肝X受体在百草枯致急性肺损伤小鼠肺组织中的表达及作用

目的研究肝X受体(Liver X receptors,LXRs)在百草枯(Paraquat,PQ)致急性肺损伤小鼠肺组织中的表达情况及保护作用。方法 48只雄性c57小鼠随机分为6组,对照组:0.1 m L生理盐水腹腔注射;A组(TO901317低剂量对照组):5 mg/kg TO901317腹腔注射;B组(TO901317高剂量对照组):20 mg/kg TO901317腹腔注射;C组(百草枯染毒组):百草枯28 mg/kg腹腔注射;D组(TO901317低剂量预处理组):百草枯染毒前0.5 h给予TO901317 5 mg/kg腹腔注射;E组(TO901317高剂量预处理组):百草枯染毒前0.5 h给予TO90131720 mg/kg腹腔注射。在百草枯染毒后72 h处死小鼠,收集肺组织及肺泡灌洗液标本。肺组织取出后测定肺湿重/干重比,肺组织切片后HE染色进行肺损伤评分,采用ELISA方法检测肺泡灌洗液中IL-1β和TNF-α含量,Western blot方法检测肺组织中LXRs(LXRα和LXRβ)及Toll样受体4(TLR-4)的表达。结果对照组小鼠肺组织中可检测到较高水平的LXRα和LXRβ表达,与对照组相比,百草枯中毒组小鼠LXRα和LXRβ表达明显减少,肺湿重/干重比及肺损伤评分显著增加,肺泡灌洗液中IL-1β和TNF-α含量明显增高,TLR-4表达明显增加。上述改变在TO901317预处理组明显减轻,减轻程度与TO901317剂量有关。结论肝X受体可以在正常小鼠肺组织的中表达,百草枯中毒可显著抑制肝X受体在小鼠肺组织中表达,应用LXRs激动剂TO901317能明显减轻百草枯导致的小鼠急性肺损伤程度,这一作用可能与LXRs抑制TLR-4在肺组织中的表达有关。     

腺花素对急性肺损伤模型小鼠的保护作用及其机制

目的 探讨腺花素对急性肺损伤(ALI)的治疗作用及其机制。方法 C57BL/6雄性小鼠30只,随机分为6组：正常对照组、模型对照组(10 mg·kg^-1脂多糖)、地塞米松组(5 mg·kg^-1地塞米松)和腺花素小、中、大剂量组(5,10和20 mg·kg^-1腺花素),每组5只。造模6 h后分别腹腔注射相应药物。18 h后,记录体质量变化,麻醉处死,取肺部样本。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的含量;二喹啉甲酸(BCA)比色法和瑞氏-吉姆萨染色法分别检测肺泡灌洗液中总蛋白的浓度、巨噬细胞和中性粒细胞数目;苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变。采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度腺花素对RAW264.7细胞生长的影响。AnnexinV-FITC/PI双染法检测腺花素对RAW 264.7细胞凋亡的影响。免疫印迹法(Western blotting)检测RAW 264.7细胞和肺组织中Toll样受体4(TLR4)、MyD88、p-NF-κB、NF-...     

百草枯中毒急性肺损伤的治疗进展

百草枯（Paraquat PO），化学名1，1’-二甲基-4，4’联吡啶二氯化物．于1882年合成．1962年作为除草剂上市。由于与土壤接触后能快速分解．极少残留．对周围环境无害，因而得以迅速推广使用。然而使用时中毒病例屡见不鲜．现已成为人类急性中毒病死率最高的除草剂。百草枯中毒常引起多器官损害．其中肺脏是其损伤的主要靶器官。     

