一氧化氮在急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤中的作用

目的　探讨一氧化氮 (NO)在急性坏死性胰腺炎 (ANP)肺损伤中的作用。　方法12 0只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组、精氨酸 (L Arg)组、N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)组、混合预处理组 ,每组 2 4只。逆行性胰胆管注射 3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞 (AM) ,检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)水平、AM分泌肿瘤坏死因子α(TNFα) ,NO水平及TNFαmRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况。　结果　ANP大鼠肺损伤随着病情进展而逐渐加重 ;肺组织MPO及BALF蛋白含量逐渐升高 ,12h达最高值 ,分别为 (10 8± 0 6 )U/g和 (2 0 11 0± 10 5 5 ) μg/ml;AM分泌TNFα ,NO水平逐渐升高 ,至 6h达到高峰 ,分别为 (16 2 4 2± 14 9 2 ) pg/ml和 (88 8± 6 5 )μmol/L ,12h又回落。AMTNFαmRNA、iNOSmRNA的表达情况与TNFα,NO的变化趋势相似。L Arg、L NAME、混合预处理三组各指标变化趋势与ANP组相似 ,各组与正常对照组相比 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。L Arg、L NAME组与ANP组相比 ,L Arg组各指标均升高 ,L NAME组各指标均降低 ,差异亦有显著性 (P <0 0 5 )。　结论　由iNOS介导产生的NO的过量生成促进了ANP所致的肺损伤。加入外源性     

大承气汤对急性出血坏死性胰腺炎急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞的影响

目的观察大承气汤对急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）并发急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡巨噬细胞的影响。方法SD大鼠经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠（1ml／kg,0．1ml／min）诱发AHNP,AHNP＋DT组在造模后30min用大承气汤（10ml／kg）灌胃;AHNP＋DEX组在造模后30min经尾静脉地塞米松（O．5ms／100g）注射;AHNP＋DT＋DEX组则于造模后30min同时给予大承气汤（10ml／kg）灌胃和地塞米松（0．5mg／100g）尾静脉注射,比较3、6、12、24h各个时间段不同治疗方法支气管灌洗液肺泡巨噬细胞数量、吞噬功能和肺干湿比变化。结果AHNP＋DT组和AHNP＋DT＋DEX组两组肺泡巨噬细胞的数量明显减少、吞噬功能减弱,与模型组和AHNP＋DEX组比较,P〈0．05,差异有显著性。结论大承气汤能抑制肺泡巨噬细胞的吞噬活性、改善急性肺损伤。     

肿瘤坏死因子-α对大鼠坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的　探讨肺内肿瘤坏死因子 α(TNF α)在大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)所致肺损伤中的作用。方法　将大鼠分为正常对照、ANP和TNF α抗体预处理 3组 ,后两组又分为 1、3、6、12h 4组 ,每组 6只。胰胆管注入 3 %牛磺酸钠诱发ANP。肺灌洗获得巨噬细胞 ,培养后检测TNF α水平、肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量 ,取肺组织测髓过氧化物酶 (MPO)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测巨噬细胞TNF αmRNA表达。结果　ANP和TNF α抗体预处理组各指标均较正常对照升高 (P <0 .0 5 )。TNF α水平与MPO及BALF蛋白含量呈正相关 (P <0 .0 1) ,TNF αmRNA的表达及TNF α水平与肺损害程度呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　肺泡巨噬细胞TNF α的过表达与ANP大鼠所致肺损伤有密切关系。     

大鼠重症急性胰腺炎肺泡巨噬细胞的活化和调控作用

目的 观察巨噬细胞中p38蛋白活化激酶对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的影响.方法 假手术组仅胆胰管注射生理盐水0.1 ml/100 g;5%的牛黄胆酸(0.1 ml/100 g)逆行注射到SD大鼠的胆胰管内,造成重症急性胰腺炎(SAP)分为SAP组和SB03580组(SB203580,0.5 mg/kg,静注).在6 h剖杀大鼠,查腹水,抽血检测血清淀粉酶(AMS)和肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6[酶联免疫吸附试验(ELISA)法];同时分别离心收集全肺肺泡巨噬细胞,免疫组织化学检测肺组织及其巨噬细胞中p38 MAPK的表达,同时检测肺组织中的TNF-α和IL-6;光镜下检测胰腺组织损害.结果 SAP组及SB组中AMS在6 h分别为(4865.12±890.35)IU/L和(2918.24±614.58)IU/L,差异有统计学意义.血清TNF-α分别为(106.59±43.71)ng/L和(76.43±38.43)ng/L;IL-6是(2203.76±640.85)ng/L和(1254.76±459.35)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01).肺组织中的TNF-α和IL-6的升高与血中的一致.光镜下,胰腺组织内可见炎细胞浸润、充血、水肿和坏死;在SAP组中肺组织及其巨噬细胞中p38 MAPK强烈表达,TNF-α和IL-6的表达一致,SB治疗组表达下降.结论 TNF-α和IL-6在重症急性胰腺炎肺损伤起着重要作用;肺泡巨噬细胞中p38 MAPK表达对TNF-α和IL-6的转录和合成起重要作用.     

