PCR-ELISA测定结核分枝杆菌DNA临床应用评价

目的评价聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA)测定结核分枝杆菌DNA临床应用价值.方法用PCR-ELISA测定436例肺结核、172例非结核病人痰标本中的结核分枝杆菌DNA,并结合临床诊断和痰菌检查对实验结果进行分析.结果 436例活动性肺结核病人本法最终阳性341例,阳性率78.21%,其中痰菌阳性病人本法阳性率为97.07%,痰菌阴性病人阳性率为55.33%(109/197);而172例对照患者只有3例假阳性,假阳性率1.74%.结论本法测定痰液结核分枝杆菌DNA对肺结核的诊断具有很高的敏感性和特异性,尤其对痰菌阴性的活动性肺结核病人具有重要辅助诊断价值.     

评价血清中结核杆菌特异性蛋白抗体对诊断肺结核的应用价值

目的 评价结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核诊断的应用价值.方法 对370例活动性肺结核患者、42例非结核性肺部疾病患者和30例健康献血员进行血清结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测,同时对全部肺结核和非结核性肺部疾病患者进行痰抗酸杆菌涂片和培养.结果 370例临床诊断的活动性肺结核患者,结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测阳性284例,阳性率76.8％;42例菲结核性肺部疾病患者,假阳性4例,假阳性率9.5％;30例健康献血员对照组,假阳性1例,假阳性率3.3％.检测菌阳肺结核的敏感性为81.4％,,菌阴肺结核的敏感性为72.9％;阳性检出率76.8％远高于细菌学的阳性检出率45.1％,x2=77.72,P＜0.05,具有统计学意义.结论 结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核的诊断具有较好的敏感性和特异性.     

结核抗体阴性排菌肺结核患者临床分析

血清结核抗体检测是诊断肺结核的重要辅助检查,由于肺结核病人痰菌阳性率与痰中结核菌的有无及浓度有关,若每毫升痰标本中结核菌数＜1000条,则涂片阳性率＜10%,所以,在门诊病人的诊断中,结核抗体成为肺结核诊断的常规检查,但作者在长年临床实践中发现,有许多病人痰菌阳性,但血清结核抗体阴性,有报道活动性肺结核病人血清结核抗体阳性率为62%,为了探讨影响结合抗体阳性率的因素,作者对2000年以来,结核抗体阴性及结核抗体阳性排菌肺结核病人的临床干预因素进行了观察研究,报道如下:     

痰液结核杆菌的检查方法结果比较

目的：探讨不同方法结果比较痰液结核杆菌(TB)阳性率。方法：痰直接涂片和浓集涂片找抗酸杆菌；痰培养；实时动态荧光定量PCR(FQ—PCR)检测痰液TB—DNA。结果：浓集法较直接法阳性率有大幅提高，培养法阳性率较低。对50份来自临床诊断肺结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的标本检测表明，FQ—PCR检出28份阳性，直接法检出6份阳性，浓集法检出16份阳性，培养法检出12份阳性，其中1例假阳性，其余证实无结核分枝杆菌的标本，几种方法检查均为阴性。结论：涂片检查结核杆菌应提倡用浓集法，FQ—PCR法检测TB—DNA可列入TB实验诊断常规项目，涂片。培养，及FQ—PCR同时检测可从不同方面满足临床需要。     

结核分枝杆菌检测方法临床应用的对比研究

目的用涂片、聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值。方法对169例临床确诊的肺结核患者、可疑肺结核患者和非结核患者痰标本用涂片、PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析。结果 169例痰标本中,痰涂片检查阳性率为7.1%(12/169),PCR检测阳性率为32.54%(55/169);痰涂片、PCR法检测42例临床确诊的肺结核患者痰标本阳性率分别为11.9%(5/42)、57.1%(24/42);检测82例临床可疑肺结核患者痰标本阳性率分别为8.54%(7/82)、37.8%(31/82)。比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(χ2=19.729,P<0.01),检测45例非结核患者痰标本,涂片及PCR检测均为阴性。结论 PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

血清脂阿拉伯甘露糖-IgG检测对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的评估血清脂阿拉伯甘露糖(LAM)-IgG检测对痰菌阴性肺结核的诊断价值。方法采用结核抗体快速检测试剂检测146例肺结核和127例非结核患者血清中LAM-IgG。结果肺结核组LAM-IgG阳性率为76.7%,其中痰菌阳性组为91.7%,痰菌阴性组为62.2%;非结核组LAM-IgG阳性率为10.2%。本法检测LAM-IgG的敏感性为76.7%,特异性为89.8%,差异有统计学意义(P0.01)。结论结核抗体快速检测试剂检测血清LAM-IgG操作简便快速,准确性高,可用于结核病的辅助诊断,特别是对痰菌阴性肺结核患者具有较高的鉴别诊断价值。     

