收获卵子数目对卵胞浆内单精子显微注射结局的影响

目的：探讨收获卵子数目对卵胞浆内单精子显微注射（ ICSI）结局的影响。方法：对355个ICSI移植周期进行回顾性分析,比较获卵数≤3、4-14、15-20、〉20各组的MII卵率、受精率、卵裂率、优质卵泡数等。结果：4组MII卵率、受精率、卵裂率和移植周期妊娠率差异均无统计学意义（P〉0.05）,而4组可用胚胎率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：ICSI周期中获卵数多少对MII卵率、受精率、卵裂率和移植周期妊娠率方面无显著影响,而获卵数〉20组可用胚胎率下降。     

卵巢高反应临床结局及其卵母细胞超微结构分析

目的 探讨控制性超促排卵周期中卵巢高反应对卵母细胞、胚胎质量及妊娠结局的影响.方法 回顾性分析因输卵管因素和(或)男方因素初次行体外受精-胚胎移植/卵胞浆单精子注射(IVF-ET/ICSI)周期治疗的326例不孕患者的临床资料.根据人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清雌二醇(E2)水平、获卵数不同分为卵巢高反应组(HCG日血清E2＞3 000 pg/ml或获卵数＞15个,n=146)和正常反应组(HCG日血清E2500～3 000 pg/ml或获卵数5～15个,n=180),分析两组间的MII卵率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率和流产率.并通过透射电子显微镜下观察两组卵母细胞透明带、卵母细胞卵周隙、卵母细胞细胞器等超微结构的变化.结果 卵巢高反应组获卵数、优质胚胎数和移植周期取消率均显著高于正常反应组(P＜0.05),MII卵率、受精率、优质胚胎率、可利用胚胎率、种植率和临床妊娠率均显著低于正常反应组(P＜0.05).两组间卵裂率、流产率和中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率差异均无统计学意义(P＞0.05).高反应组的超微结构分析显示,部分卵母细胞胞质中出现大量异常线粒体.结论 卵巢高反应影响卵母细胞质量及胚胎发育潜能,最终降低临床结局.     

罗伯逊易位携带者胚胎植入前遗传学诊断

目的:了解罗伯逊易位携带者进行胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的价值.方法:应用荧光原位杂交方法(FISH),采用位点特异探针(LSI)和端粒探针(Tel)对3例罗伯逊易位患者的卵裂球进行PGD分析,并选择正常或平衡胚胎移植人子宫.结果:共进行5个PGD周期,获卵145个,正常受精率81.1%,卵裂率92.5%,优质胚胎率88.9%.5个周期共移植11个胚胎,1例获得妊娠.获妊娠者孕20周后经羊水细胞核型分析,证实为正常/平衡,现已分娩健康婴儿.结论:PGD是罗伯逊易位携带者获得正常后代的有效途径.     

ICSI胚胎质量及临床结局的影响因素

目的探讨不同取精方式、女方年龄、获卵数等因素对卵胞浆内单精子注射（ICSI）后胚胎质量和临床结局的影响。方法对施行ICSI-ET的87个周期进行分析。分别对不同取精方式、女方年龄、获卵数进行分组研究,比较各组的受精率、优质胚胎率及临床妊娠率。结果（1）取精方式：手术抽吸精组与体外排精组的受精率、优质胚胎率及临床妊娠率,比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）女方年龄：年龄≤30岁组的获卵数及正常受精率好于3—35个组及i〉5个组,差异均有统计学意义（P〈0．001）;优质胚胎率和临床妊娠率、种植率,3组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）获卵数：获卵数≤5个组、获卵数6-15个组及≥16个组。种植率和临床妊娠率、优质胚胎率,3组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ICSI时不同取精方式、女方年龄及获卵数对胚胎质量和妊娠结局无明显影响。     

