MYPT1通过RhoA/ROCK信号通路抑制结直肠癌细胞增殖和迁移

目的 探讨实肌球蛋白磷酸酶靶亚基1（MYPT1）在结直肠癌发生发展中的作用及其可能的作用机制。方法 RT-PCR检测mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell法检测结直肠癌细胞迁移能力,生物信息学软件筛选可与MYPT1相互作用的蛋白质,通过TCGA数据库分析MYPT1表达水平及与RAS同源基因家族成员A（RhoA）和锌离子相关的RhoA蛋白1（ROCK1）的相关性。根据实验方案进行分组,分为空白对照组、阴性对照组、MYPT1过表达组、RhoA过表达组、MYPT1过表达+RhoA空载组和MYPT1过表达+RhoA过表达组。结果 和癌旁正常组织及正常肠粘膜细胞相比,MYPT1在结直肠癌组织和细胞中低表达（P＜0.05）。过表达MYPT1可抑制结直肠癌细胞增殖和迁移（P＜0.05）。MYPT1负调控RhoA和ROCK1的表达（P＜0.05）。过表达RhoA促进结直肠癌细胞增殖和迁移（P＜0.05）。MYPT1通过下调RhoA的表达抑制ROCK1表达（P＜0.05）。MYPT1通过负调控RhoA抑制细胞增殖和迁移（P＜0.05）。结论 MYPT1在结直肠癌组织和细胞中低表达,其通过RhoA/ROCK信号通路调控结直肠癌细胞增殖和迁移。     

胃癌组织ezrin表达的意义

目的:研究ezrin基因与胃癌发生发展的关系.方法:采用原位杂交和免疫组化法,检测60例胃癌和15例正常及40例不典型增生胃黏膜中ezrin mRNA及蛋白的表达.结果:在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中ezrin mRNA及蛋白阳性表达率呈递减趋势.组间差异性均有统计学意义(P＜0.001);ezrin mRNA和蛋白表达在不同浸润深度、肿瘤大小和有无淋巴结转移组内表达率的差异性有统计学意义(P＜0.05),而在年龄、性别和脉管侵犯组内差异无统计学意义(P＞0.05).Ezrin mRNA和蛋白表达呈正相关(rs=0.990,P＜0.01).结论:Ezrin表达降低与胃癌的发生、发展及浸润转移有密切关系.     

亲环素A在胃癌细胞中的表达及与肿瘤细胞增殖的关系

目的 检测亲环素A(CypA)在胃癌组织和细胞株中的表达情况,采用基因干扰技术抑制胃癌细胞中CypA的表达,探讨CypA对胃癌细胞增殖能力的影响和相关分了机制.方法 实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CypA在胃癌组织、癌旁组织和细胞株中的表达;合成针对CypA的靶向siRNA并转染胃癌MKN45细胞株,检测CypA-siRNA对胃癌细胞内源性CypA的抑制作用,同时设置非特异性siRNA对照组和阴性对照组.MTT法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞周期;实时定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞增殖基因PCNA、P21、P16、Cyclin D1的表达.结果 胃癌组织中CypA的mRNA和蛋白表达高于癌旁组织,胃癌细胞株CypA的mRNA和蛋白表达高于胃上皮细胞株,且在低分化细胞MKN45中表达最高(P＜0.05).CypA-siRNA可有效抑制内源性CypA的表达;CypA-siRNA转染后MKN45细胞增殖能力下降(P＜0.05),G0/G1期细胞比例上升、G2/M期细胞比例下降(P＜0.05),PCNA、Cyclin D1的mRNA和蛋白表达下调,P21mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05).结论 胃癌细胞中CypA的表达增强,CypA基因能够通过调节部分增殖基因的表达而促进胃癌细胞增殖.     

ezrin,c-Met及ICAM-1在胃癌组织中的表达及其意义

目的:探讨ezrin,c-Met及ICAM-1在胃癌组织中的表达及意义.方法:应用免疫组化检测ezrin,c-Met及ICAM-1在正常胃黏膜(n=15),不典型增生胃黏膜(n=50)及胃癌组织(n=75)中的表达.结果:正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中,ezrin和c-Met阳性率有递减趋势,组间差异有统计学意义(χ2=33.319,P＜0.001; χ2=19.913,P＜0.001); ICAM-1蛋白阳性表达率有递增趋势,组间差异有统计学意义(χ2=16.409,P＜0.001).Fisher精确概率检验显示在不同的肿瘤大小、浸润深度和淋巴结转移组内ezrin,c-Met及ICAM-1阳性表达率组内差异有统计学意义(P＜0.05),而在年龄、性别和脉管侵犯组内差异无统计学意义(P＞0.05). Spearman等级相关分析显示ezrin与c-Met表达呈正相关(r=0.880,P＜0.05),ezrin与ICAM-1表达呈负相关(r=-0.735,P＜0.05),c-Met与ICAM-1表达无相关性.结论:ezrin与c-Met的缺失以及ICAM-1的过表达与胃癌的发生发展及浸润转移有关.     

