P38MAPK调控AQP2参与内淋巴积水的形成北大核心CSCD

目的探讨P38MAPK是否通过调控AQP2参与内淋巴积水的形成。方法筛选合格豚鼠30只,随机分为三组:空白对照组(6只):腹腔注射生理盐水;积水组(12只):腹腔注射醋酸去氨加压素;抑制剂组(12只):腹腔注射醋酸去氨加压素15min后,腹腔注射SB203580。所有组别豚鼠连续给药10天,在停止给药7天后行ABR和DPOAE检测,并在检测后同时取材,HE染色观察各组豚鼠内淋巴积水程度,免疫组化和qRT-PCR分别检测PP38MAPK、AQP2蛋白和mRNA在各组豚鼠耳蜗表达情况。结果1、行为学观察及听力检测:各组无明显差异。2、形态学观察:空白对照组积水率为0%;积水组积水率为75%;抑制剂组积水率为33%。3、免疫组化:P-P38MAPK:在各组豚鼠耳蜗中均有表达,积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。AQP2:在各组豚鼠耳蜗中均有表达,除螺旋神经节外,积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。4、荧光定量PCR检测结果:P38MAPK、AQP2:积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。结论P38MAPK通过调控AQP2参与内淋巴积水的形成;P38MAPK抑制剂可减轻内淋巴积水程度。     

正常和膜迷路积水豚鼠内耳水通道蛋白的表达及意义

目的检测正常和膜迷路积水豚鼠内耳水通道蛋白（aquaporins,AQPs）的表达,探讨其机理和意义。方法 20只健康豚鼠随机分为实验组和对照组,每组10只,实验组（膜迷路积水模型组）豚鼠腹腔注射醋酸去氨加压素,4μg&#183;kg-1&#183;d-1,共1周,诱导其内耳膜迷路积水,对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。用免疫组化方法检测两组豚鼠内耳水通道蛋白的表达,并进行比较。结果对照组豚鼠内耳中有AQP0、1、2、3、5、7、8的表达,其中AQP0仅在血管纹和螺旋神经节细胞有较弱的表达;AQP1分布于包绕骨迷路、内淋巴囊、内淋巴管的纤维细胞,基底膜鼓阶面细胞、螺旋韧带纤维细胞、螺旋缘纤维细胞、Corti’s器、内外螺旋沟、血管纹、椭圆囊壁、球囊壁、螺旋神经节等;AQP2表达在血管纹、Corti’s器、螺旋神经节细胞和内淋巴囊中;AQP3、7、8三者的分布类似,在螺旋神经节和包绕膜迷路的组织中表达,包括Corti’s器、内外螺旋沟、血管纹、螺旋韧带纤维细胞、螺旋缘、椭圆囊壁、球囊壁、内淋巴囊等;AQP5则表达在Corti’s器、内外螺旋沟、螺旋神经节、螺旋韧带纤维细胞。实验组豚鼠内耳中,血管纹AQP2的表达与对照组较正常豚鼠表达增加,其它亚型AQPs的表达与对照组无明显差异。结论正常豚鼠内耳中有多种AQPs表达,膜迷路积水后豚鼠内耳中AQP2的表达增强,提示膜迷路积水可能与AQP2表达上调有关。     

两种内淋巴积水动物模型中水通道蛋白1的表达

目的了解水通道蛋白1（aquaporin 1，AQP1）在手术及醛固酮引起的内淋巴积水豚鼠耳蜗及内淋巴囊中的表达情况。方法30只健康豚鼠随机分为手术组、醛固酮注射组和对照组，每组10只。通过手术阻塞内淋巴囊和腹腔注射醛固酮的方法制造出两种内淋巴积水动物模型，采用免疫组化染色及蛋白质印迹法检测豚鼠耳蜗及内淋巴囊中AQP1的表达，通过图像处理软件进行半定量分析。结果手术组出现中、重度内淋巴积水，以顶回最为明显，自顶回向底回减轻；醛固酮注射组出现轻、中度积水，积水多位于底回。两组积水动物模型中AQP1表达的部位与对照组相同，手术组耳蜗与对照组相比AQP1表达差异无统计学意义（t=0．718，P〉0．05）；醛固酮组耳蜗AQP1表达低于对照组（t=6．609，P〈0．01）；对照组与醛固酮组内淋巴囊AQP1表达差异无统计学意义（t=0．998，P〉0．05）。醛固酮组耳蜗外侧壁组织中AQP1蛋白定量低于对照组（t=13．626，P〈0．01）。结论AQP1在手术引起的内淋巴积水中表达没有改变，在醛固酮引起的内淋巴积水中表达下降。AQP1在豚鼠内耳中的表达可能受离子浓度的调节。     

