纤维蛋白对肾小球内皮细胞表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物的作用

目的：观察体外培养人肾小球内皮细胞（GEC）表面原位形成的纤维蛋白对GEC表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物（PA／PAI）的影响。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）,酶谱分析法与反向酶谱法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对GEC表达tPA,uPA gn PAI-1r 作用,纤维蛋白平板法检测纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应,结果：纤维蛋白能够明显促进tPA,uPA与PAI－1的mRNA表达上调,无血清RPMI 1640培养下的GEC几乎检测不到PAI知性,但可检测到PAI－1的活性。纤维蛋白能够浓度依赖性刺激GEC tPA与uPA活性增加以及PAI01的活性增加,呈浓度依赖性与时间依赖性,相同剂量的纤维蛋白原与纤维蛋白的作用相似,放线菌酮与放线菌素D均可抑制纤维蛋白上调GEC表达tPA,uPA与PAI的作用,纤维蛋白平板法显示,纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应是以升高PA活性为主,其活性能够被抑肽酶完全阻断。结论：肾脏局部毛细血[管内沉积的纤维蛋白可能通过对GEC PA／PAI系统的调节发挥其病理作用。     

探讨高血压患者治疗前后纤溶状态及胰岛素水平变化的临床意义

目的了解高血压患者经恰那林治疗前后纤溶及胰岛素抵抗水平，对二者与高血压疾病的关系进行初步探讨。方法采用ELISA、发色底物法以及RIA方法分别检测高血压患者治疗前后血浆纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）含量、活性及胰岛素水平的变化。结果与治疗前比较高血压治疗后t-PA和PAI-1水平均有下降趋势，t-PA活性上升，PAI-1活性下降，胰岛素水平降低，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论部分高血压患者常有胰岛素水平的增高并伴随PAI-1活性增高。提示在这些高血压患者治疗中应重视对高胰岛素血症的控制。     

霉酚酸酯对肾大部切除大鼠肾脏的保护作用

目的 观察霉酚酸酯在肾大部切除大鼠模型中对残肾的保护作用并探讨其可能的机制。方法 采用5/6肾大部切除模型,分别给予霉酚酸酯(MMF,15 mg·kg-1·d-1),福辛普利(25mg·kg-1·d-1)及两药合用。8周后观察大鼠24 h尿蛋白、BUN、Scr以及肾脏病理改变。并用免疫组化观察了胶原Ⅳ、纤连蛋白(FN)、增殖细胞核抗原(PCNA)和巨噬细胞趋化蛋白1(MCP-1)。用RT-PCR的方法测定了肾皮质中转化生长因子β1(TGF-β1)和组织性金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA的表达。结果 两药均能减少尿蛋白,降低BUN和Scr,合用组减少最为明显。病理上,肾大部切除组可见基质增生,肾小球硬化,用药后病变减轻。其中应用MMF者可见PCNA和MCP-1明显减少。结论 在5/6肾大部切除模型中,MMF能通过抑制肾脏中的异常增殖、减少MCP-1的表达,下调TGF-β1和TIMP-1,减少细胞外基质,减少尿蛋白,从而明显减轻肾脏的损害。     

胆囊癌患者凝血及纤溶分子标志物的变化研究

目的　观察胆囊癌患者凝血及纤溶分子标志物的变化 ,以探索其发生、发展与止凝血的关系。方法　用 EL ISA方法检测 30例正常对照组、34例胆囊炎、胆石症患者和 31例胆囊癌患者的尿激酶型纤溶酶原激活物 (u- PA)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (u- PAR)、纤溶酶 -抗纤溶酶复合物 (PAP)、组织因子 (TF)、组织因子途径抑制物 (TEPI)和凝血酶 -抗凝血酶复合物 (TAT)的血浆含量。结果　胆囊癌患者手术前 u- PA(0 .6 4± 0 .2 7)、u- PAR(0 .4 5± 0 .2 3)、PAP(0 .5 8± 0 .16 )、TF(4 9±13)、TAT(4 .7± 1.8)值均高于正常对照组、胆石症和胆囊炎组 (P均 <0 .0 5 ) ;术后 TF(35± 8)、TAT(3.8± 2 .3)、PAP(0 .38± 0 .18)已有所下降 ,但仍高于正常对照组和胆石症和胆囊炎组 (P均 <0 .0 5 ) ,手术前后 TEPI变化与正常对照组、胆石症和胆囊炎组无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;凡有局部浸润、肿瘤周淋巴结转移、其它脏器转移的胆囊患者 ,其 u- PA、u- PAR较无这些改变的患者有不同程度的升高 (P均 <0 .0 1)。结论　胆囊癌患者存在着明显的止凝血功能紊乱 ,u- PA、u- PAR可以作为胆囊癌患者判断预后的辅助指标     

颅脑损伤后凝血、纤溶系统变化的研究

急性颅脑损伤后常引起凝血、纤溶系统的改变,严重者可造成DIC[1].凝血系统的改变可严重影响颅脑损伤的预后,已越来越为大家所重视.     

