肝癌细胞胞内游离Ca~(2+)测定及其与间隙连接通讯功能的相关性研究

 目的 研究肝细胞肝癌和正常肝细胞胞内信号分子游离 Ｃａ２＋浓度变化，及其对间隙连接通讯功能的意义。方法 通过Ｆｌｕｏ－３ＡＭ负载和激光扫描共聚焦显微镜分析，定位及定量研究静息状态下肝癌细胞系ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ胞内游离Ｃａ２＋浓度。结合Ｌｕｃｉｆｅｒ Ｙｅｌｌｏｗ划痕标记荧光传输技术，分析对上述细胞间隙连接通讯功能的影响。结果 激光扫描共聚焦显微镜研究证实，定量分析静息状态下［Ｃａ２＋］ｉ在正常肝细胞ＱＺＧ和肝癌细胞ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１中分别为１０８．３７ ｎｍｏｌ／Ｌ，３５．１３ｎｍｏｌ／Ｌ和 ４７．０８ ｎｍｏｌ／Ｌ，［Ｃａ２＋］ｉ在 ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１细胞与正常肝细胞 ＱＺＧ比较显著降低。肝癌细胞ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１的间隙连接通讯功能较正常肝细胞ＱＺＧ明显减弱。结论 肝癌细胞内第二信使游离Ｃａ２＋浓度的降低，与肝癌细胞的间隙连接通讯功能障碍相一致，可能与肝癌的发生密切相关。     

间隙连接基因Cx43表达对肺癌细胞体内成瘤生长的抑制

目的探讨间隙连接基因表达和细胞通讯功能对肿瘤生长的抑制作用。方法以高转移性人肺癌ＰＧ细胞为材料,该细胞的间隙连接基因Ｃｘ４３表达抑制,细胞通讯功能缺陷。用Ｃｘ４３ｃＤＮＡ转染ＰＧ细胞,分离转染子克隆,与只转染空载体ｃＤＮＡ的对照组ＰＧ进行比较。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分子杂交和染料传输方法检查间隙连接表达情况,并观察细胞在体外和裸鼠体内生长。结果空载体对照组与未转染组ＰＧ相似,Ｃｘ４３ｍＲＮＡ无表达,通讯功能缺陷,细胞生长快,在软琼脂内集落形成率高（１１．６％）,植入裸鼠体内２８天,平均瘤重３．４７ｇ。转染组细胞Ｃｘ４３ｍＲＮＡ表达升高,通讯功能增强,细胞生长慢,在软琼脂内集落形成率和在裸鼠体内生长速度明显低于对照组,抑制率分别为９０％和７５％。结论间隙连接基因Ｃｘ４３表达对肺癌细胞有抑瘤作用。     

紫外光血液辐照疗法对放射治疗鼠肿瘤细胞DNA含量、AgNORs计数的影响

应用多功能图像分析仪，检测了鼠Ｗ２５６移植性肿瘤细胞ＤＮＡ含量，并同时测定细胞ＡｇＮＯＲｓ计数，探讨紫外光血液辐照疗法（ＵＢＩ）对放射治疗的增敏作用。结果表明；光量＋放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为５．３４±１．０９Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为２．２４±０．４３；单纯放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为７．８３±０．８６Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为５．３５±０．８４；前者ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数显著小于后者（Ｐ＜０．０５）。表明ＵＢＩ对放疗恶性肿瘤有明显的增敏作用。     

肺部疾病患者血清血管紧张素转换酶活性的变化

目的：探讨血清血管紧张素转换酶（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ， Ａ Ｃ Ｅ） 活性变化对肺部疾病诊断的价值。方法：采用紫外比色法检测血清 Ａ Ｃ Ｅ 活性。结果：肺炎及肺结核患者血清 Ａ Ｃ Ｅ 活性分别为（３５１ ±９３） Ｕ／ Ｌ 和（３９６ ±１０２） Ｕ／ Ｌ，与对照组（３７４ ±９４） Ｕ／ Ｌ 相比均无显著性差异（ Ｐ＞ ００５） ，３６例肺癌患者血清 Ａ Ｃ Ｅ 活性（２９２ ±９６） Ｕ／ Ｌ，明显低于肺炎、肺结核患者及对照组；６７ 例肺结节病患者血清 Ａ Ｃ Ｅ 活性（６５８ ±１３６） Ｕ／ Ｌ，明显高于对照组、肺癌、肺炎及肺结核组（ Ｐ＜ ０００１） 。结论：血清 Ａ Ｃ Ｅ 活性测定可作为诊断肺癌或肺结节病的重要指标，有助于肺癌、肺结节病和肺结核、肺炎的鉴别诊断。     