单核细胞趋化蛋白-1及脂蛋白(a)与梅尼埃病关系的研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)及脂蛋白(a)[lipoprotein(a),LP(a)]与梅尼埃病的关系。方法选取30只健康SD大鼠,分成正常组、对照组及实验组,每组10只,实验组腹腔注射醋酸去氨加压素(4μg·kg^-1·d^-1连续注射7 d后改为6μg·kg^-1·d^-1连续注射3 d)行膜迷路积水造模,对照组腹腔注射等量生理盐水,正常组不作处理,停药7 d后对三组动物行ABR检测,取耳蜗中阶横截面积(SM)/(中阶+前庭阶横截面积)(SM+SV)比值评价膜迷路积水情况。造模成功后通过免疫组化染色检测耳蜗组织中MCP-1的表达,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清中LP(a)的水平,对LP(a)水平与内耳积水程度及大鼠ABR各指标进行相关性分析。结果实验组波Ⅱ阈值升高、波Ⅱ、Ⅴ潜伏期及Ⅲ-Ⅴ波间期较正常组和对照组均延长,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组、对照组、正常组SM/(SM+SV)比值分别为0.45±0.04、0.34±0.02、0.35±0.01,前者显著大于后两者(P<0.05)。实验组MCP-1在耳蜗螺旋器、血管纹螺旋韧带及神经节细胞组织表达明显,前庭膜上也有表达,其它两组无表达。实验组、对照组、正常组LP(a)水平分别为4.07±0.20、1.36±0.12、1.38±0.14 mg/L,前者显著高于后两者(P<0.001),LP(a)表达水平与膜迷路积水程度及ABR各指标间均呈正相关(P<0.001)。结论膜迷路积水模型大鼠耳蜗组织中MCP-1表达明显,血清LP(a)水平明显升高,且LP(a)水平与膜迷路积水程度及大鼠听力下降呈正相关,提示MCP-1和LP(a)可能与梅尼埃病的发生有关。     

阿米卡星对小鼠内耳水通道蛋白4表达的影响北大核心CSCD

目的观察阿米卡星对小鼠内耳水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达的影响,探讨AQP4在阿米卡星耳毒性机制中的可能作用。方法 60只CBA/CaJ小鼠随机分为实验组和对照组,每组30只,实验组小鼠皮下注射阿米卡星450mg·kg-1·d-1,每天1次,共14d,对照组小鼠皮下注射等量生理盐水。注射4天后应用免疫组化染色分别检测两组小鼠耳蜗AQP4的表达及定位情况,应用蛋白免疫印迹技术及RT-PCR技术检测两组小鼠内耳AQP4表达水平的变化。结果 AQP4在小鼠内耳表达于Corti器的支持细胞。对照组和实验组的AQP4蛋白相对含量分别为0.672±0.074、0.479±0.108,AQP4mRNA相对含量分别为0.701±0.107、0.460±0.080,实验组AQP4的蛋白及mRNA的相对含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论阿米卡星可导致小鼠内耳AQP4蛋白及基因表达的下调,这可能是阿米卡星耳毒性的机制之一。     

去氨加压素对耳蜗功能及上皮钠通道表达的调节作用

目的研究去氨加压素DDAVP调节豚鼠耳蜗功能及上皮钠通道蛋白α亚基(α-ENaC)的表达,探讨其在内淋巴积水中的作用。方法将24只豚鼠随机分为3组,分别给予0、5、10天DDAVP,通过耳蜗电图(ECochG)检测耳蜗功能学改变。应用苏木素-伊红染色(HE)确定各组耳蜗组织形态学改变,并用免疫组化法确定α-ENaC蛋白在耳蜗定位表达。采用蛋白印迹实验(WesternBlot)分别检测不同给药时间豚鼠耳蜗α-ENaC蛋白表达水平。结果DDAVP注射后,ECochG提示部分豚鼠耳蜗出现内淋巴积水,HE证实豚鼠内淋巴积水。α-ENaC蛋白在耳蜗血管纹、螺旋韧带、Reissner膜、Corti器、螺旋缘、螺旋神经、耳蜗神经表达。与未给予DDAVP相比,10天组豚鼠耳蜗α-ENaC蛋白表达升高(P<0.05);。结论 DDAVP调节豚鼠耳蜗α-ENaC蛋白表达升高,进而调节内淋巴代谢,诱导内淋巴积水,影响内耳功能。     

