人源化BCMA CAR-T细胞挽救治疗鼠源BCMA CAR-T细胞治疗后再进展的难治多发性骨髓瘤二例

目的探讨人源化B细胞成熟抗原（BCMA）嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）治疗鼠源BCMA CAR-T后疾病再进展的难治性多发性骨髓瘤（RRMM）患者临床疗效及安全性。方法采集两例患者自体外周血单个核细胞，制备BCMA CAR-T细胞，FC方案（氟达拉滨+环磷酰胺）预处理后分别予鼠源/人源化BCMA CAR-T细胞输注。输注后监测CAR-T细胞扩增、细胞因子变化及不良反应。体外试验检测鼠源/人源化BCMA CAR-T转染效率、对MM细胞株的杀伤活力及炎症细胞因子释放水平。结果例1及例2输注鼠源CAR-T后3个月分别为完全缓解（CR）及疾病稳定（SD）。16个月及18个月后出现疾病再进展，且例1出现髓外病变，输注人源化BCMA CAR-T细胞挽救治疗后，分别达到部分缓解（PR）及非常好的部分缓解（VGPR）的疗效，例1髓外病变4个月消失。两例患者在人源化BCMA CAR-T细胞治疗期间，CAR-T细胞体内扩增峰值、体内持续时间均较鼠源输注期间水平升高。人源化BCMA CAR-T治疗期间IL-6、IL-8、IFN-γ、IL-10及TNF-α峰值高于鼠源CAR-T峰值。两例患者输注鼠源CAR-T期间细胞因子释放综合征（CRS）均为1级，无神经系统毒性（ICANS）；人源化CAR-T治疗例1 CRS为3级，ICANS为2级，支持对症治疗后好转，例2 CRS 2级，无ICANS发生。体外试验证实48 h效靶比为1∶1时，人源化BCMA CAR-T、鼠源CAR-T细胞分别与例1、例2患者共培养，BCMA⁺肿瘤细胞残余比例分别为（17.38±5.18）％对（28.27±4.58）％、（13.25±1.62）％对（22.77±1.77）％，人源化BCMA-CAR-T对原代MM的细胞毒作用优于鼠源CAR-T细胞（P<0.001），且IFN-γ、TNF-α及IL-6释放水平均高于鼠源CAR-T细胞（P值均<0.001）。结论鼠源BCMA CAR-T治疗后复发进展的RRMM患者再次输注人源BCMA CAR-T可能有效且安全性可控。     

供者CD19 CAR-T细胞治疗急性B淋巴细胞白血病移植后复发九例临床观察

目的观察供者抗CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）（HI19α-4-1BB-ζ CAR-T）治疗急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发患者的疗效及安全性。方法对2017年7月至2020年5月期间9例allo-HSCT后复发B-ALL患者应用供者抗CD19 CAR-T细胞治疗，FCA方案（氟达拉滨+环磷酰胺+阿糖胞苷）预处理后回输供者CD3⁺T淋巴细胞，其中CAR-T细胞中位数1.79（0.86～3.53）×10⁶/kg，观察疗效和不良反应。结果①输注CAR-T细胞后28～42 d，9例患者均获得MRD阴性的完全缓解。②所有患者发生细胞因子释放综合征（CRS），其中3级2例、2级4例、1级3例；4例患者出现免疫效应细胞相关的神经毒性（ICANS），2级1例、1级3例；1例患者发生急性Ⅳ度移植物抗宿主病（GVHD），上述不良反应经治疗均控制。③4例患者再次复发，中位复发时间为CAR-T细胞治疗后8.6（4.6～19.3）个月，2例化疗后病情进展死亡，1例接受二次移植14个月后复发死亡，1例接受CD22 CAR-T细胞治疗后完全缓解，现6例患者无病存活，植入分析为完全供者嵌合体，中位无白血病生存（LFS）期18.1个月，预期1年、2年LFS率分别为63.5％、50.8％。④中位随访25.1（6.9～36.7）个月，预期2年、2.5年总生存（OS）率分别为87.5％、52.5％。结论供者抗CD19 CAR-T细胞治疗allo-HSCT后复发的B-ALL的缓解率高，不良反应可耐受，半数患者可无病生存2年以上，长期疗效有待进一步观察。     

