非酶糖化抑制剂对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的：观察非酶糖化抑制剂-氨基胍(AG)对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法：54只SD大鼠分为12周对照组(8只)，24周对照组(10只)；糖尿病12周组(8只)，糖尿病24周组(10只)；AG治疗12周组(8只)，AG治疗24周组(10只)，观察糖尿病大鼠心肌病变过程中(12周及24周)心脏肥厚、心功能指标及心肌细胞凋亡的改变一结果：链尿佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠12周时出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞，随心衰的加重，24周时凋亡细胞数目明显增多。透射电镜检查，发现糖尿病大鼠左室心肌组织中可见凋亡的心肌细胞(具有凋亡形态学特征)。AG治疗组大鼠心功能和心肌超微结构明显改善，心肌细胞凋亡数目减少、结论：心肌细胞凋亡在糖尿病心肌病发生发展过程中起着重要作用，AG可有效减少心肌细胞凋亡，改善心肌病理形态学异常。     

组蛋白去乙酰化酶1对人胃癌发生发展的影响

目的观察组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在胃癌及癌前病变组织中的表达,探讨HDAC1在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学PV6000法分别检测20例正常胃黏膜组织,20例萎缩性胃炎伴肠化生组织,20例不典型增生组织及60例胃癌组织中HDAC1的表达,并分析HDAC1与胃癌临床病理特征的关系,同时检测60例胃癌组织中p53,p21的表达,分析HDAC1与p53、p21表达的关系。结果 HDAC1在萎缩性胃炎伴肠化生、不典型增生及胃癌各组表达均高于正常胃黏膜组(45.0%,60.0%,63.3%vs 5%,均P<0.05);胃癌组中HDAC1的表达与分化程度和淋巴结转移有关(均P<0.05);胃癌组织中HDAC1与p21蛋白的表达呈负相关,而与p53蛋白的表达呈正相关(均P<0.05)。结论 HDAC1在胃癌及癌前病变组织中表达增高,HDAC1的表达与胃癌分化程度和淋巴结转移有关,胃癌组织中HDAC1与p21蛋白的表达呈负相关,而与p53蛋白的表达呈正相关,HDAC1可能通过调节癌基因与抑癌基因参与胃癌的发生、发展,对胃癌的早期诊断及预后的判断具有一定的意义。     

去泛素化酶USP14对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的 研究抑制去泛素化酶USP14的活性对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响.方法 用胰酶消化法和差速离心法分离培养新生SD大鼠CFs,加入不同浓度去泛素化酶USP14的抑制剂IU1作用48小时后,采用MTS、细胞计数法和结晶紫染色法检测CFs的增殖,采用LDH释放检测测定IU1对CFs的细胞毒性作用.结果 IU1可以浓度依赖的抑制CFs的增殖,并且没有明显的细胞毒性作用.结论 抑制去泛素化酶USP14活性可以抑制CFs的增殖,去泛素化酶USP14可能是一个抗心肌纤维化的重要靶点.     

组蛋白去乙酰化酶3在心血管疾病中的研究进展

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是表观遗传的一种修饰酶,其与染色质结构和基因转录调控密切相关。HDAC3属于第Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶,研究报道HDAC3在心脏发育过程中起着关键的作用,最新研究发现HDAC3在心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文主要围绕Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶家族中的HDAC3,综述其定位和酶活性与先天性心脏病、冠心病、心肌疾病、心力衰竭、心律失常的关系,为心血管疾病临床治疗提供新的药物靶点。     

氯胺酮对培养大鼠乳鼠缺氧心肌细胞的影响

目的探讨氯胺酮对原代培养心肌细胞缺氧损伤的影响。方法将原代培养成活48h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组:对照组(氰化钠造成心肌细胞细胞内缺氧模型),氯胺酮1组(缺氧+10μmol/L氯胺酮),氯胺酮2组(缺氧+100μmol/L氯胺酮)。比较3组心肌细胞形态学的变化及吸光度(A)值的改变。结果缺氧12h后,对照组细胞搏动功能变化明显,呈散在细胞簇状搏动,而实验组搏动频率减慢。随着时间的延长,细胞形态学变化逐渐明显,对照组较实验组变化更显著。结论氯胺酮对原代培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧损伤有一定的保护作用。     

