白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变分析

目的分析白色假丝酵母菌临床分离株对氟康唑的耐药性,阐明耐氟康唑白色假丝酵母菌Erg11基因突变。方法回顾性分析2011年6月-2012年12月医院患者送检各类标本分离的287株假丝酵母菌属,采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)M27-A3推荐的微量稀释法进行体外药敏试验,从177株白色假丝酵母菌中筛选出7株对氟康唑耐药株,对氟康唑靶酶基因Erg11进行PCR扩增、测序,与Genbank上标准序列(X13296)比对分析。结果在7株白色假丝酵母菌氟康唑耐药株和1株敏感株中共发现25个点突变,其中15个同义突变,10个错义突变,10个错义突变分别为V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G、D116E、K119N、K128T、D153E、E266D,其中V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G是新发现的。结论成功分析了白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变。     

侵袭性感染白假丝酵母ERG11突变分析与氟康唑耐药关系研究

目的明确医院侵袭性感染的白假丝酵母氟康唑耐药的主要分子机制及其与ERG11突变的关系,以指导临床抗真菌的治疗。方法收集2015年1月-2017年6月医院临床住院患者分离的50株侵袭性感染白假丝酵母,采用VITEK-2COMPACT进行检测及药敏分析,提取其真菌基因组DNA,采用PCR检测ERG11基因并测序分析,同时采用实时荧光定量RT-PCR检测ERG11基因mRNA相对表达量,并采用SPSS19.0统计软件分析氟康唑耐药与ERG11突变及相对表达量之间关系。结果 50株侵袭性白假丝酵母主要来自尿液、伤口分泌物和腹水标本,其中对氟康唑耐药11株,氟康唑剂量依赖性耐药10株,氟康唑敏感29株;ERG11基因扩增及测序分析发现15个突变位点,其中11个为同义突变,无氨基酸改变,4个为错义突变;白假丝酵母氟康唑耐药株、剂量依赖性敏感株和氟康唑敏感菌株ERG11基因的mRNA表达水平之间比较差异有统计学意义(F=78.30,P=0.002);随着白假丝酵母对氟康唑敏感性的降低,ERG11基因mRNA的表达量均有不同程度的上升。结论侵袭性感染白假丝酵母氟康唑耐药严重,耐药水平与ERG11基因的错义突变及表达量密切相关。     

侵袭性白假丝酵母感染ERG3基因突变及表达

目的分析侵袭性白假丝酵母感染ERG3基因突变及表达情况。方法收集2018年1月-2018年12月亳州市人民医院发生IFI的住院患者体液标本,分离白假丝酵母。采用微量肉汤稀释法对菌株进行氟康唑敏感性实验,采用聚合酶链反应(PCR)扩增ERG3基因并测序分析突变位点,比较不同氟康唑敏感性菌株ERG3基因表达情况。结果所有标本共分离出白假丝酵母239株,以痰液(67.36%)为主,其次为阴道分泌物(12.13%)、尿液(10.04%);239株白假丝酵母共检出221株氟康唑敏感株(92.47%)、17株氟康唑耐药株(7.11%)及1株剂量依赖敏感株(0.42%);随机选择10株氟康唑敏感株和4株氟康唑耐药株进行ERG3基因扩增,14株白假丝酵母ERG3基因序列中共发现28个点突变,包括24个(85.71%)同义突变,4个(14.29%)错义突变,其中同义突变位点为C602T、T432C、C438T,错义突变位点为I340L、V374G、P902L和V1076A;氟康唑耐药株ERG3基因高表达率明显高于敏感株。结论侵袭性白假丝酵母感染对氟康唑具有一定耐药性,其耐药性可能与ERG3基因错义突变I340L、V374G、P902L和V1076A有关。     