CD19嵌合抗原受体T细胞靶向B细胞肿瘤细胞株过程中糖皮质激素对其扩增影响的体外研究

目的评估糖皮质激素对CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）靶向杀瘤过程中增殖的影响。方法健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）作为T细胞来源，经CD3磁珠分选及CD19 CAR慢病毒转染制备CD19 CAR-T细胞；采用流式细胞术（FCM）测定CD19 CAR-T细胞转染率及其在培养体系中所占比例；采用CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针试剂标记CD19 CAR-T细胞后测定其荧光强度；LDH细胞毒性检测方法检测不同浓度的糖皮质激素对B细胞肿瘤细胞株杀伤活性的影响。结果①CD19 CAR-T细胞CD19 CAR转染率为（51.34±5.28）％。②24 h后不同剂量甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer及U2932细胞的杀伤活性高于地塞米松，48 h后低浓度（4 mg/ml）甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer、U2932细胞杀伤活性高于低浓度（0.75 mg/ml）地塞米松，而高浓度（12 mg/ml）甲泼尼龙杀伤活性低于高浓度（2.25 mg/ml）地塞米松。但各个时间不同剂量甲泼尼龙组对EHEB细胞的杀伤活性均低于对应时间、剂量的地塞米松。③CD19 CAR-T细胞在不同浓度糖皮质激素作用下的比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD-19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用更明显。④CD19 CAR-T细胞与不同肿瘤细胞共培养体系中，其比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制更明显。结论CD19 CAR-T细胞靶向不同肿瘤细胞株过程中地塞米松对CD19 CAR-T细胞的扩增和增殖抑制作用大于甲泼尼龙，高剂量组该抑制作用更加明显。     

三种人多发性骨髓瘤细胞系移植小鼠模型的建立和比较

目的利用人骨髓瘤细胞系ARP1、MM.1S和NCI-H929建立异种移植模型，并对三种细胞移植后生长周期、肿瘤负荷和生物学特点进行比较。方法将ARP1、MM.1S和NCI-H929细胞分别由皮下或尾静脉植入经¹³⁷Cs照射后的NOD/SCID小鼠，每周观察小鼠的生存情况，监测肿瘤负荷。应用流式细胞术检测小鼠肿瘤组织或骨髓中CD138⁺细胞的比例。采用免疫荧光检测肿瘤组织细胞的CD138和免疫球蛋白轻链表达。ELISA法检测骨髓和外周血中的免疫球蛋白轻链，micro-CT评价骨病变。结果皮下移植ARP1、MM.1S和NCI-H929细胞的小鼠在两周内均可形成局部肿瘤，免疫荧光检测支持浆细胞肿瘤。尾静脉移植后第20天时可在ARP1组小鼠外周血中检测出κ轻链［（8.2±1.0）ng/ml］。尾静脉移植6周左右，ARP1组小鼠出现体重下降、精神萎靡、下肢逐渐瘫痪等表现，骨髓中能检测到人CD138⁺CD38⁺细胞群，予硼替佐米治疗可显著降低肿瘤负荷［（5.7±0.2）％对（21.3±2.1）％，P<0.01］。MM.1S和NCI-H929组小鼠骨髓中未检测到人CD138⁺CD38⁺细胞群。结论ARP1、MM.1S和NCI-H929细胞系构建的小鼠模型可作为MM发病机制及临床研究的良好模型。     

人源化CD19 CAR-T细胞治疗儿童及青少年复发难治急性淋巴细胞白血病患者的疗效及安全性

目的探讨人源化CD19 CAR-T细胞（hCART19s）治疗儿童及青少年复发、难治性急性淋巴细胞白血病（R/R ALL）的疗效及安全性，研究影响其预后的相关因素。方法筛选2016年5月至2021年9月徐州医科大学附属医院入组{"type":"clinical-trial","attrs":{"text":"NCT02782351","term_id":"NCT02782351"}}NCT02782351临床试验中31例25岁以下儿童及青少年R/R ALL患者的临床资料，评价hCART19s在年轻患者中的疗效及安全性。结果hCART19s输注后1个月，短期疗效评估显示27例（87.1％）患者获得完全缓解（CR）或完全缓解兼部分血细胞计数缓解（CRi）。治疗期间，20例（64.5％）患者出现1～2级细胞因子释放综合征（CRS），4例（12.9％）出现3～4级CRS；2例患者出现1级神经系统毒性。中位随访19.3（2.2～62.4）个月，中位无事件生存（EFS）率和总生存（OS）率分别为15.7（95％ CI 8.7～22.5）个月和32.2（95％ CI 10.6～53.9）个月。桥接移植患者EFS和OS率均高于未桥接移植患者［EFS：（75.0±12.5）％对（21.1±9.4）％，P＝0.010；OS：（75.0±12.5）％对（24.6±10.2）％，P＝0.012］；既往治疗线数>3次的患者EFS和OS率明显低于治疗线数≤3次的患者［EFS：0对（49.5±10.4）％，P<0.001；OS：0对（52.0±10.8）％，P<0.001］。截止随访终点，13例患者出现CD19阳性（CD19⁺）复发，1例出现CD19阴性（CD19⁻）复发。结论hCART19s可有效治疗儿童及青少年R/R ALL患者，其严重不良事件发生率较低。桥接移植、治疗线数可对患者长期疗效及预后产生影响。     

