应用胶固素酶联免疫吸附试验测定流行性出血热病人循环免疫复合物

<正> 流行性出血热(简称流热)的免疫学发病机理,多数报导认为与免疫复合物有关。诸家应用~(125)IC_(1Q)结合试验,PEG 沉淀光密度测定方法,竞争性补体结果试验     

用Clq结合试验测定乳癌患者的免疫复合物

有人证明,带瘤动物的血清在体外能封闭细胞免疫.癌肿患者的血清中也有类似的封闭因子.动物实验证明这种封闭活性可能与抗原——抗体复合物有关.有人以~(125)I标记补体Clq与免疫复合物结合,用放射免疫沉淀试验证明肿瘤患者血清中Clq结合值增高.本文目的在于探讨检测血清Clq能否作为鉴别正常人、乳房良性肿瘤和乳癌的手段,并了解乳癌患者Clq结合活性与癌胚抗原(CEA)和抗球蛋白活性之间的关系.     

麻风病人血清和病损皮肤中免疫复合物的检测

<正> 麻风是一个古老的疾病,近年来,许多学者从免疫学角度进行研究,初步认为麻风是慢性感染引起的机体免疫紊乱。我们用~(125)I-Clq结合实验法和免疫荧光技术,对麻风病人血清可溶性免疫复合物和病损局部组织固着的免疫复合物进行了检测,现报告如下。材料与方法 1.被检血清:住院病人临床诊断为瘤型麻风者20例为检查对象;同时以20名正常人(献血员)做阴性对照,19例系统性红斑狼疮活动期病人做阳性对照。静脉采血2ml,室温凝固(不超过2小时),分离血清,-20℃保存。 2.可溶性免疫复合物测定:用~(125)I-Clq结合实验法。Clq的提取、标记、测定均根据Zubler资料,按本实验室方法进行。 3.麻凤病人病损皮肤的免疫荧光检查:参照McCluskey方法进行。无菌取病损皮肤组织制成4微米厚的组织切片,用磷酸缓冲液(PBS,     

人血小板低密度脂蛋白受体的探讨

用~(125)Ⅰ标记(Iodogen法)低密度脂蛋白(~(125)Ⅰ-LDL),其比放射性为(1.94-1.0)×10~4Bq/μg,标记率为98.44±0.9％。~(125)Ⅰ-LDL与洗涤法分离的血小板结合,37°C下孵育60 min,结合达到平衡,不需二价阳离子存在。未标记的LDL可抑制~(125)Ⅰ-LDL与血小板的结合,而纤维蛋白原,白蛋白等无此作用。每个血小板约可结合3504±735个LDL分子,具有饱和性,解离常数Kd值为(4 5±2.1)×10~(-9) mol/L。高密度脂蛋白能抑制结合。结果提示血小板有LDL特异性受体,LDL有可能通过受体介导影响血小板功能。     

用葡萄球菌蛋白A(SPA)菌体试剂免疫沉淀诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)靶抗原(摘要)

本文参考Kessler和Howard等报道的方法,用金黄色葡萄球菌CowanI株(SPA)菌体试剂免疫沉淀诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)表面抗原,获得了较为满意的结果。 用乳过氧化物酶催化的~(125)Ⅰ标记诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)表面抗原,后将用Tri-ton X-100提取出的标记抗原和SPA菌体试剂在室温孵育60分钟;后取100μl~(125)Ⅰ标记的诺氏疟原虫表面抗原加入到100μl的兔抗诺氏疟原虫免疫血清中,在4℃孵育18小时,使其形成免疫复合物。在室温下将100μl预先用TNT缓冲液(0.15M NaCl、10mM Tris,pH7.5,0.25%TritonX-100)洗过3次的10%SPA菌     

中国医学科学院1983年主要科研进展

现将1983年重点科研进展情况汇总如下: 一、计划生育的研究: (一)棉酚的研究 1.首次建立了用高压液相分离加电化学方法测定体液中微量棉酚的方法。还建立了~(125)Ⅰ棉酚一组氨酸、~(125)Ⅰ棉酚-白蛋白标记测定法,并获得了标记率和结合率的初步结果。     

人低密度脂蛋白~(125)I标记——一氯化碘法

本文报告了利用-氯化碘法对人血清低密度脂蛋白(LDL)进行~(125)Ⅰ碘化标记,结果表明,~(125)Ⅰ-LDL的比放射性为(61～185)×10~(-6)μCi/ng LDL,脂质标记率<1%,游离~(125)Ⅰ含量在0.43～1.90%之间,~(125)Ⅰ-LDL浓度为0.5～1.0mg/ml.~(125)Ⅰ-LDL的生物活性经受体实验证实与天然脂蛋白无差异,基本符合用于脂蛋白代谢研究的要求.本法具有反应温和,不易损伤脂蛋白,脂质标记率低,设备简单等优点,为进一步进行脂蛋白受体的研究提供了可行的方法.     