FAF1、Livin蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌患者胃癌组织中FAF1、Livin蛋白的表达变化及其临床意义.方法 用免疫组化染色SP法检测53例胃癌患者病变组织及50例浅表性胃炎患者正常胃黏膜组织中FAF1、Livin蛋白的表达水平,并进行相关性分析.结果 胃癌组织中FAF1蛋白表达率（28.30％,15/53）明显低于正常胃黏膜组织（84.00％,42/50） （P ＜0.05）;Livin蛋白表达率（73.58％,39/53）明显高于正常胃黏膜组织14.00％ （7/50） （P ＜0.05）;在胃癌组织中FAF1蛋白表达与胃癌组织学分化程度有关（P＜0.05）;Livin蛋白表达与胃癌肿瘤大小、浸润深度、分化程度、癌细胞转移及TNM分期有关（P＜0.05）;FAF1、Livin蛋白在胃癌组织中的表达水平无相关性（r,=0.307,P＞0.05）.结论 FAF1蛋白的表达缺失可能参与胃癌的形成并抑制组织细胞的分化.胃癌的发生、发展、浸润、转移可能与Livin蛋白异常高表达有关.联合检测FAF1、Livin蛋白为胃癌的早期诊断及推断演进方向提供重要依据.     

RhoA、RAC1在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究RhoA、RAC1在宫颈癌组织中的表达,探讨其与宫颈癌转移的相关性.方法 应用免疫组化S-P法,检测10例正常宫颈、20例不典型增生宫颈、58例宫颈癌组织中RhoA、RAC1蛋白的表达情况,分析其表达结果与临床病理特征的关系.结果 (1)RhoA、RACl蛋白在正常宫颈组织中的表达率均为0,在不典型增生宫颈组织中的表达率分别为40%、25%,在宫颈癌组织中的表达率分别为70.69%、81.03%,两者在宫颈癌组织中的表达水平高于不典型宫颈增生及正常宫颈组织(P＜0.05),随着从正常宫颈组织→宫颈不典型增生组织→宫颈鳞癌的转化,两者的阳性表达率呈递增趋势.(2)RhoA蛋白表达与病理组织分级及淋巴结转移相关(P＜0.05),与患者年龄、临床分期无关(P＞0.05).RAC1的表达与病理组织分级相关(P＜0.05),与宫颈癌患者的年龄、临床分期、有无淋巴结转移无关(P＞0.05).(3)RhoA、RAC1蛋白两者表达水平成正相关关系(P＜0.05).结论 RhoA、RAC1蛋白的表达与宫颈鳞癌转移及预后有一定关系.检测RhoA、RAC1对了解宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的临床价值.     

三叶因子3和环氧合酶-2在胃癌组织中的表达

目的：检测三叶因子3 （TFF3）和环氧合酶-2（COX-2）在正常胃黏膜组织、癌旁组织和胃癌组织中的表达水平,探讨TFF3表达与胃癌发生的关系.方法：选取正常胃黏膜组织40例,癌旁组织和胃癌组织各60例,采用SP免疫组化方法检测各组标本中TFF3和COX-2的表达.结果：TFF3和COX-2在胃癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中的表达呈逐渐降低趋势（P＜0.05）,TFF3和COX-2在胃癌中的异常表达与TNM分期、淋巴结转移相关（P＜0.05）,TFF3在胃癌中的异常表达与肿瘤分化程度相关（P＜0.05）,Spearman相关分析显示两者的表达呈正相关（r=0.462,P＜0.01）.结论：TFF3与COX-2的表达增加有可能参与胃癌的发生;两者在胃癌中表达上调有可能使细胞增殖与凋亡的失衡,从而导致胃癌的发生;TFF3与COX-2在胃癌中可能呈协同作用.     