初诊多发性骨髓瘤患者高危细胞遗传学异常数目对临床特征及预后的影响

目的探讨初诊多发性骨髓瘤（MM）患者的高危细胞遗传学异常（HRCA）数目对临床特征及预后的影响。方法选取2013年11月至2020年9月江苏省人民医院收治的360例初诊MM患者，应用胞质轻链免疫荧光结合荧光原位免疫杂交（cIg-FISH）技术检测患者的HRCA，并结合患者的临床资料进行分析。结果360例患者中，无HRCA、1种HRCA、2种HRCA、3种HRCA的患者分别为120例（33.3％）、175例（48.6％）、61例（16.9％）、4例（1.1％）。依据HRCA数目将患者分为无HRCA组、1种HRCA组、≥2种HRCA组，三组患者的R-ISS分期、血红蛋白、白蛋白、骨髓浆细胞比例、诱导治疗后疗效差异均有统计学意义（P值均<0.05）。Cox比例风险回归分析显示，髓外病变（P＝0.018）、HRCA≥2种（P＝0.001）、未行自体造血干细胞移植（P<0.001）是影响患者无进展生存的独立危险因素，乳酸脱氢酶≥220 U/L（P<0.001）、HRCA≥2种（P＝0.001）、未行自体造血干细胞移植（P＝0.005）是影响患者总生存的独立危险因素。生存分析显示，无HRCA组、1种HRCA组、≥2种HRCA组患者的中位无进展生存期分别为28、22、14个月（P＝0.005），中位总生存期分别为未达到、60个月、30个月（P＝0.001）。结论HRCA数目≥2是影响初诊MM患者生存的独立危险因素，HRCA数目越多，肿瘤负荷越重，进展及死亡风险越高。     

非IgM型淋巴浆细胞淋巴瘤临床及生物学特征

目的探索非IgM型淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL）患者的临床及生物学特征。方法回顾性收集中国医学科学院血液病医院1993年7月至2020年8月收治的340例LPL患者的临床资料，其中23例为非IgM型LPL组，317例为华氏巨球蛋白血症（WM）组。比较两组患者的临床及生物学特征。结果23例非IgM型LPL患者中，2例分泌单克隆性IgA，14例分泌单克隆性IgG，7例不分泌单克隆性免疫球蛋白。非IgM型LPL和WM患者中位年龄均为62（35～81）岁。与WM组患者相比，非IgM型LPL组患者女性（56.5％对27.3％，P＝0.007）、脾大（60.1％对43.8％，P＝0.100）、结外侵犯（21.7％对12.3％，P＝0.672）比例更高。非IgM型LPL组18例患者进行了MYD88基因相关检测，阳性率55.6％。非IgM型LPL组17例患者接受了治疗，启动治疗的患者比例与WM组患者相当（94.4％对92.7％，P＝0.488）。非IgM型LPL组16例患者进行了疗效评价，一线治疗总体缓解率87.5％，中位随访时间33.9（3.5～125.1）个月，总体中位无进展生存（PFS）、总生存（OS）时间未达到，3年PFS率和OS率分别为71.4％和68.9％。WM组中位PFS、OS时间分别为66.2个月和78.1个月。两组PFS、OS的差异均无统计学意义（P值分别为0.340、0.544）。结论非IgM型LPL与WM患者的临床及生物学特征相似，但非IgM型LPL组女性、结外受累比例更高。非IgM型LPL患者的生存及预后与WM患者相似。     

