土槿皮乙酸诱导大鼠神经胶质瘤C6细胞株凋亡

目的:研究土槿皮乙酸诱导大鼠神经胶质瘤C6细胞株凋亡及其机制.方法:采用MTT法检测0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L不同终浓度PAB对C6细胞增殖能力的影响,激光扫描共聚焦显微镜观察AO/EB荧光染色后细胞的凋亡情况,流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后细胞周期的变化,免疫组化法测定C6细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达.结果:MTT结果显示,PAB呈时间剂量依赖性抑制C6细胞的生长.PAB处理24、48和72 h后,对C6细胞的半效致死剂量(IC50)分别为39.811、23.306和7.360 μmol/L.5.0、10.0、20.0 μmol/L PAB作用C6细胞72 h后的凋亡率分别为(50.5±0.7)%、(63.5±2.3)%和(80.0±1.2)%,与对照组(12.0±1.6)%比较均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测结果显示5.0、10.0、20.0 μmol/L不同浓度PAB作用C6细胞72小时后,随着浓度的增加,G2/M期细胞逐渐增多,分别为(29.84±6.215)%,(34.58±1.187)%和(70.23±6.325)%,与对照组(7.79±0.570)%相比,后两组差异有统计学意义(P<0.05).C6细胞中Bcl-2蛋白阳性表达率随药物剂量的增大而减小.结论:PAB可抑制大鼠神经胶质瘤C6细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期、下调Bcl-2表达为其可能的作用机制.     

辛伐他汀诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨胆固醇合成抑制剂辛伐他汀（SIM）对人神经胶质瘤U251细胞抗增殖和诱导凋亡作用,并探讨其可能的分子机制。方法：用不同浓度的SIM干预U251细胞,四甲基偶氮唑盐（MTY）测定细胞增殖,流式细胞分析检测细胞周期和凋亡率、survivin和Bax蛋白表达,Hoechst33258荧光染色法观察细胞形态学改变,半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测survivin和BaxmRNA表达的变化。结果：①SIM能有效抑制U251细胞增殖,培养48h抑制率可达93．12％,IC50为（11．33±0．16）μg／ml。②SIM诱导U251细胞凋亡,影响细胞周期进程,细胞阻滞于G-S期。SIM诱导U251细胞凋亡过程中随作用时间延长,survivin蛋白表达水平逐渐下降,Bax蛋白表达水平逐渐升高。③经SIM处理后,U251细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成。④survivin mRNA表达逐渐降低,BaxmRNA表达逐渐升高。结论：SIM对人神经胶质瘤U251细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用,survivin基因表达下降、Bax基因表达升高可能为其分子机制之一。     

辛伐他汀诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨胆固醇合成抑制剂辛伐他汀(SIM)对人神经胶质瘤U251细胞抗增殖和诱导凋亡作用,并探讨其可能的分子机制。方法用不同浓度的SIM干预U251细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)测定细胞增殖,流式细胞分析检测细胞周期和凋亡率、survivin和Bax蛋白表达,Hoechst33258荧光染色法观察细胞形态学改变,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测survivin和Bax mRNA表达的变化。结果①SIM能有效抑制U251细胞增殖,培养48h抑制率可达93.12%,IC_(50)为(11.33±0.16)μg/ml。②SIM诱导U251细胞凋亡,影响细胞周期进程,细胞阻滞于G_1-S期。SIM诱导U251细胞凋亡过程中随作用时间延长,survivin蛋白表达水平逐渐下降,Bax蛋白表达水平逐渐升高。③经SIM处理后,U251细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成。④survivin mRNA表达逐渐降低,Bax mRNA表达逐渐升高。结论SIM对人神经胶质瘤U251细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用,survivin基因表达下降、Bax基因表达升高可能为其分子机制之一。     

X射线诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨X射线能否诱导胶质瘤细胞凋亡及剂量-效应关系。方法：用不同剂量X射线照射细胞，并分别在不同时间段用倒置显微镜、电镜观察形态变化；DNA凝胶电泳观察阶梯状条带形成；流式细胞仪检测凋亡峰及细胞凋亡百分率。结果：20Gy照射后48h观察组细胞凋亡率最高(38．49％)。结论：放射可诱导胶质瘤细胞凋亡，20Gy的照射剂量对胶质瘤有最强的诱导凋亡作用，但不存在时间效应关系。     

X射线诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究

目的探讨X射线能否诱导胶质瘤细胞凋亡及剂量-效应关系。方法用不同剂量X射线照射细胞,并分别在不同时间段用倒置显微镜、电镜观察形态变化;DNA凝胶电泳观察阶梯状条带形成;流式细胞仪检测凋亡峰及细胞凋亡百分率。结果20Gy照射后48h观察组细胞凋亡率最高(38.49%)。结论放射可诱导胶质瘤细胞凋亡,20Gy的照射剂量对胶质瘤有最强的诱导凋亡作用,但不存在时间效应关系。     