Survivin与P16蛋白在胃癌组织中的表达及其意义

目的 观察Survivin与P16 蛋白在胃癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测60例胃癌患者的胃癌组织及从中随机抽取的20例癌旁组织的Survivin与P16蛋白的表达情况.结果 胃癌组织中Survivin与P16蛋白的阳性例数分别为40例和18例,而相应的20例癌旁黏膜组织中的Survivin与P16蛋白的阳性例数分别为4例和17例,两组间差异有统计学意义（P＜0.05）.胃癌组织中Survivin基因的阳性表达与组织学分级无关（P＞0.05）,而与临床分期、淋巴结转移情况相关（P＜0.05）;胃癌组织中P16蛋白表达的缺失与组织学分级、临床分期和淋巴结转移情况均相关（P＜0.05）.结论 Survivin蛋白的过表达和P16蛋白的表达缺失与胃癌的侵袭性及预后相关.     

胃癌组织神经元再生相关蛋白的表达及临床意义研究

目的探讨神经元再生相关蛋白（NREP）在胃癌组织中的表达及临床意义。方法选取2021年3月至8月在宁波市医疗中心李惠利医院接受D2根治术的20例胃癌患者的胃癌组织和对应的癌旁正常组织作为研究标本,采用在线生物信息数据库（Oncomine、GEPIA、Ualcan数据库）分析胃癌组织NREPmRNA的表达。采用基因芯片分析胃癌组织差异表达基因以验证NREPmRNA表达情况。采用人类蛋白质图谱（HPA）分析胃癌组织NREP蛋白的表达。免疫组化检测胃癌组织和癌旁正常组织NREP蛋白的表达。采用Kaplan-Meierplotter数据库分析胃癌患者NREPmRNA表达与预后的关系。结果Oncomine、GEPIA、Ualcan数据库分析显示,胃癌组织NREPmRNA表达水平高于癌旁正常组织（P＜0.05）。基因芯片分析发现NREPmRNA在胃癌组织中高表达,其表达水平比癌旁正常组织高至少2.8倍（P＜0.05）。胃癌组织NREP蛋白高表达比例高于癌旁正常组织（P＜0.05）。多因素分析显示,NREP高表达是胃癌患者预后不良的独立危险因素之一（P＜0.05）。NREPmRNA低表达胃癌患者总生存时间、无进展生存时间均优于高表达胃癌患者（均P＜0.05）。结论NREP在胃癌组织中高表达,且其高表达与患者预后不良密切相关。NREP或可成为评估胃癌预后和指导治疗的生物标志物。     

河湟谷地胃癌患者TNF-α、NF-κB P65的表达及临床意义

目的 探讨河湟谷地胃癌患者TNF-α及NF-κB P65的表达及临床意义.方法 采用ELISA法检测河湟谷地健康人、胃炎患者及胃癌患者（各20例）血清中TNF-α的表达,Western blot法检测上述胃癌患者癌组织及癌旁组织NF-κB P65蛋白的表达,分析TNF-α和NF-κB P65与胃癌发生、发展的相关性.结果 TNF-α在健康入、胃炎患者及胃癌患者血清中的表达具有差异性（P ＜0.001）,并与胃癌分期及淋巴结转移具有相关性（P＜0.05）.NF-κB P65蛋白在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达差异具有统计学意义（P＜0.001）,并与胃癌分期及淋巴结转移有相关性（P＜0.05）.胃癌患者TNF-α和NF-κBP65的表达呈正相关（r=0.745,P＜0.01）.结论 TNF-α和NF-κB P65具有作为河湟谷地胃癌患者早期诊断的分子标志物的潜力,并且二者在胃癌发生、发展及转移过程中可能起重要协同作用.     

青海地区汉、藏族PLCE1rs2274223基因多态性与胃癌相关性

目的 通过检测PLCE1 rs2274223基因在青海汉、藏族胃癌患者与健康对照者中的分布,初步探讨其多态性与汉、藏族胃癌的相关性.方法 提取青海汉、藏族胃癌患者与健康人群的外周血DNA,采用dHPLC法行PLCE1 rs2274223基因位点分型.并行相关分析.结果 汉族胃癌组PLCE1基因单核苷酸多态性位点rs2274223的基因型（AA,AG,GG）频率分别为53.33%、42.50%、4.17%,对照组为56.67%、38.33%、5.00%,两组间各基因型分布差异无统计学意义（P＞0.05）.藏族胃癌组PLCE1 rs2274223基因的基因型（AA,AG,GG）频率分别为50.00%、40.83%、9.17%,对照组为60.83%、36.67%、2.50%,两组间AA、AG基因型分布差异无统计学意义（P＞0.05）,两组间GG基因型分布差异有统计学意义（P＜0.05）,与AA、AG型比较,携带GG基因型者胃癌发生的危险性增加（OR=3.936,95%CI=1.069-14.485）.两民族间PLCE1 rs2274223的3种基因型（AA,AG,GG）频率差异无显著性（P＞0.05）.结论 本研究显示,两民族间PLCE1基因rs2274223的基因型（AA,AG,GG）分布频率不存在差异.PLCE1基因 rs2274223位点单核苷酸多态性与青海地区汉族人群胃癌易感性不存在相关性.携带GG基因型的青海地区藏族人群胃癌发病风险较高.     

