GPRC5A、SOCS3及STAT3在非小细胞肺癌的表达及相关性分析

目的本研究旨在探讨GPRC5A、SOCS3、STAT3在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达与NSCLC临床特征的关系及三者之间的相关性。方法运用免疫组织化学Elivision法检测GPRC5A、SOCS3、STAT3在92例NSCLC中的表达情况,随机抽取40例的癌旁正常组织作为对照,并对三者进行相关性分析。结果在NSCLC中GPRC5A、SOCS3、STAT3的阳性表达率分别为43.4%(40/92)、44.6%(41/92)、76.0%(70/92),而在癌旁组织中三者的阳性率分别是77.5%(31/40)、100%(40/40)、32.5%(13/40),三者与NSCLC的分化、分期、淋巴结转移密切相关(P0.05),GPRC5A与SOCS3在NSCLC中呈正相关(r=0.537,P0.05)、SOCS3与STAT3呈负相关(r=-0.369,P0.05)。结论 GPRC5A、SOCS3、STAT3在NSCLC的发生和发展中起重要作用,且三者之间存在显著相关性,为深入研究其调控路径提供了依据,为肺癌的靶向治疗提供了新的思路。     

STAT3在消化系统恶性肿瘤研究进展

信号转导与转录活化因子3(STAT3)是信号转导和转录活化因子家族(STAT)的重要成员,是许多致癌途径的焦点,在多种癌肿中异常活化。由于它对关键蛋白的调控失常而促进癌肿进展,包括肿瘤细胞对增殖失控、抑制凋亡、诱生血管形成,且侵袭远处器官,逃逸免疫监视和耐药。此文着重对其在消化系统恶性肿瘤中的异常活化、促进癌肿发生发展可能的机制和肿瘤分子治疗的靶位等研究的新进展做一综述。     

癌基因STAT3与结直肠癌的关系研究进展

STAT3是信号转导和转录激活因子家族(STAT)的重要成员,由细胞外细胞因子、生长因子等多肽类配体激活,作用于细胞核内特异的DNA片段,调控靶基因的转录,促进细胞的增殖,抑制凋亡.因此,STAT3信号通路可能成为肿瘤分子治疗的新靶位点.对STAT3癌基因的一些相关性研究,为结直肠癌形成机制的阐述及治疗奠定了基础.     

STAT3蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨STAT3和p-STAT3蛋白在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学的方法检测了90例肝癌组织及其相应的癌旁组织中STAT3和p-STAT3蛋白的表达,分析STAT3和p-STAT3蛋白表达与临床病理特征及患者预后的关系。特征参数之间用χ2检验;采用Kaplan-Meier法进行生存分析,用Log-rank检验进行曲线间比较;运用Cox回归进行单因素及多因素生存分析。结果肝癌组织中STAT3主要在细胞质中表达,而p-STAT3主要表达在细胞核内;STAT3和p-STAT3在肝癌组织中阳性表达率明显高于癌旁组织;STAT3和p-STAT3蛋白的表达与卫星灶（P=0.033,P〈0.01）、血管浸润（P=0.046,P〈0.01）及AJCC分期（P〈0.01,P〈0.01）有关,与患者的性别（P=0.280,P=0.403）、年龄（P=0.432,P=0.844）、肿瘤大小（P=0.762,P=0.161）、肿瘤数量（P=0.301,P=0.326）、肿瘤的分化程度（P=0.753,P=0.910）及甲胎蛋白（P=0.441,P=0.080）比较差异无统计学意义;肝癌组织中STAT3和p-STAT3蛋白高表达的患者5年生存率明显低于低表达患者。结论 STAT3和p-STAT3蛋白可能参与了肝癌的浸润转移,有望成为一种新的肝癌预后参考指标。     

应用表达载体介导siRNA抑制胰腺癌STAT3基因表达的研究

目的探讨表达载体介导小干扰RNA（siRNA）对人胰腺癌细胞系SW1990转录激活因子-3（STAT3）表达的抑制作用。方法设计合成3种可编码后形成小发夹结构针对STAT3基因的siRNA的DNA序列，将其连入pRNAT—U6．1／Neo质粒中，构建STAT3siRNA表达载体。表达载体进行PCR及测序鉴定，并分别转染SW1990细胞，实时定量PCR和Western blot观察SW1990细胞转染后STAT3 mRNA和蛋白表达的改变。结果PCR和DNA测序证实携带3种STAT3 siRNA表达载体构建成功，分别转染SW1990细胞后，STAT3基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降（P〈0．05），其中，第二种STAT3 siRNA作用明显，可使mRNA和蛋白表达水平分别下降63％和60％。结论本研究构建的STAT3．siRNA表达载体可有效抑制SW1990细胞STAT3的mRNA和蛋白表达，为下一步以STAT3为靶点的胰腺癌基因治疗实验研究奠定了基础．     