再次体外受精-胚胎移植获卵数的改变及其影响因素的分析

目的 探讨首次体外受精( IVF) -胚胎移植( ET)/卵母细胞内单精子显微注射( ICSI )失败行再次 IVF/ICSI-ET时获卵数的变化以及相关影响因素的分析. 方法 回顾性分析222例在12个月内行2次IVF/ICSI-ET周期的患者,根据基础窦卵泡数(bAFC)将患者分为 A组(bAFC≥9)和 B组(bAFC<9),分析每组前后两周期间患者的基本情况、临床方案、获卵数、进入减数分裂中期II( MII期)卵子数、正常受精率、优胚率、累积妊娠率的变化,探讨影响前后周期获卵数发生变化的相关因素. 结果 A 组第二个 IVF 周期(cycle2)获卵数、MII期卵子数、受精率、优胚率、累积妊娠率明显高于第一个IVF周期( cycle1 ) ,前后周期中临床方案无大的变化,均以长方案为主,但 cycle2 每日的促性腺激素( Gn)使用剂量高于 cycle1 ( P <0. 05 ). B 组中相对于 cy-cle1,cycle2获卵数、MII期卵子数差异无统计学意义,而优胚率及累积妊娠率均提高,并且cycle2 中短方案明显多于cy-cle1(P<0. 05). 其中B组中有14例患者在cycle1中为长方案,在cycle2中转变为短方案,后者的获卵数以及MII期卵子数均高于前者( P<0. 05 ). 结论 对于卵巢功能正常的患者,结合患者cycle1中获卵数以及Gn使用剂量,在控制卵巢过度刺激综合征发生的情况下,cycle2中可通过适当的提高每日Gn使用剂量来提高获卵数及MII期卵子数. 相对于长方案,短方案可能更适合卵巢功能减退的患者.     

女方年龄及获卵数对妊娠结局的影响

IVF-ET是指在用促性腺激素刺激多个卵泡发育后,当卵泡成熟时将卵子取出,在体外使之与精子受精至胚胎,再选取优质胚胎移植至子宫腔内的技术[1-3].由此可知获得优质胚胎的前提是通过超促排卵得到多个成熟的卵子,有关获卵数数目、胚胎质量、基础激素等对妊娠结果的研究国内外相继报道[4-7],但结果不一,获卵数及女方年龄对IVF-ET结局的影响还有较大的争议.本研究分析了262个IVF周期的临床资料,探讨获卵数及女方年龄对其妊娠结局的影响.     

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~ 2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原 因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男 方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵 子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子 注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%（88/98）;共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优 质胚胎率36.73%（36/98）。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%（8/15）,活产率为33.33%（5/15）。随患者年龄 增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率（82.76% vs 74.42%,P=0.211）、临床妊娠率（77.78% vs 16.67%,P=0.041）及活 产率（55.56% vs 0,P=0.044）均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者 的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获 得满意的临床妊娠结局。     

单精子冷冻和常规冷冻对显微取精患者的胚胎培养及妊娠影响的比较

【目的】比较单精子冷冻和常规冷冻对显微取精患者的胚胎培养及妊娠影响。【方法】回顾性分析自2018年1月至2021年12月于中山大学附属第六医院生殖医学研究中心行显微镜取精术患者的临床资料,行单精子冷冻共39例307枚成熟卵子为单精子冷冻组,通过SPSS统计软件倾向性评分匹配女方基本助孕信息1:1匹配选择对照组,为常规冷冻组,共410枚成熟卵子,分析单精子冷冻与常规冷冻两组的受精、胚胎培养及移植后妊娠情况。【结果】单精子冷冻组和常规冷冻组的年龄、体质量指数（BMI）、不孕年限、基础基础卵泡刺激素（FSH）、基础黄体生成素（LH）、基础雌二醇（E2）、抗苗勒管激素（AMH）、窦卵泡计数（AFC）、获卵数、移植胚胎数等一般资料的比较,差异均差异无统计学意义（P>0.05）;两组的受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率比较分别为65.8%vs. 60.49%、67.82%vs. 58.87%、70.80%vs. 75.34%,差异均无统计学意义;两组的临床妊娠率为45.45%vs. 70.0%,有统计学差异（P=0.049）。【结论】显微取精患者若获取精子极少,为增加每颗精子利用机会以及保证后...     

47,XYY综合征患者精子染色体的FISH研究

目的 分析47,XYY 综合征患者的精子染色体组成,评估其子代染色体异常的风险.方法 采用多色荧光原位杂交(FISH)技术,利用CSPX、Y、18 及GLP13、21 探针和精子核杂交,杂交信号归类计数,与对照进行统计学分析.结果 经χ2检验和Fisher精确概率检验,47,XYY 患者的精子常染色体异常数明显高于正常对照(P＜0.05),性染色体异常数与正常对照相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 47,XYY患者不增加其子代性染色体异常的风险,而常染色体发生次级不分离的风险却远高于对照.因此,通过应用FISH技术分析该类患者的精子染色体,可为评估其子代染色体异常风险提供客观的实验数据.     

