受者外周血中供者特异性活化T淋巴细胞频度在预测肾移植后排斥反应中的价值

在同种异体肾移植术后发生的急性排斥反应中，T淋巴细胞发挥了重要作用，参与多层次的免疫应答，包括抗原识别、免疫调节、溶细胞效应等^[1]，受者外周血中的供者特异性活化T淋巴细胞(pds T淋巴细胞)频度与排斥反应的发生呈高度相关^[2]。据此，术前检测受者外周血中供者特异性活化T淋巴细胞的频度，对预测同种异体肾移植后急性排斥反应的发生具有重要的临床意义。     

肾移植病人群体反应性抗体的检测

肾移植是治疗晚期肾功能衰竭的最佳方法,而影响移植肾存活主要原因排斥反应,尤其是超急性排斥反应及早期急性排斥反应造成移植肾不可逆损伤导致手术失败。组织配型是肾移植病人寻找合适供者,减少术后排斥反应发生,提高移植成功率和移植肾存活率的重要措施。本文对389例肾移植受者术前进行群体反应抗体(PRA)检测,探讨其与淋巴细胞交叉配合试验(CDC)和术后排斥发生的关系及该技术在临床肾移植工作中的实用价值。     

供者特异性、分泌γ干扰素的细胞的频数与术后半年及一年时移植肾功能的关系

目的探讨肾移植患者体内供者特异性、分泌γ干扰素（INF-γ）的细胞的频数（以下简称“供者特异性细胞频数”）与急性排斥反应和移植肾功能的关系。方法分别于肾移植前及术后1、2、3、4氐8、12、16、20和24周时采集患者（48例）的外周血，分离出淋巴细胞，以酶联免疫斑点实验（ELISPOT）检测供者特异性细胞频数，测定术后6个月和12个月时血肌酐和肾小球滤过率。结果41例术后未发生急性排斥反应者，其术前供者特异性细胞频数小于150／500000，7例术后发生急性排斥反应，3例（42．9％）术前供者特异性细胞频数超过150／500000。术后第2、3周时的供者特异性细胞频数与术后半年和1年时的血肌肝水平呈显著正相关，而与术后半年和1年时的肾小球滤过率呈显著负相关（P〈0．05）；术后第6个月时供者特异性细胞频数与血肌肝水平（术后第6个月及第12个月）具有相关性，但不具有统计学意义。结论术前测定供者特异性细胞频数可以为判断受者对供者特异性免疫反应能力提供一定依据；术后早期监测患：苦体内供者特异性细胞频数可以预测患者发生亚临床型排斥反应所导致的移植物损伤的危险性。     

定期检测肾移植患者尿中供者细胞DNA的临床意义

目的 探讨肾移植患者尿中供者细胞的出现与急性排斥反应的相关关系及其临床意义。方法 以供者为男性、受者为女性或HLA—DB抗原有错配的80例肾移植患者为研究对象，定期收集尿液标本，从中提取DNA，利用聚合酶链反应及序列特异性引物—聚合酶链反应分别检测Y染色体上特异的基因片段DYZ—l和HLA-DR抗原的基因DRB1。结果 手术当天受者的尿中即有供者细胞出现，随着时间的推移，尿中供者细胞DNA的基因表达强度逐渐减弱，直至术后30d，仍有90．0％患者的尿中有供者细胞DNA的基因表达，其中8例(29．6％)发生了急性排斥反应；出院后发生急性排斥反应者，90．0％的尿液标本中能检测到供者细胞DNA，抗排斥治疗结束后2周，83．3％仍为阳性，治疗过程中尿中供者细胞DNA的基因表达强度逐渐减弱，直至3个月后，88．9％转为阴性；肾功能良好的稳定期患者，仅6．7％的患者尿中DYZ—l或HLA-DRB1基因阳性。结论 肾移植患者尿中供者细胞DNA的检测可以作为诊断急性排斥反应，并与药物性肾功能损伤进行鉴别的一种方法，其基因表达强度变化为定量评价排斥反应提供了可能性。     

猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学特点

目的 观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点.方法 建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型(供、受者各3只).检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化.并在发生排斥反应时对移植肾进行免疫组织化学(测定补体、抗体的沉积及各类型淋巴细胞浸润情况)及病理学分析.结果 3只受者均发生了加速性排斥反应.其中2只受者在预致敏后血清中供者特异性抗体明显增加,对供者的淋巴毒反应明显升高;肾移植后受者血清中供者特异性抗体及针对供者的淋巴毒进一步升高.苏木精-伊红染色显示排斥反应的移植肾内有明显的动脉坏死、血栓形成、间质出血、中性粒细胞浸润;免疫组织化学及荧光染色显示移植肾内有大量的补体、抗体沉积(主要为IgG),而各种类型的淋巴细胞浸润少见.另1只受者体内的供者特异性抗体及对供者淋巴毒反应的升高程度不如前2只明显,病理学变化以肾小管损伤为主.结论 皮肤移植预致敏可以诱导受者产生程度不等的预存抗体,导致大多数移植肾在术后早期发牛主要南抗体和补体介导的严重的急性体液性排斥反应.     

肾移植术后的巨细胞病毒感染及其对急性排斥反应的影响

目的 探讨肾移植受者术后活动性巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染的发生率、感染的原因以及ＣＭＶ感染对急性排斥反应的影响。方法 检测１８７例肾移植受者和供者术前血清抗－ＣＭＶ抗体;受者术后定期检测体内ＣＭＶ ＤＮＡ、对ＣＭＶ ＤＮＡ阳性的部分患者给予抗ＣＭＶ治疗,并比较各组排斥反应的发生率。结果 无论是供者还是受者,术前如血清抗－ＣＭＶ抗体阳性,受者术后发生活动性ＣＭＶ感染者明显增多,这些患者急性排斥反应的发     

灵长类动物预致敏后肾移植加速排斥反应模型的建立

目的 建立灵长类动物预致敏后肾移植加速排斥反应模型.方法 取血型相容的正常猕猴配对,预先将供者腹部全层皮肤移植到受者背部,使受者预致敏.2周后再将同一供者的左侧肾脏移植到受者腹腔内,间时切除受者自体双肾,术后予以环孢素A、霉酚酸酯和泼尼松治疗(致敏用药组),不用免疫抑制剂者为对照(致敏对照组),以未致敏的肾移植作为对照组.术后观察受者血肌酐变化、移植物存活时间及病理特点.结果 对照组的4只移植肾存活时间分别为9、18、8、7 d;致敏对照组的3只移植肾存活时间分别为3、3、4 d;致敏用药组的3只移植肾存活时间分别为2、3、4 d.移植皮肤于术后10 d出现排斥反应,至术后14 d被完全排斥.对照组于肾移植1周以后才发牛排斥反应,而致敏者均在肾移植后3 d左右发生较严重的排斥反应.结论 受者被供者皮肤预致敏后再行肾移植,可以加速移植物的排斥,且不能被环孢素A、霉酚酸酯及泼尼松所组成的三联免疫抑制方案逆转.     

供犬脾灌注对特异性致敏犬移植肾功能的影响

目的探讨供犬脾灌注对特异性致敏犬移植肾的免疫保护作用。方法雄性家犬作为肾移植的供、受者。首先采用供者淋巴细胞多次输注诱导18只受者致敏后，随机平均将致敏受者分为3组。特异性脾灌注组：用加工过的人用血液透析穿刺管将同一供者的离体脾动、静脉与受者的腹主动脉及下腔静脉连通后开放血流（血流量约18-25ml／min），充盈后轻揉脾脏，灌注40min，然后用同一供肾行肾移植术；非特异性脾灌注组：离体脾灌注以及肾移植的方法与特异性脾灌注组相同，不同的是供脾和供肾均来自于无关供者；对照组：开腹旷置40min后，同法行肾移植。监测脾灌注前、后各组受者微量淋巴细胞毒（CDC）试验和混合淋巴细胞培养（MLC）的变化；观察供者脾灌注对受者移植肾排斥反应发生和肾功能的影响。结果各组受者均在输注淋巴细胞3～4次后诱导致敏成功。特异性脾灌注可以显著降低受者CDC配型水平和MLC淋巴细胞增殖水平，使受者外周血白细胞计数一过性减少，总补体溶血活性（CH50）下降。肾移植术后特异性脾灌注组移植肾肾小球滤过率下降较非特异性脾灌注组和对照组缓慢；病理检查提示术后特异性脾灌注组移植肾排斥反应较非特异性脾灌注组和对照组为轻。结论供者脾灌注可以特异性吸附毒性抗体，使外周血激活淋巴细胞归巢，耗竭血小板，从而延缓特异性致敏受者肾移植后排斥反应的发生，改善移植肾功能。     

