供体神经雷公藤预处理对异体移植后神经再生的影响

[目的]探讨雷公藤多甙(雷公藤提取物)或MEM预处理的供体坐骨神经对异体周围神经缺损修复的影响.[方法]用新鲜异体坐骨神经移植(A组)或雷公藤多甙(B、C组)/MEM(D、E组)预处理的Wistar大鼠坐骨神经,桥接SD大鼠10 mm坐骨神经缺损,术后以雷公藤多甙治疗5周:A、C、E组5 mg/(kg·d),B、D组2.5 mg/(kg·d).术后2周观察移植物炎症反应情况,12周电生理检测和组织学观察神经再生,16周观察靶肌肉运动终板.[结果]术后早期炎症反应D组比其它组严重;运动神经传导速度、动作电位潜伏期,再生有髓神经纤维数量和轴突直径、髓鞘厚度,C组优于A、B、E组(P<0.05),A、B、E组则优于D组(P<0.05);运动终板染色着色和数量,D组明显比其它组差.[结论]供体神经经雷公藤多甙预处理可能降低了神经组织免疫原性,异体移植后能促进神经再生,减少移植后受体免疫抑制剂用量.     

雷公藤多甙对大鼠精子凋亡的影响

目的:研究雷公藤多甙(GTW)对大鼠精子凋亡的影响。方法:将SD雄性大鼠16只均分成2组,雷公藤多甙组和羧甲基纤维素钠对照组均为剂量20 mg/(kg.d)灌胃,6周后取大鼠附睾精子测定其凋亡率、膜脂流动性、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化。结果:灌胃6周后,GTW组精子的凋亡率、NO和MDA的含量显著增加(与对照组相比,P<0.01),精子膜脂流动性(P<0.05)和SOD含量(P<0.01)降低。结论:雷公藤多甙可致大鼠精子膜脂质过氧化损伤、膜结构受损以及膜流动性下降,精子凋亡率升高。     

雷公藤多甙对大鼠支持细胞功能的影响

大鼠灌服抗生育剂量的雷公藤多甙（ＧＴＷ）并不影响血清中抑制素水平，但用体外培养大鼠曲细精管方法观察不同剂量的ＧＴＷ对支持细胞功能的影响，发现低剂量ＧＴＷ并不影响支持细胞合成与分泌抑制素功能，也不影响其对ＦＳＨ的应激反应，但大剂量ＧＴＷ可明显抑制支持细胞的基础分化与应激反应。因此，认为大剂量的ＧＴＷ对细胞有明显的毒性作用。     

雷公藤多甙对大鼠原位肝移植排斥反应的治疗作用

目的：研究雷公藤甙对大鼠肝移植诱导自发耐受过程产生的影响。方法：以SD→Wistar大鼠同种原位肝移植的模型,观察雷公藤多甙对大鼠原位移植肝脏排斥反应强度、浸润细胞变化及细胞凋亡的改变。结果：雷公藤多甙组排斥反应减弱，肝脏内浸润细胞明显减少。雷公藤多甙组肝脏内凋亡细胞记数明显高于单纯肝移植组，并且以间质细胞为主。结论：雷公藤多甙治疗后移植肝脏通过诱导间质中浸润细胞凋亡发挥保护移植脏器的作用，雷公藤甙在大鼠肝移植后近期不仅全面移植了受体的免疫反应状态，而且还加快了免疫耐受状态的诱导。     

