脑星形胶质细胞瘤组织P21^WAF1／CIP1mRNA的表达与p53？…

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ２ｍＲＮＡ的表达与ｐ５３基因突变的关系及其意义。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：ｐ５３基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ〈０．０５）；Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～     

脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1的表达和意义及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系

目的 研究脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)的表达和意义,以及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系.方法 202例脑胶质瘤患者,经病理检查进行脑胶质瘤病理分级及组织类型分型.采用免疫组化染色法检测脑胶质瘤组织中TK1和Ki67的表达.比较不同级别及类型患者脑胶质瘤组织中TK1表达的阳性率;分析TK1与Ki67表达的关系.结果 本组患者脑胶质瘤按WHO分级:Ⅰ级12例,Ⅱ级85例,Ⅲ级60例,Ⅳ级45例;组织类型分型:少突胶质细胞瘤28例,星形胶质细胞瘤174例.本组患者TK1阳性119例(58.9％);其中良性组(WHO Ⅰ级)患者无TK1阳性,低度恶性组(WHO Ⅱ级)阳性31例(36.5％),高度恶性组(WHO Ⅲ、Ⅳ级)阳性88例(83.8％);三组间TK1阳性率比较差异均有统计学意义(P ＜0.05 ～0.001).星形胶质细胞瘤及复发患者的TK1阳性率分别显著高于少突胶质细胞瘤和初发的患者(均P＜0.05).TK1与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.711,P＜0.01).结论 恶性程度高、星形胶质细胞瘤及复发的脑胶质瘤患者瘤组织中TK1的表达增高;提示TK1表达可作为脑胶质瘤病理分级、分型及复发的重要参考指标.TK1与Ki67正相关,提示TK1亦可反映脑胶质瘤细胞的增殖情况.     

脑星形细胞瘤P~(53)抗癌基因突变的研究

目的研究Ｐ５３抗癌基因突变与脑星形细胞瘤恶性程度的关系。方法采用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析法检测了３１例星形细胞瘤患者Ｐ５３抗癌基因的突变情况。结果（１）９例存在突变，突变区域分布于第５～８外显子中，以第６外显子突变率最高，第９外显子未测得突变病例。（２）２例存在多点突变，其中１例同时存在第５、６外显子突变，另１例同时存在第６、７外显子突变。（３）病理级别为Ⅰ、Ⅱ级组的突变率为０，Ⅲ级组的突变率为３６．４％，Ⅳ级组的突变率为５０％。Ⅲ、Ⅳ级组与Ⅰ、Ⅱ级组的突变率比较，均存在极显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论Ｐ５３基因的突变和星形细胞瘤的恶性程度有关     

人脑胶质瘤 IDH1基因突变与临床病理类别的关系

目的探究不同病理类型和级别的胶质瘤患者中异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）基因突变情况及其临床意义。 方法选取厦门大学附属第一医院神经外科自2014年1月至2017年9月收治并实施手术的胶质瘤患者76例,通过免疫组化检测并鉴定各病理组织样本中IDH1基因突变情况,分析不同病理类型、不同WHO级别和不同年龄患者IDH1基因突变率。 结果76例胶质瘤标本中,共检出37例IDH1基因突变,总突变率48.68%。各种病理类型突变率由高至低分别为：弥漫性星形细胞瘤（71.43%）、间变型少突星形细胞瘤（71.43%）、少突胶质瘤（66.67%）、少突星形细胞瘤（66.67%）、间变型星形细胞瘤（63.64%）、胶质母细胞瘤（34.62%）。IDH1基因突变型的年龄普遍较野生型更小,其中,弥漫性星形细胞瘤、少突星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤、间变型少突星形细胞瘤及胶质母细胞瘤样本中,IDH1基因突变型患者平均年龄均低于野生型患者,差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论IDH1基因突变在WHOⅡ、Ⅲ级胶质瘤中的发生率较高,并在胶质瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