托拉塞米对5/6肾切除大鼠肾脏的保护作用与机制

随着血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）的应用和“醛固酮逃逸”现象的提出，醛固酮在各疾病中的作用和多位点阻断肾素-血管紧张素．醛固酮系统（RAAS）的观念越来越受到人们的重视。托拉塞米是一个吡啶磺酰脲类新型袢利尿剂，除用于治疗水肿性疾病外，还具备抑制醛固酮与其受体结合及抑制醛固酮分泌的作用，兼有呋塞米和螺内酯的功效。我们采用5／6肾切除方法制作大鼠慢性肾衰竭模型，给予托拉塞米进行干预，观察其对大鼠残余肾脏功能及病理的影响，并初步探讨其机制，为托拉塞米的临床应用提供实验依据。     

高糖对肾小球内皮细胞与组织型纤溶酶原激活物结合力的影响

糖尿病肾病（ＤＮ）是导致慢性肾功能不全的常见原因之一,其发生机制仍不清楚。组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）由内皮细胞合成及释放。ｔ－ＰＡ可与内皮细胞结合后提高其催化活性并免受其抑制物灭活,可见ｔ－ＰＡ在内皮细胞上结合多少直接影响其催化活性,从而影响纤溶和裂解细胞外基质（ＥＣＭ）的活性[１］。这些异常不仅与动脉粥样硬化,而且与肾小球硬化密切相关,目前尚未见报道。 一、材料与方法 １．肾小球内皮细胞的培养和鉴定：剥离肾包膜,剪碎肾皮质于１００目筛网研磨后,最后在２００目筛网上收集肾小球,镜下观察为９９…     

肾病综合征患者血浆中t-PA/PAI-1的变化及糖皮质激素治疗的影响

目的:探讨肾病综合征患者糖皮质激素治疗前后不同阶段组织型纤溶酶原激活物(t-PA)与纤溶酶原激活物抑制物-1(PA1-1)的变化.方法:分为健康对照组、肾病综合征组,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血浆中t-PA和PAI-1水平的变化.结果:t-PA的血浆水平在各组之间无统计学差异(P>0.05);PAI-1的水平在肾病综合征组较正常明显升高(P<0.05),激素治疗1周后进一步升高(P<0.05),治疗4周后比1周组有显著下降(P<0.05),但较正常仍高(P<0.05).结论:t-PA/PAI-1平衡的紊乱,可能参与了肾病综合征的损伤机制,经糖皮质激素治疗后高凝状态短期内无明显改善.     

蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响

目的:探讨蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质uPA、PAI-1蛋白及mRNA表达的影响。方法:采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化大鼠模型。实验分组为正常组、模型组、假手术组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组,实验周期为25 d。采用免疫组织化学和原位杂交方法,分别检测肾组织uPA、PAI-1蛋白及其mRNA表达,使用图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果:模型组肾小管间质中PAI-1蛋白及mRNA的表达均明显高于正常组和假手术组(P<0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达则与正常组和假手术组差异无统计学意义(P>0.05);虫草组和不同剂量的蝉花菌丝组的PAI-1蛋白及mRNA表达量明显低于模型组(P<0.05～0.01);而uPA蛋白及mRNA的表达量则明显高于模型组(P<0.05～0.01);蝉花菌丝大剂量组的PAI-1蛋白及mRNA的表达量又较蝉花小剂量组和虫草组为低(P<0.05～0.01)。说明蝉花菌丝能下调UUO大鼠肾小管间质PAI-1蛋白及mRNA的高表达,上调UUO大鼠uPA蛋白及mRNA的低表达,并呈明显的量效依赖关系。结论:本研究表明蝉花菌丝通过调节UUO大鼠肾小管间质uPA/PAI-1蛋白及mRNA的表达紊乱而发挥抗肾间质纤维化的药理作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物对高糖诱导大鼠系膜细胞增殖及表型转化的影响及其机制

