nm23-H1基因转染对膀胱癌T-24细胞转移能力及化疗敏感性的影响

目的 探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞侵袭转移能力及化疗敏感性的影响.方法 将nm23-H1真核表达质粒通过电击穿孔转染技术导入人膀胱癌细胞株T-24, G418筛选阳性克隆,免疫组织化学方法检测nm23-H1基因的表达情况.Transwell小室和冲刷实验观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化.MTT法检测T-24细胞转染前后对化疗药物敏感性的变化.结果 以电穿孔技术将nm23-H1基因转入T-24细胞后,获得稳定表达;免疫组织化学结果显示T-24细胞株在nm23-H1基因转染前后其表达水平有明显差异;转染后T-24细胞侵袭、粘附、趋化运动能力有明显的降低.转染后T-24细胞对顺铂(CDDP)明显增敏.结论 nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用.nm23-H1基因能增强T24细胞对顺铂的化疗敏感性.     

nm23-H1基因对口腔癌细胞化疗敏感性影响的体外实验

目的 通过nm23-H1的转化及导入人舌粘膜鳞癌细胞(Tca8l13细胞株)，观察nm23-H1对Tca8l13细胞株化疗敏感性的影响。方法 完成细胞培养和基因转染后，MTT法观察nm23-H1对Tca8l13细胞株化疗敏感性影响。结果 转染前Tca8l13细胞株对阿霉素(ADM)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、氨甲喋呤(MTX)的化疗敏感性无显著差异。但转染后的Tca8l13细胞株对顺铂(DDP)明显增敏。结论 nm23-H1可能通过特异性地影响细胞内的能量交换过程来达到对DDP化疗增敏的效果。     

E1A基因对人宫颈癌细胞化疗药物敏感性的影响

目的探讨E1A基因对人宫颈细胞化疗药物的增敏作用及其相关机制。方法E1A基因经PEI—Fe3O4纳米粒介导转染人宫颈癌细胞系，用不同浓度的顺铂、5-氟尿嘧啶和紫杉醇处理细胞。通过MTT法测绘细胞存活曲线，观察EIA基因对顺铂、5-氟尿嘧啶和紫杉醇等化疗药物敏感性的影响；用同一浓度的顺铂、5-氟尿嘧啶和紫杉醇处理细胞，观察EIA基因在不同时间对癌细胞存活率的影响。结果转染EIA基因的人宫颈癌细胞（Hela-E1A）对顺铂和紫杉醇的敏感性显著增加，与Hela和Hela—vect细胞系比较．Hela—E1A细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性分别提高了10倍和15倍；对5-氟尿嘧啶的增敏作用不明显。结论E1A基因能显著提高人宫颈癌细胞对顺铂和紫杉醇等化疗药物的敏感性。其作用机制可能是E1A基因抑制了该细胞的HER-2／neu基因的表达，使该细胞周期再分布，出现S期抑制和G2/M期阻滞。     

Nm23-H1基因对膀胱癌化疗敏感性的体外实验研究

目的: 探讨外源性人抑癌基因nm23 H1 对膀胱癌细胞系T -24 细胞化疗敏感性的影响。方法: 将nm23 -H1真核表达质粒通过脂质体转染技术导入人膀胱癌细胞株T -24,利用免疫组化及Western blot法鉴定质粒的表达。利用MTT法、流式细胞仪分析技术检测T -24细胞转染前后化疗药物对细胞增殖、细胞凋亡的变化。结果: 顺铂组(CDDP)细胞生长明显受到抑制,细胞凋亡增加;顺铂转染前后细胞凋亡指数分别为(26.51±0.98)%、(63.21±0.58)%,两者间差异有统计学意义。结论: Nm23- H1 基因能增强顺铂的化疗敏感性,为基因联合化疗药物治疗膀胱癌提供了参考依据。     