热带假丝酵母菌对氟康唑耐药性分析

目的研究热带假丝酵母菌分离株对氟康唑的耐药性,并探讨其耐药的分子机制。方法检测142株热带假丝酵母菌对氟康唑药物的敏感性,PCR扩增热带假丝酵母菌ERG11全基因序列,DNA测序后经生物信息学分析CtERG11基因突变。结果142株热带假丝酵母菌中,128株对氟康唑敏感,占90.1%;4株为氟康唑剂量依赖(S-DD)株,占2.8%;10株对氟康唑耐药,占7.1%;CtERG11序列分析发现,氟康唑敏感株中未见基因突变;S-DD株中出现G1362A和C1404T沉默突变;耐药株中共出现T225C、A242C、T243C、G264A、A395T、C461T和G1362A等7种点突变,并导致D81A、Y132F和S154F氨基酸突变。结论D81A、Y132F和S154F氨基酸突变可能与热带假丝酵母菌对氟康唑耐药有关。     

ERG5基因在白色念珠菌耐唑类药物中的突变及高表达

目的探讨临床分离白色念珠菌ERG5基因突变、高表达与唑类抗真菌药物耐药的关系。方法对36株临床白色念珠菌进行药物敏感性试验,并对其ERG5基因进行扩增测序,将测序结果与Gen Bank中已发表的序列(Gen Bank序列号:AF069572)进行比对,分析基因突变情况;抽提白色念珠菌临床菌株的总RNA,并反转录合成c DNA,采用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)方法检测ERG5基因的表达水平。结果 36株白色念珠菌临床菌株中,共检测出ERG5基因存在1个错义突变位点;氟康唑耐药组有11株发生ERG5高表达,占61.11%,敏感组中5株发生高表达,占31.25%。耐药菌株组ERG5基因的表达量ΔCt值与敏感组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论白色念珠菌ERG5基因的高表达可能与FCA产生耐药有关,并未发现ERG5耐药菌株在同一位点发生错义突变,白色念珠菌ERG5基因突变、高表达在耐药中的作用还有待于进一步研究证实。     

耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG基因家族突变研究及唑类药物抑菌分析

目的研究耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG11、ERG3和ERG5基因突变,及分离株对酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑的抑菌分析。 方法收集221株经质谱仪鉴定为白色念珠菌的菌株,微量肉汤稀释法进行氟康唑、酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑药敏试验,得出四种药物对白色念珠菌最小抑菌浓度（MIC）值;根据CLSI M27-A3筛选出氟康唑非敏感白色念珠菌,提取DNA后扩增ERG11、ERG3与ERG5基因,进行双向测序,与GenBank中的标准菌株基因序列（SC5314和AF069752）进行BLAST比对分析。 结果白色念珠菌对氟康唑耐药率为9.05%;对白色念珠菌MIC值进行比较,酮康唑的MIC值均低于克霉唑和硝酸咪康唑,差异有统计学意义（P＜0.05）。克霉唑与硝酸咪康唑比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。ERG11、ERG3、ERG5分别发现18、17、12种错义突变。 结论酮康唑对白色念珠菌抑菌率总体比克霉唑、硝酸咪康唑强。耐氟康唑白色念珠菌ERG11、ERG3、ERG5基因出现若干错义突变位点,某些位点突变导致氨基酸变异可能与耐药产生有关。     

白色假丝酵母菌感染的临床分布与药敏及生物膜类型分析

目的探讨白色假丝酵母菌感染的临床分布与药敏率以及产膜能力,为临床合理使用抗真菌药物提供科学依据。方法收集2013年1月-2015年8月住院患者标本分离出7 612株真菌,真菌分离培养按《全国临床检验操作规程》进行,采用法国生物梅里埃公司全自动微生物VITEK-2Compact分析仪鉴定到种,体外药敏试验采用纸片K-B法,采用WHONET 5.6软件进行统计分析,通过结晶紫染色法对白色假丝酵母菌进行生物膜定量分析。结果分离的真菌中白色假丝酵母菌1 366株,占17.9%;白色假丝酵母菌主要分离自呼吸科389株及急诊科241株,分别占28.5%及17.6%;白色假丝酵母菌的标本来源主要以痰液最多,其次为尿液及分泌物,分别占68.3%、10.5%及5.8%;白色假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑的敏感率分别为100.0%、100.0%、99.9%、99.8%、98.0%;标准菌株SC5314为强产生物膜,临床分离的1 366株白色假丝酵母菌中弱产生物膜325株、中等产生物膜243株、强产生物膜798株。结论白色假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑依然保持较高的敏感性,白色假丝酵母菌的临床分布不同,临床治疗应合理选择抗真菌药物,同时加强对真菌耐药性的监测有助于减少耐药菌株的产生,也推动了生物膜产生能力与白色假丝酵母菌的耐药机理及致病性之间关系的进一步研究。     