目的 通过体外培养大鼠系膜细胞（MC）,观察尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）对高糖环境下MC增殖及表型转化的影响及其可能的信号转导机制。 方法 体外培养大鼠MC,分为4组：对照组、高糖组、高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组。MTT法检测各组MC增殖情况。流式细胞仪分析各组MC细胞周期改变。Western印迹法检测各组MC表达CDK2与p27Kip1变化,并测定MC中信号蛋白Akt的活性。激光共聚焦显微镜检测各组MC中α-SMA表达方式及表达量变化。 结果 培养24 h后高糖组MC增殖程度较对照组显著增加（P < 0.01）,渥曼青霉素与uPA组可明显抑制细胞增殖（P < 0.01）。高糖刺激Akt活性,渥曼青霉素与uPA组Akt活性均较高糖组显著降低（均P < 0.01）。高糖组MC培养24 h后, p27Kip1蛋白表达较对照组显著减少（P < 0.01）;高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组p27Kip1蛋白表达均较高糖组显著增加（均P < 0.01）;各组CDK2蛋白表达无明显变化。高糖组MC培养24 h后,胞质中α-SMA表达较对照组显著增加（P < 0.01）,并在核周出现聚集;高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组α-SMA表达量均较高糖组显著减少（均P < 0.01）,其分布与对照组无显著差异。 结论 uPA可能通过抑制Akt信号分子活性,上调p27Kip1表达,拮抗高糖所致MC增殖与表型转化。     

人精子tPA和PAI-1的测定及精子上tPA的定位研究

目的 :人精子上组织型纤溶酶原原激活因子 (tPA)的分布及精子中tPA、纤溶酶激活物抑制因子 (PAI 1)活性研究。　方法 :应用底物显色法测定 6 1例人精子中tPA及其PAI 1的活性 ,其中正常对照组 2 0例 (已婚生育男子 ,经 2次精液分析正常者 ) ,少弱畸精症组 41例 ;用免疫组化法进行精子表面膜上tPA定位分析。　结果 :正常对照组精子中tPA和PAI 1的活性分别为 (0 2 4± 0 0 4)IU/ 10 6精子和 (0 2 3± 0 0 3)AU/ 10 6精子 ,少弱畸精症组的tPA和PAI 1活性分别为 (0 12± 0 0 3)IU/ 10 6精子和 (0 35± 0 0 9)AU/ 10 6精子 ,经分析二者之间有极显著差异 (P <0 0 1) ;tPA主要分布在精子的顶体膜、赤道板、颈部和尾部。　结论 :正常健康人精子中的tPA和PAI 1活性有别于弱精症者 ,提示精子上的tPA和PAI 1活性可能与精子活力、精子形态以及精子数有关 ;精子的顶体膜、赤道板、颈部及尾部存在着tPA ,推测其与精子运行、获能等有关。     

纤溶酶原激活物抑制物1与肝细胞癌

目的研究纤溶酶原激活物抑制物１（ＰＡＩ１）在肝细胞癌（ＨＣＣ）蛋白和ｍＲＮＡ水平的表达及其与ＨＣＣ生物学特性的关系。方法取ＨＣＣ石蜡标本４８例,肝良性肿瘤石蜡标本１２例（对照组）做免疫组化染色;液氮冻存ＨＣＣ标本２０例,肝血管瘤５例（对照组）做免疫印迹杂交。结果肝癌细胞与癌周细胞及对照组肝细胞相比,ＰＡＩ１抗原蛋白和ｍＲＮＡ表达显著升高,差异有显著意义,Ｐ值分别＜００１和＜０．０５。术后２年内死亡病例与生存病例相比,ＰＡＩ１阳性率有显著意义的升高,Ｐ＜００５。ＰＡＩ１和纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）及其受体（ｕＰＡＲ）同时阳性患者与同时阴性患者相比,前者侵袭性病例较后者升高有显著性意义（Ｐ＜００５）。结论ＨＣＣ中ＰＡＩ１蛋白和ｍＲＮＡ表达明显增高。ＰＡＩ１与ＨＣＣ浸润转移和预后密切相关。     

