不同品系大鼠对天花粉蛋白诱导被动皮肤过敏差异性的比较研究

目的比较SD、Wistar和F344三种品系大鼠对天花粉蛋白诱导的被动皮肤过敏(Passive cutaneous ana-phylaxis,PCA)反应的差异性。方法选用SD、Wistar和F344三种品系大鼠,用天花粉蛋白为致敏原,以PCA反应时出现蓝斑的直径及蓝斑OD值变化率作为判别标准,进行大鼠同种或小鼠异种PCA试验。结果大鼠同种PCA试验显示,每只大鼠注射天花粉蛋白0.9 mg后,三种品系大鼠PCA反应均为阳性,蓝斑直径大小及蓝斑OD值变化率从大到小依次为:SD、F344大鼠Wistar大鼠;小鼠异种PCA试验显示,耳廓皮内分别注射三种品系大鼠天花粉蛋白抗血清后,小鼠异种PCA反应均为阳性,耳廓蓝染OD值变化率从大到小依次为:SD大鼠抗血清组F344大鼠抗血清组Wistar大鼠抗血清组。结论三种品系大鼠对天花粉蛋白的敏感性存在差异,其中以SD大鼠最为敏感。     

2种品系大鼠被动皮肤过敏反应的差异性比较

目的:比较SD,Wistar 2种品系大鼠对卵蛋白(OVA)、天花粉蛋白(TCS)诱导的被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)反应的差异性。方法:选用SD,Wistar 2种品系大鼠,以OVA,TCS为致敏原,PCA反应时出现蓝斑的直径及阳性反应率作为判别标准,进行大鼠同种或小鼠异种PCA试验,并考查佐剂的应用与否对试验结果产生影响。结果:大鼠同种PCA加或不加佐剂的TCS反应均为阳性,蓝斑直径大小SD大鼠＞Wistar大鼠;加入氢氧化铝凝胶佐剂可提高两品系大鼠对OVA的过敏反应阳性率,且Wistar大鼠的敏感性高于SD大鼠;小鼠异种PCA试验显示:耳廓皮内分别注射两种品系大鼠不加佐剂致敏的OVA抗血清时均呈阴性反应,注射SD大鼠天花粉蛋白抗血清后,呈阳性反应;分别注射加入佐剂致敏的OVA,TCS抗血清,则小鼠异种PCA反应均呈阳性。结论:2种品系大鼠对OVA,TCS的敏感性存在较大差异,SD大鼠对TCS较敏感,而Wistar大鼠对OVA的敏感性较强;加入佐剂可提高两种品系大鼠对OVA的过敏反应阳性率。     

不同品系大鼠对灯盏花素过敏反应差异性研究

目的:比较研究F344、BN、SD、Wistar四种品系大鼠对灯盏花素注射液被动皮肤过敏及其致敏血清中总IgE水平差异性。方法:四种品系大鼠分别随机分为正常对照组、OVA组、灯盏花素组。采用皮下注射给予不同药物致敏,观察各组大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)皮肤蓝斑直径大小和阳性率,并检测致敏血清总IgE水平。结果:PCA结果显示,四种品系大鼠的正常组均无蓝斑出现;OVA组,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为11.67±3.61(6/6)、47.33±5.72(6/6)、5.70±4.81(6/10)、17.90±3.84(10/10),与正常组相比均明显升高且具有显著统计学差异;血清总IgE水平检测结果显示,OVA组血清总IgE含量变化与PCA试验结果一致。对灯盏花素,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为5.17±2.32(4/6)、2.00±1.79(0/6)、1.67±1.97(0/10)、0.00±0.00(0/10),与正常组相比仅F344大鼠显示出显著性差异;血清总IgE仅F344、BN大鼠血清明显升高,且以F344大鼠变化倍数更高。结论:四种不同品系大鼠对灯盏花素所致被动皮肤过敏反应敏感性及血清总IgE水平均存在一定差异,两者具有一定相关性,其中以F344大鼠最为敏感。     