肾移植术后供者特异性抗体对移植肾近期效果的影响

目的 评价肾移植术后供者特异性抗体(Ds-Ab)对移植肾近期效果的影响。方法 对2001年1月至2002年7月间进行尸肾移植的92例受者，使用酶联免疫吸附(ELISA)法，检测受者血清中HLA抗体水平，随访1年。结果 16例(17．4％)受者术后出现供者特异性抗体。抗体阳性组急性排斥发生率(56．3％)高于抗体阴性组(11．9％)，P=0．000；移植肾功能延迟恢复的发生率(12．5％)与抗体阴性组(9．2％)比较，差异无显著性，P=0．102；供者特异性抗体阳性组受者发生急性排斥后，移植肾肌酐水平高于抗体阴性组或无急性排斥组。结论 供者特异性抗体与肾移植术后急性排斥有关，可能影响近期移植肾功能。     

儿童肾移植术后新生供者特异性抗体介导排斥反应1例

回顾性分析华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的1例儿童肾移植术后新生供者特异性抗体(de-novo donor specific antibody, dnDSA)介导排斥反应的临床资料。对儿童移植术后dnDSA产生的风险因素与预防策略、晚期发生的抗体介导排斥反应的临床特点和治疗体会进行总结和分析。     

亲属活体肾移植101例分析

目的 总结16年亲属活体肾移植的经验。方法 101例亲属活体肾移植，除3例为夫妻间供肾外，其余为血缘亲属供肾。供、受者为同卵孪生2例，HLA全配24例，HLA单倍体相同69例，HLA有5个抗原错配者4例，HLA完全错配者2例。73例取供者右肾，28例取左肾；100例经开放手术取肾，1例经腹腔镜取肾。术后采用环孢素A（或他克莫司）、硫唑嘌呤（或霉酚酸酯）及泼尼松预防排斥反应。结果 所有供者术后1周内出院，随访6个月，血肌酐正常。术后96例受者存活，存活时间最长者达15年，其中4例移植肾功能丧失，其原因分别为超急性排斥反应（1例，术中切除肾脏）、慢性移植肾肾病与肾病复发（3例）；5例死亡，除1例术后发生移植肾功能恢复延迟，透析期间因肺出血死亡外，另4例死亡与移植肾无关。术后5例发生急性排斥反应，4例Banff分级为Ⅰ级，经甲泼尼龙冲击治疗，4例逆转，1例无效，恢复透析治疗。术后2例发生尿瘘，5例发生移植肾输尿管慢性梗阻，经手术治疗痊愈。结论 术前对供、受者进行全面综合评估是亲属活体肾移植成功的保证；亲属活体肾移植的组织配型好，供肾缺血时间短，排斥反应发生少，免疫抑制剂用量小，移植肾长期存活率高。     

肾移植受者术后早期巨细胞病毒感染及其影响

同种异体肾移植受者巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染十分普遍，而且有大量迹象表明其感染可能是诱发急慢性排斥反应的重要原因［１］。我院１９９６年１２月～１９９８年７月检测了１６２例肾移植受者及其供者术前ＣＭＶ血清抗体和受者术后体内ＣＭＶＤＮＡ，部分患者给予抗病毒治疗，并比较各组排斥反应发生率。１．资料与方法：患者为首次行同种异体肾移植且未发生超急性排斥反应、术后１个月内肾功能恢复正常、肾存活不少于３个月。本组共有１６２例，男９７例，女６５例，年龄１３～６９岁，供受者为同血型，Ｔ淋巴细胞毒试验均为阴性。（１…     