蛋白激酶C在结肠癌多细胞耐药中的实验研究

目的：探讨蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）在结肠癌细胞多细胞耐药中的作用。方法：采用体外三维细胞培养的方法,通过应用不同剂量PKC抑制剂Staurosporine（SP）对三维（3D）培养结肠癌HT-29细胞药物敏感性、核因子-κB（NF-κB）活性及PKC活性的影响的研究,探讨PKC在结肠癌细胞群集耐药中的作用。结果：3D培养结肠癌细胞中PKC、NF-κB活性较二维（2D）培养细胞明显增高,氟尿嘧啶（5-FU）的药物敏感性降低;SP不同浓度处理HT-29球形细胞可抑制其PKC及NF-κB活性,对5-FU的药物敏感性增加,在一定浓度范围内,随着SP浓度的增加,抑制作用逐渐增强,存在量效关系。结论：PKC在结肠癌细胞群集耐药中有一定作用,抑制PKC活性,可增加结肠癌球形细胞对5-FU的敏感性。     

大鼠皮层C6脑胶质瘤模型的建立

目的：为脑胶质瘤的研究提供实验基础，建立稳定可靠的动物模型。方法：借助于脑立体定位技术，在25只雄性Wistar大鼠脑S1区接种含有10g／L琼脂糖的C6细胞悬液。随机分成4个周组和1个自然死亡组后观察大鼠的生存期，并采用MRI、病理解剖、HE染色及GFAP免疫组织化学方法，动态观察各周组肿瘤生长情况。结果：在不同周组中，所有检查均显示颅内肿瘤形成，GFAP阳性。4周内无死亡，自然死亡组在第5周死亡2只、余3只于第6周死亡。结论：该方法建立的S1区脑胶质瘤模型具备与人脑胶质瘤生长相似的特性，肿瘤形成时间短，生存期稳定，且无脑外转移和颅外扩散，适合各种脑胶质瘤实验治疗研究。     

SGPL1在神经胶质瘤组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨SGPL1在神经胶质瘤组织中的表达及其对神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:在TCGA及PROGgene在线数据库中分析SGPL1在神经胶质瘤临床肿瘤组织及正常神经组织中的表达差异,并分析其表达与神经胶质瘤预后生存的关系;在神经胶质瘤细胞系U251和U87中分别敲降和过表达SGPL1,通过RT-qPCR和Western blot实验分别检测SGPL1的mRNA和蛋白表达水平;用CCK-8法、细胞克隆形成实验检测SGPL1敲降和过表达后细胞增殖变化;通过流式细胞术和caspase3/7酶活性试剂检测分析细胞凋亡变化,Western blot实验检测caspase3、PARP及CyclinD1等凋亡相关蛋白的表达;ELISA检测细胞内S1P含量;RT-qPCR检测S1PR5的表达水平;RNA-seq分析SGPL1在神经胶质瘤细胞中调控的信号通路;Western blot实验检测SGPL1敲降和过表达后Phospho-p38-MAPK、Phospho-ERK、Phospho-STAT3及Phospho-NF-κB(p65)的表达变化。结果:TCGA及PROGgene在线数据库分析表明SGPL1在神经胶质瘤组织中高表达并与神经胶质瘤患者的预后生存成负相关。在U251中敲降SGPL1后细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加;在U87细胞中过表达SGPL1后能显著促进细胞的增殖能力。SGPL1表达对S1P信号通路无明显影响;RNA-seq结果表明SGPL1在神经胶质瘤细胞内调控细胞增殖死亡信号通路,SGPL1敲降和过表达可影响p38-MAPK、ERK、STAT3及NF-κB(p65)等细胞增殖生长信号的变化。结论:SGPL1在神经胶质瘤组织中高表达并与生存预后负相关。在神经胶质瘤细胞内SGPL1可调控p38-MAPK、ERK、STAT3及NF-κB(p65)等细胞增殖生长信号通路,其表达可影响神经胶质瘤细胞的增殖和凋亡,可能是一个潜在的肿瘤标志物和治疗的分子靶点。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的：榄香烯是从姜科植物莪术中提取的抗肿瘤药物,我们应用榄香烯治疗神经胶质瘤取得了较为显著的疗效,本研究探讨榄香烯的抗胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡作用。方法：^3H-TdR掺入法检测榄香烯对鼠源性C6胶质瘤细胞及人源性SHG-44胶质瘤细胞的体外增殖抑制效应,Hoechst33258／PI荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：榄香烯能有效抑制C6／SHG-44胶质瘤细胞的恶性增殖,^3H-TdR掺入法检测榄香烯处理不同时间(1～4天)的IC50,C6细胞为7．33--11．02mg／L,SHC-44细胞为13．29～27．16mg／L。在相同药物浓度下,C6细胞较SHG-44细胞敏感。经榄香烯作用后,C6／SHG-44胶质瘤细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成,DNA直方图观察到特征性亚倍体峰(Ap峰),DNA凝胶电泳出现有明显的梯状条带。结论：榄香烯有显著的抗胶质瘤细胞增殖作用,并能诱导胶质瘤细胞凋亡。     