经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后早期组织形态及免疫学观察

目的 观察经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后髓鞘损伤程度及急性期免疫排斥反应,探讨雷公藤早期免疫抑制作用及合适用药浓度. 方法取60只3月龄雄性SD大鼠制备右侧坐骨神经干缺损模型,随机分为A、B、C、D、E组5组(n=12).取18只3月龄雄性Wistar大鼠,切取双侧坐骨神经干约15 mm,置入含200、400、800 mg/L雷公藤多甙细胞保存液(各浓度组浸泡12条神经),4℃下浸泡24 h,作为A、B、C组神经修复供体,修复神经缺损;另取6只3月龄Wistar大鼠,切取12条新鲜坐骨神经桥接于D组神经缺损处;E组将切下的自体坐骨神经立即行原位缝合.术后不同时间对移植神经行大体、光镜、电镜观察,检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)含量变化及免疫组织化学分析移植物CD4 、CD8 T细胞入侵情况. 结果 术后1周,A、B、C组神经纤维形态及结构较完整,炎性细胞浸润程度较D组轻;术后1、2、4周,A、B、C组组织形态学观察结果 相似,移植神经片段外形及结构清晰,与周围结缔组织粘连均较D组轻;术后48h及1、2、4周,各组均有不同程度髓鞘损伤,各时间点坐骨神经MBP含量B组最接近E组,两组差异无统计学意义(P＞0.05).术后1、4周,A、B、C组CD4 ,CD8 分子的IA值与D组比较,差异均有统计学意义(p＜0.05). 结论 雷公藤能有效降低异体神经移植术后早期急性排斥反应,对髓鞘发挥一定的保护作用.     

雷公藤多甙对大鼠支持细胞功能的影响

大鼠灌乳抗生育剂量的雷公藤多甙（ＧＴＷ）并不影响血清中抑制素水平，但用体外培养大鼠曲细精管方法观察不同剂量的ＧＴＷ对支持细胞功能的影响，发现低剂量ＧＴＷ并不影响支持细胞合成与分泌抑制素功能，也不影响其对ＦＳＨ的应激反应，但大剂量ＧＴＷ可明显抑制支持细胞的基础化与应激反应。因此，认为大剂量的ＧＴＷ对细胞有明显的毒性作用。     

雷公藤多甙在大鼠胰、十二指肠移植中的作用

目的 解胰腺移植术后应用雷公藤多甙对移植胰腺功能存活的影响。方法 供体为雄性Ｗｉｓｔｅｒ大鼠,受体为雄性ＳＤ大鼠。受体经尾静脉注射链脲霉素５０ｍｇ／ｋｇ制备成糖悄病大鼠模型。胰腺４移植受用全胰腺、十二指肠移植,胰岛素回流采用门腔静脉吻合的体循环回流,外分泌胰液采用 受体十二指肠间侧侧吻合的肠引流法。血管吻合采用显微外科技术。胰腺移植术后开始每隔采用供受体十二指肠间侧侧吻合的肠引流法。血管吻合采用显     

雷公藤多甙抑制大鼠精子发生的研究

目的探讨雷公藤多甙对大鼠精子发生的抑制作用及其可能的信号通路。方法成年雄性大鼠给予雷公藤多甙(16 mg/kg)灌胃,每日1次,在2及6周检测血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和可的松水平;光镜观察睾丸组织的形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)观察睾丸生精细胞凋亡;免疫组织化学法观察凋亡通路相关蛋白Bax/Bcl-2的表达。结果给药组与对照组相比,性激素、肾上腺皮质激素均无显著变化(P均>0.05);给药2周后精子数下降和畸形率上升(P<0.05),给药4和6周精子数下降和畸形率升高更显著(P<0.001);组织学检查给药组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,原始精原细胞和支持细胞(Sertoli细胞)未见明显改变。与正常对照组相比,生精小管内生精细胞凋亡显著增加(2周P<0.05,4和6周P<0.001)。凋亡相关蛋白Bax表达明显上调,Bcl-2表达无显著差异。结论雷公藤对大鼠精子发生的抑制作用表现为增加生精细胞凋亡,导致精子计数下降,精子的畸形率升高。雷公藤多甙使睾丸Bax表达增加,与诱导生精细胞凋亡相关,可能是相关的信号通路之一。进一步研究雷公藤多甙作用的分子信号机制有助于今后降低剂量、减少毒副作用,探讨其作为一种安全的男性避孕药可能性。     

雷公藤多甙联合环孢素对小鼠小肠移植抗排斥作用的研究

目的：研究雷公藤多甙对实验性小鼠小肠移植的抗排斥作用。方法：以Balb/c小鼠作为供体，C57BL/6小鼠为受体，建立同种异位小肠移植模型。将受体分为5组，各组样本数为12只：1组，无处理（对照组）；2组，单独使用雷公藤多甙10mg/(kg.d）；3组，小剂量CsA10mg/(kg.d）；4组，联合应用雷公藤多甙与小剂量CsA；5组，大剂量CsA20mg/(kg.d)。每组抽取6只于术后5d处死，切除移植物进行组织学检查，其余动物分别观察受体及移植物的生存期。结果：单独使用雷公藤多甙不能抑制小鼠小肠移植的排斥反应，联合应用雷公藤多甙及环孢素（CsA)可使移植物生存期明显延长。结论：雷公藤多甙与CsA协同对小鼠小肠移植的移植物有保护作用。     

