重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞及相关细胞因子的表达及意义

目的探讨重度子痫前期(sPE)患者外周血Th17及CD4+CD25+Treg细胞及相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-21、IL-10和转化生长因子β(TGF-β)的水平变化及意义。方法选取30例sPE患者(sPE组)及30例正常妊娠者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+CD25+Treg细胞水平。采用QRT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平。采用ELISA法检测血浆IL-17、IL-21、IL-10和TGF-β水平。结果 sPE组外周血Th17细胞水平为(1.16±0.78)%,显著高于对照组的(0.68±0.35)%,差异有统计学意义(t=3.447,P=0.002)。sPE组外周血CD4+CD25+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.000)。sPE组RORγt mRNA表达水平为0.190±0.063,高于对照组的0.136±0.037,差异有统计学意义(t=3.776,P=0.001)。而sPE组Foxp3mRNA表达水平为0.069±0.025,低于对照组的0.127±0.027,差异有统计学意义(t=-8.218,P=0.000)。sPE组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为(82.03±37.61)、(63.29±27.42)、(56.89±17.28)ng/L,高于对照组的(30.81±21.87)、(33.87±13.73)、(33.24±11.93)ng/L,差异有统计学意义(P0.01),TGF-β水平为(24.34±6.51)ng/L,低于对照组的(46.97±15.81)ng/L,差异有统计学意义(t=-7.781,P=0.000)。sPE患者血浆IL-17、IL-21水平与Th17细胞水平呈正相关(r分别为0.695、0.586,P0.01)。结论 sPE患者Th17细胞数量升高,CD4+CD25+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在sPE的发病机制中可能起到重要作用。     

化疗联合内分泌疗法对Luminal A型乳腺癌的疗效及生存期的影响分析

目的探讨化疗联合内分泌疗法在LuminalA型乳腺癌患者中的临床效果及对生存期的影响。方法选择2015年6月～2017年7月科室收治的LuminalA型乳腺癌患者84例,采用随机数字法分为对照组(n=42例)和观察组(n=42例)。对照组采用单纯化疗治疗,观察组在对照组基础上联合他莫昔芬内分泌治疗,采用流式细胞仪测定两组治疗前后C D 3+、CD4~+、CD8~+和CD4~+/CD8~+水平;采用流式细胞仪测定两组治疗前后干扰素-r (IFN-r)、肿瘤坏死因子-a (TNF-a)、白细胞介素-4 (IL-4)和白细胞介素-10 (IL-10)水平,记录两组治疗后不同时间点生存期情况,比较两组临床疗效及对生存期的影响。结果观察组治疗2周期疗效率为64.29%,与对照组47.62%比较差异无统计学意义(χ~2=2.367,P0.05);观察组治疗后2周期CD3~+/CD4~+CD8~+和CD4~+/CD8~+水平均高于对照组(t=18.486、14.581,P0.05);观察组治疗后2周期CD3~+/CD8~+低于对照组(t=11.295,P0.05);观察组治疗后2周期IL-4和IL-10水平低于对照组(t=8.385、9.132、14.681、15.773,P0.05);两组治疗后1年、3年、5年生存率比较差异无统计学意义(χ~2=0.994、1.556、1.365,P0.05)。结论将化疗联合他莫昔芬内分泌治疗用于LuminalA型乳腺癌患者有助于提高机体免疫、降低炎症因子水平、延长患者生存期,值得推广应用。     

骨髓单个核细胞Coombs试验(+)血细胞减少症患者Th17细胞数量及功能研究

目的 研究骨髓单个核细胞(BMMNC)-Coombs试验(+)血细胞减少症(又称免疫相关性血细胞减少症,IRP)患者骨髓Th17细胞数量及功能,探讨Th17细胞在IRP发病中的作用.方法 选取初诊IRP患者43例、血常规恢复正常IRP患者34例及正常对照13名.采用流式细胞术(FCM)检测骨髓白细胞介素(IL)-23受体(IL-23R)+CD4+/CD4+细胞比例;酶联免疫吸附(ELISA)法测定骨髓上清液IL-6、IL-23和IL-17水平;RT-PCR技术检测BMMNC视黄酸相关孤核受体γt(RORγt)及信号转导转录激活子3(STAT3)mRNA的相对表达水平.结果 IRP初诊组IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例[(3.6±3.1)%]明显高于恢复组[(2.0±1.0)%]和正常对照组[(1.9±1.4)%](P值均＜0.05);初诊组骨髓上清液IL-6、IL-23和IL-17水平[分别为(26.21±14.55)、(2.23±0.99)和(2.54±1.33)μg/L]明显高于恢复组[分别为(9.08±6.36)、(0.91±0.76)和(1.28±0.18)μg/L]和正常对照组[分别为(14.63±7.66)、(1.19±0.98)和(1.50±0.28)μg/L](P值均＜0.05);初诊组RORγtmRNA、STAT3mRNA表达水平(0.25±0.08、1.10±0.16)明显高于恢复组(0.12±0.08、0.97±0.12)和正常对照组(0.07±0.05、0.95±0.13)(P值均＜0.05).IRP组IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例与CD5+CD19+/CD19+细胞比例呈正相关(P＜0.05);IRP组骨髓液IL-17水平与骨髓CD5+CD19+/CD19+细胞比例、自身抗体数量呈正相关(r分别为0.494、0.377,P值均＜0.05);IRP组RORγt mRNA表达水平与骨髓CD5+CD19+/CD19+细胞比例及自身抗体数量呈正相关(r分别为0.741、0.541,P值均＜0.05);IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例与骨髓上清液IL-17水平及STAT3 mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.438、0.448,P值均＜0.05).结论 Th17细胞在IRP患者中数量增加,功能活跃;Th17细胞有望成为该类疾病干预治疗的新靶点.     