TLR9信号通路参与急性肺损伤的作用机制研究

目的研究Toll样受体-9在急性肺损伤中的作用机制,为临床诊疗提供理论依据。方法分离40例急性肺损伤患者的外周血单个核细胞,采用RT—PCR检测Toll样受体-9mRNA表达,外周血单个核细胞（PBMC）经过非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸序列的寡脱氧核苷酸（CpGODN）和不含非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸序列的寡脱氧核苷酸（non—CpGODN）、空白培养三种形式培养72h。采用3H—TdR掺入法测定PBMC增值变化,采用流式细胞仪检测T细胞亚群比例、T细胞表面CD69分子变化及CD8＋T细胞内IFN-γ和IL-4的表达。采用ELISA法对PBMC上清液IFN-α的浓度,并评价其对氯喹和抑制性ODN的反应程度。结果急性肺损伤患者PBMC表达TLR9mRNA的表达强度为（0．75±0．08）,与健康组（0．76±0．09）比较差异无统计学意义（P〉0．05）;CpGODN诱导急性肺损伤患者PBMC增殖（P〈0．05）,增加CD3＋T细胞表面CD69分子的表达（P〈0．05）;增强CD8＋T细胞产生IFN-γ的能力（P〈0．05）;增强CD4＋T／CD8＋T比值（P〈0．05）;CpGODN可促进IFN-α的分泌（P〈0．05）;氯喹和抑制性ODN会抑制CpGODN产生IFN—α。结论TLR9参与急性肺损伤患者的免疫调节,其激活效应包括促进PMBC活化、增加PBMC中CD4＋T的比例,诱导并增殖IFN-α产生,促进CD8＋T分泌IFN-γ。     

百草枯中毒急性肺损伤救治与护理进展

百草枯中毒对肺的急性损伤最严重,虽急救护理水平已有较大的提高,但仍不容乐观。目前对百草枯中毒急性肺损伤的有效治疗与护理已成为研究的热点与难点。该文就近年来百草枯中毒的急性肺损伤机制、病理改变、临床表现、救治与护理进展等进行综述。     

丙酮酸乙酯对大鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨丙酮酸乙酯(EP)对D-氨基半乳糖所致的大鼠急性肝损伤的保护作用及其可能机制。方法采用D-氨基半乳糖复制急性肝损伤(ALI)模型,Wistar大鼠随机分为正常对照组、ALI组、EP干预组。用Westernblot方法测定肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1),鲎实验法检测血清中内毒素水平,全自动生化分析仪测定肝功能指标。结果与正常对照组相比,ALI后24～72hHMGB1表达显著升高(P<0.01);血清内毒素水平逐渐升高,24h达到高峰;血清丙氨酸转氨酶(ALT)6h和24h有两个峰值,且24h峰值高于6h。与ALI组相比,EP干预组24～72hHMGB1蛋白表达均显著抑制(P<0.01),内毒素和ALT在24、48、72h也均有不同程度下降(P<0.05)。结论EP可减轻D-氨基半乳糖所致的ALI。其机制可能是EP下调了肝组织中HMGB1蛋白表达和降低血清中的肠源性内毒素水平。     

丙酮酸乙酯对利福平致小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨丙酮酸乙酯（EP）对利福平致小鼠肝损伤的保护作用及其可能机制。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成3组：正常对照组、模型组（利福平,200 mg·kg^-1·d^-1） 和EP组（利福平200 mg·kg^-1·d^-1+丙酮酸乙酯40 mg·kg^-1·d^-1）,每组8只。造模后第7天处死小鼠,检测小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、碱性磷酸酶（ALP）,观察小鼠肝脏病理学变化,检测小鼠肝组织总胆汁酸（TBA）、丙二醛（MDA）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、高迁移率族蛋白B1 （HMGB1） 及乙酰化的HMGB1（AC-HMGB1）蛋白的表达情况。结果 与正常对照组相比,模型组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平升高（P<0.05）;肝细胞空泡变性、脂肪变性明显,部分肝细胞可见嗜酸性变、核溶解或固缩;肝组织TBA、MDA的含量提高（P<0.05）,SOD减少（P<0.05）,HMGB1及AC-HMGB1表达增多（P<0.05）,HMGB1胞浆表达为主。与模型组相比,EP组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平降低（P<0.05）;肝组织病理学变化改善;肝组织TBA、MDA的含量降低（P<0.05）, SOD增多（P<0.05）,HMGB1及AC-HMGB1的表达水平降低（P<0.05）,HMGB1以胞核表达为主。结论 丙酮酸乙酯能够减轻利福平所致的小鼠肝损伤,其机制可能与丙酮酸乙酯抗氧化,下调肝组织HMGB1及AC-HMGB1的表达和调节HMGB1的分布有关。     