藻蓝蛋白对氨甲喋呤和顺铂的体外增效研究

用MTT法在体外培养的喉癌Hep-2细胞中观察了藻蓝蛋白对氨甲喋呤和顺铂细胞毒性的增效作用，结果表明：藻蓝蛋白与3种浓度的氨甲喋呤合用后显著增强氨甲喋呤的毒性，其增敏效果近似于异博定。藻蓝蛋白与0.1μg/ml，1μg/ml顺铂联合应用后能显著增强顺铂的细胞毒性，但对10μg/ml顺铂的增敏作用不明显。     

化疗药物对舌癌细胞增殖能力的影响

目的：观察紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂4种化疗药物对舌鳞状细胞癌细胞增殖能力的影响,以指导临床合理用药,减少药物的副作用。 方法：收集手术切除的舌癌组织,制备单细胞悬液进行培养。选择紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂4种化疗药物进行药物敏感性实验,以不加药物为对照组,通过MTT比色法和流式细胞术法观察舌癌细胞增殖抑制率和细胞周期各时相的变化。 结果：紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶对舌癌细胞增殖抑制率分别为45.3%、37.3%和36.2%,明显高于对照组（2.1%）（P<0.01）;顺铂与对照组比较差异无显著性。流式细胞术测定结果显示,紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶组与对照组比较,其G₀/G₁期细胞增多,S期细胞减少,G₂/M期细胞相对增多(P<0.01）。结论：紫杉醇、丝裂霉素和5-氟尿嘧啶能明显抑制舌癌细胞的生长,临床上应优先考虑使用。     

人金属硫蛋白1H基因对肺腺癌细胞A549耐药性的影响

目的：探讨金属硫蛋白1H（metallothionein 1H,MT1H）基因对人肺腺癌A549细胞耐药性的影响．方法：构建真核表达载体pcDNA3．1（-）-MT1H,利用脂质体介导将其转染肺腺癌A549细胞,G418筛选阳性克隆．分别以RT—PCR和Western方法检测MTIH mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测细胞对顺铂的药物敏感性;流式细胞仪（FCM）检测顺铂诱导细胞凋亡率．结果：转染pcDNA3．1（-）-MT1H的细胞,其MT1H mRNA和蛋白表达水平显著高于亲本细胞及转染空载体细胞,细胞对顺铂药物敏感性明显下降,顺铂诱导的凋亡率明显降低．结论：MT1H能促进A549细胞耐药,可能和降低顺铂诱导细胞凋亡有关．     

顺铂、5-氟尿嘧啶对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的相互作用

目的：观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤在体外对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的作用。并观察顺铂、5-氟尿嘧啶配伍对Hela细胞的相互作用。方法：采用MTT例定法观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤单用及合用对Hela细胞的影响,流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。并利用中效原理判定顺铂和5-氟尿嘧啶合用的效果。结果：顺铂和5-氟尿嘧啶单独应用时随着药物剂量增加,其抑制作用也增加,两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用(CI＞1),小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用(CI＜1)。甲氨喋呤在本实验条件下未见明显抑瘤作用。结论：顺铂和5-氟尿嘧啶合用小剂量产生协同作用,大剂量产生拮抗作用。     

nm23-H1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨nm23-H1基因与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测50例膀胱移行细胞癌组织nm23-H1基因表达。结果nm23蛋白弥散于胞浆及胞膜，nm23-H1的表达与膀胱癌的分级、分期有密切关系，有转移性癌组织nm23-H1基因表达明显高于无转移癌组织（P＜0.01）。结论：nm23-H1基因表达是一个判断膀胱移行细胞癌恶性程度有价值的指标。     