骨髓浆细胞比例小于10％的新诊断多发性骨髓瘤36例临床特征及预后分析

目的提高对骨髓单克隆浆细胞比例小于10％的新诊断多发性骨髓瘤（NDMM）患者的认识。方法回顾性总结2009年1月至2017年12月北京协和医院36例骨髓浆细胞比例小于10％的NDMM患者的临床特点、实验室检查、治疗反应和预后情况，选择同期诊断的72例骨髓浆细胞比例≥10％的NDMM患者作为对照组，两组患者年龄和性别匹配。结果①在818例NDMM患者中，骨髓浆细胞比例小于10％的患者36例（4.4％），其中国际分期系统（ISS）Ⅲ期11例（30.6％），显著低于对照组患者［45例（62.5％）］（P＝0.002）。与对照组相比，骨髓浆细胞比例小于10％的患者合并髓外病变比例更高（33.3％对5.6％，P<0.001），血清M蛋白中位值更低［1.04（0～50.10）g/L对4.50（0～63.10）g/L，P＝0.016］，24 h尿轻链定量中位值更低（510 mg对2800 mg，P＝0.023）。②骨髓浆细胞比例小于10％患者与对照组患者一线治疗后中位无进展生存（PFS）时间分别为26.4个月和19.9个月（HR＝1.703，95％CI 0.167～0.233，P＝0.002），总生存（OS）时间分别为65.8个月和46.2个月（HR＝2.626，95％CI 0.439～0.541，P＝0.058）。③按照M蛋白水平将研究组分为低肿瘤负荷组和高肿瘤负荷组，中位OS时间分别为66.4个月和24.0个月（HR＝2.349，95％CI 0.603～0.696，P＝0.046），中位PFS时间分别为33.1个月和15.5个月（HR＝1.806，95％CI 0.121～0.399，P＝0.077）。硼替佐米治疗对患者的生存结局无影响。结论骨髓浆细胞比例小于10％的NDMM患者疾病分期较早，肿瘤负荷较低，尽管合并髓外病变比例更高，一线疗效以及总体预后优于骨髓浆细胞比例≥10％的患者。     

89例非霍奇金淋巴瘤相关噬血细胞综合征临床特点和疗效分析

目的回顾性分析不同病理类型非霍奇金淋巴瘤相关噬血细胞综合征（HLH）的临床特征及预后影响因素。方法收集和分析2013年3月至2020年5月复旦大学附属华东医院确诊的89例非霍奇金淋巴瘤相关HLH患者的临床资料，应用Log-rank法对影响预后的因素进行单因素分析，应用Cox比例风险回归模型进行多因素分析。结果89例淋巴瘤相关HLH患者中位生存时间10.2个月，B细胞淋巴瘤患者未达到中位生存时间，T细胞淋巴瘤患者中位生存时间10.2个月，NK细胞淋巴瘤患者中位生存时间为3个月，差异具有统计学意义（P＝0.012）。非霍奇金淋巴瘤病理类型［总生存（OS）：P＝0.041，无进展生存（PFS）：P＝0.015］，美国东部肿瘤协作组评分（OS：P＝0.031，PFS：P＝0.030），是否行造血干细胞移植（OS：P＝0.005，PFS：P＝0.040），是否伴淋巴结肿大（OS：P＝0.007，PFS：P＝0.012），是否伴脾脏肿大（OS：P＝0.276，PFS：P＝0.324）是影响非霍奇金淋巴瘤相关HLH患者OS和PFS的因素。脾脏切除手术能够改善淋巴瘤相关HLH患者的生存，尤其是T细胞淋巴瘤相关HLH。结论不同病理类型非霍奇金淋巴瘤相关HLH患者临床特点相似，但长期生存率和预后影响因素不同。非霍奇金淋巴瘤相关HLH不仅需要联合化疗，B细胞淋巴瘤和NK细胞淋巴瘤相关HLH患者需尽早进行造血干细胞移植，T细胞淋巴瘤相关HLH患者应考虑脾脏切除手术，以改善患者预后。     

血液肿瘤患者回输嵌合抗原受体T细胞后28天内感染病原学和临床特征分析

目的探讨血液肿瘤患者在回输嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）后28 d内感染的发生率、临床和微生物学特征及危险因素。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科成功接受CAR-T细胞输注的170例血液肿瘤患者基线资料以及回输后28 d内发生感染的临床与病原菌特征。使用泊松回归评估基线特征与感染密度的相关性，单因素和多因素Cox比例风险回归模型评估CAR-T细胞回输后感染的高危因素。结果170例患者中急性淋巴细胞白血病（ALL）72例、非霍奇金淋巴瘤（NHL）56例、多发性骨髓瘤（MM）42例，99例患者在28 d内共发生119次感染，累积感染发生率为（58.2±3.8）％；其中细菌感染98次（45.9％），总感染密度为2.01，首次感染发生的中位时间为回输后12（1～18）d。多因素泊松回归显示ALL患者、难治性疾病、既往30 d内感染病史、回输前ANC<0.5×10⁹/L、前期治疗方案≥4种的患者在28 d内与感染密度有更高的相关性；多因素Cox回归显示≥3级细胞因子释放综合征（CRS）是发生感染的独立危险因素（HR＝3.74，95％CI 1.29～5.72，P<0.001）。结论感染是血液病患者CAR-T治疗后常见的并发症之一，不同肿瘤的感染发生率与类型有所差异，但均以细菌感染为主。ALL患者、难治性疾病、既往30天内感染病史、回输前ANC<0.5×10⁹/L、前期治疗方案≥4种与感染密度相关；3级以上CRS是感染发生的独立危险因素。中国临床试验注册中心：ChiCTR-OIC-17011180、ChiCTR1800018143     

