全反式维甲酸对甲状腺鳞癌细胞株SW579凋亡的影响

目的观察全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)体外诱导甲状腺鳞癌细胞株SW579形态学变化和细胞凋亡。方法分别以终浓度为10-7、10-6、10-5、2×10-5、4×10-5、6×10-5、8×10-5、10-4mol/L的维甲酸作用SW 579细胞株,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;利用吖啶橙染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果ATRA作用后,可见细胞形态改变;经荧光染色后可见凋亡的细胞,染色质浓集,呈致密的斑块状或新月状,并可见凋亡小体及核碎片;流式细胞仪分析,凋亡率随ATRA浓度的升高而升高(P<0.01)。结论不同浓度的ATRA可诱导SW 579细胞形态学变化及细胞凋亡。     

红景天对人胃腺癌细胞系SGC-7901DNA合成的抑制作用

目的研究红景天（Rhodiola）对体外培养人胃腺癌细胞系SGC-7901的直接抑制作用机制。方法通过液体培养、集落形成、同位素掺入与MTT比色方法分别检测给药后SGC-7901的增殖情况。结果给药组SGC-7901细胞增殖缓慢甚至停滞，生存率下降。结论红景天能抑制SGC-7901细胞的DNA合成，对其具有细胞毒作用，抑制作用随药物的浓度增加而增强。     

2-甲氧基雌二醇对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的 探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对体外培养的SGC-7901胃癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 将不同浓度的2-ME不同时间作用于SGC-7901,采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测2-ME对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;电镜观察细胞超微结构变化.结果 2-ME对SGC-7901细胞有很强的抗增殖的作用,引起大量细胞凋亡,且在一定范围内呈剂量和时间依赖性,作用组与对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05).细胞周期检测发现作用组大量细胞阻滞于G2/m期G0/G1及S期细胞减少,与对照组存在显著差异(P<0.05).结论 2-ME可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并诱导其凋亡.     

毛兰素对胃癌细胞SGC-7901端粒酶活性的影响

目的探讨毛兰素对胃癌细胞端粒酶活性的影响。方法MTT法检测毛兰素对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用,AnnexinⅤ/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率,TRAP实时荧光定量PCR检测端粒酶活性。结果毛兰素能抑制胃癌细胞SGC-7901增值,48小时IC50值为0.056μg/ml;毛兰素抑制胃腺癌SGC-790细胞端粒酶活性早于诱导凋亡,且都表现为时间和浓度依赖性。结论毛兰素能诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,可能与其对端粒酶活性的抑制有关。     

全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的诱导作用

目的研究全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法在培养液体系中加入不同浓度的全反式维甲酸(ATRA)进行不同时间长度的诱导,以MTT法,流式细胞术,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果1~50μmol/LATRA均能抑制骨肉瘤细胞增殖。5、10、50μmol/L ATRA作用细胞4 d后的凋亡率分别为(12.46±2.37)%、(18.36±1.32)%(、27.15±2.17)%,与对照组[(4.09±1.18)%]比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。ATRA浓度越高,抑制作用越明显,呈明显的剂量依赖效应。50μmol/L ATRA作用细胞1、2、34、d后的凋亡率分别为(7.35±1.28)%、(10.72±1.68)%、(17.65±2.14)%(、27.15±2.17)%,与对照组[(4.09±1.18)%]比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。ATRA作用时间越长,抑制作用也越明显,呈明显的时间依赖效应。结论ATRA能够诱导人骨肉瘤细胞发生凋亡,呈时间和剂量依赖效应。     

全反式维甲酸对人肝细胞癌细胞生长的影响

研究全反式维甲酸对人肝细胞癌细胞ＢＥＬ７４０４细胞生长的影响。方法藉ＭＴＴ法观察ＡＴＲＡ对ＢＥＬ７４０４细胞的生长及其对人表皮生长因子刺激的反应性的影响。结论ＡＴＲＡ可能藉降低细胞对表皮生长因子刺激的反应性抑制人肝细胞癌细胞的增殖。     