流行性出血热免疫学发病机制的探讨

我们采用~(125)I—CIq结合实验法,检查12例流行性出血热极期患者血清含有的可溶性免疫复合物,其中11例病人的~(125)I—CIq结合率超过正常人的±2SD值,与34例系统性红斑狼疮病人血清~(125)I—CIq结合率相似。用免疫荧光方法检查流行性出血热病人的淋巴细胞表面IgG,12例极期病人的淋巴细胞表面IgG阳性率高于正常人的±2SD值,与系统性红斑狼疮病人相似。而流行性出血热的恢复期病人淋巴细胞表面IgG检出的阳性率下降,与正常人无异。尸检肾脏标本中也证明有IgG的沉着,说明是免疫复合物的沉着,于此对免疫复合物与发病机理的关系做了讨论。     

用放射免疫法测定血小板表面相关IgG的临床应用

近年来,国外在检测血小板表面相关IgG(PAIgG)的技术方面有很大进展,采用的方法很多。我们利用葡萄球菌蛋白A能和IgG结合的特性,应用~(125)Ⅰ标记葡萄球菌蛋白A(简称~(125)Ⅰ-SPA)的方法检测血小板表面相关IgG,并观察了正常人59例和各种疾     

多肽激素的酶促~(125)碘化及其保存稳定性研究(简报)

多肽激素的~(125)碘化标记对放射免疫分析、放射性受体分析、细胞膜抗原及免疫学研究均有重要意义。1963年Greenwood等创用氯胺T~(125)碘化法,国内外目前仍沿用,但氯胺T氧化作用较强,常使标记的多肽激素的生物活性和免疫活性受到损伤。七十年代中期国外学者进行乳过氧化物酶(Lactoproxidase,简称LPO)酶促~(125)碘化法,由于此法作用温和,故能使标记的多肽激素保持较好的生物及免疫活性,提高了标记激素的保存稳定性。我室在1972～1978年中应用氯胺T法~(125)碘化多肽激素实践的基础上,于1978～1981年起先后完成五种多肽激素的酶促~(125)碘化,并结合国内目前供应的~(125)碘     

应用胶固素酶联免疫吸附试验测定流行性出血热病人循环免疫复合物

流行性出血热(简称流热)的免疫学发病机理,多数报导认为与免疫复合物有关。诸家应用~(125)IC_(19)。结合试验,PEG沉淀光密度测定方法,竞争性补体结合试验等方法,均证明病人血清中有可溶性免疫复合物,但其含量各家报导不一(1、2、3)。本室采用胶固素酶联免疫吸附试验(K—ELISA)检测流热病人的循环复合物(CIC),现将结果报告如下: 材料和方法试验方法系按曹祖华氏报导的方法     

大鼠肝细胞膜高密度脂蛋白受体的研究

作者以~(125)碘标记不含apoE的人HDL_3为配体,采用简便的聚乙二醇(PEG)沉淀分离法,建立了纯化的大鼠肝细胞膜HDL受体分析法。最终浓度为12.5％的PEG能有效沉淀~(125)I-HDL_3-膜受体复合物,总结合中94％以上为特异性结合(非特异性结合在有过量25倍的非标记HDL_3存在下     

补体及补体受体缺陷与免疫复合物疾病的研究进展

对于免疫复合物的深入研究,70年代中期已认识到补体及补体受体的缺陷与免疫复合物(IC)疾病之间的关系。补体自身通过与抗原(Ag)-抗体(Ab)复合物结合而改变了复合物的结构和生物活性;对IC清除有重要作用的C_3受体(CR_1)的特征和结构也已得到明确的描述。现就近年来有关IC的清除和IC清除障碍的病理因素作简要综述。     

流行性出血热尸检组织中的免疫复合物

流行性出血热(EHF)发病原理中有许多学说,其中免疫复合物引起发病最受人们重视。有人从血液中发现大量免疫复合物,并分离出特异性抗体及病毒抗原[罗瑞德,等.中华传染病杂志 1985; 3(2):86～88],但从组织中检出含有病毒抗原、IgG或 IgM及补体成分的可靠的免疫复合物极为少见。1 材料和方法 选用本教研室收集的EHF尸检20例,以抗病毒G_2 抗原和N抗原单克隆抗体及羊抗人IgG,IgM,C_3及Cl_q单抗为第一抗体,用我们改     

健康家兔血清中总补体量的正常值

近来,发现补体含量的变化与许多疾病有关。为探讨免疫复合物病的发病机理,在建立急性实验性血清病动物模型时,我们曾观察了免疫家兔循环免疫复合物(CIC)和血清中总补体量的动态变化),血清中总补体量在免疫复合物(IC)形成时期急骤下降,是判断动物血清病的一项重要指标。同时我们用CH_(50)试验测定了225只健康家兔血清中总补体量正常值范围,现报告如下。     