强化阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征行介入治疗患者内皮细胞微粒和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的 探讨强化剂量阿托伐他汀治疗对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗患者外周血内皮细胞微粒(endothelial microparticles,EMP)水平和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及细胞因子水平的影响。方法 行PCI治疗的ACS患者104例,根据治疗方法分为阿托伐他汀强化治疗组(强化组)和阿托伐他汀常规治疗组(常规组)各52例。常规组PCI术前、术后均口服阿托伐他汀20mg/d,强化组PCI术前口服阿托伐他汀80mg/d,术后40mg/d。分别于术前、术后1周检测2组外周血EMPs水平、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,分析EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平的相关性。结果 强化组和常规组术后CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率[(4.62±0.51)%、(3.85±0.60)%]、Foxp3 mRNA[(224.2±10.9)%、(173.7±11.6)%]和TGF-β1[(305.2±33.9)、(214.6±36.1)ng/L]均高于术前[(3.19±0.55)%、(3.25±0.49)%,(99.9±8.2)%、(101.2±9.4)%,(159.8±32.8)ng/L、(167.3±38.2)ng/L],EMPs水平[(1 062.2±336.8)个/μL、(1 387.8±353.6)个/μL]低于术前[(1 661.9±346.5)个/μL、(1 647.4±368.2)个/μL](P0.01),且强化组较常规组变化更明显,差异有统计学意义(P0.01);EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平均呈负相关(r=-0.526,P=-0.000;r=-0.487,P=-0.001;r=-0.581,P=0.000)。结论 强化剂量阿托伐他汀治疗可能通过下调EMPs水平,从而上调CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞和TGF-β1水平,进而减轻炎症反应,稳定斑块。     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞变化及意义

目的探讨重度子痫前期(s PE)患者外周血Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞变化及意义。方法选取2011-2013年镇江妇幼保健院40例s PE患者及40名健康对照者。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-22、TGF-β和IL-10水平,并分析其与s PE的相关性。结果 s PE患者组外周血Th17细胞水平为(1.21±0.82)%,显著高于健康对照组的(0.74±0.63)%,差异有统计学意义(t=3.45,P=0.002)。s PE患者组外周血CD4~+CD25~+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于健康对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.001)。s PE患者组IL-17、IL-22水平分别为80.03±31.25、60.22±18.32ng/L,高于健康对照组的32.84±17.23、35.24±14.33ng/L,差异有统计学意义(t值分别为10.74、5.89,P均0.01),IL-10、TGF-β水平为26.29±10.31、25.65±11.81ng/L,低于健康对照组的33.24±11.93、48.261±13.85ng/L,差异有统计学意义(t值分别为3.35、6.78,P均0.01)。s PE患者血浆IL-17、IL-22水平与Th17细胞水平呈显著正相关(r=0.69、0.58,P0.01)。结论 s PE患者Th17细胞数量增高,CD4~+CD25~+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在s PE的发病机制中可能起到重要作用。     