精卵孵育时间对胚胎质量的影响

目的 比较体外受精中精卵孵育不同时间(短时与过夜)对胚胎质量的影响.方法 共55个体外受精(IVF)周期常规促排卵,获卵649枚.将116枚卵子作为短时受精组,精卵孵育2 h后将卵子转移至新鲜培养基中;533枚卵子作为常规受精组,精卵孵育18 h;比较两组的受精率、卵裂率及优质胚胎率.结果 缩时受精组的受精率为75.0%、卵裂率为97.7%、优质胚胎率为55.3%,常规受精组分别为73.7%、95.9%、44.6%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),但短时受精组的优质胚胎率高于常规受精组.结论 缩短精卵孵育时间不影响受精及卵裂,相反能提高胚胎质量,从而提高胚胎的种植潜能.     

不同体外受精周期所获生殖泡期卵母细胞体外 成熟后结果比较

 【目的】 研究对比体外受精-单精子卵胞浆内注射(IVF-ICSI)周期所获生殖泡期(GV)不成熟卵母细胞以及体外成熟(IVM)周期所获GV期卵母细胞体外培养成熟后的胚胎发育情况&#65377;【方法】 163个IVF-ICSI周期中所获987个成熟卵为Ⅰ组,所获GV期卵进行体外培养后成熟的132个卵为Ⅱ组, 另有37个IVM周期中所获GV期卵体外培养后成熟的235个卵为Ⅲ组&#65377;对3组均进行ICSI,并对其受精率&#65380;卵裂率及胚胎发育进行比较&#65377;【结果】 Ⅰ组的受精率&#65380;卵裂率以及优质胚胎率均显著高于Ⅱ组及Ⅲ组(分别为84.9%,98.1%和61.6%;72.0%,90.5%和22.1%; 75.3%,94.4%和25.1%)&#65377;Ⅰ组的胚胎卵裂球数目及胚胎形态评分均显著优于Ⅱ组及Ⅲ组(P < 0.05);Ⅱ组与Ⅲ组相比差异无统计学意义&#65377; 【结论】 体内成熟卵形成的胚胎形态好于生殖泡期卵体外培养成熟者,IVF-ICSI周期的生殖泡期不成熟卵形成的胚胎形态学上与IVM周期的类似&#65377;     

不同卵巢储备功能的EMS患者行IVF-ET方案的选择

目的：了解不同卵巢储备功能的子宫内膜异位症( EMS)患者行不同方案的体外受精-胚胎移植( IVF-ET)治疗的结局差异。方法回顾性分析行IVF-ET治疗的337例EMS患者资料。据卵巢储备功能及治疗方案差异分为 A1组(卵巢储备功能正常,超长方案)、A2组(卵巢储备功能正常,长方案)和B1组(卵巢储备功能低下,超长方案)、B2组(卵巢储备功能低下,短方案),比较各组妊娠结局。结果A1组较A2组、B1组较B2组的获卵数、成熟卵母细胞数、受精数、卵裂数、可移植胚胎数及优质胚胎数均低(P<0．05),但卵裂率、可移植胚胎率及优胚率的差异均无统计学意义;A1组新鲜周期及解冻周期胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率及活产率均较A2组低( P<0．05),但B1组与B2组新鲜周期及解冻移植( F-ET)周期胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率及活产率的差异均无统计学意义。结论采取长方案取卵后行胚胎冷冻、治疗EMS后行F-ET是卵巢储备功能正常的EMS不孕患者IVF-ET最佳方案。     

孕妇年龄影响胎儿性染色体非整倍体风险

目的: 分析孕妇年龄对胎儿性染色体非整倍体发生风险的影响。方法: 以2014年1月至2018年7月在浙江大学医学院附属妇产科医院行羊水染色体核型分析的孕妇为研究对象,分为非高龄组（≤28岁、>28~34岁）和高龄组（>34~ < 38岁和≥38岁）,比较各组间胎儿性染色体非整倍体的发生率。结果: > 34~ < 38岁组胎儿45,X的发生率低于≤28岁组（P < 0.05）;高龄组两个亚组胎儿总的性染色体三体的发生率高于非高龄组的两个亚组（P < 0.05或P < 0.01）;≥38岁组47,XXX发生率高于>28~34岁组（P < 0.05）;高龄两组47,XXY发生率高于非高龄组的两个亚组（P < 0.01）;各组间胎儿47,XYY发生率差异无统计学意义（P>0.05）。排除无创产前检测提示性染色体异常高风险孕妇后,高龄组两个亚组胎儿45,X发生率均低于≤28岁组（P < 0.05或P < 0.01）,且>34~ < 38岁组45,X发生率低于>28~34岁组（P < 0.05）;其余结果均与全部孕妇结果一致。结论: 孕妇年龄越大,胎儿45,X发生风险降低,但47,XXX和47,XXY的发生风险升高。     