术前化疗治疗成神经细胞瘤临床疗效和生物特性观察

目的研究术前化疗在治疗小儿成神经细胞瘤中的作用。方法对照研究应用术前化疗后切除的成神经细胞瘤２１例，观察尿香草扁桃酸（ＶＭＡ）、ＤＮＡ图象分析和ＭＹＣＮ基因变化。结果手术切除率为９５５％，平均生存时间为２８１±１０２ｍｏ，显著高于一期手术组的８８±６８ｍｏ（Ｐ＜００１）。化疗后尿ＶＭＡ较化疗前降低（Ｐ＜００１）。化疗后肿瘤细胞ＤＮＡ指数下降，Ｇ０＋Ｇ１时相比例升高，ＭＹＣＮ基因表达明显抑制。结论术前化疗具有诱导成神经细胞瘤细胞凋亡和促使肿瘤细胞增殖活性降低的作用。     

单肺通气在食管癌根治术中的应用

目的　研究单肺通气用于食管癌根治术时对病人的影响。　方法　２０ 例病人分为Ａ、Ｂ 两组，每组１０例。Ａ组术中行单肺通气，Ｂ组行双肺通气。于麻醉前、术中和术毕测定ＰａＯ２ 和ＰａＣＯ２ ，并记录手术时间及观察术中肺部情况。　结果　Ａ组和Ｂ组术毕ＰａＯ２ 分别为８４９±０８６ ｋＰａ 和７１３±０７９ ｋＰａ（Ｐ＜ ００５） ，Ａ 组手术时间比Ｂ 组缩短２７２ ％（ Ｐ＜ ００５），两组术中ＰａＯ２ 和ＰａＣＯ２ 均在正常范围，且在同一时刻的ＰａＯ２ 和ＰａＣＯ２ 值无显著差异。关胸前发现Ｂ 组肺部明显充血，而Ａ 组无此情况。　结论　食管癌根治术时应用单肺通气可减少因外力挤压造成的肺充血水肿，减轻对弥散功能的影响；术中视野清楚，缩短了手术时间，使ＰａＯ２ 明显提高，利于恢复。     

化疗对消化系肿瘤患者CD16及T细胞活化抗原表达的影响

目的　研究消化系肿瘤患者化疗前后的免疫状态。　方法　用流式细胞仪监测８０ 例消化系肿瘤患者化疗前后Ｔ 细胞表面３ 种抗原标志，并与良性病变患者进行对比。　结果　消化系肿瘤患者化疗前ＣＤ＋３ ／ＨＬＡＤＲ＋ 显著高于对照组（ Ｐ＜００１） ，化疗后ＣＤ１６ 、ＣＤ＋３ ／ＨＬＡＤＲ＋ 显著下降（ Ｐ＜ ００１），ＣＤ６９ 低于化疗前（Ｐ＜ ００５） ，且化疗后ＣＤ１６ 、ＣＤ４９ 低于对照组（ Ｐ＜００５） 。　结论　化疗药物损害消化系肿瘤患者的细胞免疫功能，降低机体的免疫功能活性。     

IL-1诱导血管内皮细胞表达HLA-DR抗原对癌细胞粘附作用的研究

目的　探讨白细胞介素１（ Ｉ Ｌ１）作用于人脐带血管内皮细胞（ Ｈ Ｅ Ｃ）表达 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ 抗原，以及对人肝癌细胞（ Ｈ７４０１）的粘附作用。方法　应用微量细胞毒试验和中性红染色法检测肝癌细胞对 Ｈ Ｅ Ｃ的粘附作用。结果　研究发现， Ｉ Ｌ１ １００ Ｕ ／ｍ ｌ作用于 Ｈ Ｅ Ｃ ２４ ｈ 后，与对照组比较， Ｉ Ｌ１ 能诱导 Ｈ Ｅ Ｃ 表达 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ 抗原，同时发现，还能显著增加对肝癌细胞的粘附，与对照组比较，粘附百分率增加 ３６％ ，（ Ｐ＜ ００５）。当 Ｉ Ｌ１ １０００ Ｕ ／ｍ ｌ 时，对癌细胞粘附则表现为抑制。肝癌细胞与 Ｉ Ｌ１ １００ Ｕ ／ｍ ｌ预处理 ６ ｈ 后，对 Ｈ Ｅ Ｃ 的粘附作用比对照组显著增加 ２４６％ ，（ Ｐ＜ ００５）。结论　 Ｉ Ｌ１能增加 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ 抗原的表达，但 Ｉ Ｌ１ 对肝癌细胞粘附 Ｈ Ｅ Ｃ具有浓度选择作用。     