异基因造血干细胞移植患者假丝酵母菌属感染分析

目的了解医院移植病房异基因造血干细胞移植患者假丝酵母菌属感染现状及耐药性分析,为异基因造血干细胞移植患者抗感染治疗提供依据。方法对2008-2013年血液科移植病房290例住院患者送检标本进行细菌鉴定,细菌鉴定采用VITEK-2Compact全自动微生物鉴定仪及科玛嘉显色培养基,用ATB fungs 3检测假丝酵母菌属的药物敏感性,数据采用WHONET5.4软件进行处理。结果 290例异基因造血干细胞移植术患者发生假丝酵母菌属感染35例,感染率为12.07%;共分离出35株假丝酵母菌属,其中白色假丝酵母菌最多15株占42.86%,其次为热带假丝酵母菌11株占31.43%;标本来源以口腔拭子为主占31.42%,其次为血液、眼拭子、痰液,分别占17.14%、14.29%、14.29%;白色假丝酵母菌及热带假丝酵母菌对氟胞嘧啶、两性霉素B的敏感率均为100.00%,对氟康唑、伊曲康唑及伏立康唑的敏感率均≥80.00%。结论异基因造血干细胞移植患者临床分离的假丝酵母菌耐药现象呈上升趋势,本研究为临床经验用药提供了一定的依据。     

酵母菌对氟康唑的药物敏感试验分析

目的探讨Etest法检测酵母菌对氟康唑的敏感性. 方法用Etest法对108株酵母菌进行药敏试验,判定其MIC值. 结果108株酵母菌对氟康唑均有耐药菌株出现,总敏感率为86.1%,其中白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌对氟康唑的敏感率分别为96.8%、95.2%、81.8%、10%、75%,氟康唑对白色假丝酵母菌敏感的MIC≤0.50 μg/ml者占45%. 结论氟康唑具有较好抗酵母菌作用,但应监测其耐药性.     

脑卒中患者深部真菌感染的菌群分布及耐药性

目的 探讨脑卒中患者并发深部真菌感染的临床特点、菌群分布及耐药特性.方法 收集2006年1-12月脑卒中并发深部真菌感染患者的血、痰、粪便、尿、引流液等标本,用萨布罗培养基分离培养真菌,VITEK-60YBC卡进行菌种鉴定,Rosco纸片扩散法测定药敏结果.结果 从136例患者的标本中共分离出139株真菌,以白色假丝酵母菌及热带假丝酵母菌为主,其中白色假丝酵母菌80株,占57.56%,热带假丝酵母菌33株,占23.74%,光滑假丝酵母菌13株,占9.35%,对氟康唑的耐药率分别为1.81%、3.03%、46.15%,对两性霉素B和制霉菌素均敏感;感染部位以呼吸道最常见,占62.6%,其次为泌尿生殖道,占28.8%.结论 脑卒中患者易并发深部真菌感染,感染菌株以白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌为主,对唑类药物敏感性均较好,光滑假丝酵母菌对唑类药物具有较高的耐药性,两性霉素B和制霉菌素的抗菌活性最强.     