44例人脑胶质瘤P53基因突变的研究

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ直接测序研究了４４例人脑胶质瘤。发现１３例有Ｐ５３基因突变。３３例星形细胞瘤１２例有Ｐ５３基因突变。１１例非星形细胞瘤１例有Ｐ５３基因突变。ＤＮＡ直接测序证实所有突变均在Ｐ５３基因第５～８外显子，发现了一些新的突变位点，并发现在３例胶质母细胞瘤中存在Ｐ５３基因的多个位点的突变。该结果提示在大多数非星形细胞胶质瘤并不涉及Ｐ５３基因突变，Ｐ５３基因突变对星形细胞瘤的诊断有重要价值。特别是多位点的Ｐ５３基因突变可做为星形细胞瘤进展到胶质母细胞瘤的基因标志。     

儿童恶性脑胶质瘤P53与细胞增殖核抗原表达的预后价值

目的探讨Ｐ５３与细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）在儿童恶性脑胶质瘤表达的预后价值。方法采用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例儿童恶性脑胶质瘤Ｐ５３与ＰＣＮＡ表达进行回顾性研究。结果３３例儿童恶性脑胶质瘤中Ｐ５３表达阳性１５例（４５％），ＰＣＮＡ表达阳性２９例（８８％）。间变性星形细胞瘤、胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤Ｐ５３蛋白表达的阳性比例分别为５／１２、９／１６、１／５，肿瘤Ｐ５３蛋白阴性者其细胞增殖活性均较阴性者高（Ｐ＜００５）；ＰＣＮＡ标记指数与肿瘤的恶性程度呈正相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数＝０．５６，Ｐ＜００１）。Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阳性者存活率分别显著低于Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阴性者（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。结论Ｐ５３基因突变以及由此导致的细胞异常增殖与儿童恶性脑胶质瘤的发生和发展有关；ＰＣＮＡ能较好地反映胶质瘤的恶性程度，其表达检测对临床预后判定有重要参考价值。     

脑星形细胞癌P53抗癌基因突变的研究

目的：研究P53抗癌基因突变与脑星形细胞瘤恶性程度的关系。方法：采用非同位素PXCR－SSCP分析法检测 31例星形细胞瘤患者P53抗癌基因的突变情况，结果，（1）9例存在突变，突变区域分布于第5－8外显子中，以第6外显子突变率最高，第9外显子未测得突变病例，（2）2例存在多点突变，其中1例同时存在第5，6外显子突变，另1例同时存在第6，7外显子突变。（3）病理级别为Ⅰ，Ⅱ，组的突变度为0，Ⅲ级组的突变率为36．4％，IV组组的突变率为50％，Ⅲ，Ⅳ组组与Ⅰ，Ⅱ级组的突变率比较，均存在极显著差异（P＜0．01），结论：P53基因的突变和星形细胞瘤的恶性程度有关。     

增殖细胞核抗原在星形细胞瘤中表达的研究

对３３例星形细胞瘤标本进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）抗体免疫组化标记。结果表明：ＰＣＮＡ阳性细胞数随肿瘤的恶性度增高而升高，各级星形细胞瘤的ＰＣＮＡ阳性细胞数除Ⅰ级与Ⅱ级之间无显著差异外（Ｐ＞０．０５），其余各级间都有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１），而且Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间有非常显著的差异。提示星形细胞瘤ＰＣＮＡ阳性细胞数与肿瘤的分级有密切的关系，ＰＣＮＡ表达水平能较客观地反映肿瘤的恶性程度，可作为临床评价星形细胞瘤生物学行为及病人预后的参考指标。     

星形胶质细胞瘤中端粒酶活性的检测

目的:探讨原发与复发星形胶质细胞瘤中端粒酶活性情况。方法:采用ＴＲＡＰ银染法。结果:Ⅲ级及其以上恶性星形胶质细胞瘤中端粒酶活性明显高于Ⅱ级及以下胶质瘤(１/１７,５．９%)(Ｐ＜０．０５);２年内复发的胶质瘤总的阳性率(８/１１,７２．７%)明显高于原发胶质瘤的阳性率(８/２９,２７．６%)(Ｘ２＝５．０２,Ｐ＜０．０５),原发、复发胶质瘤的差别主要分布在Ⅰ－Ⅱ级星形胶质细胞瘤中。结论:端粒酶可能是促进星形胶质细胞瘤复发及恶化的主要因素之一。     