川芎嗪通过调控fas/fasL的表达对顺铂诱导豚鼠耳蜗毛细胞的抗凋亡机制研究

目的通过观察川芎嗪对顺铂诱导豚鼠耳蜗组织中fas、fasL及caspase-8蛋白表达水平的影响,探讨其抗凋亡作用的部分机制。方法将60只听力正常的健康白毛红目豚鼠按照随机字数表法随机分为2组:空白组及模型组,空白组豚鼠正常饲养,模型组豚鼠腹腔注射顺铂诱导药物性耳聋模型,模型复制成功后再次将空白组及模型组随机分为2组,即:空白对照组(Blank)、空白+川芎嗪组(Blank+Ligustrazine)、模型对照组(Model)、模型+川芎嗪组(Model+Ligustrazine)。空白+川芎嗪组及模型+川芎嗪组豚鼠腹腔注射川芎嗪注射液进行干预,2周后处死豚鼠,对各组豚鼠耳蜗组织中fas、fasL及caspase-8蛋白表达水平进行检测。结果模型评价:与空白组相比,模型组豚鼠ABR阈值显著提高(P0.01);空白组豚鼠耳蜗毛细胞排列整齐、均匀,无缺失及坏死细胞出现;模型组豚鼠耳蜗毛细胞变形明显,排列不均,溶解破坏的毛细胞较多,提示造模成功。各组豚鼠耳蜗组织中fas、fasL、caspase-8蛋白表达水平结果显示,与空白对照组和空白+川芎嗪组比较,模型对照组豚鼠耳蜗组织中fas、fasL、caspase-8蛋白表达水平均显著升高(P0.01),与模型对照组比较,模型+川芎嗪组豚鼠耳蜗组织中fas、fasL、caspase-8蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论川芎嗪可通过调控fas、fasL、caspase-8的表达水平来抑制细胞凋亡的发生,发挥其抗凋亡作用。     

尼莫地平对内耳缺血/再灌注豚鼠耳蜗血迷路屏障通透性的影响

目的研究尼莫地平对内耳缺血/再灌注后豚鼠耳蜗血迷路屏障通透性的影响。方法随机将32只豚鼠分为4组,每组8只,分别为缺血用药组、缺血对照组、再灌注用药组、再灌注对照组。采用小脑前下动脉FeCl3诱导血栓形成制备耳蜗缺血豚鼠模型,缺血1小时后再经股静脉给予尿激酶溶解血栓制备再灌注模型,分别于缺血后早期及再灌注后静脉注射尼莫地平,各对照组以等量生理盐水代替尼莫地平注射。采用激光多普勒血流测量仪监测耳蜗血流量(cochlear bloodflow,CoBF),测量实验前后豚鼠听性脑干反应(ABR)波Ⅲ反应阈值;分别在股静脉推注伊文思蓝2小时后采用荧光定量检测其血迷路屏障通透性变化。结果豚鼠耳蜗发生缺血后早期应用尼莫地平组与缺血对照组伊文思蓝通过血迷路屏障的平均量分别为每只0.245±0.108和0.442±0.153μg,差异有统计学意义(P<0.05);耳蜗发生缺血再灌注后应用尼莫地平组与再灌注对照组,伊文思蓝通过血迷路屏障的平均量分别为每只0.963±0.261和0.620±0.148μg,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在内耳缺血早期使用尼莫地平,能减轻血迷路屏障的损伤;但在缺血再灌注后使用尼莫地平,则加重血迷路屏障的损伤,使其通透性增加。     

噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白claudin-5表达及血迷路屏障通透性的影响

目的研究噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白claudin-5表达及血迷路屏障功能的影响。方法40只豚鼠随机分为正常对照组(20只)和噪声暴露组(20只),噪声暴露组给予声强为115dB SPL白噪声暴露,每天6小时,连续两天,对照组不予噪声暴露。于实验前及噪声暴露后次日对两组豚鼠行ABR检测,第二次ABR检测后对两组豚鼠耳蜗基底膜行鬼笔环肽-异硫氰酸荧光素(Phalloidin-FITC)染色;用硝酸镧透射电镜和常规透射电镜观察两组豚鼠内耳血迷路屏障通透性和紧密连接的变化;Western blot和免疫组织化学染色观察两组豚鼠耳蜗血管纹和螺旋韧带处claudin-5的表达。结果噪声暴露组豚鼠ABR波Ⅲ反应阈较正常对照组阈移40dB以上,差异有统计学意义(P<0.05);基底膜铺片FITC染色示噪声暴露组底回基底膜毛细胞大量缺失,其余部分毛细胞纤毛排列紊乱并出现融合,而对照组毛细胞排列整齐,其纤毛呈V或W型,两组间外毛细胞计数比较差异有统计学意义(P<0.05);透射电镜下,可见噪声暴露组血管内皮细胞间和边缘细胞间的紧密连接均遭到破坏,细胞间隙增大;硝酸镧透射电镜下,大量镧颗粒从血管腔内渗漏到管腔外的组织间隙,而对照组镧颗粒仅局限于血管腔内;Western blot结果示,两组耳蜗外侧壁血管纹均有claudin-5表达,但噪声暴露组的表达量明显低于正常组;免疫组织化学染色也表明,两组豚鼠耳蜗外侧壁毛细血管内皮细胞、边缘细胞等处均有claudin-5阳性表达,但噪声组表达量显著低于正常组(P<0.05)。结论噪声通过下调紧密连接蛋白claudin-5的表达,破坏细胞间紧密连接,增加豚鼠血迷路屏障的通透性,从而导致内耳微环境的破坏,是噪声性聋可能的发病机制之一。     

醋酸去氨加压素诱导豚鼠膜迷路积水

目的建立膜迷路积水的动物模型,探讨膜迷路积水的机制。方法将豚鼠随机分为两组,模型组腹腔注射醋酸去氨加压素,对照组腹腔注射生理盐水,一周后,对比两组豚鼠血清电解质的浓度,心、肺、肝、肾的组织学和耳蜗膜迷路的横截面积。结果两组豚鼠血清电解质的浓度无明显差异,心、肺、肝、肾的组织学无明显异常。模型组中有6只(6/10)豚鼠出现不同程度的膜迷路积水。结论醋酸去氨加压素可以导致豚鼠膜迷路积水,有效建立了膜迷路积水的动物模型。     

水通道蛋白在正常豚鼠中耳腔的表达及作用

目的观察水通道蛋白(aquaporins,AQP)1、AQP4、AQP5在正常豚鼠中耳腔黏膜的表达和分布情况,探讨AQP1、AQP4、AQP5在豚鼠中耳液体转运和水平衡中的作用机制。方法用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹和免疫组织化学的方法观察正常豚鼠中耳腔黏膜AQP1、AQP4、AQP5的表达和分布情况。结果AQP1、AQP4、AQP5的mRNA在正常豚鼠中耳腔黏膜内有确定表达,AQP1、AQP4蛋白在正常豚鼠中耳黏膜内有确定表达,中耳腔的扁平上皮、立方上皮、黏膜下层的毛细血管内皮和此层的纤维母细胞的胞浆中均有AQP1分布。结论AQP1、AQP4、AQP5共同参与中耳腔的液体平衡过程,保持中耳腔正常情况下的无液体积聚状态。     

噪声对豚鼠耳蜗基底膜乙酰化组蛋白H2B表达的影响

目的 观察噪声性聋豚鼠耳蜗基底膜毛细胞乙酰化组蛋白H2B表达水平的变化,探讨组蛋白乙酰化与噪声性听力损失的相关性.方法 成年雄性白色红目豚鼠60只随机分为噪声组和对照组,两组豚鼠分别进行听性脑干反应(ABR)检测后,噪声组给予高强度窄带噪声(122 dB SPL,3小时)暴露,对照组不予任何处理;噪声组于噪声暴露后1小时、3天、7天、14天和21天分别行ABR检测;并以免疫荧光染色和Western blot方法检测两组豚鼠耳蜗基底膜听觉细胞中乙酰化组蛋白H2B的表达水平.结果 噪声暴露后1小时、 3天、7天、14天、21天噪声组豚鼠ABR各频率反应阈均较噪声暴露前及对照组显著增高,且随时间的延长听力逐渐恢复,14天时趋于稳定,达到永久性阈移.免疫荧光染色显示在噪声组豚鼠耳蜗内外毛细胞及Hensen's细胞中乙酰化组蛋白H2B荧光强度较正常对照组减弱,Western blot结果显示噪声组豚鼠耳蜗基底膜中乙酰化组蛋白H2B的表达(H2B-AcK5/β-actin比值为0.310 2±0.083 9)较对照组(0.617 9±0.126)明显下调,两组差异有统计学意义(P<0.01).结论 噪声可导致豚鼠内耳感觉细胞乙酰化组蛋白H2B表达水平下降,乙酰化组蛋白失衡有可能参与了噪声性聋的发生.     

