RANTES--与角膜移植排斥反应有关的细胞因子

细胞因子是体内细胞之间相互作用的主要介质,在机体的免疫应答、炎症反应、细胞分化增殖、生长发育等各方面都起着关键作用.RANTES是一种对T细胞、单核细胞和嗜酸性细胞特异趋化的小分子因子,在免疫应答中对杀伤T细胞的活化有重要作用.内皮细胞、成纤维细胞、肾脏、肝脏及角膜基质细胞等也可产生RANTES.在肾、皮肤、角膜移植期间,RANTES蛋白和RANTES mRNA在肾小管上皮、CD8+T细胞及出现排斥反应的角膜匀浆中高表达.它参与增强淋巴细胞的免疫效应和淋巴因子的分泌;诱发整合素变化;调节信号传递;趋化嗜酸性粒细胞并刺激其脱颗粒,诱导嗜碱性粒细胞和肥大细胞释放组织胺;增强抗CD3抗体活化的T细胞与IL-1刺激的内皮细胞之间的粘附能力;影响抗原呈递过程;破坏移植物,参与排斥反应过程.     

人类角膜内皮细胞免疫学特征的初步发现(英文)

目的:评价人类角膜内皮细胞作为免疫细胞的功能。方法:免疫组织化学染色方法测定人类角膜内皮细胞,分别在有无γ-干扰素诱导条件下的HLA-II类抗原、CD40抗原的表达。体外共同培养人类角膜内皮细胞和外周血单个核细胞,FACS测定共同培养体系中活化的T淋巴细胞中CD69的表达。结果:γ-干扰素能够诱导HLA-II类抗原和共同刺激通路中CD40的表达,T淋巴细胞在人类角膜内皮细胞和外周血单个核细胞共同培养系统中被激活。结论:人类角膜内皮细胞作为潜在的抗原递呈细胞参与角膜移植排斥反应。     

生物工程角膜移植术后排斥反应的临床及免疫病理观察:附5例报告

目的：对生物工程角膜移植术后发生免疫排斥反应患者进行激光共焦显微镜观察和免疫病理研究,初步探究生物工程角膜移植排斥反应的发生机制。

方法：回顾性病例研究。纳入2018-09/2020-12我院收治的感染性角膜炎行生物工程角膜移植术后发生免疫排斥患者5例5眼。裂隙灯检查角膜透明度、角膜新生血管; 激光共焦显微镜对角膜进行动态观察,记录免疫排斥反应后角膜上皮下朗格罕氏细胞和基质炎症细胞密度,并以对侧眼作为对照进行统计分析。行同种异体角膜移植时取下生物工程角膜,免疫组织化学染色后对CD4⁺细胞和CD8⁺细胞及炎症细胞的浸润和分布进行观察。

结果：激光共焦显微镜显示,术眼角膜上皮下可见大量活化郎格罕氏细胞,其活化比例与对侧眼比较有差异(χ²=38.29,P<0.001)。基质层大量炎症细胞,与对侧眼比较具有差异(t=32.5,P<0.05)。对生物工程角膜组织进行免疫组织化学染色和HE染色,角膜基质层均可见CD4⁺细胞和CD8⁺细胞,仅1眼角膜基质层可见大量嗜酸性粒细胞。

结论：生物工程角膜移植术后免疫排斥反应经免疫病理证实以T细胞介导的细胞免疫在发病机制中具有重要作用,对异种抗原的超敏反应可能参与其中。     

穿透性角膜移植排斥反应的免疫学机制

尽管角膜具有众多特殊的免疫赦免机制,但CD4+T细胞为主介导的角膜移植排斥反应仍是术后最常见的并发症.本文从高危角膜移植对免疫赦免状态的影响、角膜免疫机制的应答以及排斥反应的预防及治疗几个方面阐述角膜移植排斥反应的最新进展.     

CD86在排斥反应和前房相关免疫偏离过程中的作用

目的检测大鼠角膜共刺激分子CD86（B7—2）的原位表达,探讨CD86分子与角膜移植排斥反应和前房相关免疫偏离（ACAID）过程的关系。方法制作穿透角膜移植排斥反应和同一供体前房内注射脾细胞诱导ACAID的大鼠模型;角膜移植组进行排斥反应指数（RI）评分;ACAID组进行迟发型超敏反应（DTH）评价;采用免疫组织化学的方法检测CD86在角膜中的原位表达（以脾脏的表达为阳性对照）。结果角膜移植组植片均出现不同程度的新生血管、角膜水肿、混浊、增厚;ACAID组角膜透明,房水清,DTH评价术后2周及4周诱导成功率100％;免疫组织化学检测CD86在正常大鼠角膜组织全层无阳性表达,在移植后出现急性排斥反应的大鼠角膜上皮层中有大量阳性细胞表达,在ACAID诱导成功的大鼠角膜中未见阳性细胞表达。结论共刺激分子CD86参与移植后的急性排斥反应,但可能不参与免疫赦免过程。     