利用siRNA技术沉默膀胱肿瘤STAT3基因及促进凋亡的机制探讨

目的沉默人膀胱移行细胞癌细胞T24的STAT3基因，并探讨其对T24细胞生长抑制及诱导凋亡的作用机制。方法利用含有STAT3 mRNA的siRNA的pSilencer 3．1-siRNA-STAT3重组质粒转染T24细胞；采用Western印迹、RT-PCR等技术观察重组质粒对STAT3基因表达的影响；用WTT法观察重组质粒对T24细胞的体外生长抑制作用；用流式细胞术（FCM）及吖啶橙染色检测重组质粒的诱导凋亡作用。结果重组质粒成功转染T24细胞；Western印迹、RT-PCR证实重组质粒在蛋白及mRNA水平都显著抑制STAT3基因的表达水平，抑制率为59％～72％；MTT及FCM证实重组质粒可显著抑制T24细胞的体外生长并诱导细胞凋亡，抑制率及凋亡率分别为53％和17．3％。结论pSilencer 3．1-siRNA-STAT3重组质粒可抑制STAT3在人膀胱肿瘤细胞的表达，抑制肿瘤细胞的生长，促进其凋亡。     

STAT3研究近况

信号转导及转录活化因子3是一类由750－795个氨基酸组成的DNA结合蛋白,有α,β,和γ三种亚型,信号转导及转录活化因子3广泛表达于不同类型的细胞和组织中,参与细胞生长,恶性转化,凋亡等生理功能的调控,现已在中枢神经系统疾病,肿瘤心血管系统等多种疾病中发现信号转导及转录活化因子3表达及活化异常。     

应用表达载体介导siRNA抑制胰腺癌STAT3基因表达的研究

目的 探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人胰腺癌细胞系SW1990转录激活因子-3(STAT3)表达的抑制作用.方法 设计合成3种可编码后形成小发夹结构针对STAT3基因的siRNA的DNA序列,将其连入pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建STAT3 siRNA表达载体.表达载体进行PCR及测序鉴定,并分别转染SW1990细胞,实时定量PCR和Western blot观察SW1990细胞转染后STAT3 mRNA和蛋白表达的改变.结果 PCR和DNA测序证实携带3种STAT3 siRNA表达载体构建成功,分别转染SW1990细胞后,STAT3基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降(P＜0.05),其中,第二种STAT3 siRNA作用明显,可使mRNA和蛋白表达水平分别下降63%和60%.结论 本研究构建的STAT3 siRNA表达载体可有效抑制SW1990细胞STAT3的mRNA和蛋白表达,为下一步以STAT3为靶点的胰腺癌基因治疗实验研究奠定了基础.     

STAT3调控胰腺癌侵袭转移相关基因的筛选

目的 应用基因芯片筛选信号转导与转录激活因子3(STAT3)调控胰腺癌侵袭转移的相关基因.方法 以慢病毒感染获得稳定STAT3沉默人胰腺癌细胞株SW1990,以空质粒病毒组、未感染组为对照.应用基因芯片筛选3组细胞与肿瘤侵袭转移相关的差异表达基因.用实时PCR及蛋白质印迹法检测STAT3 mRNA及蛋白表达,并验证所选取的3个差异表达基因(MMP-7、IL-1β、IgTα7).结果 靶向STAT3的病毒感染SW1990细胞后,STAT3 mRNA表达水平为0.391±0.037,显著低于空质粒病毒组的1.002±0.015和未感染组的1.206 ±0.042(P ＜0.05);STAT3蛋白表达水平为182.38±65.32,亦明显低于空质粒病毒组的223.40±58.40和未感染组的212.33±53.69(P＜0.05).STAT3沉默的SW1990细胞有8个肿瘤侵袭转移相关基因表达上调,3个表达下调,经验证,沉默组细胞MMP-7、IL-1β mRNA表达水平明显低于空质粒病毒组(0.287±0.115比1.010±0.124,t =19.45,P=0.000;0.490±0.010比1.002±0.002,t=13.83,P=0.000),而IgTα7 mRNA表达水平无明显变化(1.173±0.280比0.998±0.003,t=4.236,P=0.094).同时沉默组细胞MMP-7蛋白表达亦显著降低.结论 STAT3沉默可导致人胰腺癌SW1990细胞多个与肿瘤侵袭转移相关基因表达的改变,其中MMP-7可能是受STAT3调控的主要靶基因.     