脑星形细胞瘤增殖活性的研究：FCM分析和PCNA表达的研究

目的探讨星形细胞瘤的增殖活性,及星形细胞瘤的ＤＮＡ倍体特性、细胞周期分布和增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）与病理分级的关系。方法应用流式细胞术（ＦＣＭ）和ＰＣＮＡ免疫染色对５０例星形细胞瘤新鲜组织标本进行ＦＣＭ检测以及ＰＣＮＡ阳性表达的研究。结果（１）ＦＣＭ测定结果示Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的异倍体率分别为９．１％、１２．５％、３０．８％和８０％。Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的ｓ期比例（ＳＰＦ）分别为１４．１２±４．８９％、１５．９１±１６．６４％、２５．１８±１４．８０％、４１．９２±１７．８４％。（２）正常对照组均未见ＰＣＮＡ阳性表达;Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的ＰＣＮＡ－ＬＩ分别为２８．６４±１３．７５％、４５．７５±２２．１４％、６４．３８±１９．１７％和８３．７±６．９９％。结论（１）ＦＣＭ直接评估星形细胞瘤的增殖活性,异倍体和ＳＰＦ有助于病理分级。（２）ＰＣＮＡ－ＬＩ可作为评估增殖活性的良好指标,尤其在Ⅰ级与Ⅱ级判别困难时,ＰＣＮＡ－ＬＩ具有重要价值。     

bFGF及其受体在脑星形细胞瘤中的表达及意义

检测碱性纤维母细胞生长因子（ｂＦＧ）及其受体（ｂＦＧＦ－Ｒ）在脑星形细胞瘤中的表达,并探讨其意义。方法应用ｂＦＧＦ、ｂＦＧＦ－Ｒ、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的抗血清对２６例人脑星形细胞瘤进行了免疫组织化学染色。结果（１）在星形细胞瘤中,ｂＦＧＦ、ｂＦＧＦ－Ｒ及ＰＣＮＡ均有表达,高级别星形细胞瘤中ｂＦＧＦ、ｂＦＧＦ－Ｒ及ＰＣＮＡ的表达均高于低级别者（Ｐ＜０．０１）。（２）ｂＦＧＦ分别与ｂＦＧＦ－Ｒ和ＰＣＮＡ在星形细胞瘤中的表达阳性率之间呈正相关关系,相关系数ｒｓ分别为０．６７和０．５２（Ｐ＜０．０１）。结论初步揭示了脑星形细胞瘤中ｂＦＧＦ的来源和表达特点,证明ｂＦＧＦ在肿瘤恶变过程中可能发挥重要作用。     

PTEN／MMAC1基因表达与星形细胞瘤细胞增殖的相关性研究

目的研究人脑星形细胞瘤中PTEN/MMAC1基因编码蛋白的表达和星形细胞瘤增殖的关系,探讨PTEN/MMAC1基因突变在人脑星形细胞瘤增殖中的作用。方法应用PCR-SSCP、SP免疫组织化学法检测了52例星形细胞瘤中PTEN/MMAC1基因突变及表达情况,和肿瘤细胞核增殖抗原(PCNA)增殖程度;并用SPSS10.0统计软件分析PTEN/MMAC1基因表达与PCNA的关系。结果52例人脑星形细胞瘤中,PTEN/MMAC1蛋白表达缺失率约40.4%(21/52)。PTEN/MMAC1表达与肿瘤病理分级有显著关系,其中Ⅰ-Ⅱ级阳性率约80.0%,Ⅲ级约55.0%、Ⅳ级为33.3%,各级别组PTEN/MMAC1表达的差异有显著性(P<0.01);PTEN/MMAC1表达程度与星形细胞瘤的增殖呈显著负相关(r=-0.846,P<0.01)。结论PTEN/MMAC1表达与星形细胞瘤的恶性程度有关系,恶性程度越高,病人预后越差,该蛋白水平越低,肿瘤细胞的恶性增殖越明显。     