大鼠骨骼肌异位移植寄养后运动神经植入的电生理研究

目的探讨大鼠骨骼肌异位移植寄养后运动神经植入促进神经再生的作用。方法取鼠龄8个月的健康雄性SD大鼠60只，随机均分为三组：即对照组、原位再植组及异位移植寄养组。对照组：切断支配右侧股薄肌的闭孔神经，造成肌肉失神经支配；原位再植组；切取右侧股薄肌，再回植于原位，闭孔神经植入肌肉；异位移植寄养组：切取右侧股薄肌，移植寄养于左侧股部，闭孔神经植入肌肉。术后25周，采用神经肌电图仪收集各组的神经电生理信息，观察股薄肌大体形态并测量肌湿重。结果对照组股薄肌呈失神经电位；异位移植寄养组和原位再植组相比，神经肌肉电位潜伏期、波幅和神经传导速度差异均无统计学意义（P〉0、05）。对照组股薄肌萎缩明显，肌湿重为158．0±19．3mg；异位移植寄养组与原位再植组股薄肌萎缩不明显，肌湿重分别为509．6±14．5mg和516．8±12．7mg，二者差异无统计学意义（P〉0．05），但均大于对照组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论运动神经植入能有效防止或减轻异位移植寄养的骨骼肌失神经性萎缩，有助于恢复神经、肌肉的部分功能。     

EFFECTS OF ADENYLATE CYCLASE ACTIVATORS ON PORCINE SKELETAL MUSCLE IN MALIGNANT HYPERPYREXIA

The effect of adenylate cyclase activation on the in vitro contracturesof control and malignant hyperpyrexia susceptible (MHS) porcinemuscle was investigated. While fluoride and molybdateions potentiateddrug-induced contractures in control muscle, other activatorsof adenylate cyclase (forskolin and noradrenaline) did not.Furthermore, fluoride and molybdate had no effect on MHS skeletalmuscle contractility. Cyclic AMP content, basal adenylate cyclaseactivity and molybdate-stimulated adenylate cyclase activityof MHS skeletal muscle was not significantly different fromthat of control muscle. It is concluded that increased activityof adenylate cyclase does not represent the primary skeletalmuscle defect which predisposes to porcine MH.     

不同时段异体神经片段皮下包埋对周围神经再生影响的实验研究

目的 探讨异体神经片段经皮下包埋不同时段后对周围神经再生的影响。方法 Wistar大鼠55只，雌雄不限，随机分为5组，A、B、C组（实验组）和D组（对照组）每组各10只，E组（供体组）15只。E组动物在出骨盆口以远5mm处切断双侧坐骨神经，向远端游离约15mm，切断作为移植物。A、B、C组动物均行左侧大腿切口，皮下钝性分离，埋入供体神经片段。术后1周（A组）、2周（B组）、3周（C组）显露右侧坐骨神经，距骨盆出口约5mm处切断，向远端游离约10mm再切断，取出对侧包埋的神经片段，修剪远近端保留长度约10mm，移植于右侧神经缺损处。D组显露右侧坐骨神经后，在距骨盆出口约5mm处切断，向远端游离约10mm后再切断，原位缝合。术后2、4、6、8、10及12周监测坐骨神经功能指数（sciatic functional index，SFI），术后12周行电生理检查测试运动神经诱发电位的传导速度及潜伏期，组织学检测移植神经再生轴突数目和面积，以及移植神经的超微结构变化。结果术后各组SFI逐渐下降，12周时A组和D组的SFI最小，两组间差异无统计学意义，但分别与B组和C组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。术后12周A组和D组再生大量有髓神经纤维及少量无髓神经纤维，再生神经的数量和结构与正常神经相似，图像分析显示两组间无明显差别，与B组和C组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。A组和D组的运动神经传导速度及潜伏期结果无差异，优于B组和C组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 异体神经片断皮下包埋后有促进周围神经再生的作用，皮下包埋1周组促神经再生作用优于皮下包埋2、3周组。     