自体造血干细胞移植治疗初治多发性骨髓瘤的临床分析

目的评估自体造血干细胞移植（auto-HSCT）对初治多发性骨髓瘤（MM）疗效及生存的影响。方法回顾性分析2008年10月1日至2019年10月1日243例65岁以下接受auto-HSCT的初治MM患者，同时以同期176例≤65岁适合移植但未进行auto-HSCT的初治MM患者作为对照，评估auto-HSCT对患者疗效及生存的影响。为平衡auto-HSCT和非auto-HSCT患者之间各因素的分布，利用倾向性评分匹配技术按照1∶1比例匹配以减少组间的偏差。结果通过倾向性评分匹配分析，共筛选出128例患者（每组64例）。64例患者诱导治疗后接受auto-HSCT，24例（37.5％）获得严格意义的完全缓解（sCR），16例（25.0％）获得完全缓解（CR），15例（23.4％）获得非常好的部分缓解（VGPR），9例（14.1％）获得部分缓解（PR），auto-HSCT组疗效明显优于非auto-HSCT组（P＝0.032）。与非auto-HSCT组相比，auto-HSCT组总生存（OS）和无进展生存（PFS）期明显延长［OS：87.6（95％ CI 57.3～117.9）个月对53.9（95％ CI 36.1～71.7）个月，P＝0.011；PFS：42.2（95％ CI 29.9～54.5）个月对22.4（95％ CI 17.1～27.7）个月，P＝0.007］。多因素分析显示auto-HSCT是OS（HR＝0.448，95％CI 0.260～0.771，P＝0.004）和PFS（HR＝0.446，95％CI 0.280～0.778，P＝0.003）的独立保护因素。结论auto-HSCT可改善适合移植初治MM患者的OS和PFS。     

淋巴瘤合并神经系统副肿瘤综合征11例临床分析

目的探讨淋巴瘤合并神经系统副肿瘤综合征（PNS）患者的临床特点、治疗及预后。方法回顾性分析2012年1月至2021年5月于北京协和医院诊治的11例淋巴瘤合并PNS患者的临床资料。结果11例患者中，男8例，女3例，中位发病年龄为62（16～74）岁。10例患者PNS症状先于淋巴瘤出现，出现PNS症状至诊断淋巴瘤的中位时间为4个月。11例患者中包括霍奇金淋巴瘤1例、B细胞型非霍奇金淋巴瘤8例、外周T细胞淋巴瘤2例。7例患者进行了肿瘤神经抗体的检测，2例阳性，分别为抗Ma2抗体和抗Yo抗体。11例患者中，PNS症状定位于中枢神经系统者3例，定位于周围神经系统者4例，定位于肌肉者3例。11例患者中8例在诊断淋巴瘤前采用以糖皮质激素为主的免疫抑制治疗，中枢神经系统病变及皮肌炎患者对免疫抑制治疗反应良好，周围神经病变患者激素治疗获益不明显。11例患者在诊断淋巴瘤后均采用针对淋巴瘤的化疗。其中9例行疗效评估，7例为完全缓解，1例为疾病稳定，1例为疾病进展。淋巴瘤获得完全缓解的患者PNS症状均获得极大改善。中位随访时间为42（4～95）个月。截至随访终止日期，11例患者中6例存活，3例失访，2例死亡，整组患者中位OS时间未达到。结论PNS可累及神经系统的各个组成部分，可并发于各种类型的淋巴瘤。早期通过化疗达到肿瘤的完全缓解可使多数患者PNS症状改善。     

