MG132诱导人血管内皮细胞凋亡及对p53表达的影响

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人血管脐静脉内皮细胞(ECV-304)细胞的致凋亡作用及其对凋亡相关基因p53表达的影响。方法采用两个浓度(2μmol/L,5μmol/L)的蛋白酶体抑制剂MG132处理ECV-304细胞24 h;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞化学检测p53蛋白表达。结果对照组ECV-304细胞凋亡率低于5%,在2μmol/L MG132作用下,凋亡率为11.3%±1.2%,MG132浓度升至5μmol/L时,细胞凋亡率增至44.5%±5.3%;免疫组化检测p53蛋白表达水平升高。结论蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导血管内皮细胞凋亡,其机制可能与MG132上调p53基因表达有关。     

肝癌组织中PTEN的表达及其与p53、细胞增殖和凋亡的关系

目的:研究肝细胞肝癌(HCC)组织中PTEN的表达与细胞增殖及凋亡的关系及其与p53的相关性,明确PTEN是否参与HCC的发生、发展. 方法:利用免疫组织化学技术检测47例经术后病理学证实的HCC组织、42例癌旁肝组织及10例健康肝组织中PTEN,p53,增殖性核抗原(PCNA)的表达;用TUNEL法检测HCC中细胞凋亡水平. 结果:10例正常肝组织、42例癌旁肝组织中PTEN全部阳性表达(100%);53%(25/47)的HCC组织PTEN蛋白表达缺失. PTEN的表达与肝癌细胞的增殖指数和凋亡指数无相关性,与肝癌的浸润转移具有相关性,与p53的表达有相关性. 结论:肿瘤抑制基因PTEN和p53有相互作用. PTEN蛋白表达缺失可能在HCC的进展过程中发挥主要作用.     

鼻NK/T细胞淋巴瘤生存素基因表达与细胞凋亡和增殖的关系

目的 :探讨凋亡抑制基因生存素 (Survivin)在鼻NK/T细胞淋巴瘤中的表达 ,及其与细胞凋亡和增殖的关系。方法 :应用TdT介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)技术和免疫组织化学链霉素抗生物素 过氧化酶连接法 (SP法 )检测 2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织和 10例反应性增生淋巴组织中的细胞凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA)和Sur vivin基因表达水平。结果 :2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中Survivin表达阳性 17例 (6 8.0 0 % ) ,10例反应性增生淋巴组织中Survivin不表达 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。 2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤中平均凋亡指数 (AI)为 1.92 %± 0 .86 % ,平均增殖指数 (PI)为 4 1.4 8%± 5 .10 % ;Survivin表达阳性组AI(1.71%± 0 .6 1% )显著低于阴性组 (2 .2 9%± 0 .72 % ) ,PI(4 3.35 %± 4 .80 % )显著高于阴性组 (37.5 0 %± 2 .90 % ) ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结果 :鼻NK/T细胞淋巴瘤中Survivin基因表达上调 ,Survivin基因可能通过肿瘤细胞凋亡的抑制和细胞增殖参与NK/T细胞淋巴瘤的发生发展。     

p53、Bcl—2基因调控与细胞凋亡在肾母细胞瘤发生发展中的作用

目的 分析肾母细胞瘤细胞凋亡和p53、Bcl-2蛋白表达的相关性及其与肾母细胞发生、组织学类型的关系,探讨p53、Bcl－2基因调控与细胞凋亡在肾母细胞瘤发生发展中的作用。方法 对30例肾母细胞瘤用DNA末端标记（TUNEL）方法检测细胞凋亡,免疫组化LSAB法检测p53、Bcl-2蛋白的表达。结果30例肾母细胞瘤凋亡指数（AI）为1‰-400‰,平均100‰,p53、Bcl-2的表达指数PEI、BEI分别为0－300‰、1‰-360‰,平均值分别为82‰、90‰。统计分析表明细胞凋亡和p53与肾母细胞瘤组织学类型有显著相关性,细胞凋亡与p53呈负相关,Bcl-2与 组织与类型、细胞凋亡、p53均无关。结论 p53在调节肾母细胞瘤细胞凋亡中有较为重要的作用,p53基因突变可能与机体清除后肾胚胎细胞的调亡机制丧失,生后残存的胚胎组织发生肾母细胞瘤有关。细胞凋亡和p53突变与肾母细胞瘤的细胞分化、恶性程度有关,PEI、AI的检测可为了解肾母细胞瘤的发病机制和判断预后提供实验依据。     

乳腺癌p53蛋白、增殖细胞核抗原表达与预后的关系

目的　探讨p53蛋白增殖细胞核抗原 (PCNA)在乳腺浸润性导管癌中的表达及预后的关系。方法　应用免疫细胞ABC法对乳腺癌p53和PCNA的表达进行检测。结果　死亡组p53蛋白阳性表达率 (94 2 8% ,33/ 35)和PCNA指数 (PI) (55 .5 %± 2 5 .47% )明显高于存活组的p53蛋白阳性表达率 (46 .1 5 % ,30 / 65)和PI(30 .8%±2 0 .0 8% )。临床分期和淋巴结转移有显著关系。结论　p53蛋白与PCNA间有显著的正相关 ,两者对患者预后有重要意义     

p53、c—myc基因蛋白产物及增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的同步检测

目的 为弄清p53、c-myc基因和细胞增殖活性与肝细胞癌（HCC）发生发展的关系。方法 应用免疫组化方法检测了30例肝细胞癌（HCC）组织中p53、c-myc基因蛋白产物以及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果 p53、c-myc基因表达率分别为46.7%和56.7%。p53在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织的表达率有递增趋势。而c-myc基因在三级间的表达率却无明显区别，p35与c-myc基因的同时表达率为23.3% ,PCNA阳性细胞的分布在HCC中呈四种类型：散在型、边缘型、镶嵌型和弥漫型，PCNA标记指数与HCC的分级相关，p53阳性的HCC中PCNALI为53.8±24.3，阴性的为33.1±15.7(P<0.05);c-myc基因表达阳性与阴性的PCNALI分别为38.7±22.9、42.8±21.6(P>0.05)。结论 p53、c-myc基因均与HCC的发生、发展有关，但两之间无依存关系；伴有p53基因突变的HCC中癌细胞增生活跃，恶性程度高。     