流式细胞术检测CD161对结核病的诊断效能

目的探讨流式细胞术检测CD161对活动性肺结核的诊断效能,并比较其与其他检测方法的差异。方法采用流式细胞术检测138例体检健康者(健康对照组)和178例结核病患者(结核病组)全血细胞中CD161的表达,同时比较CD161检测技术、GeneXpert、结核分枝杆菌(TB)-DNA、痰涂片和γ-干扰素释放试验(IGRAs)对结核病的检测阳性率,以及在菌阴性肺结核患者和菌阳结核患者中的阳性率。结果CD161诊断活动性肺结核患者的灵敏度为72.47%,特异度为71.01%;CD161检测技术、GeneXpert、TB-DNA、痰涂片和IGRAs方法在检测结核患者中的阳性率分别为72.47%、50.34%、40.62%、33.33%、67.46%;在菌阳性肺结核患者中,GeneXpert检测阳性率最高,为97.96%,在菌阴性肺结核患者中,CD161检测技术阳性率最高,为72.64%。结论流式细胞术检测CD161对活动性肺结核有很高的诊断价值,可用于健康人群的体检筛查。     

γ干扰素释放试验在结核病诊断中的应用价值

目的分析γ干扰素释放试验(IGRA)在结核病诊断中的应用价值。方法收集2017年11月-2019年1月广州南方医院796例进行IGRA检测的住院患者资料,分析IGRA对结核病的诊断价值,并将其与痰涂片抗酸染色镜检、结核抗体胶体金法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法、结核菌素皮肤试验(TST)、结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)进行比较。结果 IGRA对肺结核和肺外结核检出阳性率分别为80.2%和84.1%,差异无统计学意义(P>0.05);肺结核组与非结核组阳性率差异有显著统计学意义(P<0.01)。IGRA对结核诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为 81.9%、81.3%、60.1%和92.9%。痰涂片抗酸染色镜检、结核抗体胶体金法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法、TST、T-SPOT.TB的灵敏度分别为3.4%、21.1%、15.2%、66.7%、82.9%。结论 IGRA灵敏度和阴性预测值较好,对结核辅助诊断具有较高临床应用价值。     

结核感染T细胞检测对活动性肺结核患者诊断效能的影响

目的探讨结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)对活动性肺结核患者诊断效能的影响。方法选取我院2015年11月-2017年6月活动性肺结核患者93例设为研究组、肺部其他病变患者93例设为对照组。抽取所有受检者空腹静脉血及痰液标本,分别实施T-SPOT.TB试验及痰多聚酶链反应结核分枝杆菌核酸检测(TB-DNA-PCR)。统计两组T-SPOT.TB及TB-DNA-PCR试验结果、研究组菌阳性及菌阴性患者T-SPOT.TB及TB-DNA-PCR试验阳性率,并对比T-SPOT.TB与TBDNA-PCR对活动性肺结核诊断效能。结果研究组T-SPOT.TB及TB-DNA-PCR试验阳性率(87.10%、37.63%)高于对照组(36.56%、0.00%)(P0.05);研究组菌阳性患者T-SPOT.TB及TB-DNA-PCR试验阳性率(97.30%、51.35%)高于菌阴性患者(80.36%、28.57%)(P0.05);T-SPOT.TB诊断敏感度(87.10%)高于TB-DNA-PCR(37.63%),特异度(63.44%)低于TB-DNAPCR(100.00%)(P0.05),两种诊断方式准确度间无明显差异(P0.05)。结论采取结核感染T细胞检测对活动性肺结核予以诊断,可有效提高诊断敏感度,为临床及早制定活动性肺结核对应治疗方案提供一定参考依据,但其特异度较低,临床实际可联合痰培养及痰多聚酶链反应结核分枝杆菌核酸检测等方式对患者进行综合诊断,以此最大程度降低疾病漏诊及误诊风险。     

菌阴肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌rpoB耐药基因突变的检测

目的 应用套式PCR-DNA测序方法直接检测菌阴肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌相关的rpoB基因突变,以期建立一种判定菌阴肺结核患者是否对利福平有无耐药性的方法.方法 采用套式PCR-DNA测序方法直接检测112例活动性肺结核患者和20例非结核性肺部疾病患者痰标本中结核分枝杆菌rpoB基因突变情况.同份痰标本同时做涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 112例活动性肺结核患者痰标本39例为菌阴(涂阴培阴),39例菌阴痰中套式PCR扩增18例呈阳性,产物DNA测序2例有rpoB基因突变,位点为第526发生了CAC→GAC突变和第531发生了TCG→TTG突变.20例非结核性肺部疾病患者标本套式PCR扩增均为阴性,特异性100%.结论 套式PCR-DNA测序可望为直接检测菌阴肺结核患者临床痰标本中结核分枝杆菌耐利福平的准确、特异、快速的方法.     