PPAR-γ受体激活对百草枯中毒致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究PPAR-γ受体激活对百草枯中毒致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法 48只SD雄性大鼠随机平均分成3组,A组(百草枯中毒组):按照20 mg/kg剂量腹腔注射;B组(低剂量PPAR-γ受体激动剂罗格列酮预处理组):在给予百草枯腹腔注射前1 h腹腔注射3 mg/kg罗格列酮;C组(高剂量PPAR-γ受体激动剂罗格列酮预处理组):在给予百草枯腹腔注射前1 h腹腔注射10 mg/kg罗格列酮;D组(对照组):1 m L生理盐水腹腔注射。在注射百草枯后24 h和72 h时,每组取出6只,收集血清和肺组织标本。采用Elisa方法检测血清中IL-1β和TNF-α含量测定,行组织切片HE染色进行肺损伤评分,利用Western blot方法检测肺组织中caspase-3和AP-1蛋白表达水平,采用免疫组化方法检测caspase-3蛋白在肺组织中的表达。结果大鼠百草枯中毒后血清炎性细胞因子IL-1β和TNF-α含量明显增加。肺湿重/干重比以及肺损伤评分明显增加。罗格列酮预处理组可以减轻肺组织损伤程度,降低血清中IL-1β和TNF-α含量,减少肺组织中caspase-3和AP-1蛋白的表达。结论应用PPAR-γ激动剂罗格列酮可以抑制百草枯中毒大鼠肺组织中caspase-3和AP-1蛋白表达,抑制炎症反应和凋亡,对百草枯中毒导致急性肺损伤产生保护作用。     

氨溴索预处理对大鼠吸人性肺损伤的影响及其可能机制

目的 探讨氨溴索预处理对大鼠吸人性肺损伤的影响及其作用机制.方法 30只健康SD雄性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、损伤组和氨溴索组各10只.对照组大鼠气道内滴人生理盐水,损伤组大鼠气道内滴入胃内容物,氨溴索组大鼠在损伤前给予氨溴索进行干预.观察肺组织湿重/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性变化;酶联免疫吸附试验测定血清及肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)含量;蛋白质印迹法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)蛋白表达;光镜下观察肺组织结构变化.结果 损伤组与对照组比较,肺组织湿重/干重比值以及MPO活性增加[(5.01±0.22)比(2.42±0.12)、(3.50±0.24)U/g比(1.10±0.18)U/g,P＜0.05],血清及肺组织中TNF-α、IL1β含量增高[血清:(0.950±0.260) μg/L比(0.075±0.010) μg/L,(0.492±0.046) μg/L比(0.009±0.001)μg/L;肺组织:(0.860±0.160)μg/L比(0.080±0.011 )μg/L、(0.583±0.054)μg/L比(0.007±0.002) μg/L,P＜0.05],TLR4蛋白表达明显增高( 1.98±0.26)比(0.28±0.04)(P＜0.05),肺组织出现明显病理组织学损伤.与损伤组比较,氨溴索组肺组织湿重/干重比值(3.92±0.12)以及MPO活性[(2.76±0.52) U/g]降低(P＜0.05),血清及肺组织中TNF-α[ (0.720±0.130)、(0.620±0.060) μg/L]、IL-1β[ (0.318±0.025)、(0.408±0.036)μg/L]含量降低(P＜0.05),TLR4蛋白表达(1.24±0.15)明显下降(P＜0.05),肺组织病理学损伤减轻.结论 氨溴索预处理对大鼠吸人性肺损伤起防护作用,可能与通过下调TLR4功能抑制促炎症因子表达有关.     