三苯氧胺对耐顺铂人肺腺癌细胞系的增敏作用

目的：研究钙通道阻断剂三苯氧胺（Tamoxifen,TAM)、异搏定（Varepamil,VRP)对人肺腺癌耐顺铂细胞系A549DDP的增敏作用。方法：MTT方法检测肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性。结果：TAM（10μm）对A549DDP细胞系有显增敏作用，使其对顺铂的敏感性增加9．6倍。谷光甘肽（Glulathion,GSH)合成抑制剂BSO耗竭细胞内GSH后，使A549DDP对顺铂的敏感性增加5倍，而TAM对细胞内GSH水平无显影响。结论：TAM对A549DDP有显的增敏作用，但并非抑制细胞解毒系统功能，其增敏作用的其他机制尚待进一步研究。     

常用抗肿瘤药物对KBV200耐药细胞株增殖抑制作用及苦参碱的耐药逆转研究

目的探讨5种常用抗肿瘤药长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、环磷酰胺对KBV200耐药细胞株的增殖抑制作用及苦参碱的耐药逆转作用.方法以喉癌KBV200耐药细胞株为研究对象,采用MTT法观察5种抗肿瘤药物对其增殖抑制作用;并采用MTT法观察苦参碱对KBV200耐药细胞株的耐药逆转作用.结果长春新碱、平阳霉素、环磷酰胺对KBV200耐药细胞株的增殖抑制作用差,而阿霉素和顺铂对KBV200耐药细胞株的抑制作用好;当苦参碱浓度大于200 μg/ml时对KBV200耐药细胞株具有直接抑制作用;苦参碱逆转KBV200耐药细胞株对长春新碱、阿霉素耐药的作用较强,逆转KBV200耐药细胞株对平阳霉素、顺铂、环磷酰胺的耐药作用较弱.结论 KBV200耐药细胞株对长春新碱、平阳霉素、环磷酰胺3种药物有不同程度耐药;苦参碱能逆转KBV200耐药细胞株对长春新碱、阿霉素的耐药.     

nm23-H1基因对口腔癌Acc-M细胞株的转移能力及化疗敏感性影响的体外研究

目的　通过 nm2 3- H1的转化及导入 Acc- M细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察 nm2 3- H1对 Acc- M细胞株侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法　采用基因转化技术 ,制备高纯度的 nm2 3- H1真核表达质粒。用阳离子脂质体介导的转染技术 ,将 nm2 3- H1基因转染到口腔腺样囊性癌 Acc- M细胞株。用免疫组化技术检测转染前后的 nm2 3- H1的表达。并用 transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。采用 MTT法观察 nm 2 3- H1对 Acc- M化疗敏感性影响。结果　 1使用重组的 p CMV - Neo- Bam的真核表达载体 ,将 nm 2 3- H 1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达。 2 Acc- M细胞株 nm2 3- H 1基因的转染前后表达水平有明显差异。 3转染后的 Acc- M细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。 4转染前后使用 C- DDP的 L D50 分别为2 .6 4± 0 .4 7,1.85± 0 .4 1(P<0 .0 1)。结论　 nm2 3- H1对 Acc- M细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用 ,同时具有对铂类药物的化疗增敏功能     

SGC7901细胞对化疗药物的敏感性研究

目的 了解胃腺癌细胞株SGC7901细胞对不同化疗药物的敏感性,为临床选择化疗药物提供信息. 方法 分别用5氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、表阿霉素、丝裂霉素、环磷酰胺的常规用药峰浓度孵育SGC7901,采用MTT法,测量孵育前后细胞的吸光度,计算各化疗药物对SGC7901细胞的抑制率. 结果 在常规峰浓度时对SGC7901细胞的抑制率分别为: 5氟尿嘧啶57.4%、阿霉素56.4%、顺铂39.8%、表阿霉素38.0%、丝裂霉素92.2%、环磷酰胺15.0%. 结论 SGC7901对化疗药物的敏感性依次为丝裂霉素、5氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、表阿霉素及环磷酰胺.达到50%以上抑制率的药物只有丝裂霉素、5氟尿嘧啶、阿霉素.     