荧光定量PCR技术检测结核分支杆菌DNA的应用价值

目的评价荧光定量PCR技术检测临床标本中结核分支杆菌的应用价值。方法应用荧光定量PCR法及抗酸染色、结核杆菌培养法,对179例活动性肺结核患者晨痰、123例活动性肺结核患者外周血、34例结核性胸膜炎患者胸水、20例非结核性呼吸系统疾病患者的晨痰标本进行检测。结果179例活动性肺结核患者晨痰、123例活动性肺结核患者外周血、34例结核性胸膜炎患者胸水,涂片抗酸染色阳性率分别为20．67％（37／179）、0．00％、0．00％;细菌培养阳性率分别为41．34％（74／179）、0．00％、2．94％（1／34）;荧光定量PCR技术阳性率分别为64．25％（115／179）、38．21％（47／123）、44．12％（15／34）。3种标本荧光定量PCR技术阳性率高于抗酸染色和结核杆菌培养,经统计学处理发现,差异有统计学意义。用荧光定量PCR技术检测临床标本特异性为95．00％。结论荧光定量PCR技术将PCR扩增、荧光探针杂交及检测一体化,在单一管内完成,具有简便、快速、防污染、敏感性及特异性高等优点,是结核病诊断的有效方法之一。     

噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用

目的 探讨噬菌体生物扩增法（Phab）快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法 应用Phab、BACTEC-460检测仪及厚涂片法共同检测206例痰标本。结果 58例涂片阳性、BACTEC-460培养阳性的标本中．Phab检测阳性55例（94．8％）;47例涂片阴性、BACTEC-460、培养阳性的标本中,Phab检测阳性35例（74．4％）;101例涂片阴性、BACTEC-460培养阴性的标本中,Phab检测阳性25例（24．8％）。结论 Phab快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆茵的快速检测,可用于结核病的初步诊断,但测定条件的选择非常重要。     

结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核诊断中的应用价值

目的评估结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核的诊断价值。方法纳入包括菌阴性肺结核病患者145例、非结核肺部疾病患者45例共190例。所有研究对象进行结核感染T细胞检测,计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等指标。结果结核感染T细胞检测对菌阴性肺结核诊断的灵敏度为85.5%,特异度为84.4%,阳性预测值为94.7%,阴性预测值为64.4%。不同年龄段间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论结核感染T细胞检测有较高的阳性预测值,适用于菌阴性肺结核病的临床辅助诊断。     

血清结核杆菌抗体检测在结核病的临床意义

目的：探讨血清结核杆菌抗体检测在住院患者结核病诊断中的临床价值。方法150例结核病患者,80例非结核病患者以及40例健康志愿者均应用以脂阿拉伯甘露糖（LAM）为抗原的 ELISA法进行抗体阳性率的检测。并应用痰涂片和PPD实验检查对150例结核患者进行检测。结果在150例肺结核患者中,结核杆菌抗体检测的阳性检出率为72．67％（109/150）,显著高于痰涂片的51．33％（77/150）和PPD实验的58．67％（88/150）,且差异均具有统计学意义（χ2＝14．49,6．52;P＜0．001,0．011）。结核病组抗体阳性率总数为72．67％（109/150）,显著高于非结核病组的17．50％（14/80）和健康对照组的10．00％（4/40）,且与二者比较,差异均具有统计学意义（χ2＝41．15,51．45;P＜0．001,0．001）。非结核疾病组与健康人群比较,抗体阳性率的差异无统计学意义（χ2＝1．18,P＝0．27）。结论结核抗体测定对结核病的阳性检出率较高,优于传统的痰涂片和PPD实验检测,临床上具有很大的应用价值。     

显微镜观察药物敏感性技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌的研究

目的探讨显微镜观察药物敏感性技术(MODS)在痰液标本中结核分枝杆菌(MTB)的检测效果,以评价其临床应用价值。方法收集150份患者临床痰标本,应用MODS技术、罗氏培养法进行MTB的检测,将两法的结果进行对比分析。结果 MODS技术与罗氏培养法结果符合率为77.8%,MODS技术检测痰标本中MTB的敏感性为93.3%,特异性为70.0%,阳性预测值(PPV)为60.8%,阴性预测值(NPV)为95.4%,正确性为77.8%。结论 MODS技术检测痰标本中MTB具有快速、灵敏、简便等优点,可作为结核病细菌学快速检测的新方法之一。     