大鼠主动全身过敏试验方法的探讨

目的建立大鼠主动全身过敏试验模型,评价中药注射剂过敏反应。方法选用豚鼠和BN、F344、SD、Wistar4种品系大鼠,以卵白蛋白(OVA)、天花粉蛋白(TCS)、清开灵注射液、注射用灯盏花素为受试物,分别隔日腹腔注射致敏,共3次,于末次致敏后第14天静脉注射2倍致敏剂量激发。同时设生理盐水对照组。观察各组动物的过敏反应发生率及过敏反应症状。结果阳性药卵白蛋白和天花粉蛋白可引起豚鼠和大鼠发生过敏反应,发生率均为100%,豚鼠发生的过敏反应症状程度略高于大鼠。清开灵注射液可引起豚鼠和BN大鼠发生过敏反应,发生率分别为50%和100%。注射用灯盏花素导致F344、BN和SD大鼠发生过敏反应,发生率分别为100%、100%、83.33%,且F344大鼠呈现强阳性反应,而豚鼠则呈现阴性反应。结论大鼠可推荐作为主动全身过敏试验的动物模型之一,对致敏原的敏感性在动物不同品系间可能存在差异。     

不同品系小鼠异种被动皮肤过敏试验反应耳廓蓝染与血液抗体IgE和IgG水平的研究

目的观察卵白蛋白(OVA)致大鼠过敏抗血清对不同品系小鼠被动皮肤过敏试验(PCA)及血液免疫球蛋白E(IgE)和免疫球蛋白G(IgG)抗体水平变化的影响。方法 Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)组、NS佐剂组、OVA组、OVA佐剂组,采用皮下注射方式给予相应药物致敏,制备大鼠OVA抗体血清,并分别将其注入不同品系小鼠耳廓内,于致敏后3 h或48 h以相应药物激发,观察各组小鼠耳廓蓝染情况,并用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测小鼠体内抗体水平变化。结果各品系小鼠(KM、BALB/c、ICR、C57BL/6、B6;129S-Fcgr2btm1Ttk/J)NS组、NS佐剂组、OVA组耳廓蓝染阴性,OVA佐剂组耳廓蓝染阳性,其中各品系间存在差异,小鼠耳异种PCA敏感程度强度依次为KM、BALB/c>ICR、C57BL/6、B6;129S-Fcgr2btm1Ttk/J。结论小鼠异种PCA试验中,不同品系动物对OVA抗血清的敏感性存在差异,其中KM,BALB/c小鼠较为敏感,但PCA强度与血液IgE水平无明显的相关性。     

大鼠被动皮肤过敏试验影响因素的研究

目的:探讨大鼠皮肤被动过敏试验(PCA)的影响因素,为选择敏感试验条件和提高试验预测的准确性提供依据。方法:采用卵白蛋白和牛血清白蛋白为PCA试验的抗原,在不同条件下(加与不加佐剂、致敏的途径、大鼠的品系、制备抗血清的最佳取血时间、卵白蛋白与牛血清白蛋白在免疫原性上的差异等)进行PCA试验。结果:①加用佐剂能够显著增强SD和Wistar大鼠机体对免疫应答的敏感性。②ip致敏和背部皮下致敏均可获得良好的PCA反应,但ip致敏加用佐剂后会诱发大鼠腹腔慢性炎症。③SD大鼠与Wistar大鼠在抗原免疫应答的敏感性方面基本相似,但在同一试验中采用不同品系的大鼠进行PCA试验优于用单一品系的大鼠。④大鼠在致敏后16 d抗体中IgE含量高于致敏后14 d。⑤卵白蛋白在PCA试验中的免疫原性优于牛血清白蛋白。     