STAT3:慢性炎症介导肝癌进程的关键分子

STAT3是信号转导及转录激活因子家族成员,在肝癌等慢性炎症相关性肿瘤中异常激活。作为肝癌炎症微环境中的关键信号分子,STAT3不仅参与肝癌发生过程中的炎癌转化,而且通过多种方式促进肝癌进展中癌细胞的增殖、侵袭与转移,是一个潜在的肝癌治疗靶标。综述了近几年STAT3与肝癌关系的新进展。     

人生长激素慢性刺激对小鼠肝细胞JAK/STAT5信号通路的影响

目的研究正常幼年小鼠长期注射人生长激素（hGH）对其肝细胞生长激素JAK/STAT5信号通路的影响。方法实验组小鼠连续2wk按1μg/g体重每天皮下注射人生长激素（hGH）,对照组小鼠连续2wk每天皮下注射磷酸盐缓冲液（PBS）,浓度为0.1M。在注射完最后一次hGH和PBS16h之后,每组处死1/2小鼠。两组中另外1/2小鼠处死前30min皮下按1μg/g体重注射单剂量hGH。蛋白质印迹法（WesternBlot）检测小鼠肝组织细胞核和细胞总蛋白中人信号传导子及转录激活子5（STAT5）、STAT5的磷酸化形式（p-STAT5）和生长激素受体（GHR）的表达,凝胶迁移实验分析（EMSA）肝细胞核STAT5与DNA粘附能力,酶标记免疫吸附测定（ELISA）法测定血清GH浓度。结果 hGH慢性刺激组小鼠与PBS对照组小鼠相比体重明显增加;与PBS对照组小鼠相比,hGH慢性刺激组小鼠的GH信号通路的人信号传导子及转录激活子5（STAT5）磷酸化水平显著减低;处死前30min按1μg/g体重单剂量注射hGH的小鼠中,hGH慢性刺激组小鼠的STAT5b磷酸化水平与PBS对照组相比也同样显著减低;细胞膜GHR水平没有变化。结论 hGH慢性刺激可抑制小鼠肝细胞的JAK/STAT5信号转导通路。     

信号传导和转录激活因子3调控肝癌侵袭转移的研究进展

信号传导和转录激活因子(STAT3)是一种信号转导蛋白和转录激活物,可被多种细胞因子激活。被活化的STAT3能转录并激活下游靶基因,引起一系列细胞相关因子的异常表达,与多种恶性肿瘤的发生、发展和侵袭转移关系密切。STAT3在肝癌的发生和发展中同样起着非常重要的作用。本文就其结构、功能及其与肝癌侵袭、转移的研究进展进行综述。     

骨髓增生异常综合征患者JAK2和STAT5基因表达的变化

目的:比较骨髓增生异常综合征(MDS-RA)型与MDS-RAEB型患者外周血JAK2、STAT5基因表达水平,探索JAK2和STAT5信号转导在MDS发病中的作用。方法:建立JAK2、STAT5基因表达的荧光定量FQ-PCR检测方法,检测10例正常人、15例MDS-RA患者和10例MDS-RAEB患者外周血JAK2、STAT5基因表达水平及其自细胞介素(IL)-2、IL-3、γ干扰素(γ-INF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)细胞因子水平。结果:正常人IL-2、IL-3、γ-INF、TNF-α分别为50．28±14．19、29．15±5．47、26．17±5．36、31．12±8．73;MDS-RA患者分别为51．16±13．44、67．72±10．19、43．39±13．08、62．36±12．78;MDS-RAEB患者为19．55±21．86、28．74±15．52、64．34±27．35、82．13±17．79。正常人JAK2、STAT5基因不表达或低表达,拷贝数分别为480．07±609．17、116．05±173．87,MDS-RA患者分别为4 725．63±3 931．59、1 265．36±1 087．80,显著高于正常人(均P<0．01); MDS-RAEB患者分别为23006．11±11 311．10、13 144．55±8 493．36,显著高于MDS-RA患者(均P<0．01)。结论:细胞因子及其相关的JAK2和STAT5基因参与了MDS的发病及其恶性转变,JAK和STAT可能是MDS细胞由低危MDS-RA型向高危MDS-RAEB型恶性转化的信号通路之一。     

STAT3与PCNA在胃癌中的表达及其临床意义

目的研究信号转导与转录活化因子(STAT3)和增殖核抗原(PCNA)在胃癌中的表达情况及其在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化二步法检测40例胃癌组织和40例正常组织中STAT3与PCNA的表达。结果胃癌组织中STAT3的阳性表达率为65.0%,明显高于正常组织的27.5%。PCNA的阳性表达率为57.6%,明显高于正常组织的25.0%。STAT3的表达与临床分期、淋巴结转移和分化程度相关(P0.05),与患者年龄、性别无关(P0.05),并且与PCNA的表达呈正相关。结论 STAT3的异常活化可促进细胞的过度增殖,而PCNA则反映了癌细胞的增殖状态。二者结合检测对胃癌的临床诊断及治疗有一定的价值。