全反式维甲酸对人胰腺癌细胞生长及Survivin基因表达的影响

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对人胰腺癌细胞株PC-3生长的抑制作用以及细胞株PC-3 Survivin基因表达的变化。方法:应用MTT比色法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法测定Survivin基因表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:经过ATRA作用后,PC-3细胞增殖受到抑制,呈时间和剂量依赖性。凋亡比例明显增加,Survivin mRNA的表达随着作用时间的延长而呈逐渐下降趋势。结论:ATRA对人胰腺癌细胞株PC-3的生长有抑制作用,同时可诱导其凋亡,提示其可能与Survivin基因表达下调有关。     

全反式维甲酸对肺癌细胞作用的初步观察

人肺癌细胞株ＳＰＣ－Ａ１加入全反式维甲酸使其浓度为１０μｍｏｌ／Ｌ。培养７ｄ后处理组和对照组分别进行ＭＴＴ，光镜，电镜及流式细胞仪检测发现处理组细胞增殖减慢，细胞聚集成片，胞浆中空泡增多，核浆比例无明显染色体固缩及凋亡小体。     

CT-1042对SGC-7901人胃腺癌细胞抗癌效应的体外研究

目的 探索CT-1042体外对人胃癌细胞SGC-7901的抗癌效应.方法 采用MTT法测定CT-1042对SGC-7901细胞的增殖抑制效应;Hoechst 33342染色观察CT-1042对细胞凋亡形态的影响;Annexin V和PI双染检测CT-1042对细胞凋亡率的影响;JC-1探针检测CT-1042对细胞线粒体膜电位的影响;流式检测CT-1042对细胞周期分布的影响.结果 CT-1042对受试细胞增殖具有良好的抑制作用,并能引起细胞核碎裂、浓缩;CT-1042能够诱导受试细胞线粒体膜电位下降,导致细胞凋亡;CT-1042能够抑制受试细胞的周期进展,使之停滞于G2/M期.结论 CT-1042体外对人胃癌细胞SGC-7901具有很好的抑制作用,并能诱导其发生细胞凋亡和细胞周期阻滞发挥抗肿瘤作用.     

附子提取物抗胃癌SGC-7901细胞增殖及诱导癌细胞凋亡实验研究

[目的]观察附子提取物诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用及机制。[方法]分别采用不同浓度(20、40、80 mg·mL~(-1))的附子溶液干预SGC-7901胃癌细胞24h、48h、72h,用四唑盐(MTT)比色法检测附子提取物对肿瘤细胞的抑制作用:采用以上浓度梯度的附子干预SGC-7901细胞24h(或采用80 mg·mL~(-1)的附子干预0h、24h、48h),应用Annexin V-FITC/PI双重染色,通过流式细胞仪观察SGC-7901的凋亡情况。[结果]附子提取物能显著地抑制SGC-7901细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性,细胞有明显的凋亡改变。[结论]附子提取物具有抗胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导癌细胞凋亡的作用。     

miRNA-34a 对人胃癌 SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

目的：研究 microRNA-34a(mir-34a)在人胃癌细胞中的表达水平及对胃癌 SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响。方法通过实时定量 PCR(RT-PCR)检测人正常胃黏膜上皮细胞 GES 及人胃癌细胞株 AGS、SGC-7901、MKN-45、BGC-823中 mir-34a 的表达水平。体外将表达人 mir-34a ( has-mir-34a)慢病毒感染人胃癌 SGC-7901细胞。荧光显微镜观察评估细胞感染情况,MTT 实验、流式细胞术检测感染后胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期及凋亡情况。结果胃癌细胞 AGS、SGC-7901、MKN-45、BGC-823中 mir-34a 的表达水平较正常胃黏膜上皮细胞 GES 明显降低,其中以胃癌 SGC-7901细胞降低最为明显(P <0．01)。与阴性对照组相比, mir-34a 感染组 SGC-7901细胞增殖明显减慢( P <0．01), G1/ G0期细胞比例显著增加(P <0．05),细胞凋亡率显著升高(P <0．01)。结论 mir-34a 在多种人胃癌细胞,尤其是SGC-7901细胞中呈低表达。 mir-34a 可以抑制胃癌 SGC7901细胞的增殖,诱导细胞周期停滞及细胞凋亡。     