正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白与糖尿病视网膜病变

正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白(RANTES)与特异性受体结合，通过对炎症效应细胞的强烈趋化作用以及诱导活化T细胞、调节Thl/Th2平衡和提高抗原特异性抗体应答，引起炎症反应。糖尿病视网膜病变（DR）的发病与很多炎症因素有关，DR患者血清中RANTES的表达上调，视网膜内层RANTES阳性着染，均提示RANTES可能参与DR的发病。这一过程受多种因素的调控，共同促进了DR的发生发展。     

人类永生化角膜内皮细胞的生物学特性

目的探讨人类永生化角膜内皮细胞在免疫反应中的分子表达及其刺激T淋巴细胞活化的能力。方法人类永生化角膜内皮细胞分别培养在含干扰素-γ（IFN-γ）（1000U／mL）和不包含IFN-γ（1000U／mL）的F99和M199培养液中,按照1：1等比例混合并含有5％小牛血清。健康志愿者采集外周血并分离外周血单核细胞（PBMCs）,应用锥虫蓝染色鉴定细胞的完整性和细胞数量。免疫组织化学染色法测定人类永生化角膜内皮细胞分别在有无IFN-γ诱导条件下的HLA—DP、DQ、DR抗原及CD40的表达。同时,体外共同培养人类永生化角膜内皮细胞和PBMCs,荧光活化细胞分类（FACS）法测定活化的T淋巴细胞中CD69的表达。结果IFN-γ能够诱导HLA—DP、DQ、DR抗原和CD40在人类永生化角膜内皮细胞上的阳性表达,表现为细胞膜和细胞质中的红色染色。CD3和CD28抗体预处理的外周血单核细胞中,20％的CD69阳性T淋巴细胞活化,无IFN-γ诱导时有10％阳性T淋巴细胞,而IFN-γ诱导组中,有12％的阳性T淋巴细胞,说明共同培养人类永生化角膜内皮细胞和PBMCs体系中,CD69阳性淋巴细胞数量增加。结论外周血中的T淋巴细胞可以被人类永生化角膜内皮细胞活化,由此人类永生化角膜内皮细胞是具有免疫学特性潜能的抗原递呈细胞。     

角膜移植与B7分子

随着角膜移植手术技巧的改进,移植成功率明显提高,移植术后的免疫排斥反应越来越成为移植失败的主要原因。角膜移植免疫排斥反应是一个复杂的反应过程,受多种因素的调节。致敏T淋巴细胞在角膜移植排斥反应中起着重要的作用,是角膜排斥过程中的主要效应细胞。而T淋巴细胞的激活需要两个信号刺激,即除了通过APC递呈MHC处理过的抗原给抗原特异性T细胞提供第1信号外,还需协同刺激分子作为辅助信号的协同作用,才能使T细胞产生正常的免疫应答。如果缺少协同刺激分子的第2信号,将会导致调节性T细胞的无反应性或特异性免疫耐受。随着研究的深入,协同刺激信号已逐渐成为角膜移植免疫学研究的热点领域。B7分子作为重要的协同刺激分子,在角膜移植免疫排斥反应的发生及其治疗中起着重要作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体转基因治疗鼠角膜移植免疫排斥的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）对角膜移植免疫排斥反应的作用。方法：选择受体BALB/c和供体C57BL/6小鼠,各32只。将其分为正常对照组、可溶性死亡受体5(soluble death receptor5,sDR5)浸泡组、TRAIL的重组腺病毒（Ad-TRAIL）转染组及绿荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的重组腺病毒（Ad-GFP）转染组,每组8只。采用免疫组化技术分别对病毒接种后不同时间的体外角膜内皮细胞中TRAIL蛋白进行检测。将携带有Ad-TRAIL的供体C57BL/6小鼠角膜移植片移植到受体BALB/c小鼠眼上,观察术后角膜免疫排斥反应发生的时间及炎性反应强度,并检测免疫排斥的角膜移植片中CD4^ 及CD8^ T淋巴细胞的浸润情况。采用DNA原位缺口末端标记检测角膜移植片中的凋亡细胞。结果：Ad-TRAIL转染3d,50％以上内皮细胞TRAIL蛋白表达阳性;转染10-14d时,内皮细胞TRAIL蛋白表达程度最高;转染3周后,TRAIL蛋白表达阴性。正常对照组、sDR5浸泡组、Ad-TRAIL转染组及Ad-GFP转染组小鼠角膜移植术后发生免疫排斥反应的平均时间分别为17.1、12.3、22.0及17.4d;4个组间角膜免疫排斥反应时间比较,差异有显著意义（P=0.000）。排斥的角膜组织中可见CD4^ 及CD8^ T淋巴细胞浸润,凋亡细胞呈散在分布。结论：TRAIL能抑制小鼠角膜移植术后免疫排斥反应,延长免疫排斥反应发生的时间。     