STAT3基因突变的T细胞大颗粒淋巴细胞白血病临床特征研究

目的探讨携带STAT3基因突变的T细胞大颗粒淋巴细胞白血病（T-LGLL）患者的临床特征，为此类患者的临床管理提供参考。方法回顾性分析2009至2019年就诊于江苏省人民医院的T-LGLL患者的临床资料，比较STAT3突变患者与未突变患者的基线临床数据、治疗反应及生存结局。结果共纳入80例患者，STAT3未突变组66例，STAT3突变组14例（17.5％），其中Y640F突变发生频率最高（42.9％）。STAT3突变组与STAT3未突变组相比，HGB减低（67.5 g/L对82.5 g/L，P＝0.018），中性粒细胞计数减少（0.665×10⁹/L对1.465×10⁹/L，P<0.001），乳酸脱氢酶升高（229 U/L对198 U/L，P＝0.041），铁蛋白升高（402.5 g/L对236.0 g/L，P＝0.029），TCR Vβ亚家族表达率升高（89.2％对65.4％，P＝0.014），具备治疗指征患者比例升高（100％对74％，P＝0.033）。STAT3突变组与未突变组一线免疫抑制治疗的完全缓解率分别为38.5％和32.7％，差异无统计学意义（P＝0.748）。STAT3突变组与未突变组一线免疫抑制治疗的总有效率分别为69.2％和69.4％，差异无统计学意义（P＝1.000）。中位随访63（2～121）个月，两组总生存时间（均未达到）的差异无统计学意义（P＝0.170）。结论STAT3基因突变的T-LGLL患者可能有更高的肿瘤负荷和治疗需求，一线应用免疫抑制剂疗效良好。STAT3基因突变对T-LGLL患者预后的意义尚需进一步验证。     

CART序贯二次异基因造血干细胞移植治疗移植后复发急性B淋巴细胞白血病41例临床分析

目的观察嵌合抗原受体T细胞（CART）序贯二次异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗移植后复发急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的疗效。方法回顾性分析2015年10月至2020年6月在河北燕达陆道培医院接受二次allo-HSCT的41例B-ALL患者的临床资料，入选患者均为移植后骨髓形态学或髓外复发且二次移植前接受CART治疗。结果全部41例患者中男21例、女20例，二次移植时中位年龄为16（3～46）岁。移植后骨髓复发31例（75.6％）、髓外复发5例（12.2％）、骨髓和髓外复发5例（12.2％）。复发后接受CD19-CART治疗35例（85.4％）、CD22-CART治疗2例（4.9％）、CD19-CART联合CD22-CART治疗4例（9.8％）。二次移植后预期3年总生存（OS）率为48.9％（95％ CI 23.0％～70.6％）、无白血病生存（LFS）率为41.8％（95％ CI 17.3％～64.9％），累积复发率（RI）为8.8％（95％ CI 2.9％～26.4％），非复发相关死亡率（NRM）为51.1％（95％ CI 31.2％～83.6％）。首次移植后复发时间≤6个月组（10例）二次移植后1年OS率低于复发时间>6个月组（31例）［45.0％（95％ CI 12.7％～73.5％）对75.0％（95％ CI 51.4％～88.8％），P＝0.017］。结论CART序贯二次allo-HSCT可使部分造血干细胞移植后复发B-ALL患者获得长生存，但NRM较高，移植方案有待进一步改进。     

血管内外周T细胞淋巴瘤的临床病理特征

目的总结血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤的临床病理特点，增加对此类疾病的认识，以减少漏诊、误诊。方法回顾性分析1例原发于淋巴结内的血管内外周T细胞淋巴瘤，非特指型（IVPTCL，NOS）患者的临床及病理学特点，并复习相关文献资料。结果患者，男性，66岁，PET-CT示全身多发淋巴结肿大，活检示正常淋巴结结构消失，淋巴滤泡部分破坏。高倍镜下显示大量血管弥漫增生、扩张，其内见异型淋巴样细胞团局限生长于管腔内，部分浸润大血管壁，细胞中等偏大，胞质中等，核不规则，可见单个或多个核仁，染色质呈凝聚状，部分空亮，核分裂象可见。肿瘤细胞表达CD3、CD43、CD8、GrB、TIA-1及穿孔素等；原位杂交EBV-EBER（−）；TCR基因重排检测（+）。予CHOP联合西达本胺方案化疗，患者不足2个月因感染、心肺功能衰竭死亡。检索相关文献，收集到有明确分型的血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤56例，其中鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤47例（男性27例，女性20例），间变性大细胞淋巴瘤8例（男性3例，女性5例），仅有1例为原发于脑组织的IVPTCL，NOS。本例为第2例报道的IVPTCL，NOS，且为第1例原发于淋巴结内的病例报道。结论血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤为高度侵袭性疾病，目前尚无有效治疗方案。此病累及淋巴结的报道少，尚需积累更多病例进一步研究。     