复方藤梨根制剂上调PG细胞间隙连接通讯功能的研究

目的：探讨复方藤梨根制剂对高转移性人肺癌细胞(PG)的生长及细胞间隙连接通讯功能的影响。方法：采用MTT法体外观察不同浓度复方藤梨根制剂对PG细胞的杀伤作用；应用激光共聚焦显微镜检测用药后细胞间隙连接通讯功能(GJIC)的变化。结果：4个浓度的复方藤梨根制剂对PG细胞均有杀伤作用，呈剂量依赖关系。与空白对照组相比，一定浓度的复方藤梨根制剂能上调GJIC。结论：复方藤梨根制对PG细胞具有生长抑制作用，其机制可能与上调细胞间隙连接通讯功能有关。     

血卟啉衍生物对鼠肿瘤细胞DNA含量,AgNORs的影响

应用图像分析技术测定大鼠移植Ｗ２５６肿瘤单纯放射治疗组（对照组）和血卟啉衍生物并放射治疗组（实验组）肿瘤细胞的ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数，探讨血卟啉衍生物对恶性肿瘤放射治疗的增敏作用。结果显示实验组大鼠肿瘤细胞ＤＮＡ含量为（５．８４±１．２２）Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为２．４２±０．７３；对照组大鼠肿瘤细胞ＤＮＡ含量为（７．８３±０．６８）Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为５．３５±０．８４；前者ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数显著低于后者（ｔ＝６．３７，ｔ＝１１．７７，Ｐ＜０．０１）。表明血卟啉衍生物对恶性肿瘤放射治疗有明显的增敏作用     

人鼻咽癌细胞及其不同亚系细胞间缝隙连接通讯功能和维胺酸作用效应的研究

研究了人鼻咽癌细胞母系ＣＮＥ－２Ｚ及其不同侵袭转移潜能亚系细胞的间隙连接结构（ＧＪ）、间隙连接通讯功能（ＧＪＩＣ）和细胞内游离Ｃａ２＋水平及其与细胞ＧＪＩＣ功能之间的相互关系，并观察了维胺酸（ＲⅡ）对上述指标的影响。结果显示，人鼻咽癌细胞之间的连接结构发育不良；ＣＮＥ－２Ｚ母系细胞具有ＧＪＩＣ功能，３个克隆细胞则缺乏此功能。从高侵袭、高转移的克隆细胞株到中、低度侵袭、转移的克隆细胞株，细胞内游离Ｃａ２＋水平呈相反顺序依次性递增，似乎反映了癌细胞侵袭程度与其细胞内游离Ｃａ２＋水平之间存在某种相关性。ＲⅡ对癌细胞间连接结构的数量未见明显影响，但可抑制母系细胞的ＧＪＩＣ功能。ＲⅡ对癌细胞母系和亚系细胞内游离Ｃａ２＋水平的作用基本相同，用药６小时，细胞内游离Ｃａ２＋水平明显下降，延长用药时间，则细胞内游离Ｃａ２＋水平逐渐回升，其作用机理有待进一步探讨。     

间隙连接蛋白43与恶性肿瘤

间隙连接所介导的间隙连接通讯对细胞增殖和分化调控起重要作用，构成间隙连接的是一组具有高度同源性的间隙连接蛋白家族，在转化或肿瘤细胞中间隙连接通讯功能的丧失常伴随间隙连接蛋白家族某一成员表达的改变。间隙连接蛋白43（Cx43)是一种主要的细胞间隙连接蛋白，其表达的异常与多种疾病的发生有关。本文就Cx43与肿瘤发生、发展的关系以及Cx43在肿瘤治疗中的应用进行综述。     