异体骨移植重建四肢肿瘤切除后的骨缺损

目的探讨同种异体骨移植及联合人工假体置换修复骨肿瘤切除后长段骨缺损的可行性。方法1999年8月～2003年12月对28例四肢恶性肿瘤切除后的骨缺损进行了长段同种异体骨段移植重建。其中骨肉瘤16例，骨旁骨肉瘤4例，尤文肉瘤5例，软组织肉瘤骨侵犯3例。均经术前活检及术后病理检查确诊，Enneking分期，IB期5例，ⅡB期23例。所有骨肉瘤及尤文肉瘤患者均接受规范术前及术后化疗。18例采用异体骨人工关节复合物重建，10例采用长段异体骨干移植，带锁髓内钉内固定。术后采用MSTS评分进行功能评价。结果所有患者获随访5～48个月，平均24个月。1例术后半年出现局部复发，行截肢术；3例出现异体骨与宿主骨接合处的不愈合和严重的骨吸收；2例深部感染。术后未发生移植骨骨折。其中23例术后功能恢复良好，MSTS评分15～27分，平均23．4分。结论异体骨移植及联合人工关节置换是重建四肢恶性肿瘤切除后骨缺损的一种有效方法。行坚强内固定，保证异体骨与宿主骨稳定接触，有助于减少并发症的发生。     

氯沙坦减少细胞凋亡延缓失神经骨骼肌萎缩的实验研究

目的 失神经骨骼肌萎缩是临床亟待解决的难题,研究旨在探讨氯沙坦能否减少细胞凋亡,以期寻找延缓失神经骨骼肌萎缩的新途径.方法 雄性SD大鼠42只,随机分成3组(n=14),分别为Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(失神经对照组)和Ⅲ组(氯沙坦治疗组).Ⅰ组不作处理,Ⅱ组和Ⅲ组制备失神经腓肠肌(gastrocnemius, GAS)动物模型.术后Ⅲ组大鼠采用氯沙坦以10mg/kg·d空腹灌胃4周;Ⅰ、Ⅱ组大鼠分别以等剂量生理盐水灌胃.术后4周处死大鼠,以GAS和体重(body mass, BM)之比(GAS/BM)作为骨骼肌萎缩指标;TUNEL法检测腓肠肌细胞凋亡;免疫组织化学和Western blot检测GAS Bcl-2及Bax的表达.结果 术后4周Ⅰ组腓肠肌正常粗细;Ⅱ、Ⅲ组腓肠肌明显萎缩,肌肉变细,与周围组织粘连明显.GAS/BM Ⅱ组为11.68 4±1.98,与Ⅰ组(12.86±0.74)比较,差异有统计学意义(P<0.05):Ⅲ组GAS/BM为12.11±0.65;与Ⅱ组比较,差异无统计学意义(P>0.05).TUNEL法检测:Ⅰ组罕见凋亡细胞核,凋亡率为0.56%±0.2l%;Ⅱ组凋亡细胞核较Ⅰ组明显增多,凋亡率为11.32%±4.51%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ组可见凋亡细胞核,凋亡率为7.21%±2.05%,与Ⅱ组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫组织化学染色观察:Bcl-2阳性率Ⅱ组为18.3%±4.9%,较Ⅰ组(27.5%±2.8%)和Ⅲ组(25.5%±3.5%)低,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅲ组与Ⅰ比较,差异无统计学意义(P>0.05);Bax阳性率:Ⅱ组为24.1%±3.1%,较Ⅰ组(22.1%±3.6%)和Ⅲ组(21.7%4±2.3%)高,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅲ组与Ⅰ组比较差异无统计学意义(P>0.05).Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ组Bax/Bcl-2平均分别为0.8、1.3及0.8.Western blot检测:Bcl-2蛋白表达Ⅱ组为122.5±14.6,较Ⅰ组(135.3±6.2)下降(P<0.05),Ⅲ组为139.2±16.2,较Ⅱ组增加(P<0.05);Bax蛋白表达Ⅱ组为107.1±15.8,Ⅰ组为89.3±8.4,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ组为94.2±9.5,较Ⅱ组下降(P<0.05);Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达Ⅲ组与Ⅰ组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 细胞凋亡在失神经骨骼肌萎缩中发挥重要作用,可能是骨骼肌萎缩的原因之一;氯沙坦可通过抑制肌细胞凋亡延缓大鼠失神经骨骼肌的萎缩.     