依达拉奉对百草枯中毒大鼠急性肺损伤治疗作用

目的研究依达拉奉对百草枯中毒急性肺组织损伤的治疗作用及可能机制。方法将96只雄性SD大鼠随机分为对照组(Con组)、模型组(Mod组)、依达拉奉治疗组(ED组)和地塞米松治疗组(Dex组),每组再根据染毒时间分为6h、24h、48h和72h等4个亚组,每组6只。采用腹腔注射20%百草枯溶液(25mg/kg)制备百草枯中毒急性肺损伤模型,Con组腹腔注射等容积生理盐水。染毒后1h开始,ED组和Dex组分别给予腹腔注射依达拉奉(3mg/kg)和地塞米松(3mg/kg),2次/日,Con组和Mod组给予等容积生理盐水。分别在染毒后6h、24h、48h和72h,观察大鼠一般状况变化,然后处死大鼠,经心脏采集血液标本检测血清SOD活性和MDA含量,并行HE染色观察肺组织病理变化。结果与Con组比较,Mod组、ED组及Dex组各时间点血清SOD活性明显下降(P<0.05或P<0.01),血清MDA水平均明显增加(P<0.01),肺组织病理示急性肺损伤改变,炎症细胞浸润,肺泡萎缩塌陷,甚至结构消失,且随时间进展加重;与Mod组相比,ED组和Dex组血清SOD活性明显上升(P<0.05或P<0.01),血清MDA含量明显下降(P<0.05或P<0.01),肺组织病理改变明显减轻;而ED组和Dex组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论依达拉奉和地塞米松对百草枯中毒引起的急性肺损伤均有治疗作用,其治疗作用和减轻自由基损伤有关。     

急性百草枯中毒大鼠肺组织线粒体中VDAC表达

目的：探讨急性百草枯中毒大鼠肺组织线粒体中线粒体电压依赖性阴离子通路（voltage-dependent anion chan-nel,VDAC）的表达变化。方法选取成年健康Wister大鼠200只,雌雄各半,随机分为对照组及染毒组。其中对照组100只,用1ml生理盐水一次性灌胃;染毒组100只,将百草枯（paraquat,PQ）按50mg/kg用生理盐水稀释到1ml,一次性灌胃染毒。分别于灌生理盐水及灌药后1、24、72、120、168h各取20只大鼠,麻醉下解剖大鼠留取肺组织标本,分离提取线粒体并测定其VDAC的含量。结果染毒后的大鼠VDAC的表达明显高于对照组,并且差异具有统计学意义（P〈0.001）。结论百草枯中毒可上调大鼠肺组织线粒体VDAC的表达,VDAC可能通过不同途径参与了急性肺损伤的过程。     

百草枯中毒患者脏器损害与血清细胞因子变化的研究

目的观察急性百草枯中毒患者脏器损害与血清细胞因子变化。方法15例百草枯中毒患者于服毒后48h采集静脉血10ml,分离血清,取部分血清立即作肝肾功能及有关生化检查,其余置-70℃冻存,备测细胞因子。采集动脉血2ml行动脉血气检查。所有病人均行高分辨CT检查。对照组为15例健康查体志愿者。肝肾功能和动脉血气分析按照常规方法进行。血清PDF、IGF、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果百草枯中毒患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆红素(TBIL)较对照组升高明显(P<0.05或P<0.01)。患者动脉血氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)下降明显,pH、碱剩余(BE)、碳酸氢盐(HCO3-)降低明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),患者血清细胞因子PDGF、IGF-1、TNF-α和IL-10等较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而IL-1β、IL-6变化不明显。HRCT主要为肺部渗出性病变,表现为片絮状影、磨玻璃样影和肺叶实变等。结论百草枯中毒可造成肺、肝和肾的损害,在百草枯中毒发病机制中细胞因子的变化可能起到了重要作用。     

法舒地尔对脓毒症所致急性肺损伤及肺组织中HMGB1表达的影响

目的观察法舒地尔对小鼠脓毒症所致急性肺损伤的影响及其使用与否对肺组织中HMGB1表达量的影响。方法将48只BALB-C小鼠随机分为对照组、盲肠结扎穿刺（CLP）组、法舒地尔预处理组,在6、24 h时间点取血、肺泡灌洗液及鼠肺用于结果分析。结果在6、24 h时间点,法舒地尔可以显著降低CLP所致的小鼠血清中TNF-α及HMGB1和肺泡灌洗液中蛋白浓度的增加。除此之外,法舒地尔预处理还可以逆转CLP诱导的小鼠肺组织病理形态改变。同时,法舒地尔能减少CLP所致小鼠肺组织中HMGB1 mRNA表达量的增加。结论法舒地尔能减轻CLP小鼠所致的肺损伤并降低肺组织中HMGB1的表达。     