糖尿病合并肺结核患者营养风险筛查、评估及干预的临床研究

目的观察营养风险筛查、评估和干预对糖尿病合并肺结核患者治疗效果的影响。方法选择绍兴市立医院2015年1月至2016年12月收治的152例糖尿病合并肺结核患者,采用营养风险筛查2002(NRS2002)评分进行筛查,根据结果分为无风险组72例,风险组80例,风险组再分为对照组和观察组,各40例。对照组和观察组均予相同的常规抗痨和降糖治疗,观察组额外加营养支持,对两组营养生化指标、细胞免疫功能及痰菌转阴率、病灶吸收率等指标进行比较。结果风险组NRS2002评分[(6.63±0.36)vs.(2.44±0.08),t=10.740,P=0.043]明显高于无风险组,总蛋白[(52.2±1.0)g/L vs.(67.4±1.5)g/L,t=8.823,P=0.039]、白蛋白[(33.5±1.0)g/L vs.(44.7±1.0)g/L,t=7.770,P=0.032]水平均明显低于无风险组。治疗后观察组体质量指数[(8.6±0.5)kg/m~2 vs.(10.6±4.0)kg/m~2,t=2.183,P=0.032]、总胆固醇[(4.03±0.21)mmol/L vs.(4.72±0.22)mmol/L,t=2.283,P=0.025]、甘油三酯[(3.67±0.30)mmol/L vs.(4.43±0.22)mmol/L,t=2.007,P=0.048]、低密度脂蛋白[(3.7±0.4)mmol/L vs.(4.8±0.3)mmol/L,t=2.098,P=0.039]、空腹血糖[(6.0±0.5)mmol/L vs.(8.9±0.5)mmol/L,t=4.089,P=0.015]、糖化血红蛋白[(4.0±0.3)%vs.(5.5±0.6)%,t=2.275,P=0.026]水平和NRS2002评分[(3.3±0.4)vs.(4.7±0.4),t=2.469,P=0.016]较对照组均明显降低,高密度脂蛋白[(5.7±0.6)mmol/L vs.(4.0±0.5)mmol/L,t=2.149,P=0.035]水平明显高于对照组。治疗后观察组CD3~+[(63.6±1.5)%vs.(59.7±1.1)%,t=2.098,P=0.039]、CD4~+[(35.6±1.5)%vs.(30.9±1.7)%,t=2.115,P=0.038]水平均明显高于对照组,CD8~+[(25.9±1.2)%vs.(29.1±1.0)%,t=2.071,P=0.042]水平明显低于对照组。治疗后观察组与对照组平均痰菌转阴天数[(67.1±1.4)d vs.(72.1±1.6)d,t=2.312,P=0.019]、病灶吸收率[(74.0±3.8)%vs.(55.0±2.7)%,t=4.096,P=0.030]的比较,差异均有统计学意义。结论规范的营养风险筛查、评估及干预能明显改善糖尿病合并肺结核患者的营养状态、免疫功能和治疗效果。     

支气管哮喘患者血清IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ水平测定及其临床意义

目的测定支气管哮喘患者血清白细胞介素-4(IL-4)、IL-10、IL-17和干扰素-γ(IFN-γ)水平,并探究其临床意义。方法选取2016年10月至2017年3月该院接诊的40例支气管哮喘患者作为哮喘组,并根据病情分为缓解期组和急性发作组。选择同期在该院接受体检的健康人40例作为对照组。检测两组血清IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ水平,并进行统计学分析。结果哮喘组IL-4、IL-17水平显著高于对照组[(47.03±8.42)pg/mL vs.(15.82±3.30)pg/mL,(102.40±26.20)ng/L vs.(43.20±7.40)ng/L],IL-10、IFN-γ水平显著低于对照组[(84.20±4.38)ng/L vs.(98.83±5.23)ng/L,(94.36±23.67)ng/L vs.(110.70±30.02)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05);缓解期组血清IL-4、IL-17水平均显著低于急性发作组[(19.16±3.92)pg/mL vs.(38.82±5.14)pg/mL,(51.32±8.31)ng/L vs.(82.08±9.20)ng/L],IL-10、IFN-γ水平均显著高于急性发作组[(71.46±4.28)ng/L vs.(48.07±4.12)ng/L,(63.27±6.26)ng/L vs.(31.98±4.13)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05)。结论血清IL-4、IL-10、IL-17水平和IFN-γ浓度与支气管哮喘存在密切的联系,对其浓度进行检测可判断患者的病情变化,为临床治疗提供有效的依据。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增龄性变化及其与老年肺癌的关系

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增龄性变化及其与老年肺癌发生、发展的关系。方法肺癌患者70例和体检健康者60例,分别按年龄(青年18~45岁、中年45~60岁、老年60岁)分为青年肺癌组21例、中年肺癌组25例、老年肺癌组24例和青年健康组20例、中年健康组20例、老年健康组20例。采用流式细胞分析法测定各组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分率,采用实时荧光定量PCR法测定功能基因Foxp3 mRNA的相对表达量;分析肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分率与临床特征的关系。结果老年肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(11.81±2.40)%]及Foxp3 mRNA相对表达量(3.14±1.30)高于中年肺癌组[(11.25±1.84)%、2.53±1.16]和青年肺癌组[(9.05±2.14)%、2.28±1.21],中年肺癌组高于青年肺癌组(P0.05);老年健康组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(9.82±1.19)%]及Foxp3mRNA相对表达量(2.67±0.99)高于中年健康组[(7.81±1.16)%、1.76±0.80]和青年健康组[(6.23±0.91)%、1.17±0.51],中年健康组高于青年健康组(P0.05);相同年龄段,各肺癌组中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量均明显高于各健康组(P0.05);肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率在肺癌分期、有无淋巴结转移上差异有统计学意义(F=28.660,P=0.002;t=21.084,P0.001),在不同性别、病理类型上差异无统计学意义(t=2.330,P=0.120;F=0.020,P=0.980)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的增龄性变化可能是导致老年肺癌发生、发展的原因之一。     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。     