维生素C对神经胶质瘤的影响作用

神经胶质瘤是中枢神经系统(CNS)最常见的一类肿瘤,占了颅内原发肿瘤的35%～60%。2007年世界卫生组织(WHO)中枢神经系统肿瘤分类中将胶质瘤分为I～Ⅳ级,其中Ⅲ、Ⅳ级为恶性胶质瘤,大约占所有胶质瘤的77.5%。目前对神经胶质瘤的临床治疗采取以手术治疗为主,结合放疗、化疗等疗法的综合治疗,虽然能延长患者生存时间,但存在高复发率、高致残率、高病死率等问题,总体预后仍然较差。自20世纪70年代以来,维生素C(VC)抗肿瘤作用的研究日益进展,国外的医疗工作者已将其作为肿瘤治疗的补充和替代疗法之一,并报道了静脉注射维生素C治疗神经胶质瘤、卵巢癌、肾细胞癌、乳腺癌、大肠癌、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、膀胱癌等肿瘤的临床病例,认为其能改善患者的临床症状、提高生存质量、延长生存期。本文就维生素C对神经胶质瘤的治疗作用做一综述。     

过氧化氢与胶质瘤细胞凋亡相关性研究进展

胶质瘤发病率、复发率、病死率高,治愈率低。目前治疗以手术治疗为主,辅助以放疗和化疗等综合治疗。过氧化氢（H2O2）是需氧生物普遍具有的细胞氧代谢中间产物,在胶质瘤细胞增殖、浸润、转移的各个阶段都必不可少。研究H2O2的产生及作用、细胞凋亡的机制及H2O2与胶质瘤细胞的关系,可为寻找治疗胶质细胞瘤的靶基因提供相应的指导。     

反义硫代寡核苷酸对人脑胶质瘤细胞系转化生长因子α基因表达 …

目的 研究转化生长因子α反义寡核苷酸对人脑胶质细胞系中核ＴＧＦα基因表达的作用。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡作用的剂量和时间依赖性研究

神经胶质瘤是目前最顽固的恶性肿瘤之一,我们应用榄香烯治疗胶质瘤取得了较为显著的疗效。在临床应用中,我们发现榄香烯的治疗效果与使用途径和用药剂量有很大关系。前期体外研究已经证实,榄香烯能抑制胶质瘤细胞的恶性增殖,并诱导凋亡。我们采用流式细胞分析方法,进一步探讨榄香烯诱导凋亡与药物浓度和作用时间的关系。     

神经肿瘤干细胞在恶性胶质瘤放射治疗中的研究进展

脑胶质瘤是最常见的神经系统原发肿瘤。放射治疗是目前脑胶质瘤综合治疗最重要的治疗手段之一。然而经过放射治疗以后,部分肿瘤又会复发。随着肿瘤干细胞学说的确立,神经肿瘤干细胞的成功筛选和分离,研究者开始对其生物学特性进行了一系列基础研究,从肿瘤干细胞角度解释其放射生物学行为。放射肿瘤学研究者探求从治疗上特异于杀伤神经肿瘤干细胞,靶向作用于其相关信号转导通路,以期能为临床诊疗提供新的思路,最终使恶性胶质瘤临床放射治疗受益。     

p38MAPK在介导TNF-α诱导大鼠胶质瘤细胞凋亡中的作用

目的 :探讨p38MAPK在介导TNF α所致大鼠胶质瘤细胞C6凋亡中的作用。方法 :应用MTT法检测TNF α处理的C6细胞的增殖活性 ,采用透射电镜和流式细胞仪观察凋亡的发生 ,应用SABC法和Westernblot检测p38MAPK的表达 ,应用流式细胞仪及SABC法观察 p38MAPK特异性抑制剂SB2 0 2 1 90对TNF α诱导C6细胞凋亡的影响。结果 :TNF α(2× 1 0 5U/L)对C6细胞增殖的抑制率为 43 .75 % ,透射电镜下可见典型的凋亡细胞 ,流式细胞仪检测凋亡率为 37.5 % ,SABC法和Westernblot显示P38MAPK表达阳性 ;加入SB2 0 2 1 90后 ,其凋亡率为 7.0 % ,未见P38MAPK表达。结论 :TNF α能诱导C6细胞凋亡和 p38MAPK表达 ,p38MAPK的活化促进了C6细胞凋亡的发生     