隐丹参酮对人胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响及其机制

目的探讨隐丹参酮(CPT)对人胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度的CPT作用于人胃癌细胞SGC-7901,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖的活力;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;Real Time RT-PCR法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、p53和p21 mRNA表达的变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、p53和p21表达的变化。结果 CPT作用于人胃癌细胞SGC-7901 24 h后,可明显抑制细胞生长,诱导细胞发生凋亡;在转录水平上调促细胞凋亡蛋白Bax和p53 mRNA的表达,下调抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2 mRNA的表达;在翻译水平上调促细胞凋亡蛋白Bax和p53的表达,下调抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论 CPT对人胃癌细胞SGC-7901具有诱导凋亡的作用,其机制可能与线粒体途径相关。     

褪黑素对人胃癌细胞SGC-7901黏附和迁移的影响

目的 :研究褪黑素对人胃癌细胞SGC-7901黏附和迁移能力的影响及探索可能的分子机制。方法 :用不同浓度的褪黑素孵育人胃癌细胞SGC-7901 24 h,通过免疫印迹方法检测F-actin和G-actin蛋白表达水平,通过免疫荧光法检测细胞骨架结构的改变,通过细胞黏附实验观察胃癌细胞对血管内皮细胞黏附能力的变化,通过划痕实验检测褪黑素对细胞迁移能力的影响。结果:褪黑素使人胃癌细胞SGC-7901 F-actin量明显降低,同时细胞骨架结构发生重组,应力纤维出现断裂;褪黑素可抑制胃癌细胞的迁移及对血管内皮细胞的黏附能力。结论:褪黑素可能通过破坏细胞内应力纤维结构的稳定,最终导致了胃癌细胞的黏附和迁移能力的降低。     

pEGFP-N1-DCN重组质粒抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖和侵袭

目的构建pEGFP-N1-DCN真核表达载体并转染胃癌细胞SGC-7901,观察其对细胞增殖、周期、迁移、侵袭的影响。方法将细胞分为3组,分别为空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组,质粒通过脂质体转染SGC-7901,RT-PCR及Western blot方法检测表皮生长因子受体(EGFR)及TGF-β1的表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell检测核心蛋白聚糖(DCN)对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示,DCN使EGFR及TGF-β1的表达均降低(P<0.05);MTT法检测发现72 h时空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组细胞D(490)值分别为(1.190±0.037)、(1.169±0.052)、(0.572±0.021),DCN使细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪分析细胞周期空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组细胞G0～G1的细胞数分别为(46.12±0.63)、(46.07±0.82)、(56.36±0.92),DCN使细胞阻滞在G0～G1(P<0.05);Transwell迁移、侵袭实验显示DCN使细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论 DCN通过抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等起到抗肿瘤作用。     

PDTC联合泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞抑制效应及其机制

目的研究PDTC合并泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞的抑制效应及其机制。方法应用MTT法观察PDTC及泰素帝对SGC-7901细胞的增殖抑制效应,采用流式细胞术检测不同处理后SGC-7901细胞凋亡率的变化,采用实时荧光定量PCR法测定c-IAP2及XIAP基因表达的改变,采用Western印迹法检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达的改变。结果 PDTC组、泰素帝组及联合用药组的细胞活力都明显比对照组降低（P〈0.05）,与相应的泰素帝组相比,联合用药组降低明显（P〈0.01）;PDTC、泰素帝及联合用药组的凋亡率高于对照组（P〈0.01）,联合用药组细胞凋亡率明显升高,达到29.37%,与泰素帝及PDTC单药组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;PDTC组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组下降,泰素帝组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组升高,联合用药组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组、泰素帝组明显下降（P〈0.01）;泰素帝处理后胞核NF-κB P65含量增加（P〈0.01）,而PDTC联合作用后胞浆及胞核NF-κB P65含量较泰素帝组及对照组明显降低（P〈0.01）。结论泰素帝与PDTC均能抑制SGC-7901细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与PDTC可拮抗泰素帝的NF-κB激活、抑制其下游凋亡抑制蛋白基因表达有关。     

褪黑素抑制缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化

目的:研究褪黑素对缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并初步揭示其分子机制?方法:在建立缺氧诱导SGC-7901人胃癌细胞发生EMT的基础上,通过免疫印迹方法检测蛋白表达水平?免疫荧光的方法检测蛋白在细胞中的分布和表达,研究褪黑素对EMT过程的作用?结果:缺氧使SGC-7901人胃癌细胞发生EMT,表现为形态发生改变,上皮标志物表达量减少?间充质标志物表达增加,褪黑素可抑制缺氧条件下活性氧簇(ROS)的产生和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及EMT?结论:在缺氧条件下SGC-7901人胃癌细胞可发生EMT,褪黑素可抑制该过程?这些结果揭示了褪黑素在缺氧引起的肿瘤细胞EMT过程中发挥的抑制作用,为褪黑素的临床应用提供了重要的理论依据?     