老年患者不同麻醉方式下腹部良性肿瘤切除术后肺部感染情况分析

目的探讨不同麻醉方式下行腹部良性肿瘤切除术老年患者术后肺部感染情况。方法择期行腹部良性肿瘤切除术老年患者45例,其中20例采用全凭静脉麻醉(全凭静脉麻醉组),25例采用硬脊膜外阻滞复合全身麻醉(硬脊膜外麻醉组),分别于麻醉前、术后6、24、72h检测2组白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、CD4~+/CD8~+水平,比较2组术后14d内肺部感染发生率。结果术后14d内,全凭静脉麻醉组肺部感染率(20.0%)高于硬脊膜外麻醉组(4.0%)(P0.05);术后6、24h,全凭静脉麻醉组IL-6[(34.23±5.11)、(33.12±5.12)μg/L]、IL-8[(56.72±9.68)、(50.11±7.83)μg/L]高于麻醉前[(29.71±4.52)、(33.87±6.72)μg/L],CD4~+/CD8~+(1.58±0.22、1.51±0.18)低于麻醉前(1.63±0.23)(P0.05);硬脊膜外麻醉组术后6hIL-6[(31.11±4.49)μg/L]、IL-8[(47.23±8.23)μg/L]高于麻醉前[(29.72±4.56)、(33.91±6.74)μg/L](P0.05);全凭静脉麻醉组术后6、24h的IL-6、IL-8水平高于硬脊膜外麻醉组,CD4~+/CD8~+水平低于硬脊膜外麻醉组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与全凭静脉麻醉相比,老年患者腹部良性肿瘤切除手术采用硬脊膜外阻滞复合全身麻醉可降低术后肺部感染发生率,对患者免疫功能影响较小。     

进展期胃癌患者化疗前后免疫调节因子及肿瘤标志物的动态研究

目的分析进展期胃癌(advanced gastric cancer,AGC)患者化疗前后免疫调节因子及肿瘤标志物的动态变化.方法回顾性分析2017年3月至2018年12月广西科技大学第二附属医院化疗科58例进展期胃癌患者(胃癌组),根据化疗疗效分为有效组、稳定组、无效组,同时选取同期健康者30名为正常组.比较研究对象的免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)以及相关肿瘤标志物(CEA、CA199、CA242)化疗前后的变化情况.结果胃癌组患者IgA[(2.11±0.89)g/L]、IgM[(10.65±4.61)g/L]、IgG[(1.25±0.45)g/L]、CD8+[(28.12±3.56)%]、CEA[(40.33±16.24)μg/L]、CA199[(76.34±21.56) kU/L]、CA242[(29.34±9.57) kU/L]水平明显高于正常组IgA[(0.93±0.36)g/L]、IgM[(6.46±3.59)g/L]、IgG[(0.65±0.32)g/L]、CD8+[(25.02±4.78)%]、CEA [(1.81±0.55)μg/L]、 CA199 [(7.51±2.67)kU/L]、 CA242 [(3.35±1.21)kU/L](t 值分别为 6.958、3.600、6.495、3.435、12.952、17.370、14.773,P<0.05),而 CD3+[(64.12±5.12)%]、CD4+[(34.12±4.10)%]、CD4+/CD8+(1.09±0.28)低于正常组 CD3+[(71.23±7.14)%]、CD4+[(39.78±5.20)%]、 CD4+/CD8+(1.47±0.40)(t 值分别为 5.376、5.592、5.192,P<0.05).胃癌组患者总有效率为79.31%(46/58),无效率为20.69%(12/58).有效组患者经两个疗程化疗后的IgA、IgG、IgM、CD8+明显低于化疗前(t值分别为3.925、3.745、4.036、2.661,P均<0.05),而CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显高于化疗前(t值分别为3.520、3.077、3.218,P均<0.05),同时免疫球蛋白、T淋巴细胞亚细胞水平明显优于稳定组、无效组(P<0.05);有效组、稳定组患者经两个疗程化疗后的肿瘤标志物 CEA、CA199、CA242 水平明显低于化疗前(P<0.05),且明显低于无效组(P<0.05).结论 AGC患者在化疗后的免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群以及肿瘤标志物水平有明显的变化,其水平高低可以指导化疗疗效.     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对辅助性T细胞漂移的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨脓毒症大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡对辅助性T细胞(Th)漂移的影响及血必净注射液的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血必净组,每组8只.行盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.于第3日采用免疫磁珠法分选各组CD4+CD25+Treg并培养12 h,用流式细胞仪检测Treg凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的分泌量;再将CD4+CD25+ Treg与CD4+CD25-T细胞1∶1共培养,刀豆素A刺激68 h,ELISA检测Th1、Th2、Th17分泌的γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17水平.结果 正常组Treg凋亡率[(12.03±0.89)%]与假手术组[(9.48±2.17)%]比较差异无统计学意义;模型组Treg凋亡率[(5.87±0.44)%]明显低于正常组和假手术组;而血必净组的Treg凋亡率[(27.29±2.48)%]显著高于其他各组(P均<0.01).Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌量随Treg凋亡率增加而减少,相关系数(r)分别为-0.878(P=0.042)、-0.877(P=0.042)、-0.743(P=0.010).与正常组比较,模型组IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显升高[IFN-γ:(254.70±44.88)ng/L比(0.68±0.78)ng/L,IL-4:(8.82±0.61)ng/L比(3.48±0.98)ng/L,IFN-γ/IL-4比值:30.28±4.87比0.23±0.30,P均<0.01];而血必净组IFN-γ[(491.54±84.28)ng/L]和IFN-γ/IL-4比值(45.31±8.01)均显著高于模型组(P<0.01和P<0.05);各组间IL-17水平无明显差异(P均>0.05).结论 脓毒症时Treg凋亡率增加可减轻对效应T细胞的抑制功能,血必净注射液能有效促进脓毒症Treg凋亡,介导Th2向Th1漂移.     

