,并且这种作用呈剂量依赖关系;其分子机制可能与下调凋亡抑制因子Survivin的表达有关。     

锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡相关蛋白表达的影响

[目的]探讨锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡的影响以及对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。[方法]①体外培养的RPMI8226细胞加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5或1.0μL/mL)培养24h,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡;②体外培养的RPMI8226细胞加入到锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,应用Western Blot检测PARP、MCl-1蛋白表达。[结果]①锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡具有剂量依赖性(P<0.05);②RPMI8226细胞暴露于锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,PARP蛋白水平表达明显增加,但不能调整Mcl-1。[结论]锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡。     

白木通醇提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究白木通乙醇提取物的体外抗肿瘤活性。方法:采用乙醇回流提取制备白木通醇提取物,以MTT法检测白木通醇提取物对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1的生长抑制情况。结果:白木通醇提取物体外对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1有抑制增殖作用。结论:白木通醇提取物具有一定的体外抗肿瘤活性。     

苦参碱和氧化苦参碱对人肝癌细胞株 SMMC-7721凋亡的影响

目的：探讨苦参碱与氧化苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖,并采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测SMMC-7721细胞凋亡。结果苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.50～2.00 mg/ml时,细胞增殖抑制率均逐渐上升,呈药物浓度和作用时间的依赖性;同样浓度下（1.00 mg/ml）,苦参碱增殖抑制作用强于氧化苦参碱[24 h、48 h和72 h时苦参碱组分别为（42.39±0.04）%、（51.69±0.03）%、（78.98±0.05）%,氧化苦参碱组分别为（21.36±0.02）%、（36.16±0.02）%、（61.24±0.13）%;P均＜0.05]。苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.25、0.50、1.00 mg/ml时SMMC-7721细胞凋亡率显著增高;同样时间点（48 h）,苦参碱对细胞凋亡的诱导强于氧化苦参碱[0.25、0.50、1.00 mg/ml时,苦参碱组凋亡率分别为（4.08±0.20）%、（4.32±0.19）%、（9.93±0.18）%,氧化苦参碱组分别为（2.20±0.18）%、（3.08±0.26）%、（9.01±0.20）%;P均＜0.05]。结论苦参碱和氧化苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。