白细胞分化抗原在角膜移植排斥反应中的作用

白细胞分化抗原是与一类T细胞识别、粘附及活化有关的细胞膜分子,在同种异体移植免疫排斥反应中发挥重要作用.目前,已知的与角膜移植排斥反应有关的CD分子主要有CD4、CD8、CD28/CTLA4-B7协同刺激分子、CD40-CD154协同刺激分子、CD25、CD69等.本文对近年来该方面的研究进展进行综述.     

共刺激通路阻断剂在角膜移植排斥治疗中的应用

共刺激通路阻断剂是利用分子生物学方法重组免疫调节分子，人为干预免疫应答，以抑制特异性T细胞免疫反应，在诱导移植耐受和治疗自身免疫性疾病中显示了良好的应用前景。本针对角膜组织的免疫学特点及共刺激通路阻断剂如CTLA4-Ig、CD40Ig、抗CD154mAb、CTLA4-FasL在角膜移植排斥治疗中的应用进行综述。     

CD40-CD154共刺激信号及其在角膜移植排斥中的研究进展

角膜移植手术失败的主要原因是T细胞介导的免疫排斥反应，T细胞的充分活化需要共刺激信号的协同作用。研究表明CD40-CD154信号在角膜移植排斥中具有重要意义，阻断该信号可延长移植物的存活、本文就其分子特性、免疫学功能进行了综述，重点探讨了阻断该信号抑制角膜移植排斥反应的效应和机制。     

共刺激通路阻断剂在角膜移植排斥治疗中的应用

共刺激通路阻断剂是利用分子生物学方法重组免疫调节分子,人为干预免疫应答,以抑制特异性T细胞免疫反应,在诱导移植耐受和治疗自身免疫性疾病中显示了良好的应用前景。本文针对角膜组织的免疫学特点及共刺激通路阻断剂如CTLA4 Ig、CD4 0Ig、抗CD15 4mAb、CTLA4 FasL在角膜移植排斥治疗中的应用进行综述。     

异种表面角膜镜片术后外周血T细胞亚群和NK细胞活性的流式细胞仪分析

目的;研究异种表面角膜术后机体对异种角膜的免疫反应,阐明人体对异种角膜的免疫耐受机制。方法：应用流式细胞仪对９例接受异种表面角膜镜片术患者术后外周血Ｔ细胞的分布和自然杀伤细胞的活性进行了分析。结果;术后２个月,Ｔ细胞末被激活,ＮＫ活化程度显著提高,但未激发排斥反应。结论;猴角膜镜片虽可诱发轻微的免疫应答,但未达到增强抗原诱发的Ｔ细胞增殖应答的程度。     

CD28/CTLA4-B7协同刺激分子与角膜移植免疫

角膜移植排斥反应是移植失败的主要原因。致敏T淋巴细胞在角膜移植排斥反应中起着重要的作用，是角膜排斥过程中的主要效应细胞。而T淋巴细胞的激活需要两个信号刺激，即除了通过APC递呈MHC处理过的抗原给抗原特异性T细胞提供第1信号外，还需协同刺激分子作为辅助信号的协同作用。才能使T细胞产生正常的免疫应答。如果缺少协同刺激分子的第2信号，将会导致调节性T细胞的无反应性或特异性免疫耐受。[眼科新进展2005；25（5）：476—478]     

RANTES与SPARC基因在大鼠角膜移植排斥反应中的表达

目的：动态检测激活正常T细胞表达和分泌的调节物（regulated on activation nomal T expressed and secreted,RANTES)和酸性富含胱氨酸分泌型蛋白（secreted protein,acidic and rich in cysteine,SPARC)在异体角膜移植排斥反应中的表达，为角膜移植排斥反应的早期诊断提供依据。方法：首先建立大鼠异体角膜移植动物模型，并设同体角膜移植，角膜碱烧伤模型为对照组，在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA。分别进行逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）扩增，电泳，半定量检测RANTES和SPARCmRNA的表达水平，然后酶切验证表达结果。结果：（1）正常角膜上皮细胞未见RANTES基因表达，可见SPARC基因的低表达；（2）异体角膜移植3天后各时间点均见排斥眼RANTES基因的高表达，同体移植及碱烧伤后未见表达。（3）SPARC在角膜移植及碱烧伤后均见较高水平表达，且与正常细胞表达有显著差异；（4）用RT－PCR方法检测基因变化诊断排斥反应早于裂隙灯检查结果。结论：大鼠角膜上皮RANTESmRNA表达上调与角膜移植排斥反应特异性相关。同时，SPARC在角膜移植排斥反应，碱烧伤和创伤过程中具有高水平表达，依时间顺序，RANTES和SPARC早期高表达早于临床观察的排斥反应至少一周，由此，选择性对细胞因子mRNA扩增，是早期诊断角膜移植排斥反应的有效方法。     