黄芪-莪术不同提取物对小鼠H22荷瘤的抑制作用及免疫调节的影响

目的研究黄芪-莪术不同提取物对小鼠H_22荷瘤的抑制作用及其对肿瘤小鼠血常规、T细胞亚群以及IL-2的影响。方法建立H_22荷瘤模型,分别灌服不同方法提取的黄芪-莪术提取物40倍人用生药量,观察抑瘤率,检查其对H_22肿瘤小鼠外周血常规、CD4~+、CD8~+T淋巴亚群以及IL-2水平调节的影响,应用SPSS 19.0统计软件进行数据分析,计量资料两两比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 EH1~EH4四种提取物组均有一定的抑瘤效果,抑瘤率分别为47.55%,36.12%,29.96%,34.68%。与模型组相比,EH1组白细胞数[(9.57±3.46)×10~9/L,t=-2.582]、淋巴细胞[(3.25±0.66)×10~9/L,t=-4.422]、嗜酸粒细胞[(0.27±0.19)×10~9/L,t=-2.123]均升高(P<0.05),EH_2组淋巴细胞[(3.41±1.04)×10~9/L,t=-3.567]升高(P<0.01),EH3组淋巴细胞[(3.79±0.56)×10~9/L,t=-7.380]、单核粒细胞[(1.15±0.36)×10~9/L,t=-5.947]升高(P<0.05),EH4组白细胞[(9.93±3.82)×10~9/L,t=-2.647]、淋巴细胞[(3.59±1.14)×10~9/L,t=-3.756]、单核粒细胞[(1.47±1.06)×10~9/L,t=-3.046]升高(P<0.05)。EH1和EH4组CD4~+T细胞(35.878±4.584,t=-2.299;37.540±9.210,t=-1.838)升高,EH1组CD8~+T细胞(27.444±4.454,t=-0.814)升高。EH3和EH4组IL-2水平(208.308±21.414,t=-2.693;206.192±20.931,t=-2.575)升高(P<0.05)。结论 95%醇提、50%醇提、水提醇沉、传统水煎四种方法提取的黄芪-莪术成分均有不同程度的抗肿瘤效果,其发挥抗肿瘤效果可能是通过调节H_22小鼠外周血中异常的白细胞数,CD4~+、CD8~+T淋巴细胞数和IL-2水平来实现的。     