小儿病毒性肝炎血清免疫复合物沉淀抑制能力的研究

血清补体与免疫复合物之间关系密切,新近发现补体有防止免疫复合物沉淀的作用,该作用被称为免疫复合物沉淀抑制能力(ICPIC)。众所周知,乙型肝炎的肝外表现与免疫复合物在周围组织沉积有关。不少作者证实各型肝炎的血清中存在免疫复合物,并同时有补体成分的改变。本文探讨了肝炎患儿的血清补体ICPIC状况及与补体成分,血清循     

固相放免方法测定IgG类风湿因子

本文报道了用固相放免技术测定IgG类风湿因子的方法和临床测定结果。本法以聚苯乙烯微量细胞培养板为载体,以兔IgG为抗原,以~(125)Ⅰ标记的提纯兔抗人IgG作为抗抗体,检测类风湿因子。30名献血员血清,~(125)Ⅰ标记抗体结合率为0.54～1.74%,平均数为0.90±1.4%。而57例类风湿性关节炎患者为1.39～18.28%,均数为5.57±1.72%,两组比较差别显著(P<0.01)。     

重组人内皮抑素的125Ⅰ标记及其体内代谢

目的探讨重组人内皮抑素(rhEndo)的125Ⅰ标记及其标记物(125Ⅰ-rhEndo)的生物学活性和体内药代动力学.方法采用小剂量Iodogen多次重复标记法标记rhEndo,细胞增殖抑制试验和亲和力试验检测125Ⅰ-rhEndo活性,并研究其在大鼠体内的药代动力学.结果0.5μg Iodogen 3次重复标记rhEndo的标记率可达84%,放射化学纯度(94.7±2.44)%.125Ⅰ-rhEndo抑制bFGF诱导内皮细胞增殖的作用与未标记rhEndo相当,且能与其竞争结合内皮细胞表面受体.大鼠单次股静脉注射125Ⅰ-rhEndo 2 μg后,血药浓度-时间曲线符合两室模型,T1/2α为(0.45±0.12)h,T1/2β为(19.53±3.41)h,AUC为(484.57±137.99)ng·h·mL-1.结论小剂量Iodogen多次重复125Ⅰ标记不影响rhEndo蛋白的生物学活性.125Ⅰ-rhEndo大鼠体内单次静脉注射的药代动力学符合两室模型,半衰期约19 h.125Ⅰ-rhEndo标记为肿瘤的靶向显像和治疗奠定了基础.     

高甘油三酯-极低密度脂蛋白在大鼠腹腔巨噬细胞结合部位的初步探讨

从高甘油三酯(HTG)大鼠动物模型中获取纯度较高、并有生物活性的高甘油三酯-极低密度脂蛋白(HTG-VLDL)。用乳过氧化物酶法~(121)Ⅰ标记HTG-VLDL,并将此~(125)Ⅰ-HTG-VLDL与正常大鼠腹腔巨噬细胞在体外共同培养,测得~(125)I-HTG-VLDL在该细胞的吸收,降解的时间曲线、剂量曲线及竞争抑制曲线。实验结果表明:~(125)Ⅰ-HTG-VLDL与鼠腹腔巨噬细胞的结合与降解具有时间饱和性、剂量饱和性及竞争抑制现象。提示鼠腹腔巨噬细胞表面可能存在能与HTG-VLDL结合并具受体性质的结合部位。HTG-VLDL可能通过受体途径的介导进入鼠腹腔巨噬细胞中代谢。     

重组人内皮抑素的^125I标记及其体内代谢

目的探讨重组人内皮抑素(rhEndo)的125Ⅰ标记及其标记物(125Ⅰ-rhEndo)的生物学活性和体内药代动力学.方法采用小剂量Iodogen多次重复标记法标记rhEndo,细胞增殖抑制试验和亲和力试验检测125Ⅰ-rhEndo活性,并研究其在大鼠体内的药代动力学.结果0.5μg Iodogen 3次重复标记rhEndo的标记率可达84%,放射化学纯度(94.7±2.44)%.125Ⅰ-rhEndo抑制bFGF诱导内皮细胞增殖的作用与未标记rhEndo相当,且能与其竞争结合内皮细胞表面受体.大鼠单次股静脉注射125Ⅰ-rhEndo 2 μg后,血药浓度-时间曲线符合两室模型,T1/2α为(0.45±0.12)h,T1/2β为(19.53±3.41)h,AUC为(484.57±137.99)ng·h·mL-1.结论小剂量Iodogen多次重复125Ⅰ标记不影响rhEndo蛋白的生物学活性.125Ⅰ-rhEndo大鼠体内单次静脉注射的药代动力学符合两室模型,半衰期约19 h.125Ⅰ-rhEndo标记为肿瘤的靶向显像和治疗奠定了基础.