高脂饮食小鼠脂肪组织中PAI-1、FOXC2及FOXO1表达的研究

目的：研究高脂饮食喂养小鼠内脏脂肪和皮下脂肪组织中PAI-1、FOXC2及FOXO1表达水平,探讨不同类型肥胖的机制。方法20只小鼠随机分为对照组和高脂组,分别给予正常饮食和高脂饮食喂养12周。测定血清PAI-1以及附睾周围组织及皮下脂肪中PAI-1、FOXC2及FOXO1 mRNA的表达水平。结果高脂组小鼠体质量、血清PAI-1水平均显著高于对照组。组内比较小鼠附睾周围脂肪组织PAI-1、FOXC2mRNA表达显著高于皮下脂肪组织;FOXO1mRNA表达显著低于于皮下脂肪组织,差异有统计学意义。结论正常体重小鼠和肥胖小鼠血清PAI-1水平表达不同,内脏脂肪和皮下脂肪PAI-1、FOXC2及FOXO1表达也存在差别,这种差别可能是不同类型肥胖的机制之一。     

腹腔镜结直肠癌手术对腹膜微结构损伤和纤维溶解分子表达的影响

目的探讨腹腔镜结直肠癌根治术对腹膜微结构损伤和腹膜纤维溶解分子表达的影响。方法前瞻性纳入2011年6月至2012年2月问山西省人民医院收治的50例结直肠癌患者．根据患者意愿和医生决策分为腹腔镜组（27例）和开腹组（23例）。分别在光镜和电镜下观察术后腹膜微结构损伤程度：采用ELISA法比较手术前后腹膜组织型纤溶酶原激活物t-PA和纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）水平的改变。结果术后标本光镜和电镜观察显示,开腹组肠管浆膜完整性受损、系膜脂肪细胞与间皮细胞覆盖脱失、炎性细胞聚集程度较腹腔镜组严重,两组损伤评分比较的总平均秩次分别为38．22和14．67,差异有统计学意义（P〈0．01）。术后网膜组织t-PA、肠管浆膜组织t-PA及PAI-1水平的差异均无统计学意义（均P〉0．05）;但腹腔镜组网膜组织中PAI-1水平显著低于开腹组（P〈0．05）。结论相对于开腹手术,腹腔镜结直肠癌根治术腹膜损伤程度较轻,对腹膜纤溶功能的影响较小．有利于防止肠粘连的形成。     

福辛普利钠对糖尿病肾脏病大鼠肾组织PAI-1表达的影响

目的观察福辛普利钠对糖尿病肾脏病（diabete kidney disease，DKD）大鼠PAI-I表达的影响。方法将45只Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组（A组）13只，糖尿病组（B组）16只，福辛普利钠干预组（C组）16只。采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。于第4、8、12周末各组随机选取4只大鼠处死并收集标本，记录体重、右肾重；检测血糖、血肌酐、血尿素氮、血胆固醇、血甘油三酯、24h尿蛋白排泄量。用逆转录PCR方法检测肾皮质PAI-1mRNA表达水平。结果造模成功，随时间增加，各组观察的指标有不同程度升高，但药物干预组与糖尿病组比较有不同程度下降。结论福辛普利钠可以抑制PAI-1 mRNA表达、延缓DKD的进展。     

腹腔镜结直肠癌手术对腹膜微结构损伤和纤维溶解分子表达的影响

目的 探讨腹腔镜结直肠癌根治术对腹膜微结构损伤和腹膜纤维溶解分子表达的影响.方法 前瞻性纳入2011年6月至2012年2月间山西省人民医院收治的50例结直肠癌患者,根据患者意愿和医生决策分为腹腔镜组(27例)和开腹组(23例).分别在光镜和电镜下观察术后腹膜微结构损伤程度;采用ELISA法比较手术前后腹膜组织型纤溶酶原激活物t-PA和纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)水平的改变.结果 术后标本光镜和电镜观察显示,开腹组肠管浆膜完整性受损、系膜脂肪细胞与间皮细胞覆盖脱失、炎性细胞聚集程度较腹腔镜组严重,两组损伤评分比较的总平均秩次分别为38.22和14.67,差异有统计学意义(P＜0.01).术后网膜组织t-PA、肠管浆膜组织t-PA及PAI-1水平的差异均无统计学意义(均P＞0.05);但腹腔镜组网膜组织中PAI-1水平显著低于开腹组(P＜0.05).结论 相对于开腹手术,腹腔镜结直肠癌根治术腹膜损伤程度较轻,对腹膜纤溶功能的影响较小,有利于防止肠粘连的形成.     