IVF受精失败卵子纺锤体、染色体的立体结构分析

目的：探索受精失败卵子纺锤体、染色体的立体结构变化及其相关因素。方法：选自本所受精卵子的材料分两组实验组：卵子来源于IVF取卵后24～40h受精失败的MⅡ期卵子。对照组：为未授精卵子。两组卵子通过免疫荧光染片后,用Nikon激光共聚焦显微镜观察染色体、纺锤体的立体结构,根据年龄段、促排卵药的差别进行分组,用t和χ^2检验进行统计学分析。结果：年龄小于30岁组的纺锤体、染色体正常率分别为：13．3％、13．3％,与对照组相比差异均无显著性,（P〉0．05）。30～35岁组的纺锤体、染色体正常率分别为：16％,12％,纺锤体正常率与对照组差异相比,无显著性,（P〉0．05）,染色体正常率与对照组相比,差异有显著性,（P〈0．05）。年龄大于35岁组的纺锤体、染色体正常率分别为：0％、0％,与对照组相比均差异有显著性,（P〈0．05）。合计年龄小于35岁患者受精失败卵子的纺锤体、染色体正常率分别为：15％、12．5％,与对照纽比,无显著性差异。果纳芬组的纺锤体及染色体的正常率均为12．5％,与对照相比,无显著性差异,（P〉0．05）。丽申宝组纺锤体及染色体的正常率分别为11．1％,5．6％,纺锤体正常率与对照组相比,差异无显著性,（P〉0．05）,染色体正常率与对照组相比,差异有显著性,（P〈0．05）。实验组的总的纺锤体和染色体正常率为12％、10％,与对照组相比均差异有显著性,（P〈0．05）。结论：高龄妇女受精失败卵子的纺锤体和染色体的正常率下降;用丽申宝进行超促排卵的受精失败卵子染色体正常率下降;染色体非整体倍增加的一个相关因素,可能对纺锤体正常梭形结构的破坏。     

无创胚胎染色体筛查在染色体非整倍体检测中的应用效果

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)在染色体非整倍体检测中的应用效果。方法收集2017年5月至2019年5月在安徽省妇幼保健院生殖中心拟行体外受精-胚胎移植的364例患者的囊胚培养液,并行NICS筛查。对单囊胚移植且临床确认妊娠的46例患者,根据其妊娠结局不同行不同染色体检查方法:对12例流产的患者行流产组织染色体检查,并以该检查结果为金标准,计算NICS的灵敏度和特异度;对继续妊娠的34例患者行外周血无创产前遗传学筛查(NIPS),比较NICS结果与NIPS筛查结果的差异。结果 12例流产的患者样本中,流产组织染色体检查与NICS检查为染色体非整倍体者均为3例,NICS筛查的灵敏度为100%;在流产组织染色体检查为整倍体的9例样本中,对应的NICS检出2例为非整倍体,其特异度为77.78%,两种筛查方法的一致性分析Kappa值为0.64。继续妊娠的34例患者样本中,NIPS筛查均未检出13、18、21号染色体为非整倍体胚胎,NICS对这3条染色体的筛查结果与NIPS一致。结论 NICS筛查染色体非整倍体有较好的灵敏度,但假阳性率偏高,需进一步技术优化以提高特异性。     

WD_5和WD_9诱发小鼠生殖细胞及早期胚胎非整倍体

用超排卵技术使雌性小鼠排卵,排卵前用WD_5或WD_9处理,然后与雄性小鼠交配,以小鼠卵母细胞(M_1)及第1 次分裂合子雌性原核染色体非整倍体及结构畸变为指标,研究其诱变作用。结果表明,对照组小鼠卵母细胞及第1 次分裂合子均未发现有染色体非整倍体及结构畸变,处理组中,WD_5和WD_9可诱发小鼠卵母细胞(M_1)及第1 次分裂合子雌性原核染色体非整倍体率增加。     

圆头精子受精能力、胚胎发育潜能及遗传风险的研究

目的 探讨圆头精子的受精能力、胚胎发育潜能及其遗传风险.方法 通过精子形态染色和透射电镜证实一例圆头精子症患者,其女方共获卵26颗,赠卵6颗,将20颗卵子(19颗为MII卵)行卵细胞质内单个圆头精子的显微注射,6颗赠卵行常规体外授精.测定该患者的染色体核型,同时针对Y染色体AZFa、AZFb、AZFc的sY84、sY86、sY127、sY134、sY254、sY255等6个序列标签位点(STS)进行Y染色体微缺失测定.结果 19颗MII卵子行圆头精子显微注射后有4颗正常受精并卵裂,其余均未受精和卵裂.6颗赠卵常规体外授精后全部正常受精并卵裂,受精率显著高于圆头精子(100%vs 21.1%,P＜0.01),卵裂率两者差异无统计学意义(100%vs 100%,P＞0.05).患者染色体核型正常(46,XY),未发现微缺失.女方行冻胚移植后妊娠,足月剖宫产一男孩,染色体核型正常(46,XY).受者行冻胚移植后妊娠,足月剖宫产一男孩,体健.结论 尽管受精率低下,卵细胞质内单精子注射(ICSI)仍不失为治疗圆头精子症患者不育的一种有效方法.     