羊膜及培养鸡角膜缘上皮对外周血T细胞CD 69分子的活化研究

目的 研究不同状态的羊膜、鸡角膜浅板层和培养鸡角膜缘上皮细胞，对人外周血T细胞的刺激，以及转化生长因子-β1(TGF—βl)对T细胞表面活化分子CD69表达的影响。方法 随机采取6例健康成人外周血，制备不同状态的羊膜、鸡角膜缘上皮细胞和鸡角膜浅板层并联合羊膜作刺激原，设立阴性对照组及阳性对照组刺激原，将10组刺激原分别与全血混合培养36h，标记检测的抗体，用流式细胞仪分析。结果 未见新鲜羊膜、去上皮新鲜羊膜及保存羊膜对外周血T细胞及CD8^ T细胞表面分子CD69产生活化表达；以羊膜为底物培养鸡角膜缘上皮细胞、鸡角膜浅板层未使人外周血T细胞及CD8^ T细胞亚群表面分子CD69产生活化表达；TGF—β1可明显下调人外周血T细胞及CD8^ T细胞亚群表面分子CD69的活化表达。结论 进一步支持羊膜免疫原性很低的观点；单用或联合羊膜应用培养鸡角膜缘上皮细胞和鸡角膜浅板层对人外周血T细胞及CD8^ T细胞亚群免疫刺激作用很弱；进一步支持TGF-βl有明显免疫抑制作用的观点。     

FOXP3在角膜移植免疫排斥反应中的作用

目的 探讨转录因子FOXP3在角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法 建立角膜移植动物模型.将57只SD大鼠随机分为A组(正常组)、B组和C组(术后0、2、 4、 6、8 d分别球结膜下注射生理盐水和地塞米松注射液).用裂隙灯观察移植排斥情况,RT-PCR检测植片内FOXP3 mRNA的表达,流式细胞术检测移植术前和术后不同时间外周血CD4 CD25 T及CD4 FOXP3 T淋巴细胞的表达.对各组角膜植片进行CD4、CD8、CD25和FOXP3表达的免疫组织化学检测.结果 C组发生排斥反应时间较B组明显延迟(P<0.05),B组术后第11 d角膜植片内FOXP3 mRNA的表达较C组明显减弱(P<0.05),对照组CD4 CD25 T/CD4 T的表达明显高于术前(P<0.05),而CD4 FOXP3 T/CD4 T的表达明显低于术前(P<0.05),植片中CD4、CD8和CD25表达明显,FOXP3有一定的表达.角膜移植排斥反应期间,地塞米松治疗组FOXP3和CD4 FOXP3 T/CD4 T的表达明显增强,CD4 CD25 T/CD4 T的表达明显减弱.结论 FOXP3在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用;增强植片内FOXP3的表达或增加外周血CD4 CD25 Tr淋巴细胞的含量有助于抑制角膜移植免疫排斥反应的发生.     

趋化因子eotaxin、RANTES在鼻息肉组织中的表达

目的探讨趋化因子eotaxin、RANTES在鼻息肉组织中的表达及意义.方法采用鼻息肉患者的鼻息肉组织10例,并以鼻中隔偏曲患者的下鼻甲组织5例作对照,用免疫组织化学的方法原位测定趋化因子eotaxin、RANTES的表达及分布.结果鼻息肉中eotaxin、RANTES呈强表达,主要分布于鼻黏膜上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞及散在分布于间质的炎性细胞中;下鼻甲组织中eotaxin、RANTES呈弱表达或阴性表达.二者差异具有显著性.结论鼻息肉组织中有高表达的eotaxin、RANTES,其与鼻息肉中嗜酸性粒细胞的大量浸润有关.     

角膜移植患者外周血中T细胞CD28分子的表达及其意义

目的　探讨角膜移植患者外周血T细胞及亚群CD2 8分子表达的变化及其意义。方法　于术前1d、术后第1、2、3、4周,应用流式细胞仪检测2 5例角膜移植患者外周血中CD2 8分子表达水平的变化。结果　角膜高血管化植床组患者术后外周血T细胞CD2 8分子表达比角膜无血管化植床组患者明显增高,也比术前明显增高(P <0 .0 1) ;6例发生排斥反应的患者均出于高血管化植床组;术后早期外周血T细胞中以CD4 + 细胞为主。结论　外周血T细胞CD2 8分子表达与角膜移植排斥反应关系密切,检测角膜移植患者外周血中的CD2 8分子表达可更早监测免疫排斥反应的发生