Effect of all-trans retinoic acid on drug sensitivity and expression of survivin in LoVo cells

Background All-trans retinoic acid （ATRA） can influence the tumor cell proliferation cycle, and some chemotherapeutic drugs are cycle specific. In this study, we hypothesize that ATRA can enhance chemotherapeutic drug sensitivity by affecting the cell cycle of tumor cells.
Methods The cell cycle of LoVo cells was evaluated using flow cytometry （FCM）. Cell viability was analyzed using the MTT assay. The morphologic changes in the treated LoVo cells were measured with acridine orange （AO）/ethidium bromide （EB） staining. Expression of survivin in LoVo cells was analyzed by immunofluorescence assay.
Results After LoVo cells were treated with ATRA, the G0/G1 ratio of the tumor cells increased and the cell ratio of S-and G2/M-phase decreased. Viability of the cells decreased significantly after combined treatment with ATRA and 5-fluorouracil （5-FU） or mitomycin c （MMC） and was evaluated by fluorescence microscopy. Expression level of survivin in the tumor cells decreased after ATRA combination treatment.
Conclusions ATRA enhances drug sensitivity of the LoVo cell line to cell cycle-specific agents and inhibits the expression of survivin in LoVo cells. The combination of ATRA and 5-FU or MMC promoted cell apoptosis, and the mechanism involved in apoptosis may be related to inhibition of survivin gene expression.     

抗肿瘤药物与维拉帕米联合对KBV200细胞P-糖蛋白表达的影响研究

目的：探讨6种常用抗肿瘤药物长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、5-Fu、环磷酰胺与维拉帕米联合对KBV200细胞P-糖蛋白表达的影响.方法：以喉癌KBV200细胞株为研究对象,通过流式细胞术检测6种抗肿瘤药物作用KBV200细胞的P-糖蛋白表达以及联合维拉帕米对P-糖蛋白表达的影响.结果：维拉帕米分别与长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺联合作用,使KBV200细胞的P-糖蛋白表达下降80.17%、89.69%、19.19%及53.48%.其中维拉帕米与长春新碱、阿霉素作用较强.结论：维拉帕米分别与长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺联合作用后,P-糖蛋白的表达水平明显下降,对KBV200细胞耐药性的逆转有一定作用.     

苦参碱与8种抗肿瘤药联合对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响

目的探讨8种常用抗肿瘤药物长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、5一氟尿嘧啶、环磷酰胺、阿糖胞酐,三尖杉酯与苦参碱联合对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响。方法以喉癌KBV200耐药细胞株为研究对象,通过流式细胞仪（FCM）检测8种抗肿瘤药物分别联合苦参碱对KBV200细胞株细胞周期的影响。结果苦参碱加顺铂组使KBV200耐药细胞株G0～G1期细胞下降,G2～M期细胞升高;苦参碱加阿糖胞酐组使KBV200耐药细胞株G0～G1期细胞升高,G2～M期细胞下降;苦参碱加5-Fu组对KBV200耐药细胞株的凋亡作用加强;苦参碱与长春新碱、阿霉素、三尖杉酯、环磷酰胺、平阳霉素联合个组中,对KBV200耐药细胞株细胞周期及凋亡均无明显变化。结论苦参碱分别与顺铂和阿糖胞酐联合作用后,均可影响KBV200耐药细胞株的细胞周期。     

人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及其生物学特征

目的 建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系SPC-A-1为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP;MTT法测定药物敏感性,透射和扫描电镜观察形态变化,常规染色体检测分析染色体变化。结果 用192d建成人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP,它对顺铂的耐药指数为11.2,对顺铂、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、长春新碱和足叶乙甙等药物有不同程度的耐药性,但对羧基喜树碱无耐药性,电镜观察可见SPC0-A-1/CDDP细胞胞核不规则,较大,有丰富的微绒毛。结论 本研究建立了稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系（SPC-A-1/CDDP）,可应用于下游实验。