正常豚鼠内耳水通道蛋白的表达及意义

目的：检测正常豚鼠内耳组织中水通道蛋白（aquaporins,AQPs）的表达,探讨其在内耳液体平衡中的意义.方法：用免疫组织化学方法,以兔抗大鼠AQP0、1、2、3、5、7、8的多克隆抗体,检测正常豚鼠内耳组织中水通道蛋白亚型0、1、2、3、5、7、8的表达.结果：水通道蛋白亚型0、1、2、3、5、7、8在豚鼠内耳有不同程度、不同模式的表达,其中AQP0仅在血管纹上皮细胞、螺旋神经节细胞有较弱的表达,AQP1的分布见于包绕骨迷路、内淋巴囊、内淋巴管的纤维细胞,基底膜鼓阶面细胞、螺旋韧带纤维细胞、螺旋缘纤维细胞、Corti器、内外螺旋沟、血管纹、椭圆囊壁、球囊壁、螺旋神经节细胞等.AQP2表达在血管纹、Corti器、螺旋神经节细胞和内淋巴囊中.AQP3、7、8的分布类似,在螺旋神经节和包绕膜迷路的组织中均有表达,其中Corti器、内外螺旋沟、血管纹、螺旋神经节表达较强,在螺旋韧带、螺旋缘纤维细胞表达较弱.AQP5则在Corti器、内外螺旋沟、螺旋神经节细胞表达较强,在螺旋韧带纤维细胞表达稍弱.结论：在正常豚鼠内耳中,尤其是膜迷路中有多种水通道蛋白亚型,以不同的方式表达,他们可能在维持膜迷路液体平衡中起着协同作用.     

干细胞移植治疗噪声性和药物性聋的比较实验研究

目的：比较耳蜗干细胞移植治疗噪声性聋豚鼠和药物性聋豚鼠模型的效果。方法选用清洁级健康成年纯白红目豚鼠120只,建立噪声性聋模型耳蜗干细胞移植组、噪声性聋模型空白对照组、药物性聋模型耳蜗干细胞移植组、药物性聋模型空白对照组,每组30只;向噪声性聋模型耳蜗干细胞移植组和药物性聋模型耳蜗干细胞移植组耳蜗分别注入耳蜗干细胞悬液10μl,向噪声性聋模型空白对照组和药物性聋模型空白对照组耳蜗分别注入10μl 生理盐水。于术后7、28、56 d 进行 ABR 检测并进行免疫荧光观测 Nestin 阳性细胞数和 MyosinⅦA阳性细胞数。结果在噪声性聋和药物性聋耳蜗干细胞移植组的耳蜗鼓阶处观测到 Nestin 阳性细胞和 MyosinⅦA 阳性细胞,但噪声性聋干细胞移植组的 Nestin 阳性细胞和 MyosinⅦA 阳性细胞数量多于药物性聋干细胞移植组;耳蜗干细胞移植后噪声性聋和药物性聋组 ABR 反应阈均下降,但术后28天和56天噪声性聋干细胞移植组ABR 阈值分别为52．61±5．14和40．39±4．59 dB SPL,低于药物性聋干细胞移植组（分别为66．39±4．77和60．41±4．17 dB SPL）。结论耳蜗干细胞移植对于噪声性聋豚鼠模型的治疗效果优于药物性聋豚鼠模型。     