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血T淋巴细胞和相关细胞因子的变化及研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)合并颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis, CAS)患者外周血T淋巴细胞比率、相关细胞因子表达及其与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness, IMT)和糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA_1c)的相关性。方法 80例T2DM患者,其中有CAS斑块者40例为CAS组,无CAS斑块者40例为无CAS组;体检健康者40例为对照组。3组采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例,采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin, IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素(interferon, IFN)-γ水平,并测量IMT和HbA_1c水平,分析外周血T淋巴细胞与IMT和HbA_1c的相关性。结果 CAS组Th1细胞和Th17细胞百分率[(19.47±2.45)%、(2.34±0.33)%]及IL-2[(211.24±31.49)ng/L]、IL-17[(19.54±3.27)ng/L]、IFN-γ[(19.72±3.21)ng/L]水平、HbA_1c[(11.28±1.56)%]、IMT[(1.45±0.40)mm]明显高于无CAS组[(15.24±1.62)%、(1.50±0.28)%、(184.32±25.74)ng/L、(15.76±2.08)ng/L、(15.68±2.07)ng/L、(8.92±1.09)%、(1.01±0.27)mm]和对照组[(10.02±1.14)%、(0.96±0.25)%、(128.46±17.49)ng/L、(7.32±0.99)ng/L、(10.43±1.21)ng/L、(5.22±0.84)%、(0.76±0.13)mm](P0.05),无CAS组高于对照组(P0.05);CAS组Th2细胞和Treg细胞百分率[(2.25±0.49)%、(4.03±0.75)%]及IL-4[(4.72±0.32)ng/L]、IL-6[(11.21±1.04)ng/L]、IL-10[(11.07±1.27)ng/L]水平低于无CAS组[(2.97±0.67)%、(5.67±1.33)%、(5.36±0.61)ng/L、(13.24±1.96)ng/L、(14.77±1.93)ng/L]和对照组[(3.36±0.83)%、(6.57±1.52)%、(7.32±0.95)ng/L、(17.75±2.36)ng/L、(22.72±2.59)ng/L](P0.05),无CAS组低于对照组(P0.05);CAS组患者IMT与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.809,P0.001;r=0.648,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.580,P0.001;r=-0.643,P0.001),HbA_1c与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.601,P0.001;r=0.528,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.844,P0.001;r=-0.602,P0.001)。结论糖尿病合并CAS患者存在Th1、Th17细胞比率上调,Th2、Treg细胞比率下调,IL-2、IL-17、IFN-γ分泌增多,IL-4、-6、-10分泌减少,且与患者疾病进展程度相关。     

益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及机制研究

目的探讨益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及作用机制。方法 60只雄性C57BL6小鼠随机分为三组,分别为假手术组(20只)、对照组(20只)和实验组(20只)。在饲养2 d后,实验组小鼠每天给予200μL的益生菌制剂,对照组和假手术组小鼠每天给予200μL等渗Na Cl溶液,连续灌胃4周。分别对实验组小鼠与对照组小鼠进行盲肠结扎穿孔术(CLP),而假手术组小鼠不予盲肠穿刺,其余步骤同CLP。每组10只用于观察小鼠活动状态及7 d存活情况;每组剩余10只,术后24 h取血液、结肠组织。采用酶联免疫吸附实验法检测各组小鼠血清中炎症因子白细胞介素22(IL-22)、IL-2及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织形态,免疫组织化学法观察各组小鼠肠黏膜抗紧密连接相关蛋白(Occludin)表达。结果假手术组小鼠生长状态良好;对照组小鼠则蜷缩在笼角,浑身战栗;实验组小鼠较对照组活跃,活动较多,未见明显战栗。术后第7天,对照组无小鼠存活,实验组小鼠仍有3只存活,予安乐死,其7 d存活情况显著高于对照组小鼠(P=0.020);而假手术组小鼠10只均存活,予安乐死。对照组与假手术组比较,小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=7.590,P0.001]、IL-2[(328±27)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=21.368,P0.001]及TNF-α[(94±22)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=4.734,P0.001]表达水平比较,差异均有统计学意义;实验组与假手术组小鼠血清IL-22[(75±33)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=3.755,P=0.001]、IL-2[(217±30)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=10.850,P0.001]及TNF-α[(107±20)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=5.956,P0.001]表达水平比较,差异亦均有统计学意义;与对照组相比,实验组小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(75±33)ng/L,t=2.185,P=0.042]及IL-2[(328±27)ng/L vs.(217±30)ng/L,t=8.371,P0.001]表达水平差异均有统计学意义,而TNF-α[(94±22)ng/L vs.(107±20)ng/L,t=1.363,P=0.188]表达水平比较,差异无统计学意义。假手术组小鼠的结肠黏膜上皮完整,腺体排列规则,少许或无炎症细胞浸润;对照组小鼠则出现结肠黏膜上皮腺体排列紊乱、变形、缺失,肠上皮细胞间紧密连接结构模糊,以及炎症细胞广泛浸润现象,有些伴有隐窝脓肿形成;而实验组小鼠结肠上皮基本完整,未有糜烂缺失,腺体排列基本正常,炎症细胞浸润程度也较对照组小鼠有所减轻。免疫组织化学法检测结果显示,假手术组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构完整,Occludin蛋白表达较多;对照组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构破坏、消失,炎症细胞浸润,Occludin蛋白表达较少;实验组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构尚完整,腺泡间间隙增宽,Occludin蛋白表达较对照组有所增加。结论益生菌可通过抑制肠上皮细胞间紧密连接相关蛋白的减少,稳定肠道黏膜屏障结构,有效提高脓毒症小鼠的存活情况。     