1690例标本中486株假丝酵母菌的分布及药敏分析

目的 了解假丝酵母菌的临床分布,以及对常用抗真菌药物的耐药性. 方法 采用回顾性资料分析2008年1月-2009年4月间,临床各种送检标本中假丝酵母菌的分离及耐药性情况. 结果从临床送检的痰、尿、分泌物等1 690例标本中检出5种假丝酵母菌共486株,检出率为28.61%,其中白色假丝酵母菌检出325株占66.87%;在各年龄段念珠菌的分布中,60岁以上患者所占比例最大为69.96%;体外药敏试验显示5种假丝酵母菌对两性霉素B、伊曲康唑、制霉菌素的敏感率均在93%以上,对氟康唑的耐药率达到11.5%. 结论白色假丝酵母菌仍是第一位的致病性真菌,并且以呼吸道假丝酵母菌感染最常见.5种假丝酵母菌对氟康唑的耐药率最高.     

泌尿系感染真菌分布及耐药性分析

目的了解泌尿系真菌感染的菌株分布及耐药率,为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法对2009年1-12月送检的1513份尿培养标本进行回顾性调查分析。结果共分离139株真菌,检出率为9.19%,前3位菌株分别是热带假丝酵母菌73株(52.52%)、白色假丝酵母菌38株(27.34%)、光滑假丝酵母菌13株(9.35%),所有菌株对两性霉素B、5-氟胞嘧啶100.00%敏感,对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑的耐药率分别是36.69%、41.73%、46.76%。结论热带假丝酵母菌的分离率及对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑的耐药率呈逐年上升趋势,应引起临床医师的高度重视。     

尿路真菌感染调查与药敏分析

目的探讨尿路医院感染真菌的分布与对抗真菌药物的敏感性,为临床合理选择抗真菌药物治疗提供指导。方法收集2013年7月-2015年7月医院收治的经中段尿细菌培养确诊为尿路真菌感染的237例患者为研究对象,采集患者尿液标本,检出的菌株采用科玛嘉显色培养基进行鉴定,并通过ATBFUNGUS3真菌药敏试剂进行药物敏感性试验。结果清洁中段尿标本,经真菌培养后分离得到237株真菌,白色假丝酵母菌113株占47.68%,光滑假丝酵母菌79株占33.33%;患者主要集中在综合ICU、泌尿外科、心内科、内分泌科及呼吸内科,以上科室尿路真菌感染占83.12%;白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌及热带假丝酵母菌对两性霉素B和氟胞嘧啶敏感,耐药率分别为0和0.88%、1.27%和0、0和0,白色假丝酵母菌对氟康唑、伊曲康唑以及伏立康唑的耐药率均10.00%,而后两者均10.00%,克柔假丝酵母菌主要对氟胞嘧啶敏感,对伊曲康唑耐药率38.4%,对伏立康唑的耐药率30.7%。结论白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌以及热带假丝酵母菌是院内尿路真菌感染的主要真菌,其对氟胞嘧啶以及两性霉素B具有较好的敏感性。     

江西南昌市52株假丝酵母菌血症病原真菌的鉴定及其药敏特征

目的了解江西南昌市假丝酵母菌血症病原真菌构成及其药物敏感性。方法收集2015年3—10月南昌某医院住院患者送检血标本分离的假丝酵母菌属真菌,扩增真菌的转录间隔间区(ITS区)和核糖体大亚基(26rRNA、D1/D2区)对菌株进行鉴定,同时检测菌株对抗真菌药物的敏感性。结果共收集血培养阳性标本1 332份,真菌阳性标本74份,占5.56%,其中检出假丝酵母菌属52株,以热带假丝酵母菌为最常见(17株,占32.69%),其次是白假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌复合体(均为16株,各占30.77%)。ITS区和D1/D2区的鉴定结果相同。52株假丝酵母菌对米卡芬净、卡泊芬净均敏感,两性霉素B的流行病学折点(ECV)结果显示,均为野生型。热带假丝酵母菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率分别为29.41%、17.64%,伊曲康唑和泊沙康唑的ECV结果显示,野生型分别占82.35%、94.12%;白假丝酵母菌对氟康唑和伏立康唑的敏感率分别为93.75%、81.25%,伊曲康唑和泊沙康唑的ECV显示,野生型分别占75.00%、81.25%;近平滑假丝酵母菌复合体对氟康唑和伏立康唑均敏感,伊曲康唑和泊沙康唑的ECV结果显示,均为野生型;光滑假丝酵母菌对氟康唑均为中介,伏立康唑、伊曲康唑和泊沙康唑的ECV结果显示,野生型分别占66.67%、100.00%、100.00%。结论热带假丝酵母菌为江西南昌市假丝酵母菌血症最常见的病原真菌,其次是白假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌复合体,唑类和棘白菌素类抗真菌药物和两性霉素B仍是一线抗真菌药物。     