豚鼠耳颞部60Coγ射线照射对耳蜗核影响的实验研究

目的探讨60 Coγ射线照射对豚鼠耳蜗核神经元的影响。方法 48只豚鼠随机分为对照组(8只)和实验组(40只),实验组豚鼠于右耳颞部做一次性40Gy 60 Coγ射线照射后的1、4、7、14、30d行听性脑干反应(audi-tory brainstem response,ABR)测试,然后处死,行耳蜗核石蜡切片HE染色及免疫组织化学染色,观察细胞形态及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)。对照组不予60 Coγ射线照射,行ABR测试后行耳蜗核HE染色,方法同实验组。结果对照组ABR反应阈为29.17±1.95dB SPL,实验组在接受60 Coγ射线照射后1、4、7、14、30dABR阈值升高,分别为31.88±2.59、35.00±3.17、35.83±2.04、39.17±2.05、41.67±2.58dB SPL,照射后4、7、14、30d ABR反应阈与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组各时间点ABR波I、II、III潜伏期及I-II、II-III、I-III波间期延长,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示实验组在照射后不同时间点均出现耳蜗核神经细胞肿胀、胞核皱缩或碎裂、尼氏体减少,以14、30天时改变明显。对照组耳蜗核Caspase3免疫组化染色的灰度值为172.33±17.81,实验组60 Coγ射线照射后1、4、7、14、30d耳蜗核Caspase3免疫组化灰度值分别为136.37±24.42、94.67±15.33、91.40±11.71、110.80±4.23、123.56±32.56,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 60 Coγ射线照射可导致耳蜗核损伤;Caspase3表达上调可能与耳蜗核神经元射线损伤有关。     

Effects of lithium on endolymph homeostasis and experimentally induced endolymphatic hydrops

There is evidence to suggest that water homeostasis in the inner ear is regulated via the vasopressin (VP)-aquaporin 2 (AQP2) system in the same fashion as in the kidney. The VP-AQP2 system in the kidney is well known to be inhibited by lithium, resulting in polyuria due to a decrease in reabsorption of water in the collecting duct of the kidney. Therefore, lithium is also likely to inhibit the VP-AQP2 system in the inner ear, and consequently exert some influence on inner ear fluid homeostasis. In this study, we investigated the effects of lithium on AQP2 expression in the rat inner ear, and on the cochlear fluid volume in hydropic ears of guinea pigs. A quantitative PCR study revealed that lithium reduced AQP2 mRNA expression in the cochlea and endolymphatic sac. Lithium application also decreased the immunoreactivity of AQP2 in the cochlea and endolymphatic sac. In a morphological study, lithium intake significantly reduced endolymphatic hydrops dose-dependently. These results indicate that lithium acts on the VP-AQP2 system in the inner ear, consequently producing a dehydratic effect on the endolymphatic compartment.     

噪声损伤和苯扎贝特干预对豚鼠耳蜗脂肪酸转运蛋白1和4表达的影响

目的 观察豚鼠耳蜗脂肪酸转运蛋白1和4(fatty acid transport protein,FATP1,FATP 4)在噪声损伤和促脂肪酸代谢药物苯扎贝特干预前后的变化,探讨噪声性听力损失与FATP1、FATP4的关系.方法 正常听力健康成年雄性Dunkin Hartley豚鼠21只随机分为对照组(15只)和干预...     

内源性一氧化碳对变应性鼻炎豚鼠诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 制备豚鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)动物模型,研究在AR豚鼠模型中内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法 24只豚鼠以随机数字表法分为4组,每组6只.第1组以生理盐水处理作为正常对照组,第2(AR组)、3、4组以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,制成AR动物模型,第3、4组再分别以血红素氧合酶1(hemeoxygenase 1,HO-1)诱导剂氯化血红素和抑制剂锌原卟啉干预处理,分别作为HO诱导组和HO抑制组,分别测定各组豚鼠血浆中碳氧血红蛋白(carboxyhemoglobin,COHb)的百分含量(用来代表血浆中CO含量),并采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定鼻黏膜中HO-1和iNOS的相对表达量.结果 第2、3、4组豚鼠AR造模成功.血浆COHb含量(x-±s,以下同)第2组(2.27%±1.13%)高于第1组(1.08%±0.24%),差异有统计学意义(q=4.10,P＜0.01);第3组(3.17%±0.68%)高于第2组,差异有统计学意义(q=3.12,P＜0.05).鼻黏膜中HO-1、iNOS的相对表达量(x-±s,以下同)第2组[分别为(7.80±1.60)×10~(-3)和(5.81±0.05)×10~(-3)]高于第1组[分别为(1.96±0.71)×10~(-3)和(0.97±0.05)×10~(-3)],差异有统计学意义(q值分别为5.52、7.21,P值均＜0.01),第3组[分别为(11.89±4.78)×10~(-3)和(7.42±0.70)×10~(-3)]高于第2组,差异有统计学意义(q值分别为3.86、2.22,P值均＜0.05),第4组[分别为(3.82±0.98)×10~(-3)和(2.34±0.04)×10~(-3)]低于第2组,差异有统计学意义(q值分别为3.76、5.18,P值均＜0.05).结论 内源性CO在AR中影响iNOS的表达.