肿瘤微环境中CD4~+Foxp3~+Treg对鼻咽癌患者预后影响

目的探讨肿瘤微环境中CD4~+Foxp3~+Treg对鼻咽癌患者的预后影响。方法选取2011年2月-2013年2月于我院收治的127例鼻咽癌患者为研究对象,应用流式细胞仪检测两组血清CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+以及Th17在CD4~+T细胞比例等指标,依据CD4~+/CD8~+值分为正常组以及异常组,并应用免疫组化法检测患者癌组织CD4、Foxp3以及IL-17,另依据CD4~+Foxp3~+Treg表达水平划分为低表达组与高表达组,应用Kaplan-Meier法比较生存情况并进行预后的多因素分析。结果异常组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、Th17在CD4~+T细胞比例显著低于正常组,CD8~+显著高于正常组(P0.05);CD4~+Foxp3~+Treg与患者无瘤生存时间呈显著正相关(P0.05),与总体生存时间呈正相关,但无统计学意义(P0.05);CD4~+/CD8~+异常患者的5年总生存率67.95%显著低于正常患者5年总生存率89.80%(P0.05);T分期、CD4~+/CD8~+表达水平以及Th17是影响鼻咽癌预后的独立影响因素(P0.05);CD4~+Foxp3~+Treg与肿瘤转移复发密切相关(P0.05)。结论鼻咽癌患者CD4~+/CD8~+、Th17水平明显降低,其水平异常表达可严重影响患者预后,肿瘤间质中CD4~+Foxp3~+Treg细胞数量增多与预后呈正相关,并与肿瘤转移复发密切相关。     

莫西沙星联合匹多莫德治疗老年呼吸道感染患者的效果及细胞免疫指标评估

目的评估老年呼吸道感染患者应用莫西沙星联合匹多莫德治疗的效果及对细胞免疫指标的影响。方法选取84例老年呼吸道感染患者,根据不同治疗方案纳入A组(42例)与B组(42例)。A组应用莫西沙星治疗,B组应用莫西沙星联合匹多莫德治疗,对比两组的治疗效果、临床症状改善时间(发热、肺啰音、咳嗽咳痰)、细胞免疫指标(CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)以及血清炎性因子水平[白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]。结果 B组的总有效率(95.24%)高于A组(80.95%),P0.05;B组发热、肺啰音、咳嗽咳痰的改善时间[(2.84±0.23)d、(4.11±0.40)d、(3.51±0.62)d]均短于A组[(3.91±0.36)d、(5.25±0.56)d、(4.76±0.83)d],P均0.05;B组治疗后的CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+[(42.16±6.53)%、(27.15±3.96)%、1.84±0.79]均优于A组[(35.87±4.21)%、(32.82±4.11)%、1.36±0.53],P均0.05;B组治疗后的IL-6、IL-8、TNF-α[(72.89±64.36)ng/L、(162.37±105.91)ng/L、(107.86±59.62)μg/L]均低于A组[(159.66±75.80)ng/L、(385.84±142.68)ng/L、(189.44±76.56)μg/L],P均0.05。结论老年呼吸道感染患者应用莫西沙星联合匹多莫德治疗的效果显著,可有效消除患者的临床症状,且可改善免疫功能指标,降低血清炎性因子水平。     

宫颈癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞与白细胞介素-17水平及其相关性研究

目的探讨外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)和白细胞介素-17(IL-17)水平在宫颈癌患者中的变化及其相关性。方法选取2014年1月至2015年3月该院确诊宫颈癌患者60例(宫颈癌组)和查体的健康女性60例(健康对照组),采用流式细胞仪检测外周血Tr细胞数量及占CD4~+细胞百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平。结果宫颈癌组外周血Foxp3~+Tr、Tr、CD4~+T淋巴细胞百分比,Foxp3~+Tr/Tr、Tr/CD4~+T淋巴细胞比值及血清IL-17水平均较健康对照组明显升高,而IL-17/Tr比值明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组患者外周血CD4~+CD25~+Tr细胞水平与血清IL-17水平呈正相关(r=0.768,P0.05)。结论宫颈癌患者存在细胞免疫功能紊乱,IL-17与Tr细胞比值失衡可能在宫颈癌发病机制中起一定的作用。     