AA861 对胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨5-脂氧合酶抑制剂AA861对胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响.方法:用含有不同浓度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)AA861的培养液培养胶质瘤U251细胞,绘制细胞生长曲线;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞抑制率;AO/EB荧光染色测定细胞凋亡率;Caspase-3活性检测试剂盒检测AA861干预后细胞内Caspase-3活性变化.结果:生长曲线及MTT法显示AA861对U251细胞增殖有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖效应;在倒置相差显微镜下,AA861诱导细胞发生凋亡形态学变化;AO/EB荧光染色显示细胞凋亡率在不同时间点及不同浓度下差异有统计学意义(P＜0.05),呈剂量和时间依赖效应;Caspase-3活性在不同时间点及不同浓度下差异有统计学意义(P＜0.05),呈剂量和时间依赖效应.结论:AA861能够抑制U251细胞的增殖,并通过Caspase-3途径诱导细胞凋亡.     

人非小细胞肺癌中蛋白激酶C βⅡ的表达与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨人非小细胞肺癌(NSCLC)中蛋白激酶C(PKC)βⅡ的表达及细胞凋亡在肺癌发生、发展中的作用.方法应用免疫组织化学LSAB法和TUNEL法检测了119例人NSCLC组织、癌旁肺组织和32例肺良性疾病肺组织中PKC-βⅡ的表达和凋亡细胞.结果(1)NSCLC组织中PKC-βⅡ表达水平(85.39%)显著高于癌旁肺组织(65.69%)和肺良性病变肺组织(53.22%)(P<0.05),癌旁肺组织中PKC-βⅡ表达水平显著高于肺良性疾病肺组织(P<0.05).NSCLC组织中凋亡指数(5.27%)显著低于肺良性疾病肺组织(15.84%)(P<0.05).(2)NSCLC组织中PKC-βⅡ的表达水平与临床病理生理特征无明显关系(P>0.05).NSCLC组织的细胞凋亡水平与肺癌P-TNM分期、原发肿瘤大小(T)及淋巴结转移状态(N)有密切关系(P<0.05),而与细胞分化程度、组织学类型,患者性别和年龄等均无明显关系(P>0.05).(3)PKC-βⅡ的表达水平与细胞凋亡水平呈显著负相关(P<0.01).结论 NSCLC中PKC-βⅡ的异常激活和细胞凋亡受抑制在NSCLC发生、发展中可能起重要作用.PKC-βⅡ介导的细胞增殖过度和凋亡受抑可能是NSCLC发生、发展的重要机理之一.     

细胞因子在胶质瘤免疫治疗中的作用

胶质瘤是中枢神经系统一种常见肿瘤。目前在胶质瘤的综合治疗方案中，包含细胞因子在内的免疫治疗倍受关注。通过皮下或颅内细胞因子输入，尤其进行联合细胞因子基因转染对胶质瘤生长的抑制以及改善胶质瘤患者的预后具有重要作用。     

甘油二酯激酶α、蛋白激酶C在肝癌组织中的表达及临床意义

 目的 研究肝癌组织中甘油二酯激酶α (Diacylglycerol Kinase α, DGKα)和蛋白激酶C（PKC）的表达及临床意义。方法 应用免疫组化检测DGKα在60例肝癌、癌周组织及10例正常肝组织中的表达,统计分析DGKα的表达与临床病理因素的关系。 结果 DGKα和PKC蛋白在正常肝组织、癌周组织和肝癌组织的阳性表达率逐渐降低,但在肝细胞的表达部位却逐渐从胞浆移至胞膜。DGKα阳性表达率的差异与原发性肝癌的分化类型、是否有门静脉癌栓和TNM分期有统计学意义(P <0.05)。结论 在越晚期、分化越差的肝癌中DGKα的活性越强,DGKα促进了原发性肝癌的病理进程。     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与脑胶质瘤

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)对于细胞的生长、分裂、分化和凋亡具有重要的调节作用。脑胶质瘤是一种严重危害人类健康的颅内恶性肿瘤,具有发病率和病死率高的特点。近年来的研究发现,MAPK信号通路在脑胶质瘤等多种恶性肿瘤组织中发生了活性改变,同时MAPK又介导了多种药物的抗肿瘤作用。本文对MAPK与脑胶质瘤的关系进行简要综述。