中药胰必清对急性出血坏死性胰腺炎急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞的作用

目的 观察TLR4、核转录因子(NF)-κB在急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠肺泡巨嗜细胞的表达及应用胰必清(YBQ)治疗前后的变化.方法 72只SD大鼠平均随机分为3组:A组(假手术对照组)、B组(AHNP)及C组(AHNP+YBQ),开腹胰胆管注入5%牛磺胆酸钠法建立大鼠AHNP模型,分别于术后3、6、12、24 h处死大鼠,逆转录·聚合酶链反应(RT-PCR)法、免疫荧光共聚焦法分别检测支气管灌洗液肺泡巨噬细胞中TLR4 mRNA、NF-KB表达水平的变化,肺组织病理检查行病理学评分.结果 C组肺泡巨噬细胞3、6、12、24 h TLR4 mRNA表达水平结果为0.54、0.65、0.65、0.54,NF.KB免疫荧光检测结果为49.54、68.67、74.27、59.23,与肺组织的病理学评分相一致,随时间的延长而逐渐升高,6～12 h左右达高峰,与时间明显相关,与B组比较明显降低,差异有统计学意义(P《0.05).结论 中药胰必清能通过调节肺泡巨噬细胞中TLR4的基因表达,进一步调节NF-KB的活化来改善AHNP-ALI.     

外源性一氧化氮对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响

目的 研究外源性一氧化氮（ＮＯ）对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响。方法 健康雄性ＳＤ大鼠随机分为空白组（Ａ组）和实验组,分别接受生理盐水１ｍｌ或内毒素５ｍｇ／ｋｇ腹腔注射,６ｈ后大鼠在麻醉下行肺灌洗术。实验组的肺泡巨噬细胞取出后孵育时又 分为对照组（不加硝普钠,Ｂ组）和加硝普钠０．１ｍｍｏｌ／Ｌ组（Ｃ组）,分别测定各组巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬和杀伤率,超氧阴离子（Ｏ２＾－）释放量,肿瘤坏死     

粘附分子基因表达在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的　研究急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA的表达情况及其与肺损伤的关系。方法　将 33只Wistar大鼠随机分为正常对照组和胰腺炎不同时间点 (1、4、12和 2 4h)各组 ,用逆行胰胆管注射方法制备ANP模型。采用逆转录聚合酶链反应法检测ANP大鼠肺组织中ICAM 1mRNA表达 ,同时观察肺组织髓过氧化物酶 (MPO)及病理改变。结果造模ANP 1h后大鼠肺组织中ICAM 1mRNA(0 82± 0 0 3)比正常对照组 (0 41± 0 0 4)的表达水平高 (P <0 0 5 ) ,并持续升高至 12h及 2 4h(分别为 1 17± 0 0 5及 1 11± 0 0 4) ,同时伴有肺组织病理损害 ,其严重程度与ICAM 1mRNA表达、MPO及肺MPO与ICAM 1mRNA表达均呈正相关 ,相关系数分别为0 85、0 85及 0 96 (P <0 0 5 )。结论　ANP大鼠早期肺组织中ICAM 1mRNA呈过度表达 ,肺损伤严重程度与ICAM 1mRNA表达的高低有关。肺组织中ICAM 1过度表达及中性粒细胞浸润是ANP肺损害发生的原因之一。     

诱导型一氧化氮合成酶在大鼠坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞的表达

目的通过研究诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)中的表达,明确其在ANP所致肺损伤中的作用。方法72只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,每组24只。逆行性胰胆管注射3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取AM,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平,AM分泌iNOS水平及iNOSmRNA表达情况,并行肺组织学检查。结果ANP大鼠AM iNOS的表达随时间进展而增强,同时肺损伤也逐渐加重。L-NAME组则恰好相反,与ANP组相比有显著性差异(P<0.05)。结论ANP发生后,肺泡巨噬细胞iNOS表达增强,并促进肺损伤。     