白细胞介素-17水平对脓毒症患者发生急性肾损伤的预测价值

目的分析脓毒症患者发生急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的影响因素,探讨白细胞介素(interleukin,IL)-17对脓毒症患者并发AKI的预测价值。方法102例脓毒症患者,根据入住ICU 7 d内是否发生AKI分为AKI组和非AKI组。比较2组患者一般资料及序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)和急性生理和慢性健康状况评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ);采用ELISA法检测血清IL-17、IL-23水平,采用免疫比浊法检测降钙素原水平,并进行2组间比较;采用多因素logistic回归分析脓毒症患者发生AKI的影响因素;绘制ROC曲线,评估IL-17早期预测脓毒症患者发生AKI的效能。结果入住ICU 7 d内102例患者共发生AKI 31例,发生率为30.39%。AKI组患者平均动脉压[(77.25±8.94)mm Hg]、氧合指数[(233.04±19.26)mm Hg]低于非AKI组[(88.17±9.38)、(254.88±18.57)mm Hg](P<0.05),SOFA评分[(8.81±1.35)分]、APACHEⅡ评分[(18.87±2.69)分]及血清降钙素原[(4.83±0.99)μg/L]、IL-23[(63.25±10.78)μg/L]、IL-17[(43.85±13.27)μg/L]水平均高于非AKI组[(6.94±1.52)分、(14.79±2.95)分、(3.91±1.13)μg/L、(56.88±11.75)μg/L、(31.99±7.13)μg/L](P<0.05)。平均动脉压(OR=0.877,95%CI:0.810~0.950,P=0.001)、SOFA评分(OR=2.096,95%CI:1.493~2.942,P<0.001)、降钙素原(OR=1.720,95%CI:1.052~2.812,P=0.030)、IL-17(OR=1.078,95%CI:1.014~1.145,P=0.015)是脓毒症患者发生AKI的影响因素。血清IL-17、平均动脉压、SOFA评分、降钙素原的最佳截断值分别为40.92μg/L、82.33 mm Hg、8.35分、4.22μg/L时,预测脓毒症患者发生AKI的AUC分别为0.848(95%CI:0.764~0.912,P<0.001)、0.677(95%CI:0.577~0.766,P<0.001)、0.689(95%CI:0.590~0.777,P<0.001)、0.638(95%CI:0.537~0.731,P<0.001),灵敏度分别为67.74%、93.55%、67.74%、70.97%,特异度分别为87.32%、39.55%、69.01%、50.93%。结论IL-17可对脓毒症患者是否发生AKI进行早期预警。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17和CD4+CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子的检测及意义

目的 探讨SLE患者外周血Th17及CD4+ CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10的水平变化及意义.方法 选取2009-2010年河南省人民医院56例SLE患者(非活动期26例、活动期30例)及28名健康对照者.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+ CDhigh25 Treg细胞水平;采用QRT-PCR检测RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10水平,并分析其与SLE的相关性.结果 SLE患者组外周血Th17细胞水平为(3.44±0.96)％,显著高于健康对照组的(2.42±0.52)％,差异有统计学意义(t=5.38,P=0.000).SLE患者组外周血CD4+CDhigh25Treg细胞水平为(1.32±0.57)％,显著低于健康对照组的(2.07±0.67)％,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.034).SLE患者的RORγt mRNA表达水平为(0.219±0.063),高于健康对照组的(0.087±0.045),差异有统计学意义(t=6.41,P=0.000);而SLE患者的Foxp3+ mRNA表达水平为(0.063±0.045),低于健康对照组的(0.128±0.056),差异有统计学意义(t=5.28,P=0.000).SLE患者组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为122.4(60.5～188.3)、167.2(128.7 ～871.4)、51.3(20.9 ～123.7)ng/L,高于健康对照组的27.1(18.1 ～86.2)、31.0(31.0～424.5)、33.5(16.4～54.1) ng/L,差异有统计学意义(Z值分别为3.83、4.54、1.87,P均＜0.05),TGF-β水平为31.0(31.0 ～168.6) ng/L,低于健康对照组的159.8(63.4～389.7)ng/L,差异有统计学意义(Z=4.87,P＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平与Th17细胞水平、SLEDAI积分、抗dsDNA抗体水平呈显著正相关(r=0.621、0.581、0.512,P＜0.05),与补体C3水平呈负相关(r=-0.543,P＜0.05).CD4+ CDhigh25Treg细胞与SLEDAI积分呈负相关(r=- 0.423,P＜0.05),与补体C3水平呈正相关(r=0.511,P＜0.05).结论 SLE患者Th17细胞数量增高,CD4+ CDhigh25 Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在SLE的发病机制中可能起到重要作用.