青海汉族、回族、藏族MICA-TM基因多态性与胃癌相关性

目的 分析青海汉族、回族、藏族MICA-TM基因多态性与胃癌相关性.方法 以特异引物聚合酶链法扩增青海汉族、回族、藏族胃癌患者(病例组)MICA-TM基因特异序列,直接测序分型技术检测等位基因频率分布情况,并与健康人群(对照组)进行对比分析.结果 病例组检测出*A4、*A5、*A5.1、*A6、*A7、*A8、*A9等...     

Ezrin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨Ezrin蛋白在肺非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化S-P法,检测45例在非小细胞肺癌(NSCLC)、20例正常肺组织(NL)中Ezrin蛋白的表达。结果:Ezrin蛋白在鳞癌、腺癌、鳞腺癌、大细胞癌阳性率分别为63.64%(14/22),70.00%(7/10),71.43%(5/7),66.67%(4/6),Ezrin蛋白在非小细胞肺癌总的阳性率为66.67%(30/45),Ezrin蛋白在正常肺组织阳性表达率为100%(20/20),两组相比有显著性差异(P<0.05)。Ezrin蛋白在非小细胞肺癌主要表达于胞浆,在正常肺组织主要表达于胞膜,Ezrin蛋白的阳性表达与肺癌组织学类型、肿瘤分化程度、肺癌分期无关,而与有无淋巴结转移有关。结论:Ezrin蛋白在非小细胞肺癌表达下降且表达部位发生移位,可能与非小细胞肺癌发生发展及远处转移有关。     

胃癌PTEN与Survivin的表达及其相关性研究

目的探讨胃癌磷酸酶基因PTEN与Survivin的表达及其相关性。方法用免疫组织化学SP法检测70例胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中PTEN与Survivin的表达情况。结果PTEN蛋白表达在胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中阳性率分别为45171％、8429％及91．42％,差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin蛋白表达在胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中阳性率分别为5571％、1714％及8．57％,差异有统计学意义（P〈0．01）;PTEN与胃癌浸润深度、淋巴结转移、肝转移及临床分期呈负相关（均P〈0．05）;Survivin与胃癌淋巴结转移、肝转移及临床分期呈正相关（均P〈005）;胃癌PTEN阳性表达率与Survivin呈显著负相关（P〈0．05）。结论PTEN、Survivin基因在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用;联合检测PTEN及Survivin可能对胃癌恶性程度的判定及预后评估提供帮助。     

Runx3和Survivin在胃癌中的表达及其相关性

目的：探讨Runx3、survivin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SABC方法,检测Runx3、survivin蛋白在8例正常胃粘膜、15例异型增生、47例胃癌组织中的表达。结果：Runx3、survivin在正常胃黏膜、异型增生及胃癌组织中的阳性表达率分别87.5%、53.3%、36.2%和0%、33.3%、70.2%。Runx3的表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关（P〈0.05）;survivin的表达与胃癌组织学分类、淋巴结转移相关（P〈0.05）,（2）Runx3与sur-vivin在正常胃粘膜（P〈0.010,r=-0.6255）和胃癌组织中的表达呈负相关（P〈0.05,r=-0.3271）。结论：Runx3、survivin表达在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用,联合检测Runx3和survivin蛋白的表达更能反映胃癌的生物学行为,优于单项检测。     