丹参粉针剂对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨丹参粉针剂对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡的作用。方法18只引种繁殖的雄性SHR随机分成3组,每组6只对照组育至第8周处死;丹参组从第8周给药,丹参粉针剂每天1 g·kg-1腹腔注射,第18周处死;高血压组用相同容量蒸馏水替代丹参针腹腔注射,余同丹参组。测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LV-MI) ,采用TdT介导的原位末端缺口标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,用S-P免疫组化法检测心肌细胞Bcl-2基因蛋白表达。结果与对照组比较,高血压组SBP、LVMI、心肌细胞凋亡指数(AI)显著增加,Bcl-2蛋白阳性表达指数(PEI)降低;与高血压组比较,丹参组LVMI、AI显著降低,PEI增高,差异均有统计学意义。结论长期应用丹参粉针剂治疗,能显著上调SHR心肌细胞Bcl-2基因蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,预防高血压左室肥厚的形成。     

更年平调液对更年期大鼠心肌细胞Bcl-2表达的研究

目的:探讨更年平调液对更年期大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法:选用鼠龄为11~15个月的自然更年期雌性SD大鼠共40只,随机分为4组,即更年平调液组(P组)、更年期对照组(M组)、乙烯雌酚组(E组)及更年康组(G组),每组10只。另选鼠龄为4~6个月,体重130~180 g的SD大鼠10只,为青年对照组(Y组)。实验第45d,采用免疫组织化学方法检测各组心肌组织中Bcl-2的表达水平,利用计算机图像分析技术测量各组心肌组织中Bcl-2表达的平均光密度和平均阳性面积。结果:更年平调液组与更年期对照组、乙烯雌酚组及更年康组之间,Bcl-2的平均光密度及阳性面积率有显著性差异(P<0.01),更年平调液组与青年对照组比较平均光密度及阳性面积率的差异无显著性(P>0.05)。结论:更年平调液能抑制心肌细胞凋亡而对心肌细胞起着重要的保护作用。     

新生大鼠心肌细胞培养技术

目的探讨新生大鼠心肌细胞的分离、培养方法。方法取1~3 d龄新生大鼠的心室肌细胞,用胶原酶Ⅰ分离心肌细胞,离心收集心肌细胞,差速贴壁法纯化后培养于DMEM培养基。显微镜下鉴定心肌细胞的纯度和形态结构,锥虫蓝染色检查心肌细胞成活率。结果心肌细胞纯度为96%,平均成活率95.43%,并出现同簇细胞的同步跳动。结论该方法简单有效,为研究心肌细胞的人员提供了一种实验手段。     

转化生长因子β1在大鼠心肌细胞肥大中的作用

目的探讨转化生长因子β1(transforminggrowth factorβ1，TGF-β1)在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法培养新生大鼠的心肌细胞，检测[^3H]-Leu的掺入量和胚胎抗原心房利钠因子(atrial natriuretic factor，ANF)的表达。结果不同浓度的转化生长因子β1均能明显增加心肌细胞[^2H]-Leu的掺入量和ANF的表达。结论转化生长因子β1能诱导大鼠的心肌细胞肥大。     

黄芪总皂苷对大鼠梗死心肌血管新生的影响

目的 观察黄芪总皂苷(AST)对大鼠梗死心肌血管新生的影响.方法 建立大鼠心肌梗死模型,将30只存活大鼠随机分为药物组A(n =10,AST2.5 mg·kg-1·d-1)、药物组B(n=10,AST 10 mg· kg-1 ·d-1)和对照组(n=10),分别予以AST注射液2ml及等量0.9％氯化钠注射液腹腔注射4周,HE染色观察心肌组织病理变化,CD34染色计算微血管数(MVC)及微血管密度(MVD).结果 HE染色见大鼠心肌结构紊乱,肉芽组织生成,成纤维细胞增生;药物组病变较对照组轻,药物B组病变较A组轻.CD34染色各组大鼠梗死心肌边缘见新生微血管,药物组MVC及MVD多于对照组(P＜0.01),药物B组MVC及MVD高于药物A组(均P＜0.01).结论 AST可改善大鼠梗死心肌缺血,促进大鼠梗死心肌血管新生,并与药物剂量呈正相关.     

尼可地尔对心肌肥厚模型大鼠的保护作用及机制研究

目的:研究尼可地尔(Nic)对甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚的保护作用。方法:大鼠连续10d腹腔注射甲状腺素建立心肌肥厚模型,3d后分别灌胃给予Nic低、高剂量8d,测定并观察Nic对大鼠心肌组织形态、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及钙调神经磷酸酶(CaN)活性的影响;采用逆转录-聚合酶链反应法检测心肌c-fos、c-jun及TGF-β1mRNA表达;采用酶链免疫吸附法检测TGF-β1蛋白表达。结果:与模型组比较,Nic能显著改善肥厚心肌组织的病理改变,提高心肌SOD活性,降低MDA含量,并显著抑制CaN活性(P<0·01);下调心肌c-fos、c-jun及TGF-β1mRNA表达(P<0·05);降低TGF-β1蛋白的含量(P<0·01)。结论:Nic能显著抑制甲状腺素诱发的大鼠心肌肥厚,对心肌具有明显的保护作用。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾功能及肾组织SIRT1表达的影响