大蒜素、氟康唑对医院感染酵母菌的体外抗菌活性研究

目的研究大蒜素、氟康唑对临床分离酵母菌的体外抗菌活性,比较中西药对酵母菌的耐药现状.方法286株酵母菌由住院患者各类感染标本中分离,菌种采用全自动微生物鉴定仪VITEK YBC卡鉴定,用琼脂稀释法测定大蒜素和氟康唑对酵母菌的最低抑菌浓度(MIC),比较大蒜素和氟康唑对酵母菌的MIC50、MIC90.结果经鉴定临床分离的酵母菌中,白色假丝酵母菌最常见,占67.6%,其次为热带假丝酵母菌17.5%、光滑假丝酵母菌8.4%、近平滑假丝酵母菌3.5%等;大蒜素对各类酵母菌均有抑菌作用;氟康唑对白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌及近平滑假丝酵母菌的敏感率较高.结论医院深部酵母真菌感染及耐药性呈上升趋势,提示临床在不明确何种酵母菌感染的情况下,中西药联合使用,可能得到好的疗效.     

泌尿系真菌感染分布及耐药性

目的 分析首都医科大学附属北京世纪坛医院患者泌尿系深部真菌感染病原菌的分布及其耐药性,为临床合理选用抗真菌药物提供依据.方法 收集北京世纪坛医院2009年1月-2010年12月尿液样本中分离的真菌,采用科玛嘉培养基及VITEK-2 Compact鉴定系统进行菌株鉴定,ATB Fungus 3进行药物MIC测定,卡方检验进行统计学分析.结果 共分离出各类酵母样真菌217株,白色假丝酵母菌66株,占30.4％,热带假丝酵母菌57株,占26.3％,光滑假丝酵母菌53株,占24.4％,近平滑假丝酵母菌20株,占9.2％;分离的真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性好,对氟康唑耐药率为4.6％与伏立康唑的8.8％差异无统计学意义,对氟康唑耐药率为7.4％与伊曲康唑的14.3％差异有统计学意义(x2=5.37,P＜0.05).结论 尿液标本真菌感染以白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌为主,对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伏立康唑敏感性较好.     

假丝酵母菌属对氟康唑药敏分析

目的探析医院假丝酵母菌属的分布及对氟康唑的敏感性,为防范重点科室患者假丝酵母菌属感染及提高治疗效果提供依据。方法选取医院2012年7月-2013年7月从真菌室分离到的假丝酵母菌属178株作为鉴定对象,采用科玛嘉假丝酵母菌属显色培养基鉴定菌种分布,以及微量稀释法检测对氟康唑的敏感性,采用SPSS 16.0进行统计分析。结果 178株假丝酵母菌属中以白色假绿酵母菌为主,共140株占78.7%;白色假丝酵母菌对氟康唑的敏感率最高,敏感率为97.9%,其次为伏立康唑96.4%,伊曲康唑敏感率最低为82.1%,其他假绿酵母菌属也对氟康唑的敏感率最高。结论医院分离的假丝酵母菌属以白色假丝酵母菌为主,对氟康唑敏感。     