核因子-κB活化在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

通过急性坏死性胰腺炎 (ANP)模型 ,探讨核因子 κB(NF κB )活化在大鼠ANP肺损伤发病机制中的作用。一、材料与方法1.实验动物分组与模型 :雄性Wistar大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,随机分成 3组 ,对照组、ANP组、NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,每组 30只。大鼠禁食 2 4h ,自由饮水。 2 5 %戊巴比妥钠腹腔注射麻醉 ,胰管末端逆行穿刺 ,近肝门及十二指肠乳头处夹闭胰管两端 ,1ml/kg体重胰管内缓慢匀速注入 5 %牛磺胆酸钠。对照组胰管内注入等量0 9%生理盐水。模型制备后 ,PDTC组立即尾静脉缓慢匀速注入PDTC 10mg/…     

银杏叶提取物对急性坏死性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响

目的:探讨银杏叶提取物(GBE)对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤时肺泡巨噬细胞功能的影响。方法:48只成年SD大鼠随机分为对照组、ANP组、治疗组,每组再分为6h、12h组。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。治疗组在胰腺炎模型基础上予GBE干预,对照组、ANP组给予等量生理盐水。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)结合特异性荧光探针DAF-FM-DA检测肺泡巨噬细胞内一氧化氮(NO)、ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及MIF水平。结果:治疗组肺泡巨噬细胞内NO水平、TNF-α、MIF分泌水平显著低于ANP组(P<0.01)。结论:银杏提取物通过抑制肺泡巨噬细胞内NO生成,降低TNF-α、MIF分泌活性,从而改善ANP肺损伤时肺泡巨噬细胞的功能。     

一氧化氮对急性坏死性胰腺炎大鼠肺源性肿瘤坏死因子α的影响

目的探讨一氧化氮(NO)对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺源性肿瘤坏死因子α水平的影响。方法96只成年SD大鼠被随机分为正常对照组、ANP组、精氨酸(L-Arg)组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,每组24只。逆行性胰胆管注射3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞(AM),检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子α(TNFα)水平及TNFαmRNA的表达。结果随着病情进展,肺组织MPO及BALF蛋白含量在12h达最高值,分别为(10·8±0·6)U/g和(2011±106)μg/ml。TNFα至6h达到(1624±149)pg/ml。AMTNFαmRNA表达至6h达到高峰,为1·127±0·069。L-Arg、L-NAME组各指标变化趋势与ANP组相似,MPO及BALF蛋白含量至12h达最高值,分别为(13·58±0·56)U/g、(9·42±0·74)U/g和(3276±267)μg/ml、(1875±71)μg/ml,AM分泌TNFα含量至6h达到高峰,分别为(2276±222)pg/ml、(956±106)pg/ml,各组与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0·05)。与ANP组相比,L-Arg组各指标均升高,L-NAME组各指标均降低,差异亦有统计学意义(P<0·05)。结论NO可促进ANP大鼠AM分泌TNFα,并加重肺损伤。     

氯化钆对急性坏死性胰腺炎肺损伤的防护作用

目的　探讨氯化钆 (GdCl3 )在急性坏死性胰腺炎 (ANP)肺损伤中的作用。方法　将 90只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组、GdCl3 处理组、ANPGdCl3 预处理组、ANPGdCl3 治疗组。每组 18只。逆行性胰胆管注射 3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞 (AM ) ,行血气分析 ,检测肺湿 /干重比值、支气管肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)水平、AM分泌肿瘤坏死因子α(TNFα)、一氧化氮 (NO)水平。以琼脂糖凝胶电泳分析、透射电镜观察和流式细胞仪碘化丙啶 (PI)单染色法检测AM凋亡情况。并行肺组织病理学检查。结果　GdCl3 处理组各指标与正常对照组相比差异无显著意义 (P >0 0 5 )。ANPGdCl3 预处理组和ANPGdCl3 治疗组各项指标均升高 ,与正常对照组相比差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,但与ANP组相比升高不明显 ,两组相比差异也有显著意义 (P <0 0 5 )。ANPGdCl3 预处理组和ANPGdCl3 治疗组AM琼脂糖凝胶电泳均可见DNA梯状条带 ,透射电镜观察可见典型凋亡形态学特征 ,流式细胞仪DNA直方图可见G1峰左侧出现典型亚二倍体细胞群峰型 ,而另 3组则均未出现。结论　GdCl3可能通过诱导ANP大鼠AM发生凋亡来减轻ANP所致的肺损伤     