目的观察二甲双胍(MET)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠肾组织沉默调节蛋白1(SIRT1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨MET对糖尿病肾功能损害的修复作用机制。方法30只T2DM模型大鼠随机分为糖尿病组(T2DM组)、格列本脲组(GLY组,5 mg·kg~(-1)·d~(-1))和二甲双胍组(MET组,300 mg·kg~(-1)·d~(-1)),同时设立正常对照组(NC组)。8周后,观察各组大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖(BG)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄和肾小球基底膜厚度(GBMT)情况;免疫组化检测肾小管SIRT1蛋白表达;real-time PCR检测肾组织SIRT1 mRNA表达;ELISA检测尿SIRT1蛋白排泄。结果 8周末,MET组及GLY组BG、Hb A1c、尿白蛋白/尿肌酐(UACR)、尿SIRT1/尿肌酐(USIR)和GBMT明显低于T2DM组,高于NC组(P<0.05);MET组与GLY组BG、Hb A1c和GBMT差异无统计学意义(P>0.05),但UACR明显降低(P<0.05);MET组肾组织SIRT1 mRNA和蛋白表达高于T2DM组,但低于NC组(P<0.05);MET组肾组织SIRT1表达高于GLY组(P<0.05),尿SIRT1蛋白排泄低于GLY组(P<0.05)。结论二甲双胍可增加T2DM大鼠肾组织SIRT1表达,该作用可能与其肾脏保护有关。     

维A酸对肺气肿大鼠氧化/抗氧化因子表达调控作用的研究

目的 探讨全反式维A酸(ATRA)对猪胰蛋白酶(PPE)诱导肺气肿大鼠模型氧化/抗氧化因子表达的调控作用.方法 选择60只SPF级健康Wistar大鼠,按数字表法随机分为对照组(N组)、模型组(E组)、棉籽油组(C组)、小剂量ATRA治疗组(L组)、中剂量ATRA治疗组(M组)和大剂量ATRA治疗组(H组)各10只作为研究对象,一次性气管内注入PPE制作大鼠肺气肿模型,然后选用小、中、大剂量ATRA及棉籽油注入大鼠腹腔内进行干预治疗.30 d后处死、解剖大鼠,测量大鼠肺体积、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂质过氧化物(MDA)含量.结果 与N组比较,E组、C组、L组、M组、H组的肺体积明显增大(t =9.351、7.805、2.155、2.273、5.507,均P＜0.05),各组MLI、MAA的肺泡形态学比较显示:E组、C组、L组、M组、H组与N组,差异均有统计学意义(t=4.048、5.650、3.479、10.487、12.795,均P＜0.05),L组比E组明显缩小(t =5.856,P＜0.05);E组、C组、L组、M组、H组SOD活力与N组差异均有统计学意义(t=2.711、4.398、15.767、5.672、5.415,均P＜0.05),L组SCD活力明显高于其他各组(t=15.767、13.502、12.139、7.866、7.221,均P＜0.05).E组、C组、L组、M组、H组MDA含量均明显高于N组(=7.702、8.507、3.186、7.950,均P＜0.05),L组、M组明显低于E组(t=6.397、4.044,均P＜0.05).结论 采用低剂量ATRA治疗对肺泡有较好修复作用,可提高肺组织SOD活力,能够作为抗氧化作用保护剂,达到保护肺组织作用.     

SIRT1在贲门癌中的表达及临床病理学意义研究

目的研究SIRT1表达与责门癌临床病理学间的关系及对预后的影响。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法检测176例贲门癌组织和32例正常贵门组织中SIRT1、p53、Ki67蛋白的表达情况。结果SIRT1在贲门癌中的阳性表达率高于正常贲门中的阳性表达率（P〈0．01）;176例贲门癌中,SIRT1在淋巴结有转移组中的表达高于淋巴结无转移组（P〈0．01）;且SIRT1表达与贲门癌TNM分期呈正相关（P〈0.05）。SIRT1阳性组的Ki67蛋白水平高于SIRT1阴性组（P〈0．05）。其中90例有随访资料的贲门癌病例中,SIRT1阳性患者的3年生存率及平均生存时间,低于SIRT1阴性表达患者（P〈0．05）。结论SIRT1在贵门癌组织中存在过表达。与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤增殖状态以及预后相关,可能成为判定贵门癌恶性程度及评估预后的生物学指标。     