细胞间隙连接通讯与肺癌

细胞间隙连接通讯 (ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｃｏｍｍｕｎｉｃａ ｔｉｏｎ ,ＧＪＩＣ )是细胞间的 1种重要连接方式 ,在细胞分化、生长控制及维持体内环境平衡等方面起重要作用。近几年来 ,国内外对ＧＪＩＣ与癌变的关系进行了大量的研究 ,发现多数肿瘤细胞无ＧＪＩＣ功能 ,其间隙连接 (ＧＪ)少或无 ,邻近的正常组织或良性肿瘤的间隙连接正常。少数肿瘤细胞有脆弱的连接通讯 ,但很容易受到破坏 ,其间隙连接数量少 ;或连接通讯功能比正常细胞低。认为ＧＪＩＣ在癌变发生过程中扮演着极为重要的角色[1] 。已有学者对…     

ＰＳＭＡ-ＣＡＲ慢病毒颗粒包装浓缩及感染 ＣＩＫ细胞的研究

目的：探讨前列腺特异性膜抗原（ｐｒｏｓｔａｔｅｓｐｅｃｉｆｉｃｍｅｍｂｒａｎｅａｎｔｉｇｅｎ,ＰＳＭＡ） 嵌合抗原受体（ｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＣＡＲ）慢病毒颗粒的浓缩方法及提升感染 ＣＩＫ细胞效率的方法。方法：本研究通过超速离心法、超滤管浓缩 法、ＰＥＧ ８０００浓缩法三种方法浓缩 ＰＳＭＡ ＣＡＲ慢病毒颗粒,通过比较三种方法获得的 ＰＳＭＡ ＣＡＲ慢病毒颗粒感染 ＣＩＫ细胞的效率,确定其最佳浓缩方法;其次,通过比较 ＣＩＫ细胞的感染效率,确定联合室温 ＋长时间 ＋低速离心的 方法是否可以提高 ＰＳＭＡ ＣＡＲ慢病毒颗粒感染 ＣＩＫ细胞的效率。结果：测定 ＰＳＭＡ ＣＡＲ慢病毒颗粒感染 ＣＩＫ细胞 的效率,超滤管浓缩法为 ６．９８％ ±０．７７％,超速离心法为 ３２．０４％ ±１．６６％,ＰＥＧ ８０００浓缩法为 ５３．４７％ ±４．７２％ （Ｆ＝１８９７０,Ｐ＜０．０１）,３种方法的感染效率差异有统计学意义;室温（２６℃）＋长时间（４ｈ）＋低速离心（１５０ｇ）的 方法可使 ＣＩＫ细胞的感染效率提高至 ３２．０４％ ±１．６６％,而常规方法感染 ＣＩＫ细胞的感染效率仅为 ２．７３％ ± ０．７５％。结论：ＰＥＧ ８０００浓缩法为制备 ＰＳＭＡ ＣＡＲ慢病毒颗粒的最佳浓缩方法,室温 ＋长时间 ＋低速离心的方法可 提高其对 ＣＩＫ细胞的感染效率。     

钙拮抗剂增加化疗中卵巢癌细胞凋亡相关因子的研究

目的 探讨钙拮抗剂（ＣＡ）对促进化疗化物诱发卵巢癌细胞凋亡的作用。方法：从６８例首次手术及１７例复发卵巢癌患者腹水中提取富含癌细胞的悬液,应用３种荧光单克隆抗体Ｐ１７０,ＣＤ９５,及Ａｐｏ,２．７标记,经流式细胞仪检测,结果 应用ＣＡ组化疗后癌细胞ＣＤ９５及Ａｐｏ２．７含量均高于姐（Ｐ〈０．０５）,对癌细胞Ｐ１７０含量无明显影响（Ｐ〉０．０５）,复发组癌细胞Ｐ１７０含量显著高于初发手术组（Ｐ〈０．     

肺癌生物学特性与灌注化疗疗效和生存关系的初步探讨

本文对１７例Ⅲ期肺癌，测定了癌细胞ＤＮＡ含量，ＤＮＡ指数（ＤＩ），细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）。１７例肺癌均给支气管动脉灌注化疗。小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）和非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）分别缩小４８．８±３１．０％，３６．８±１７．１％（Ｘ±ＳＥ）。化疗后７例开胸手术６例切除肿瘤。ＳＣＬＣ和ＮＳＣＬＣ的中位生存期分别为３个月和８．５个月。在ＮＳＣＬＣ中，ＰＣＮＡ与肿瘤缩小范围呈负相关（ｒ＝－０．４７）；ＤＮＡ超四倍体百分比和ＤＩ存活时间呈正相关（（ｒ＝０．５１，ｒ＝０．５６）。ＳＣＬＣ则相关性差。结果表明，ＰＣＮＡ、ＤＡＮ和ＤＩ是ＮＳＣＬＣ判定疗效和预后的有用指标。     