急性胰腺炎大鼠脑组织TNF-α mRNA和蛋白表达及其意义

目的 探讨急性胰腺炎大鼠脑组织中TNF-α mRNA和蛋白的表达及其对胰性脑病发病机制的意义.方法 应用5%、1%的牛磺胆酸钠分别诱导急性坏死性胰腺炎(ANP)和急性水肿性胰腺炎(AEP)大鼠模型,同时设立假手术组,每组16只.分别于模型诱导后12 h,以酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血液和脑脊液标本中TNF-α的含量,RT-PCR方法测定脑组织TNF-α mRNA的表达,Western-Blot测定TNF-α蛋白的表达水平,免疫组化观察TNF-α蛋白的定位表达.结果 ANP组、AEP组和假手术组的血清TNF-α水平分别为1065.6pg/ml、577.5pg/ml和543.8pg/ml,脑脊液TNF-α水平分别为820.9pg/ml、307.4pg/ml和481.6pg/ml.ANP组血清和脑脊液TNF-α水平同AEP组和假手术组相比,差异均有显著性(P＜0.05).ANP组脑组织TNF-α mRNA和蛋白的表达明显增强.ANP组TNF-α蛋白的表达定位于大脑小胶质细胞和神经元细胞.结论 在ANP病程中,大鼠脑组织可能是细胞因子过度表达的来源之一;脑组织中,TNF-α主要由小胶质细胞和神经元细胞表达;TNF-α的过度表达可能是ANP早期脑髓鞘损伤的原因之一.     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺损伤的影响

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺损伤与核因子-κB(NF-κB)活化、胰腺细胞凋亡的关系及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对胰腺损伤的影响.方法 33只Wistar大鼠分为正常对照、盐水对照和胰腺炎组.以3.5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管制作ANP模型,于造模前、后1 h应用NAC,12 h后取材,采用凝胶电泳迁移率实验测定胰腺组织NF-κB活性、改良TUNEL法检测细胞凋亡.同时观察血淀粉酶、脂肪酶、胰腺组织湿/干重比率及病理改变. 结果盐水对照组NF-κB活性很低(2.00±0.33),胰腺炎组NF-κB明显活化(6.03±0.41),造模前使用NAC抑制NF-κB活性(3.28±0.42),降低淀粉酶及胰腺湿/干重比率,促进胰腺细胞凋亡(P<0.05).NF-κB活化与凋亡呈负相关(r=-0.96,P<0.01),与胰腺损伤病理呈正相关(r=0.63,P<0.01);胰腺损伤病理分级与凋亡呈负相关(r=-0.98,P<0.01).结论 NAC可能通过抑制胰腺NF-κB活化、促进胰腺细胞凋亡,减轻胰腺损伤.     

PGE2对大鼠急性胰腺炎肺超微结构与TNF-α、IL-10水平的影响

目的：探讨前列腺素E2（PGE2）免疫干预对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肿瘤坏死因子（TNF－α）和白介素－10（IL－10）与肺组织超微结构改变的影响。方法：SD大鼠91只分成4组：手术对照组（n=7）、ANP组、PGE2前干预组和PGE2后干预组(每组n=28），后3组又随机分1h、3h、6h、12h时段，每时段7只。大鼠ANP模型用5％牛磺胆酸钠诱导制作，PGE2前干预组和后干预组分别在ANP模型制作前2h和模型完成时肌肉注射150μg/kg和150μg/kg PGE2。采用ELISA检测各时段大鼠血清的TNF－α与IL－10含量，观察PGE2前干预、后干预对大鼠血清TNF-α与IL－10含量动态变化，同时随机取NAP组和PGE2干预组6h和12h时段肺组织，电镜下观察超微结构改变。结果：PGE2前、后干预组IL－10含量峰值分别在3h和6h时段，比ANP组显升高（P＜0．001），所有时段（1h、3h、6h、12h）TNF－α均比ANP组大鼠显降低（P＜0．001），IL－10上升幅度随PGE2给予的早晚而不同，TNF－α亦随IL－10上升而下降。PGE2免疫干预组与ANP组相比，6h时段的肺组织病变有所减轻，12h时段明显改善。结论：PGE2在上调大鼠血清IL－10、降低TNF－α含量的同时，使肺组织损伤得到改善。     

炎症介质与急性坏死性胰腺炎大鼠的肺损伤

目的　探讨急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠并发肺损伤的机制。方法　逆行性胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠建立ANP大鼠模型。观察肺组织学改变,测定血中淀粉酶、磷脂酶A2（PLA