供者特异性抗体监测在肾移植中的应用

目的 研究肾移植术后受者血清中供者特异性抗体（DSA）与发生急性排斥反应的关系,为临床早期诊断、合理制定个体化治疗方案、评估疗效提供客观的参考依据.方法 选取2012年1月至2013年8月西安交通大学医学院第一附属医院肾病医院肾移植科285例首次肾移植受者,术后动态监测DSA水平,检测时间点为术后3,5,7,14,21,30,60,90 d.观察受者肾功能和急性排斥反应发生情况.使用卡方检验或Fisher精确概率法比较不同HLA抗体类型的受者急性排斥反应发生率.结果 285例肾移植受者术后初筛人类白细胞抗原（HLA）抗体阳性率为22.11％ （63/285）,其中DSA阳性4例.急性排斥反应发生率6.67％ （19/285）.HLA抗体阴性受者和HLA抗体阳性且DSA阴性受者急性排斥反应发生率分别为3.15％ （7/222）和16.95％ （10/59）,二者相比差异有统计学意义（x2=12.891,P＜0.05）;4例DSA阳性受者有3例发生急性排斥反应,与HLA抗体阴性、HLA抗体阳性且DSA阴性受者急性排斥反应发生率相比,差异均有统计学意义（P=0.000和P=0.016）.19例发生急性排斥反应受者经甲泼尼龙、兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白冲击治疗或血浆置换等治疗后,15例受者成功逆转,1例死于并发症.结论 动态监测肾移植术后受者DSA水平,可预测移植肾功能状态,对急性排斥反应的发生有重要预警作用,有利于及时清除或降低DSA水平,对有效预防和及时诊治排斥反应具有重要作用。     

72例肾移植受者术后排斥反应发生状况的调查

目的 比较不同肾源及免疫治疗方案的肾移植术后排斥反应发生状况,寻找可有效监测排斥反应的观测指标.方法 回顾分析北京大学第一临床医学院72例进行肾移植术后,发生排斥反应的状况.结果 亲属肾移植与尸体肾移植,CsA+MMF+Pred和FK506+MMF+Pred两种免疫治疗方案的肾移植受者,术后1年内排斥反应发生率都无统计学差异(P>0.05);血压和体温能有效监测排斥反应.结论 肾移植术后仍需做好监测、护理工作,减少排斥反应的发生.     

术前受者外周血中抗原特异性单个效应细胞频数对急性排斥反应的影响

目的探讨术前受者外周血抗原特异性单个效应细胞频数与肾移植后急性排斥反应的关系。方法采用酶联免疫斑点实验方法,检测8名健康志愿者及25例肾移植受者术前外周血淋巴细胞经同种异体抗原刺激后分泌特异性细胞因子(γ干扰素、白细胞介素2、白细胞介素4和白细胞介素5)的单个效应细胞频数,并对25例受者肾移植后的情况进行随访,时间至少为半年。结果8名健康志愿者外周血中分泌γ干扰素(INFγ)的细胞的频数最高,为15/500000～120/500000,其频数在连续4个月内相对稳定。受者术前体内存在的供者特异性的、分泌INFγ的细胞频数与供、受者间HLA配合情况无关;25例肾移植受者中,21例移植术后均未发生急性排斥反应,其术前供者特异性的、分泌INFγ的细胞频数除2例外,均低于40/500000;4例术后发生急性排斥反应,术前供者特异性的、分泌INFγ的细胞频数分别为86/500000、104/500000、128/500000及264/500000。结论移植术前测定受者体内供者特异性的、分泌INFγ的细胞频数可以作为评估受者针对供者的特异性免疫反应能力的方法之一,并为术后急性排斥反应的防治提供参考。     

活体亲属肾移植19例报告

目的探讨活体亲属肾移植的临床应用价值。方法回顾性分析我院2002年2月～2006年5月完成的19例活体亲属肾移植的临床效果。结果19例供者术中均未输血，术后未发生严重的并发症，于术后7～10天出院。术后随访1～51个月，平均28个月，复查肝、肾功能均正常。19例受者术后随访1～51个月，平均28个月，其中16例术后3～5天肾功能恢复正常，3例于术后3周内肾功能恢复正常。2例发生急性排斥反应，其中1例经激素冲击治疗后逆转，另1例激素治疗无效，改用抗人血淋巴细胞球蛋白治疗10天后逆转。1例为同卵双生兄弟之间肾移植，术后仅用激素治疗3周，未用其他免疫抑制剂，未发生急性排斥反应。2例术后情况良好，半年后自行减量乃至停用免疫抑制剂，导致急性排斥反应，经激素冲击治疗后好转。1年人／肾存活率为100％。结论活体亲属肾移植安全可行；受者人／肾存活率高。     