灯盏花素对大鼠CYP3A4体内活性的影响

目的以咪达唑仑作为探针药物,研究灯盏花素对大鼠细胞色素P450 3A4(CYP3A4)体内活性的影响,为临床合理用药提供参考。方法将SD大鼠随机分为3组,对照组、灯盏花素低剂量组和高剂量组。低剂量组和高剂量组每天分别尾静脉给予灯盏花素粉针剂0.18 mg/100 g及0.54 mg/100 g,共10 d,对照组给予生理盐水。各组分别于第11天注射咪达唑仑溶液,于给药前及给药后不同时间点眼内眦静脉取血0.8 ml,使用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆中咪达唑仑的浓度。结果静脉给予大鼠灯盏花素粉针剂10 d后,与对照组相比,低剂量组和高剂量组咪达唑仑的AUC、MRT和tφ均显著高于对照组(P<0.05),CL显著低于对照组(P<0.05);灯盏花素高剂量组与低剂量组无显著性差异。结论灯盏花素可明显抑制大鼠CYP3A4的体内活性。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织细胞周期负性调节蛋白P27和肾功能影响的实验研究

目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织细胞周期负性调节蛋白P27和肾功能的影响。方法:选健康雄性昆明种SD大鼠70只,随机分为糖尿病组(A)、糖尿病灯盏花治疗组(B)各25只和正常对照组(C)20只,前2组用链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,A组和C组等量生理盐水腹腔内注射,B组灯盏花素20mg.kg-1d-1腹腔内注射,3组给药后2w和6w宰杀,收集血和肾组织标本检测P27、血肌酐和血尿素氮水平,6w时收集尿标本检测尿肌酐水平。结果:(1)肾组织P27、血肌酐和血尿素氮水平为糖尿病组>灯盏花组>正常组,而血肌酐降低以2w组更明显(P<0.01);(2)尿肌酐排泄比较:正常组>灯盏花组>糖尿病组,有统计学差异(P<0.05)。结论:灯盏花素可能通过对肾组织细胞周期负性调节蛋白P27的影响而抑制肾脏增生而调节肾功能,增加尿肌酐排泄,降低血尿素氮和血肌酐浓度发挥肾脏保护作用。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏P47phox基因mRNA表达影响的实验研究

目的:探讨灯盏花素对SD大鼠糖尿病模型肾组织中p47phox基因mRNA表达的影响.方法:将SD大鼠随机分为糖尿病模型(A)组、糖尿病灯盏花素治疗(B)组和正常对照(C)组,取其肾组织采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法检测各组SD大鼠肾组织中p47phox基因的mRNA表达,并进行比较分析.结果:(1)对A组、B组和C组样本实时荧光定量PCRCT(cycle time)均数进行方差分析,差别有统计学意义(P＜0.05).2周时A组和B组肾组织中p47phox基因的mRNA表达分别是C组的1.92倍及1.87倍,6周时分别是C组的5.69倍及4.08倍.(2)与C组比,A组和B组的血肌酐、尿素氮和肾重/体重有升高.A组和B组相比,B组下降,相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:(1)糖尿病时肾脏p47phox基因的mRNA表达水平升高,氧化应激增强.(2)灯盏花素治疗降低肾脏p47phox基因的mRNA表达水平,抑制氧化应激.(3)灯盏花素治疗后糖尿病SD大鼠的血肌酐,尿素氮水平降低,肾重/体重降低.提示灯盏花素治疗能改善糖尿病SD大鼠肾脏功能,抑制肾脏肥大.     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织NF-κB和肾功能影响的实验研究

目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织nuclearfactorkappaB(NF-κB)和肾功能的影响。方法:选健康雄性昆明种SD大鼠70只,随机分为糖尿病组(A)、糖尿病灯盏花治疗组(B)各25只和正常对照组(C)20只,前两组用链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,A组和C组等量生理盐水腹腔内注射,B组灯盏花素20mg.kg-1.d-1腹腔内注射,三组给药后2w和6w宰杀,收集血和肾组织标本检测NF-κB、血肌酐和血尿素氮水平,6w时收集尿标本检测尿肌酐水平。结果:1、肾组织NF-κB、血肌酐和血尿素氮水平为糖尿病组>灯盏花组>正常组,而血肌酐降低以2w组更明显(P<0.01);2、尿肌酐排泄比较:正常组>灯盏花组>糖尿病组,有统计学差异(P<0.05)。结论:灯盏花素可能通过对肾组织NF-κB的影响而抑制肾脏增生,增加尿肌酐排泄,降低血尿素氮和血肌酐浓度发挥肾脏保护作用。     