活性氧和转化生长因子β1在醛固酮上调纤溶酶原激活物抑制剂1中的作用

目的 探讨活性氧(ROS)、转化生长因子β1 (TGF-β1)在醛固酮促进系膜细胞生成纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)途径中的作用。 方法 用醛固酮刺激大鼠肾脏系膜细胞。采用激光共聚焦检测系膜细胞内ROS水平。以貂肺上皮细胞(Mvllu)生长抑制MTT法检测上清中TGF-β1活性。然后用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)与抗TGF-β1中和抗体阻断醛固酮刺激肾脏系膜细胞所产生ROS和TGF-β1。用RT-PCR观察系膜细胞PAI-1 mRNA的变化。用Western印迹法测定系膜细胞培养上清液中的PAI-1。 结果 醛固酮刺激大鼠肾脏系膜细胞24 h后，细胞内ROS水平上升到对照组的5倍(P < 0.01)；细胞上清中活性TGF-β1浓度明显升高(P < 0.01)；PAI-1 mRNA与蛋白表达分别上升到对照组的1.8倍(P < 0.01)和1.7倍(P < 0.01)。而采用NAC抑制ROS水平的升高、采用抗TGF-β1中和抗体阻断TGF-β1的作用后，PAI-1 mRNA表达分别下降了32%和30%(P < 0.01)；PAI-1蛋白表达分别下降了21%与11%(P < 0.05)，但仍未下降到正常水平。 结论 ROS、TGF-β1在醛固酮上调系膜细胞的PAI-1表达方面起了重要作用，但醛固酮并非完全依赖ROS、TGF-β1促使PAI-1的表达上调。     

双倍剂量ACEI、ARB及联合用药治疗蛋白尿疗效比较

目的比较双倍剂量血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）、血管紧张素I型受体拮抗剂（ARB）及二者联合用药对蛋白尿和延缓肾损害的疗效、安全性及差别。方法采用前瞻性、随机、对照研究。慢性肾脏病患者共60例,随机分为3组,每组20例。A组口服洛汀新20mg／d,初始剂量10mg／d;B组口服科素亚100mg／d,初始剂量50mg／d;C组口服洛汀新10mg／d加科素亚50mg／d,初始剂量分别为5mg／d、25mg／d。疗程均为6个月。观察治疗前后血压、24h尿蛋白定量、血肌酐（SCr）、血钾、肝功能及不良反应情况。结果3组患者治疗后血压均下降至130／80mmHg以下,治疗前后血压和伍用降压药平均种数组间比较无差异（P〉0．05）;3组减少尿蛋白的总有效率均〉95％,组间比较,总有效率无统计学差异;3组均无因副作用退出研究的病例。结论双倍剂量ACEI、ARB及二者联合用药对多种病因导致的轻、中度蛋白尿有显著疗效,能延缓肾损害进程;安全。     

脉血康对单侧输尿管梗阻大鼠肾保护作用及机制探讨

目的观察脉血康对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾脏保护作用并探讨其可能作用机制。方法建立UUO大鼠模型,大鼠随机分为假手术组、模型组及脉血康组3组,各组给予相应干预,各组大鼠于术后14 d处死,抽取血清并留取肾组织标本,检测各组大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)情况,并观察各组肾脏病理改变情况,采用免疫组化方法观察肾组织中组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,u-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)在各组的表达情况。结果①3组肾脏形态学变化有差异,假手术组双肾大小及体积无改变,颜色红润,模型组及脉血康组术侧肾脏体积明显增大,术侧肾盂肾盏及输尿管结扎段以上全程扩张。模型组肾实质颜色变浅,剖面肾皮质变薄,皮髓质分界不清,脉血康组肾脏颜色稍红润,肾脏皮髓质分界较清。②假手术组肾脏病理未见明显改变,与假手术组比较,模型组及脉血康组肾小管损伤及肾间质纤维化程度显著(P0.01);与模型组比较,脉血康组肾小管损伤及肾间质纤维化程度明显减轻(P0.05)。③与假手术组相比,模型组SCr、BUN、TC、TG水平均升高(P0.05),与模型组相比,脉血康组SCr、BUN、TC、TG水平均下降(P0.05)。④假手术组PAI-1、t-PA、u-PA表达于肾小管上皮细胞及肾小球系膜细胞胞浆,肾间质表达极少;与假手术组比较,模型组及脉血康组PAI-1明显增多(P0.05),而t-PA、u-PA表达明显减少(P0.05),与模型组相比,脉血康组PAI--1表达明显减少,t-PA表达明显增多(P0.05),u-PA无明显差别(P0.05)。结论脉血康可能通过调节脂质代谢下调肾脏PAI-1的表达,上调t-PA的表达从而促进肾脏细胞外基质降解,对UUO大鼠肾间质纤维化及肾功能具有保护作用。