寡核苷酸法检测结核病患者血清IgG抗体的临床应用评价

目的评价结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法在结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法对285例结核病[菌阳肺结核（涂片阳性/培养阳性）124例,菌阴肺结核（涂片、培养均为阴性）161例]、38例非结核病的其他呼吸系统疾病患者及49名健康志愿者同步进行抗酸杆菌涂片、培养及结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法检测。结果结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法诊断菌阳肺结核的敏感性为67.7%（84/124）,诊断菌阴肺结核的敏感性为33.5%（54/161）,诊断结核病的总体敏感性为48.4%（138/285）,总体特异性为92.0%（80/87）,其中在非结核病的其他呼吸系统疾病患者中的特异性为86.8%（33/38）,在健康志愿者中的特异性为95.9%（47/49）。结论结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法有极高的特异性和一定的敏感性,可用于结核分枝杆菌IgG抗体的血清学检测,能为临床诊断提供可靠的参考依据。     

结核分枝杆菌复合群检测在AIDS合并结核病诊断中的应用

目的探讨结核分枝杆菌复合群(MTD)检测在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并结核分枝杆菌感染实验诊断的临床应用。方法采用MTD、结核分枝杆菌培养及抗酸染色3种方法,对127例AIDS合并疑似分枝杆菌感染患者的痰样本进行同步检测,对照组为同期住院非人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的普通疑似结核病患者25例。结果 127例AIDS患者痰样本MTD阳性率为29.1%;结核分枝杆菌培养法阳性率为25.2%;抗酸染色阳性率为18.9%;对照组MTD和结核分枝杆菌培养法的阳性率均为44.0%,抗酸染色阳性率为40.0%。结论 MTD对AIDS合并结核病的诊断有较高的应用价值,在提高阳性率的同时可在1个工作日内提供结核分枝杆菌感染的实验诊断信息。     

荧光定量聚合酶链反应检测在肺结核诊断中的应用价值

目的分析荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)在诊断肺结核中的应用价值。方法选择2018年1月-2020年1月湖南省儿童医院收治的21例肺结核患儿作为肺结核组,另外选择同时期21例排除肺结核感染的肺部疾病患儿作为非肺结核组。全部患儿均行痰涂片抗酸染色镜检、纤维支气管镜(纤支镜)痰涂片抗酸染色镜检和BALF中TbDNA荧光定量PCR检测。比较3种检测方法对肺结核诊断的特异度、敏感度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。结果痰涂片抗酸染色镜检、纤支镜痰涂片抗酸染色镜检和荧光定量PCR的敏感度分别为19.05%、14.29%、76.19%,特异度分别为100.00%、100.00%、95.24%,PPV分别为100.00%、100.00%、94.12%,NPV分别为55.26%、53.85%、80.00%。荧光定量PCR检测BALF中TbDNA的敏感度明显高于痰涂片抗酸染色镜检和纤支镜痰涂片抗酸染色镜检(76.19%比19.05%、14.29%),差异有统计学意义(P<0.05);3种检测方法的特异度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA,具有快速、敏感度高、特异度高的特点,利于早期诊断肺结核,尤其是对于痰涂片检测呈阴性及无典型影像学特征的患儿,可以明显提高确诊率,其结果能够作为诊断肺结核的主要指标。     

LCx Mycobacterium tuberculosis assay is valuable with respiratory specimens, but provides little help in the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis

BACKGROUND: Commercial nucleic acid amplification tests, designed for the detection of Mycobacterium tuberculosis DNA/RNA in respiratory samples, are often applied also in nonrespiratory specimens in order to verify the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis. AIM. To evaluate the value of the Abbott LCx Mycobacterium tuberculosis assay for the diagnosis of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis based on routine clinical laboratory results. METHODS: The assay was used to analyse 350 respiratory and 826 nonrespiratory specimens from 961 patients, of whom 3.6% had culture-proven tuberculosis. The results obtained by the LCx assay were compared with the records on mycobacterial isolates of the national reference laboratory and, in the case of positive findings, with clinical data. RESULTS: In comparison with culture, the sensitivity, specificity and positive/negative predictive value of the assay on respiratory specimens were 87.5%, 99.7%, 93.3% and 99.4%, respectively. With nonrespiratory specimens, the overall sensitivity, specificity and positive/negative predictive value of the LCx assay were 73.3%, 98.0%, 40.7% and 99.5%, respectively. When clinical and histological data were also included, the positive predictive value of LCx with nonrespiratory specimens was 45.8%. CONCLUSION: Critical interpretation of the nucleic acid amplification results obtained from nonrespiratory specimens is necessary in both laboratory and clinical settings.