失神经骨骼肌萎缩机制的研究进展

目的对近年失神经骨骼肌萎缩机制的研究进展作一综述。方法广泛查阅近年有关失神经骨骼肌萎缩的国内外文献,并进行综述。结果失神经骨骼肌萎缩的机制非常复杂,目前主要从组织学、细胞学和分子学的改变来研究萎缩机制。失神经骨骼肌纤维变细,排列紊乱,并有凋亡小体出现。促凋亡相关基因表达上调,抑制凋亡相关基因下调。骨骼肌卫星细胞在失神经支配后增多,但不能分化为成熟肌纤维,以致最后减少甚至耗竭。失神经支配萎缩的骨骼肌细胞中线粒体结构改变和代谢相关酶基因下调导致肌细胞代谢紊乱。结论骨骼肌纤维组织学改变,肌卫星细胞数量及分化改变,线粒体结构改变,凋亡相关基因和代谢相关基因表达发生改变均参与了失神经骨骼肌萎缩的发生。     

异体神经段皮下包埋对坐骨神经再生影响的研究

目的　探讨异体周围神经段皮下包埋对坐骨神经再生的影响。　方法　 Wistar大鼠 30只 ,雄性。 6只为供体 (C组 ) ,余随机分为两组。实验组 (A组 ) 12只 ,于右大腿后侧皮下行异体坐骨神经 (15 mm)包埋 ,2周后取出 ,修整为 10 mm的片段移植于左侧新鲜的坐骨神经缺损处 (10 m m)。对照组 (B组 ) 12只 ,于右腿相应部位皮肤切口直接缝合 ,左侧新鲜坐骨神经 (10 mm)原位吻合。术后 2、4、8和 14周行组织学观察 ,14周作电生理测定和电镜观察。　结果　术后 2周 ,A组炎性反应稍重于 B组 ;至 4周时两组的炎性反应程度相似 ,近端少许胶原纤维增生 ;8周时两组的炎性反应基本停止 ,胶原纤维增生稍明显 ;14周时两组神经外膜构成完整 ,束膜、内膜结构无明显差异。再生大量的有髓神经纤维及少量的无髓神经纤维。髓鞘结构完整。再生轴突数目、面积差异无统计学意义 ,束膜厚度、分布及范围相似。运动神经传导速度、峰值及潜伏期差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。　结论　皮下包埋的异体周围神经段虽有一定的炎性反应 ,但仍具有与自体神经移植相似的神经再生引导作用。     

骨形成蛋白对骨骼肌卫星细胞增殖与胶原蛋白合成的影响

目的　探讨骨形成蛋白 (BMP)对骨骼肌卫星细胞增殖与胶原蛋白合成的影响。　方法　体外获取与培养 Wistar大鼠骨骼肌卫星细胞 ,分别用含 BMP浓度为 0、50、1 0 0、50 0和 1 0 0 0 ng/ml的诱导培养基培养 72小时。通过 MTT法测定细胞的增殖 ,光镜观察细胞融合率 ,3 H-脯氨酸掺入法测定细胞胶原蛋白合成量。　结果　 BMP可促进骨骼肌卫星细胞的增殖 ,降低其细胞融合率 ,同时增加胶原蛋白的合成量。这种作用在 BMP浓度为 50 0 ng/ml即可表现出来 ,并随着浓度的增加越明显。　结论　 BMP可促进骨骼肌卫星细胞的增殖 ,抑制成肌表型促进向成骨细胞分化     

骨骼肌成肌细胞移植研究

目的 回顾近年国内外骨骼肌成肌细胞移植的相关研究进展。方法 广泛查阅近期成肌细胞培养、移植方法改进、移植前受体和细胞准备、支架材料的选取，以及机体免疫情况对移植效率的影响等相关文献，探讨如何提高成肌细胞移植效率。结果 近年成肌细胞移植技术不断改进，移植效率不断提高。结论 骨骼肌成肌细胞移植具有潜在的临床价值和广泛的应用前景。