供者DC介导的淋巴细胞反应在肾移植后个体化免疫抑制治疗中的作用

目的 探讨根据供者骨髓源性树突状细胞(DC)介导肾移植受者淋巴细胞反应指导肾移植术后免疫抑制剂个体化应用的价值。方法 2008年1月至2010年1月间接受亲属活体供肾移植者30例,根据药物剂量调整依据的不同分为试验组和对照组,每组各15例,免疫抑制方案同为他克莫司(Tac)+吗替麦考酚酯(MMF)+皮质激素。试验组术后根据受者淋巴细胞对供者DC的反应强度,结合血Tac、MMF浓度调整药物剂量;对照组术后仅根据血药浓度调整药物剂量。术后每月检查肝功能、肾功能、血常规、尿常规、血糖,随访时间为1年。结果 随访期内试验组急性排斥反应的发生率为13.3％,对照组为46.7％(P＜0.05);试验组和对照组的感染发生率分别为6.7％和40.0％(P＜0.05);试验组和对照组不良反应的总体发生率分别为13.3％和46.7％(P＜0.05)。两组各时间点的血清肌酐的差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 利用供者骨髓源性DC介导肾移植受者淋巴细胞反应结合治疗药物血药浓度监测作为免疫监测指标,指导肾移植术后免疫抑制剂个体化应用,较仅利用血药浓度监测更全面、准确。     

群体反应性抗体在肾移植中的意义

目的 研究群体反应性抗体（ＰＲＡ０在肾移植中的意义。方法 对１７８例肾移植患者进行了术前、术后ＰＲＡ检测。结果 肾移植术前ＰＲＡ阳性患者有２３例,肾移植术后发生急性排斥反应的为２０例。术后ＰＲＡ阳性受者５８例,发生排斥反应的有３４例。移植前后ＰＲＡ阴性患者有１０８例,有８例发生排斥。在肾移植患者中所产生的抗ＨＬＡ抗体的频率和ＨＬＡ抗原的分布不同。结论 ＰＲＡ检测对预测移植肾排斥有重要意义。     

肾移植联合造血干细胞移植诱导治疗七例

目的 探讨肾移植联合造血干细胞移植诱导治疗的安全性和有效性,并总结其经验.方法 2009年实施7例亲属活体肾移植联合造血干细胞移植,其中1例为供受者HLA抗原全相合,其余为半相合.肾移植前5d使用粒细胞集落刺激因子动员供者造血干细胞,术前1d采集供者造血干细胞.肾移植前3d受者开始接受全身淋巴照射,连续3d,肾移植术中给予受者抗胸腺细胞球蛋白50 mg,术后第2、4、6天输注供者造血干细胞.术后常规采用三联免疫抑制方案,监测受者血常规、淋巴细胞亚型变化及移植肾功能等情况.结果 全身淋巴照射后受者淋巴细胞数进行性降低,以B淋巴细胞(CD19+)的比例下降幅度最大,其他血细胞数量变化不大.HLA全相合受者诱导出30％～50％的嵌合体,其余受者仅诱导出1％～5％的嵌合体.术后随访3年,7例受者移植肾功能稳定,均未出现骨髓抑制和移植物抗宿主病,未增加感染风险.经移植肾活检证实,1例受者出现轻度急性排斥反应,其余6例受者未发生排斥发生.7例受者中,有3例减少了免疫抑制剂的用量.结论 肾移植联合造血干细胞移植诱导治疗的方案安全、有效.     

大鼠肾移植急性排斥反应时移植物中基因表达的研究

目的全面认识肾移植急性排斥反应早期移植物内基因表达改变，为进一步探讨肾移植急性排斥反应的发病机理、寻找早期诊断指标提供实验依据。方法以F344大鼠为供者，近交系Lewis大鼠为受者，建立大鼠原位肾移植急性排斥反应模型（同种异体移植组），以近交系Lewis大鼠间肾移植为对照（近交系移植组）。观察术后3、7和14d时的移植肾组织病理学改变，并利用基因芯片技术检测7d时移植物中基因表达水平，获得其表达谱。结果急性排斥反应早期存在大量基因变化，在丽个通道均有有效杂交信号的基因中，上调的有48条，其中7于扰素诱导GTP酶基因上调最为显著。结论移植物排斥反应是个多途径连续衍变的动态不平衡过程，诸多促进排斥与保护因子并存，很难以单一标志物对肾移植急性排斥反应进行早期诊断，但同时通过多个标志物来综合分析还是有一定可能性的。