直肠癌患者白细胞和癌细胞体外抗癌药物敏感相关性探讨

目的：探讨直肠癌患者白细胞和癌细胞体外抗癌药敏相关性。方法：用 Ｍ Ｔ Ｔ 法体外测定直肠癌（１３ 例） 患者白细胞和癌细胞抗癌药物敏感性。结果：患者白细胞、癌细胞对 Ａ Ｄ Ｍ、 Ｃ Ｔ Ｘ、 Ａｒａ Ｃ、 Ｖ Ｃ Ｒ、 Ｍ Ｔ Ｘ 的敏感率没有显著差异,对５ Ｆ Ｕ、 Ｍ Ｍ Ｃ、 Ｄ Ｄ Ｐ 白细胞药敏率显著低于癌细胞（ Ｐ＜ ０００１） 。结论：白细胞、癌细胞体外抗癌药敏感性测定,对于直肠癌病人化疗用药和预防骨髓抑制有一定的临床意义。     

联合检测血清CyFRA21—1和CEA对非小细胞肺癌临床价值探讨

目的探讨血清ＣｙＦＲＡ２１１和癌胚抗原（ＣＥＡ）对非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的临床价值。方法采用免疫放射分析方法对３０例经临床和病理证实的ＮＳＣＬＣ患者和２０例正常人进行血清ＣｙＦＲＡ２１１和ＣＥＡ联合测定。结果血清ＣｙＦＲＡ２１１值在ＮＳＣＬＣ组的阳性率为４８％，鳞癌组阳性率为６２５％，分别明显高于正常组和腺癌组（Ｐ＜００１）；且与分期有关，Ⅱ期阳性率为３３３％，Ⅲ期为６６７％，Ⅳ期为７２％。血清ＣＥＡ值在ＮＳＣＬＣ组阳性率为４０％，腺癌中阳性率为５０％，分别明显高于正常组和其他类型（Ｐ＜００１）。联合检测ＣｙＦＲＡ２１１和ＣＥＡ可将整个ＮＳＣＬＣ组阳性率提高到６３２％。结论两者联合检测对ＮＳＣＬＣ的诊断、分型、分期和预后判断有一定的临床意义。     

高转移人肺癌表型去恶化研究─一细胞通讯、细胞骨架和癌基因、抑癌基因的相关变化

高转移人肺巨细胞癌ＰＧ细胞恶性表型明显。以人胚肺细胞为对照，荧光染料标记示踪法表明，ＰＧ的间隙连接通讯功能缺陷；免疫荧光染色显示微管解聚；荧光鬼笔环肽染色显示微丝网架破坏。分子杂交结果表明，ＰＧ细胞有ｃ－ｍｙｃＤＮＡ扩增和ｃ－Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ基因高表达，抑癌基因Ｐ５３ｍＲＮＡ水平低于正常。用钙调蛋白拮抗剂ＣＤＺ（１００～２００ｎｍｏｌ／Ｌ）和中药Ｌ２（３～１３ｍｇ／ｍｌ）分别处理ＰＧ，细胞增殖受到抑制，表型向正常分化，细胞通讯功能再现，微管网架恢复。但只有Ｌ２能促进微丝骨架恢复，抑制软琼脂内的集落形成，并使ｃ－ｍｙｃ扩增减弱和ｍＲＮＡ水平下降，Ｐ５３表达升高。     

化疗期间卵巢癌细胞及外周血淋巴细胞多药耐药基因表达产？…

目的 探讨卵巢癌细胞及外周血淋巴细胞多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达产物Ｐ１７０的变化及临床意义。方法 从３８例首次手术及１５例复发卵巢癌腹水中提取癌细胞（ＡＣＣ），并抽静脉血提取淋巴细胞（ＰＢＬ），用荧光单克隆抗体Ｐ１７０标记上述细胞，经流式细胞术检测，。结果①化疗前２１％卵巢癌细胞Ｐ１７０阳性；②复发组ＡＣＣ之ＭＤＲ１表达明显高于初发组（Ｐ〈０．０５）；③化疗期间及ＰＢＬ及ＡＣＣ的ＭＤＲ１，表达随