GW112基因逆转录病毒载体的构建及在胃癌SGC-7901细胞的表达研究

目的 构建人GW112基因的逆转录病毒载体,并通过病毒介导其在人胃癌SGC-7901细胞的稳定表达.方法 采用DNA 重组技术构建并鉴定重组逆转录病毒载体pLEGFP-N1-GW112;以脂质体PT67细胞包装病毒,经病毒感染的SGC-7901细胞通过G418筛选及荧光定量 PCR 鉴定,建立GW112稳定过表达SGC-7901细胞株.结果 成功构建了pLEGFP-N1-GW112逆转录病毒表达载体,经病毒包装的重组转录病毒成功感染SGC-7901细胞,Real-Time PCR结果显示实验组中GW112基因是对照组细胞中的4.2倍.结论 逆转录病毒介导的GW112基因在胃癌SGC-7901细胞获得了稳定过表达,为进一步研究GW112在胃癌中的功能奠定了良好基础.     

过表达Mxi1对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的：构建含有Max结合蛋白1（Mxi1）基因的重组慢病毒载体,并探讨过表达Mxi1基因对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法：利用DNA重组技术将Mxi1基因克隆至慢病毒载体,经酶切和测序鉴定后,将重组质粒与慢病毒辅助包装元件质粒共转染293T 细胞,获得含 Mxi1基因的重组慢病毒。重组慢病毒感染人胃癌SGC-7901细胞,荧光显微镜下观察感染效率,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Mxi1、cyclinB1和caspase-8的基因表达,免疫印迹法（Western blot）检测Mxi1蛋白的表达。CCK-8比色法和流式细胞术分别检测Mxi1 基因对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。结果：成功构建含 Mxi1基因的慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot检测到Mxi1 基因和蛋白的表达。RT-PCR结果显示,过表达Mxi1 的SGC-7901细胞与空白对照细胞及过表达空病毒对照细胞相比,细胞内cyclinB1的mRNA表达水平明显降低,而caspase-8的 mRNA表达水平显著升高。CCK-8实验和流式细胞术检测结果显示,过表达Mxi1的SGC-7901细胞与空白对照细胞及过表达空病毒对照细胞相比,细胞增殖活性明显降低,细胞凋亡率显著升高。结论：成功构建Mxi1慢病毒载体且有效转染SGC-7901细胞,过表达Mxi1 可以抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡。     

尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的:体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:采用MTT法、流式细胞仪(FCM)、电镜等技术,体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和影响及可能的机制.结果:MTT显示尼美舒利(12.5～400μmol/L)呈时间-剂量依赖方式抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖.FCM显示,DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰".S期、G2/M期细胞比例升高,G1期细胞比例下降,阻止细胞周期的进展.电镜下见典型的细胞凋亡形态特征:细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成等.结论:尼美舒利体外能显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901生长,可能与诱导细胞凋亡阻止细胞周期进展有关.     

丝裂霉素对胃癌细胞SGC-7901miRNA表达谱的影响

目的 分析丝裂霉素(MMC)治疗对胃癌细胞miRNA表达谱的影响,为MMC的胃癌治疗机制提供理论参考。方法 体外培养胃癌SGC-7901细胞,根据噻唑兰(MTT)法评估MMC的作用效果和作用浓度;利用miRNA芯片技术评估MMC干预后SGC-7901的miRNA表达谱改变,并通过qRT-PCR验证差异表达miRNA。 结果 SGC-7901细胞生长抑制率与MMC作用浓度间存在正相关;MMC干预48 h后SGC-7901细胞有59个miRNA出现表达改变,与正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,SGC-7901胃癌细胞的miR-205*和miR-3924等11个miRNAs表达上调,而miR-498,miR-18b,miR-196b,miR-1247等22个miRNA表达下调;经MMC干预后,部分异常表达得到恢复。 结论 MMC可能调控miR-498在内的59个miRNA在胃癌细胞的表达。