大鼠急性百草枯中毒血清中细胞因子的动态变化

目的观察细胞因子TGF-β1、PDGFI、GF-1在急性百草枯中毒动物模型中的变化规律,探讨百草枯中毒致肺损伤的作用机制。方法72只Wister大鼠随机分为1个对照组和3个染毒组,分82、4、72 h 3个观察时段,观察不同剂量组在染毒后不同时间大鼠静脉血细胞因子TGF-β1、PDGFI、GF-1的动态变化,同时作病理检查。结果染毒大鼠于染毒后出现的中毒表现,8、247、2 h各剂量组所监测细胞因子的水平增加,24与72 h组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05;P<0.01)。72 h高剂量组各指标与同时间点低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。72 h高、中、低3个剂量组与8 h时间点比较,差异有统计学意义(P<0.05)。病理检查示染毒后8 h出现肺泡毛细血管扩张、充血、中性白细胞浸润,24 h肺泡毛细血管扩张及炎性粒细胞浸润更加明显,有大量渗出液;72 h出现广泛弥漫的间质纤维化的表现。结论在百草枯中毒急性肺损伤机制中细胞因子TGF-β1、PDGFI、GF-1可能起到了重要作用。     

Inhibition of c-Src protects paraquat induced microvascular endothelial injury by modulating caveolin-1 phosphorylation and caveolae mediated transcellular permeability

The mechanisms underlying paraquat induced acute lung injury (ALI) is still not clear. C-Src plays an important role in the regulation of microvascular endothelial barrier function and the pathogenesis of ALI. In the present study, we found that paraquat induced cell toxicity and an increase of reactive oxygen species (ROS) in endothelium. Paraquat exposure also induced significant increase of caveolin-1 phosphorylation, caveolae trafficking and albumin permeability in endothelial monolayers. C-Src depletion by siRNA significantly attenuate paraquat induced cell toxicity, caveolin-1 phosphorylation, caveolae formation and endothelial hyperpermeability. N-acetylcysteine (NAC) failed to protect endothelial monolayers against paraquat induced toxicity. Thus, our findings suggest that paraquat exposure increases paracellular endothelial permeability by increasing caveolin-1 phosphorylation in a c-Src dependant manner. The depletion of c-Src might protect microvascular endothelial function by regulating caveolin-1 phosphorylation and caveolae trafficking during paraquat exposure, and might have potential therapeutic effects on paraquat induced ALI.     

急性肾损伤诱导急性肺损伤的研究进展

急性肾损伤是一种ICU患者中常见的疾病,致死率较高,当合并肺损伤时,致死率显著提高,可达到80%。急性肾损伤可导致全身体液灌注量增加,血浆渗透压升高进而引起肺水肿和急性呼吸衰竭。同时,炎症反应,氧化应激,细胞凋亡和可溶性调节因子代谢异常等也可能参与急性肾损伤诱导的肺损伤。对急性肾损伤诱导肺损伤的临床认识和可能发病机制的研究,将有助于临床疾病的治疗和死亡率的降低,同时也将有助于对其它肾脏疾病发病机制的认识。     

乙酰半胱氨酸泡腾片治疗百草枯致急性肺间质损伤的疗效分析

目的：探讨乙酰半胱氨酸泡腾片（ AET）治疗百草枯（ PQ）致急性肺间质损伤的疗效。方法选取2012年1月—2013年6月三峡大学仁和医院呼吸内科收治的由其他科室转入的PQ致急性肺间质损伤患者38例,随机分为对照组和治疗组,各19例。两组均给予血液灌流、抗感染及其他对症治疗,治疗组同时加用AET,治疗8周。观察肺纤维化发生率、病死率和肺功能、动脉血气分析指标。结果治疗组肺纤维化发生率和病死率比对照组低（P<0.05）;治疗后治疗组肺总量（TLC）、一氧化碳弥散量（DLCO）、氧合指数（PaO2/FiO2）比对照组高,肺泡—动脉血氧分压差〔P（ A—a） O2〕比对照组低,差异有统计学意义（ P<0.05）。结论 AET治疗PQ致急性肺间质损伤的疗效确切。