白藜芦醇对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察白藜芦醇(Res)对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法:建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧模型,MTT法检测心肌细胞活力,免疫组织化学法检测心肌细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平,检测心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平和心肌细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:大鼠乳鼠心肌细胞在体外缺氧培养24 h后,HIF-1α表达水平明显升高;心肌细胞培养液中LDH活性从正常对照组的(93.07±15.84)U.L-1上升到(750.77±181.51)U.L-1(P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性从正常对照组(46.96±8.36)U.mL-1下降为(27.13±4.76)U.mL-1(P0.01)。25,50,75μmol.L-1Res可剂量依赖性抑制缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞内HIF-1α表达增加;心肌细胞培养液中LDH含量呈剂量依赖性下降,分别为(486.17±69.97),(189.43±32.07),(155.34±29.57)U.L-1(P0.05或P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性呈剂量依赖性升高,分别为(33.55±6.34),(37.67±6.73),(41.44±7.91)U.mL-1(P0.05或P0.01)。结论:Res对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤有良好保护作用。     

左归丸对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的:观察不同浓度左归丸水提液对体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响。方法:应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠BMSCs,并传代扩增,采用倒置显微镜进行细胞形态学观察,免疫组化检测细胞表面抗原鉴定其表面标志。将BMSCs分为对照组及不同浓度左归丸干预组,采用MTT比色法观察不同浓度左归丸水提液干预后BMSCs增殖的情况。结果:采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs形态以长梭形为主,呈集落样生长。体外培养的BMSCs免疫组织化学鉴定显示CD44,CD29呈阳性表达,CD34呈阴性表达。MTT检测结果显示,与空白对照组相比,相当于生药质量浓度2.5～4 g·L-1的左归丸水提液干预24 h后,干预组吸光度均明显增高(P<0.01),而与其他浓度相比1 g·L-1时左归丸水提液促进BMSCs增殖的作用最强。结论:所培养的大鼠骨髓基质细胞在细胞表型表达和细胞形态上具备BMSC特征。左归丸水提液在一定浓度范围内可以提高BMSCs的体外增殖能力。     

吴茱萸水提物给药大鼠尿液代谢组学研究

目的:研究吴茱萸水提液给药对大鼠内源性代谢产物的影响。方法:吴茱萸水提物按0.385 7 g.kg-1给SD大鼠连续灌胃33 d,收集尿液,通过Agilent 1200 6410三重四极杆质谱对尿液中内源性代谢物进行全扫描分析,SIMCA-P软件经过PCA,PLS-DA分析。结果:给药组与对照组相比,大鼠尿液代谢物白细胞三烯,棕榈酰乙醇胺,二十二碳六烯酸,8(R)-氢过氧亚油酸/花生酸等有明显变化。结论:吴茱萸水提物灌胃对正常大鼠机体代谢产生影响,为进一步阐释吴茱萸的药性研究工作提供依据。     

京尼平苷对SD大鼠,Wistar大鼠与ICR小鼠肝毒性的比较研究

目的：比较京尼平苷对不同种系、不同月龄大鼠,小鼠的肝毒性差异。方法：不同月龄的SD,Wistar大鼠,ICR小鼠灌胃给药3 d后,观察动物外观及体重的变化;称肝重量并计算其脏器指数;测定动物血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及总胆红素（TBIL）的含量。结果：大鼠：280 mg/kg的京尼平苷可导致各组的肝重量增加,脏器指数增大,ALT,AST活性增高,TBIL含量增加,与各自空白对照组比较具有显著差异。小鼠：560 mg/kg的京尼平苷未表现出明显肝毒性,1 860 mg/kg京尼平苷导致ALT活性增高,TBIL含量增加。结论：京尼平苷对不同月龄、不同系（SD和Wistarg系）大鼠在肝毒性上未表现出显著差异;小鼠未表现出明显肝毒性。     