用全染色体涂抹探针进行卵母细胞第一极体荧光原位杂交

 【目的】建立用全染色体涂抹探针（WCP）对卵子第一极体进行荧光原位杂交（FISH）检测染色体的方法。【方法】收集单精子卵胞浆内注射（ICSI）中不成熟卵母细胞经体外培养成熟和常规试管婴儿（IVF）中未能成功受精的成熟卵母细胞，活检第一极体，固定后行13、14号染色体的全染色体涂抹探针荧光原位杂交。活检后，一部分卵母细胞固定行FISH以分析卵子自身的13、14号染色体，其余行ICSI受精，观察受精和卵裂情况。【结果】共获得成熟母细胞93个，成功活检85个，成功固定78个，共29个第一极体处于分裂中期，均有FISH结果。卵母细胞体外培养成熟后立即取极体进行固定，90．5％（19／21）的极体处于分裂中期，而取卵后30-48h和72h后活检的第一极体处于分裂中期的比例分别为27．3％（6／22）和11．4％（4／35），3组相比有统计学差异（P〈0．01）。11个卵母细胞同时获得了极体和相对应卵细胞的FISH结果，其中10个极体和相对应的卵细胞分别有1条13，14号染色体，剩余1个卵母细胞的极体有2条14号染色体和1条13号染色体，相对应的卵细胞仅有1条13号染色体，二者互补。活检后行ICSI受精的卵母细胞受精率为78．6％（11／14），优质胚胎率45．5％（5／11）。【结论】全染色体涂抹探针对卵子第一极体进行遗传分析可以有效、准确地推测相对应卵母细胞的染色体构成，从而应用于女性染色体易位患者的植入前遗传诊断。     

OPS玻璃化冷冻小鼠MII期卵效果观察

目的　以小鼠为研究模型 ,探讨MII期卵母细胞冷冻后纺锤体和染色体改变的有效观察方法。研究OPS玻璃化冻存成熟卵的可行性。　方法　运用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)的光学切片和三维图像重建技术 ,系统研究了OPS玻璃化冷冻对小鼠MII期卵纺锤体和染色体的影响。　结果　冷冻组卵复苏后存活率达 5 8% ,纺锤体和染色体形态正常率分别为 46%和 5 2 % ,与对照组 ( 76%和 70 % )相比 ,差异具显著性 (P <0 0 5 )。暴露组卵纺锤体和染色体结构正常率较对照组略有下降 ,但无统计学差异。　结论　LSCM能够清晰有效地观察冷冻对卵母细胞纺锤体和染色体影响。应用OPS玻璃化方法能够有效冻存卵母细胞     

NO对小鼠卵母细胞及胚胎发育的影响

目的 评价外源性NO对小鼠卵母细胞体内成熟、体外受精及胚胎发育的影响. 方法受试雌性小鼠超排卵期间分别腹腔注射NO供体硝普钠(SNP)1.0、5.0和10.0 mg/kg,对照组雌性小鼠注射等量的生理盐水.注射hCG 15 h后处死小鼠,收集卵母细胞进行体外受精和胚胎培养,观察卵母细胞的成熟度、受精率、早期胚胎的发育能力及其形态学变化.结果 5.0 mg/kg SNP组M Ⅰ期卵母细胞和M Ⅱ期卵母细胞的比例较对照组和1.0 mg/kg SNP组升高(P＜0.05,P＜0.01),而受精率降低(P＜0.01),10.0 mg/kg SNP组小鼠在注射药物20 min后全部死亡;5.0 mg/kg SNP组2-细胞胚胎以后各阶段胚胎的卵裂率低于对照组和1.0 mg/kg SNP组(P＜0.01),并被阻滞在桑葚胚期;5.0 mg/kg SNP组形态异常胚胎的比例高于对照组和1.0 mg/kg SNP组(P＜0.01).结论 较高浓度NO抑制卵母细胞体内成熟、体外受精及早期胚胎发育并影响胚胎的质量.