靶向CLL-1嵌合抗原受体T细胞的构建及其功能验证

目的探索开发一种靶向CLL-1的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）并验证其功能。方法通过流式细胞术检测急性髓系白血病（AML）细胞系和AML原代细胞CLL-1靶点的表达水平。构建CLL-1 CAR载体并制备出相应慢病毒，感染激活后T细胞生产出CAR-T细胞，并通过体外和体内实验验证CLL-1 CAR-T细胞的功能。结果AML细胞系和原代AML细胞中均表达CLL-1。制备的CLL-1 CAR-T细胞转导率为77.82％，在AML细胞系以及AML原代细胞中，CLL-1 CAR-T细胞能明显特异性杀伤表达CLL-1的靶细胞系和原代肿瘤细胞。相对于未转导的T细胞，CLL-1 CAR-T细胞在杀伤靶细胞和原代肿瘤细胞时分泌IL-6、IFN-γ等细胞因子水平更高（P值均<0.001）。在AML人源性异种移植小鼠模型中，相对于未转导的T细胞，CLL-1 CAR-T细胞表现出有效的抗白血病活性并延长小鼠存活时间［未达到对22（95％ CI 19～24）d，P＝0.002］。结论靶向CLL-1的CAR-T细胞成功开发并具有较好的肿瘤杀伤作用。     

靶向CD52嵌合抗原受体T细胞的制备及其抗白血病作用研究

目的构建一种靶向CD52的嵌合抗原受体T细胞（CD52 CAR-T），探索其对CD52⁺白血病的治疗效果。方法应用分子克隆技术构建以CD52为抗原结合区的CD52 scFv、4-1BB为共刺激分子的二代CAR-T细胞。慢病毒载体包装后感染T细胞，制备CD52 CAR-T细胞，通过流式细胞术检测CD52 CAR-T细胞CD4、CD8细胞亚群及其分化状态。通过体外杀伤实验、脱颗粒实验及细胞因子的释放等功能实验，观察CD52 CAR-T细胞对CD52⁺白血病细胞的特异性细胞毒作用。结果①成功构建了pCDH-CD52 scFv-CD8α-4-1BB-CD3ζ-GFP表达载体，感染人T细胞，获得靶向CD52的CAR-T细胞。②感染CD52 CAR表达载体的第6天，T细胞中表达CD52的细胞可被清除［CD52 CAR-T组CD52⁺ T细胞为（4.48±4.99）％，Vector-T组为（56.58±19.8）％，P＝0.011］。③CD52 CAR-T的自我杀伤不会影响T细胞的增殖，培养后期CD52 CAR-T组的增殖速度高于Vector-T组。④T细胞表型检测发现CD52 CAR可以促进CAR-T细胞向中心记忆T细胞及效应记忆T细胞分化，减少CAR-T细胞向终末效应细胞分化。⑤CD52 CAR-T细胞与HuT78-19t及MOLT4-19t靶细胞以效靶比1∶1共培养24 h，HuT78-19t细胞可被清除，而对MOLT4-19t细胞无明显杀伤作用［（2.66±1.60）％对（56.66％±5.74）％，P<0.001］。⑥脱颗粒实验显示，HuT78-19t细胞对CD52 CAR-T细胞的激活作用显著高于MOLT4-19t细胞［（57.34±11.25）％对（13.06±4.23）％，P<0.001］。⑦CD52 CAR-T与HuT78-19t细胞共培养48 h上清中细胞因子分泌水平［IFN-γ（3706±226）pg/ml、TNF-α（1732±560）pg/ml］远高于MOLT4-19t细胞组［IFN-γ（1577±846）pg/ml、TNF-α（74±12）pg/ml］（P值均<0.01）。结论该研究成功制备了具有抗白血病作用的CD52 CAR-T细胞，为进一步的靶向CD52的免疫治疗奠定了基础。     

LymphGen基因分型在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的分布特征及预后价值验证

目的了解LymphGen基因分型在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）人群中的分布特征并验证其预后价值。方法收集2014年6月至2020年12月在新疆维吾尔自治区人民医院资料完整155例初诊DLBCL患者的临床资料及石蜡包埋肿瘤组织标本，从肿瘤组织中提取DNA，应用二代测序技术检测475种基因突变情况，研究LymphGen基因分型在新疆DLBCL人群及不同细胞起源（COO）分型患者中的分布情况及对无进展生存（PFS）及总生存（OS）的影响。结果①155患者中 105例（67.7％）能进行基因分型，其中MCD型14例（9.0％），BN2型26例（16.8％），N1型10例（6.5％），EZB型8例（5.2％），A53型27例（17.4％），ST2型20例（12.9％）。②各基因亚型在不同COO分型中分布不同（P＝0.021），生发中心型（GCB）组中以ST2为主（28.8％），非生发中心型（non-GCB）组中以A53及MCD型为主（35.8％、17.0％），BN2型在两组中均较多分布（23.1％、26.4％）。③不同基因亚型PFS、OS差异有统计学意义（P值分别为0.031、0.005）：N1型2年PFS、OS率仅为（21.3±18.4）％，A53型3年PFS、OS率分别为（60.9±11.3）％、（46.8±10.9）％。④MCD型3年PFS、OS率最优，但5年PFS、OS率较差。⑤LymphGen基因分型预测OS的受试者工作特征曲线（ROC曲线）曲线下面积为0.66，具有一定的区分度。结论LymphGen基因分型在DLBCL人群中分布与以往报道有差异，LymphGen基因分型对DLBCL患者预后判断有一定价值。     