血液病患者临床分离真菌的特点及对抗真菌药物活性分析

目的分析临床分离真菌的分布及耐药情况,为更加合理有效预防和治疗血液病患者真菌感染提供实验室依据。方法菌株分离自2003-2006年9月住院患者上呼吸道、下呼吸道、泌尿生殖道、消化道、肛周、会阴及皮肤软组织等分泌物标本;药物敏感试验最低抑菌浓度（MIC）测定采用微量肉汤稀释法。结果共检出真菌3104株,以白色假丝酵母菌、曲霉菌属、热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌及光滑假丝酵母菌5种菌为主;白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌对氟康唑、伊曲康唑及5-氟胞嘧啶的耐药率均〈1.4%,伊曲康唑对热带假丝酵母菌MIC50～MIC90的范围较小,对氟康唑MIC50～MIC90的范围相对较宽。结论白色假丝酵母菌、曲霉菌属、热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌及光滑假丝酵母菌5种菌是外源性与内源性真菌感染的主要菌种;热带假丝酵母菌菌株对氟康唑的耐受变化幅度高于伊曲康唑的原因,与临床普遍使用氟康唑致热带假丝酵母菌CtMDR1的过量表达有关。     

医院内侵袭性假丝酵母菌感染的流行病学趋势及变迁

目的研究北京朝阳医院2000-2010年分离的侵袭性假丝酵母菌,了解医院侵袭性假丝酵母菌感染的流行病学趋势及变迁。方法对侵袭性假丝酵母菌进行菌种收集统计;采用科玛嘉显色培养基和VITEK-2Com-pact YST卡进行菌种初筛鉴定;用26SrDNA D1/D2区SSCP图谱分析进行精准分子鉴定;采用CAI区SSCP图谱和GeneScan相结合对侵袭性白色假丝酵母菌进行基因分型;药敏试验采用ATB FUNGUS 3系统和E-test对5种抗真菌药进行MIC值测定。结果 2000-2010年共检出血流感染病原菌2320株,其中假丝酵母菌属148株占6.4%;无菌体液标本4093株,其中假丝酵母菌属253株占6.2%;侵袭性假丝酵母菌感染中ICU最高,值得重视;临床独立来源的82株白色假丝酵母菌,基于微卫星片段CAI区共有38种基因型,基因型18-26(9.76%)、16-21(8.54%)、21-21(7.32%)、11-18(4.88%)、18-18(4.88%)、11-20(4.88%)、25-33(4.88%)分布占优势;6例患者不同部位分离的白色假丝酵母菌基因型完全相同;体外药物敏感率氟康唑为93.2%、伏立康唑为94.5%、两性霉素B为100.0%、卡泊芬净为100.0%、5-氟胞嘧啶为97.3%。结论侵袭性白色假丝酵母菌仍然是主要病原菌,但非白色假丝酵母菌感染有不同程度的上升趋势,基因分型显示侵袭性白色假丝酵母菌呈多态性分布,发生侵袭的菌株基因型与定植的基因型有关。     

呼吸道白色假丝酵母菌基因分型与耐药性研究

目的 了解呼吸道白色假丝酵母菌的基因分型和不同基因型白色假丝酵母菌的药敏情况,并探讨基因分型与耐药性之间的关系.方法 采用PCR扩增白色假丝酵母菌基因组DNA的25S rDNA基因内含子区,根据扩增产物片段大小和数目分型,采用ATB FUNGUS3酵母菌药敏试剂盒对不同基因型白色假丝酵母菌进行药敏分析.结果 80株白色假丝酵母菌临床分离株分为3型:A型39株、B型30株、C型11株；A型是主要的基因型,占48.75％,B型占37.50％,C型占13.75％;3种基因型白色假丝酵母菌均未出现对两性霉素B耐药株,C型白色假丝酵母菌未出现对氟胞嘧啶耐药株,A、B、C型白色假丝酵母菌对氟康唑的耐药率分别为5.1％、6.7％、18.2％,对伊曲康唑的耐药率分别为5.1％、13.3％、27.3％,对伏立康唑的耐药率分别为2.6％、3.3％和9.1％,B型和C型白色假丝酵母菌对唑类药物的耐药率高于A型.结论 A型白色假丝酵母菌呼吸道感染基因分布中占首位,白色假丝酵母菌的基因分型对抗真菌药物的选择,控制真菌感染有重要意义.