高血氨对大鼠脑内NMDAR1 CREB表达的影响

目的探讨高血氨大鼠学习记忆能力改变的分子机制。方法雄性SD大鼠40只,随机分为2组,每组20只：正常对照组（A组）,高血氨模型组（B组）,Morris水迷宫观察动物学习记忆的变化,大鼠处死后,检测血氨,原位杂交检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体1（NMDAR1）基因的表达,实时荧光定量聚合酶链反应（RTqPCR）检测大鼠脑组织环磷酸腺苷（cAMP）应答元件结合蛋白（CREB）基因的表达。结果与正常对照组比较,高血氨模型组大鼠血氨水平明显升高,其平均逃避潜伏期、游泳总距离均延长;并且大脑皮层、海马NMDAR1mRNA表达均下降,CREB基因表达亦均下降。结论高血氨模型大鼠学习记忆功能下降可能由于脑组织NMDAR1、CREB等基因表达下调所致。     

Effect of the flavonoid quercetin on cadmium-induced hepatotoxicity

The present study was designed to evaluate whether treatment with quercetin exerts any beneficial effect on cadmium (Cd)-induced hepatotoxicity in order to establish the possible protective mechanisms of quercetin. Wistar rats were distributed in four experimental groups: control, Cd, quercetin, and Cd + quercetin. Hepatic toxicity was evaluated by measuring plasma concentrations of markers of hepatic injury. The activity of antioxidant enzymes in liver was also measured. Hepatic expression of metallothioneins (MT), and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) was assayed by Western and Northern blot. Our results demonstrated that Cd administration induced an increased marker enzyme activity in plasma. This effect was not inhibited by quercetin. However, the administration of quercetin softened Cd-induced oxidative damage. MT levels in liver were substantially increased when the animals received Cd and quercetin. Hepatic eNOS expression was significantly increased after treatment with Cd and quercetin, being this increase higher than in animals receiving Cd alone. In conclusion, in this experimental model, quercetin was not able to prevent the Cd-induced liver damage although the animals that received both, Cd and quercetin showed a marked improvement in oxidative stress and an increase in the MT and eNOS expression. These results suggest that other mechanisms different to oxidative stress could be involved in hepatic damage.     

Protective effect of quercetin on experimental chronic cadmium nephrotoxicity in rats is based on its antioxidant properties

Oxidative stress can play a key role in Cd-induced dysfunctions. Quercetin is a potent oxygen free radicals scavenger and a metal chelator. Our aim was to study the effect of quercetin on Cd-induced kidney damage and oxidative stress as well as its mechanism of action. Wistar rats were distributed in four experimental groups: control rats; Cd; quercetin and Cd + quercetin. Renal toxicity was evaluated by measuring urinary excretion of proteins, albumin, glucose and enzymes markers of tubular necrosis, as well as plasma concentration of creatinine. Plasma TBARS concentration and activity of antioxidant enzymes in kidney were also measured. Renal cell damage was assessed by electron microscopy. Animals that received both Cd and quercetin showed a better renal function than those receiving Cd alone. Cd-induced tubular lesions were markedly reduced in rats that also received quercetin. Cd-induced increase in plasma TBARS was prevented by the administration of quercetin. Total plasma antioxidants and renal superoxide dismutase and glutathione-reductase activities were higher in the group that received Cd and quercetin than in rats that received Cd alone. Quercetin administration does not modify the renal content or the urinary excretion of Cd. In conclusion, quercetin treatment prevents renal tubular damage and increased oxidative stress induced by chronic Cd administration, most probably throughout its antioxidant properties.     

The effect of lead exposure on expression of SIRT1 in the rat hippocampus

Based on how the silent information regulator 2 homolog 1 (SIRT1) regulates the cyclic AMP response element binding protein (CREB), which is the molecular switch of long-term memory that maintains cognitive function, it is postulated that the impact of lead (Pb) on SIRT1 is one of the mechanisms leading to Pb-induced cognitive and learning deficits. Hence, the purpose of this study was to investigate the effect of Pb exposure on the expression of SIRT1, and the reversion effect of resveratrol, which is an activator of SIRT1. We examined the effects of maternal rat ingestion of Pb in drinking water during gestation and lactation on the expression of SIRT1 and CREB in the hippocampus of their offspring at postnatal week 3 (PNW3) and 52 (PNW52), and then reexamined these effects in offspring after intragastric administration of resveratrol for 4 weeks. Pb exposure decreased SIRT1 and CREB phosphorylation in a dose-dependent manner in the rat hippocampus at both PNW3 and 52, and resveratrol reversed those losses. These results indicated that SIRT1 might be a novel target to prevent Pb neurotoxicity.