栝蒌根散对糖尿病模型大鼠血糖、血脂的影响

目的:探讨栝蒌根散对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响,分析其降糖作用与剂量之间的关系。方法:SPF级雄性Wistar大鼠,给予36 mg.kg-1链脲佐菌素(STZ)ip建立2型糖尿病模型。将成模大鼠按随机表随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪降糖颗粒组和栝蒌根散低、中、高(2,4,6 g.kg-1)剂量组,每组10只,每天ig相应的药物。10只正常大鼠作为正常组,每天ig2 mL生理盐水。ig前和ig 8周后各测一次空腹血糖和体重,最后从腹主动脉采血,化验各组大鼠的甘油三脂和胆固醇。结果:栝蒌根散低、高剂量均能降低链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血糖(P<0.01),低剂量作用最强,中剂量无效。栝蒌根散3个剂量均能降低2型糖尿病大鼠血脂(P<0.05),但不能控制大鼠体重的下降。结论:栝蒌根散能降低糖尿病模型大鼠的血糖,其作用与剂量之间不存在量效关系。其降脂作用明显,但不能改变糖尿病大鼠体重下降的趋势。     

两肾一夹型高血压大鼠模型的改良及评价

目的:采用Goldblatt经典肾性高血压大鼠模型并加以改进,建立简易稳定的两肾一夹型高血压大鼠模型.方法:将70只雄性SD大鼠,随机分为模型组和假手术组,其中模型组大鼠从背部开口以丝线结扎左肾动脉,假手术组大鼠除不结扎左肾动脉,余步骤同模型组.术后测定4周内不同时间点血压及观察一般情况对所建模型进行评价.结果:模型组术后成活率达94.5％,成模率达89.1％模型组大鼠自造模后3d血压开始升高,此后呈持续性升高,与实验前和假手术组比较均保持显著性差异(P＜0.05).结论:从背部开口以丝线结扎大鼠左肾动脉是一种安全性高和手术操作简便的新方法.     

金丝桃苷的大鼠胚胎-胎仔发育毒性研究

目的:观察金丝桃苷对Wistar大鼠的胚胎-胎仔发育毒性,为妊娠期安全用药提供参考。方法:取健康受孕大鼠,随机分为金丝桃苷低、中、高(30,175,1 000 mg.kg-1)剂量组、阳性对照组(环磷酰胺,7 mg.kg-1)和溶媒对照组(等体积1%羧甲基纤维素钠水溶液)。分别于母鼠受孕后第6～15天灌胃给予1%羧甲基纤维素钠水溶液和金丝桃苷,环磷酰胺组于母鼠受孕后第11～13天皮下注射给药。给药后观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况,妊娠第20天处死孕鼠。观察母体动物的临床症状、体重变化、黄体数、着床数、胚胎生存死亡情况、生存胎仔的体重、性别、外观、内脏及骨骼检查等指标。结果:金丝桃苷对各给药组的母鼠和胎鼠的外观、内脏及骨骼发育均未见明显异常。但是金丝桃苷高剂量组可致胎鼠体重增长减缓,身长和尾长缩短(P<0.05)。结论:在本实验条件下,金丝桃苷对胎鼠生长发育有一定影响,建议临床用药时怀孕妇女应慎用。     

灯盏花素不同脂质载体凝胶体外经皮渗透性评析

目的:制备4种灯盏花素脂质载体凝胶和普通凝胶,研究4种脂质载体对灯盏花素体外经皮促渗性能.方法:采用改良Franz扩散池,以离体小鼠皮肤为透皮屏障进行体外透皮实验,对各凝胶体外透皮特性进行药动学方程拟合,采用HPLC测定单位面积累积透皮量.结果:各凝胶单位面积累积透皮量大小为固体脂质纳米粒凝胶＞传递体凝胶＞脂质体凝胶＞纳米结构脂质载体凝胶＞普通凝胶.其中固体脂质纳米粒凝胶24 h单位面积累积透皮量最大,为普通凝胶的3.75倍,体外释药特性符合Higuchi动力学方程.结论:脂质载体凝胶对灯盏花素经皮吸收有不同程度的促渗作用,其中固体脂质纳米粒为4种脂质载体凝胶中的最佳促渗载体.