伴TP53基因突变急性B淋巴细胞白血病的临床特征及预后分析

目的研究TP53基因突变阳性急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者的临床特征及预后。方法回顾性分析2016年1月至2019年12月在苏州大学附属第一医院治疗的479例初诊B-ALL患者的临床资料。结果479例B-ALL患者中，34例（7.1％）TP53基因突变阳性，共检测到36个TP53突变，其中移码基因突变10个（27.8％），错义突变23个（63.9％），无义突变3个（8.3％）。共有34个（94.4％）突变位于DNA结合结构域（第5～8号外显子）。伴TP53基因突变组患者平均突变基因数目（2.3个）与无TP53基因突变组（1.1个）差异有统计学意义（P<0.001）。Ph阳性和Ph-like阳性患者在TP53基因突变阴性组中的比例显著高于TP53突变阳性组，差异有统计学意义（P<0.001）。TP53基因突变阴性组3年总生存（OS）率、无事件生存（EFS）率显著高于TP53基因突变阳性组（χ²＝4.694，P＝0.030；χ²＝5.080，P＝0.024）。多因素分析中，1个疗程诱导化疗未完全缓解（CR）是影响患者OS的独立预后不良因素。34例伴TP53基因突变患者中16例在第1次CR（CR₁）状态行异基因造血干细胞移植（allo-HSCT），2例移植后复发输注供者来源的抗CD19嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞后获CR₂。11例巩固化疗过程中复发的TP53基因突变患者中6例行抗CD19 CAR-T细胞治疗，4例获得缓解且微小残留病（MRD）转阴，缓解后桥接allo-HSCT，其中2例持续CR。结论伴TP53基因突变B-ALL患者中错义突变最常见，突变位点主要分布于DNA结合结构域。伴TP53基因突变的B-ALL患者复发后CAR-T细胞治疗清除MRD后应尽早行allo-HSCT。伴TP53基因突变的B-ALL患者在allo-HSCT后仍有较高的复发率，输注供者来源的CAR-T细胞能获得较好的持续缓解。     

非EB病毒病原体所致感染相关噬血细胞综合征的临床特征及预后

目的探讨非EB病毒病原体所致感染相关噬血细胞综合征（IAHLH）患者的临床特征及预后。方法收集2015年1月至2021年3月首都医科大学附属北京友谊医院确诊的48例非EB病毒病原体所致IAHLH患者的临床资料，对患者的临床特征、治疗、疗效及预后进行回顾性分析。结果共纳入48例患者，男28例，女20例，中位年龄34.5（2.0～74.0）岁，导致IAHLH的病原体中，病毒16例（33.3％），细菌17例（35.4％），寄生虫13例（27.1％），真菌2例（4.2％），患者发病至确诊噬血细胞综合征（HLH）的中位时间为40（10～160）d，发病至确诊为IAHLH的中位时间为67（23～270）d。患者起病时临床表现如下：发热48例（100％），脾大34例（70.8％），血细胞减低38例（79.1％），铁蛋白升高45例（93.8％），甘油三酯升高7例（14.6％），纤维蛋白原降低17例（35.4％），NK细胞活性减低26例（59.1％），可溶性CD25升高35例（74.5％）。25例（52.1％）患者起病时伴淋巴结肿大。明确导致HLH的病原体后尽快减停细胞毒药物及激素并应用有效的抗感染治疗，36例（75.0％）患者获得完全缓解，93.3％（14/15）的寄生虫及真菌所致IAHLH患者获得了病情缓解，细菌及病毒相关IAHLH仅有66.7％（22/33）的缓解率。患者5年预期总生存（OS）率为72.3％（95％ CI 50.3％～69.8％），多因素分析显示，总胆红素大于2倍正常上限（OR＝20.0，95％ CI 1.1～378.3，P＝0.046）及诱发HLH的病原体感染未控制（OR＝19.9，95％ CI 2.9～134.5，P＝0.002）为预后不良因素。结论非EB病毒病原体所致IAHLH预后较好，诊断后应尽快减停细胞毒药物及激素，有效控制病原体感染为关键性治疗。