星形细胞瘤中LGI1蛋白的表达及其临床意义

目的 通过检测星形细胞瘤组织中LGI1蛋白的表达水平,探讨其与星形细胞瘤发生、发展、恶性程度及预后的关系. 方法 应用免疫组织化学技术对50例星形细胞瘤患者肿瘤组织和12例来自于脑外伤内减压手术、高血压脑出血及脑血管畸形手术中所取的正常脑组织中LGI1蛋白的表达进行检测. 结果 肿瘤组与正常组LGI1蛋白阳性细胞百分率[(28.3±27.1)%/vs(57.3±22.9)%]比较有显著性差异(P＜0.05);低级别星形细胞瘤和高级别星形细胞瘤中LGI1蛋白阳性细胞百分率[(39.56±28.0)% vs(141±18.2)%]比较有显著性差异(P＜0.05).50例星形细胞瘤患者中肿瘤复发组与未复发组的LGI1蛋白表达阳性比率(8/27 vs 18/23)比较有显著性差异(P＜0.05);死亡组与未死亡组的LGI1蛋白表达阳性比率(4/21 vs 22/29)比较有显著性差异(P＜0.05).50例星形细胞瘤患者中LGI1蛋白表达阳性组与表达阴性组GOS评分(1.846±1.461 vs 3.917±1.640)比较有显著性差异(P＜0.05). 结论 星形细胞瘤患者肿瘤组织中存在LGI1蛋白分子低表达,推测LGI1蛋白缺失率有可能成为预测脑胶质瘤恶性程度及预后的指标之一.     

Mipu1在人脑星形细胞瘤中的表达及临床意义初步探讨

目的研究心肌缺血预适应上调蛋白1(Mipu1)在人脑星形细胞瘤中mRNA及蛋白水平的表达情况,并探讨其临床意义。方法收集24例临床上病理级别分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的脑星形细胞瘤组织标本,应用逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测Mipu1的mRNA和蛋白质表达水平。结果 RT-PCR结果显示Mipu1的mRNA的表达水平随着星形细胞瘤病理级别的升高而上调;相似,Western blot分析结果显示Mipu1蛋白表达水平也随着星形细胞瘤病理级别的升高而上调,差异有显著性(P<0.05)。结论 Mipu1在脑星形细胞瘤中表达上调,其表达水平与星形细胞瘤病理级别成正相关,可作为判别星形细胞瘤分化程度的指标之一。     

人脑星形细胞瘤中肿瘤相关抗原RCAS1的表达

目的探讨表达于SiSo细胞系上的受体结合癌抗原(RCAS1)在星形细胞瘤中的表达情况,及其与肿瘤病理分级的关系.方法用免疫组织化学方法检测RCAS1的表达,研究对象为6例正常脑组织、13例毛细胞型星形细胞瘤、25例弥漫型星形细胞瘤、20例间变型星形细胞瘤、13例胶质母细胞瘤.结果 RCAS1在人脑星形细胞瘤中的总表达率为60.1%, RCAS1的表达与肿瘤级别呈正相关(P<0.001),间变型星形细胞瘤与胶质母细胞瘤之间的阳性表达细胞计分差异有显著性(P<0.01).结论 RCAS1是人脑星形细胞瘤的新的肿瘤相关抗原,其表达与胶质母细胞瘤的形成相关.     

Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性

目的 探讨Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性.方法 应用免疫组化SP法,检测65例脑星形细胞瘤患者的肿瘤标本中Survivin、PTEN蛋白的表达.结果 不同级别间的脑星形细胞瘤Survivin 蛋白的表达阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著低于Ⅲ级与Ⅳ级(均P＜0.05);不同级别间PTEN蛋白表达的阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著高于Ⅲ级与Ⅳ级(P＜0.05,P＜0.001);两者在脑星形细胞瘤中的表达呈负相关(r=-0.5367,P＝0.002).结论 Survivin、PTEN蛋白的表达与脑星形细胞瘤形成有关,抑癌基因PTEN的突变与Survivin基因的表达可能在星形细胞瘤的恶性进展中起协同作用.     