Bcl-2过表达抑制乙醇诱导的HCC-9204肝癌细胞凋亡

目的　探讨凋亡相关基因 bcl- 2过表达对乙醇诱导的肝细胞癌 (HCC)细胞凋亡的影响 .方法　将含有人 bcl- 2 c DNA的逆转录病毒表达载体 p DOR- SB质粒转染到不表达 bcl- 2蛋白的人肝癌细胞系 HCC- 92 0 4细胞中 ,用免疫组织化学 ABC法检测bcl- 2蛋白的表达情况 .连续克隆化直至获得 10 0 %表达 bcl- 2蛋白的单克隆细胞株 ,并进行流式细胞术检测 .用 6%乙醇分别作用于上述细胞 6 h后 ,用 MTT法和 TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡发生程度 .结果　转染 p DOR- SB的细胞大部分为bcl- 2蛋白表达阳性 ,而转染 p DOR空载体或未转染…     

细胞凋亡、PCNA、p53和Fas与肝细胞癌临床病理特征关系的研究

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中细胞凋亡、增殖及其相关调控因子p53和Fas表达特征与HCC临床病理的关系.方法分别以末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术(TUNEL)和S-P免疫组化方法检测35例人HCC与其癌旁组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及p53、Fas的表达特征,并结合临床病理资料进行统计学分析.结果细胞凋亡指数(AI)、PCNA指数(LI)、p53和Fas表达与HCC的性别、年龄及肿瘤大小无显著性差异;AI、p53和Fas表达与HCC的组织学类型间也无显著差异(P＞0.05);LI与HCC组织学类型有关:实体型较梁状型和腺样型明显增高(P＜0.01);随Edmondson分级、TNM分期增加,AI逐渐减少,而LI及p53表达强度则逐级增高,Fas表达无显著变化(P＞0.05).结论 HCC的恶性程度与细胞凋亡指数呈负相关,而与PCNA指数呈正相关.HCC细胞凋亡为p53依赖型,p53基因高突变、Fas表达的下调的肝癌组织其分化程度较低,提示预后不佳.     

肝细胞癌细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达的研究

目的：探讨肝细胞癌细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达特征与HCC分化状态的关系。方法：分别以末端脱氧核苷酸转移酶（TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术（TUNEL）和SP免疫组化方法检测35例人HCC与其癌旁组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原（PCNA）及p53,Fas的表达特征，并结合临床资料进行分析。结果：凋亡细胞在HCC组织中呈散在分布，其凋亡细胞指数显著低于癌旁组织，而PCNA指数明显于癌旁组织，在HCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中，凋亡细胞指数分别为0．53，0．42，0．20，0．21。PCNA指数分别为0．06，0．41，0．63，0．80，均存在显著差异；HCC组的p53表达随Edmondson分级呈递增现象。而Fas均呈低水平表达，结论：HCC的分化程度与细胞凋亡指数呈正相关，而与PCNA指数呈负相关，HCC细胞凋亡为p53依赖型，p53基因高突变，Fas表达的下调的肝癌组织其恶性程度较高，提示预后不佳。     

SCLC与NSCLC基因调控的差异--凋亡调控基因p53、Bcl-2表达的差异及意义

目的　研究小细胞肺癌 (SCLC)与非小细胞肺癌 (NSCLC)中p53与Bcl- 2基因表达的差异及意义 ,探讨SCLC与NSCLC凋亡基因调控的异同。方法　免疫组化方法检测 87例NSCLC与 2 0例SCLC中p53、Bcl- 2蛋白的表达 ,TUNEL法检测凋亡指数 (AI)。结果　SCLC的AI=5 .6± 4 .8,NSCLC的AI=3 .3± 4 .5 ,腺癌AI=2 .3± 1 .7,腺鳞癌AI=2 .7± 2 .8,SCLC的AI值与NSCLC无显著差异 (P >0 .0 5) ,但显著高于腺癌和腺鳞癌 (P <0 0 5)。SCLC与NSCLC中Bcl- 2表达率分别为 80 .0 % (1 6 2 0 )和 2 8.7% (2 5 87) ,有显著差异 (P <0 .0 1 ) ;SCLC与NSCLC中p53表达率分别为 60 .0 % (1 2 2 0 )和 63 .2 % (55 87) ,差异无显著性 (P >0 .0 5)。SCLC中Bcl- 2阳性组AI=3 .6± 3 .5 ,阴性组AI =8.6± 4 .2 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。结论　SCLC细胞凋亡率与NSCLC无显著差异 ,但显著高于腺癌和腺鳞癌。SCLC与NSCLC凋亡基因调控存在显著不同 :Bcl- 2在SCLC中高表达 ,是SCLC凋亡调控的关键蛋白质 ,但在NSCLC中表达率低下 ,在其凋亡调控中不起主要作用 ;p53参与SCLC与NSCLC的凋亡调控 ,其异常表达在肺癌发生中是保守过程