Ezrin蛋白与E-cadherin在食管鳞癌中的联合检测及其意义

目的：探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Ezrin蛋白与E-cadherin的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系.方法：以30例癌旁正常黏膜组织作对照,应用免疫组织化学SP法检测76例ESCC组织标本中Ezrin蛋白与E-cadherin的表达.结果：ESCC组织中Ezrin蛋白与E-cadherin的异常表达率分别为78.95％和59.21％;而癌旁正常黏膜组织中异常表达率分别为26.67％和6.67％,两项指标差异均有统计学意义（P＜0.01）.Ezrin蛋白异常表达在ESCC淋巴结转移和组织分化程度间差异有统计学意义（P ＜0.05和P＜0.01）,E-cadherin异常表达在ESCC组织的浸润深度、ESCC细胞的分化程度和淋巴结转移间差异均有统计学意义（P ＜0.05 ～P ＜0.01）.Ezrin蛋白与E-cadherin在ESCC中的异常表达呈正相关关系（P＜0.05）.E-cadherin异常表达组Ezrin蛋白表达阳性率显著高于E-cadherin正常表达患者（P＜0.05）.两者同时异常表达的40例中淋巴结转移高达70％,而两者同时正常表达的11例均无淋巴结转移,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论：Ezrin蛋白与E-cadherin在ESCC组织中均异常表达,且呈正相关.联合检测Ezrin蛋白和E-cadherin的表达有助于综合判断ESCC的浸润、转移及预后.     

青海汉族土族胃癌患者MICA—TM基因分布与发病相关分析

目的探讨青海地区汉族、土族MICA跨膜区（TM）基因在胃癌患者中的分布及其与该病的相关性。方法将两个民族人群分为胃癌组与对照组,利用基因测序方法检测其MICA—TM等位基因分布情况并用R软件统计包进行分析。结果病例组中检测出MICA％A4、A5、A5．1、A6、A7、A8、A9共7种等位基因;对照组中检测出MICA＊A4、A5、A5．1、A6、A7、A8、A9共7种等位基因。统计结果显示健康人群MICA＊A5、A6、A7频率分布在汉、土族间有差别（P〈0．05）;病例组MCIA＊A4、A5、A5．1在两民族间分布有差别（P〈0．05）;与对照组相比,病例组中汉族A5、A5．1、A6等位基因频率分布不同（χ^2=20．75,P〈0．05,OR=0．22;χ^2=10．39,P〈0．05,OR=2．62;χ^2=12．26,P〈0．05）;土族A5、A5．1等位基因频率分布不同（χ^2=76．61,P〈0．05,OR=0．21;χ^2=57．78,P〈0．05,OR=2．44）。结论汉族、土族人群中MICA＊A5、A5．1可能与胃癌发生有关,前者可能为保护基因,后者可能为易感基因。     

胃癌组织中surv淅n的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨胃癌组织中Survivin的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组化S-P法检测80例胃癌标本中survivin的表达,并探讨其与患者组织学类型、TNM分期和淋巴结转移等临床病理特征和预后的关系。另选择30例正常的胃黏膜标本组织作对照。结果胃癌组织中Survivin的阳性率明显高于正常胃黏膜（P〈0．01）。低分化、中分化胃癌Survivin的阳性率较高分化明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。胃癌PTNM分期Ⅲ、Ⅳ期的Survivin的阳性率明显高于I、Ⅱ期（P〈0．01）,淋巴结转移组Survivin的阳性率明显高于无淋巴结转移组（P〈0．01）。Survivin阳性表达组的3年生存率明显低于Survivin阴性表达组（P〈O．05）。结论Survivin参与胃癌的发生发展过程,Survivin基因与胃癌临床病理特征和预后具有明显相关性。     

胃腺癌组织中MAC30蛋白的表达变化及意义

目的观察胃腺癌石蜡包埋标本中MAC30蛋白的表达变化,并分析其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测20例正常胃黏膜组织及40例胃腺癌组织中MAC30蛋白的表达。结果胃腺癌组织MAC30表达阳性率为65％（26／40）,明显高于正常胃黏膜组织中的15％（3／20）,差异有统计学意义（P〈0．05）;在胃腺癌中,MAC30蛋白与淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论胃腺癌组织中MAC30蛋白高表达可能与胃腺癌的发生和转移有关。     

胃癌组织中KiSS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白及mRNA的表达

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及基质金属蛋白酶9（MMP-9）与胃癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例胃癌及40例正常胃黏膜组织中KiSS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果胃癌组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率（52.5%）低于正常胃黏膜组织（95.0%）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率（77.5%）高于正常胃黏膜组织（52.5%）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0.05）。胃癌组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率及表达水平（57.5%,0.869±0.063）均低于正常胃黏膜组织（92.5%,1.103±0.152）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率及表达水平（75.0%,1.083±0.137）均高于正常胃黏膜组织（47.5%,0.902±0.035）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关（P〈0.05）。结论 KiSS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与胃癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。