星形细胞胶质瘤中IDH1基因突变及DNA甲基化分析

目的 分析星形细胞胶质瘤患者IDH1基因突变分布与病理级别、预后的关系;探讨DNA甲基化是否为IDH1基因调控的模式之一.方法 直接测序法检测91例星形细胞胶质瘤组织样本中IDH1的突变分布;重亚硫酸盐测序法检测9例星形细胞胶质瘤中IDH1启动子DNA甲基化水平.结果 91例星形细胞胶质瘤患者中35例存在IDH1突变(38.5％),均为R132H突变.WHO Ⅰ级肿瘤中未检测到IDH1突变;WHOⅡ～Ⅳ级原发性星形细胞胶质瘤中IDH1突变率分别为70.6％、62.1％、12.5％,突变率与病理级别呈负相关(r=0.522,P＜0.001);7例继发性多形性胶质母细胞瘤中有5例(71.4％)发生突变,突变类型与原发肿瘤一致.IDH1突变型胶质瘤患者中位生存期较IDH1野生型患者明显延长(P＜0.05).9例胶质瘤患者IDH1启动子均未检测到DNA甲基化改变.结论 IDH1突变在星形细胞胶质瘤中发生频繁,是预后改善的指标;DNA甲基化可能未参与IDH1基因表达的调控.     

脑星形细胞瘤癌基因表达

52例星形细胞瘤应用免疫组化方法,检测癌基因p~(53)、C-erbB-2及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,结果发现①p53异常表达率为41.2%(24/52),C-erbB-2过度表达率为39%(20/52),PCNA(PI>0.05)增殖指数为77%(40/52),与对照组正常脑组织对比有显著差异(P<0.001).②p53,C-erbB-2,PCNA异常表达与病理级别有明显相关性.病理Ⅲ,Ⅳ级的阳性率分别为80%(16/20),40%(8/20),100%(20/20),(P0.05);C-erbB-2阳性组,PCNA指数;0.361±0.27,阴性组PCNA指数;0.399±0.39,两组间亦无差异(P>0.05).④11例胶质增生组织有1例(9%)显示p53表达,C-erbB-2,PCNA无表达.随访3年,病变复发,病理证实为星形细胞瘤Ⅰ～Ⅱ级,C-erbB-2,PCNA表达.结果提示:①星形细胞瘤p53、C-erbB-2及PCNA的异常表达可作为星形细胞瘤恶性程度及病人预后的指标,以p53过度表达尤为重要;②3种抗体的联合应用对星形细胞瘤发病机理研究及预测早癌发生有一定价值,p53异常表达主要是影响星形细胞瘤的分化,而C-erbB-2对肿瘤进展早期起一定作用.③胶质增生的胶质细胞具有恶性表型.     

环氧化酶-2及诱导型一氧化氮合酶在星形胶质细胞瘤中的表达

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及血管内皮生长因子(VEGF)在星形胶质细胞瘤中的表达及意义。方法采用组织芯片及免疫组化技术检测12例正常脑组织、49例低级别星形胶质细胞瘤(Ⅰ-Ⅱ级)及50例高级别(Ⅲ-Ⅳ级)星形胶质细胞瘤中COX-2、iNOS及VEGF的表达。结果(1)在正常脑组织中三者均为阴性表达;随着星形胶质细胞瘤组织学分级的升高,COX-2、iNOS及VEGF的阳性表达率增加,分别为:COX-2:68%(32/47)、86%(36/42)、iNOS:58%(27/47)、82%(40/49);VEGF:44%(19/43)、70%(30/43)。(2)COX-2、iNOS及VEGF、在星形胶质细胞瘤中的表达有明显的相关性(P<0.05)。结论COX-2、iNOS及vEGF在星形胶质细胞瘤发生发展中起重要作用;COX-2、iNOS通过上调VEGF的表达来促进星形胶质细胞瘤血管形成。     

人脑胶质瘤WAF1／CIP1表达的研究

目的检测抑癌基因ＷＡＦ１／ＣＩＰ１在人脑胶质瘤中的表达。方法取４６例胶质瘤组织及１２例脑外伤组织，提取其ｍＲＮＡ，用ＷＡＦ１／ＣＩＰ１作为模板进行逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）。结果４６例胶质瘤中有１４例有ＷＡＦ１／ＣＩＰ１蛋白表达（１４／４６），表达率为３０．４％，１２例脑外伤标本全部表达（１２／１２），表达率为１００％，两组比较有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＷＡＦ１／ＣＩＰ１的缺失是脑胶质瘤发生及进展的原因之一。