桃红四物汤含药血清对巨噬细胞的影响

目的探讨桃红四物汤含药血清对巨噬细胞分泌TNF-α、TGF-β1功能的影响,阐述中药治疗激素性股骨头坏死的作用机制。方法普通级新西兰兔,♀♂各半,随机分为3组,每日灌服浓度为1 g.ml-1的桃红四物汤药液,高剂量组15 ml.kg-1、低剂量组7.5 ml.kg-1,对照组15 ml.kg-1的生理盐水,每日1次,连续灌胃2周;巨噬细胞以5×105接种于6孔板中,以坏死骨微粒制备模型组,并予以含药血清干预48 h,ELISA检测各组上清中TNF-α、TGF-β1的含量;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组巨噬细胞TNF-α、TGF-β1mRNA的变化。结果荧光定量RT-PCR和ELISA检测结果可见桃红四物汤含药血清作用下的巨噬细胞分泌的TNF-α的量较空白血清组降低,组间差异具有统计学意义(P<0.05);桃红四物汤含药血清作用下巨噬细胞分泌的TGF-β1在转录水平和蛋白水平较空白血清组均有明显的升高,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论桃红四物汤含药血清能提高巨噬细胞TGF-β1的表达,抑制TNF-α的表达,进而促进激素性股骨头坏死中骨的修复。     

二苯乙烯苷对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶及其基因的调节作用

目的探讨二苯乙烯苷（THSG）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）一氧化氮（NO）含量及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性的影响及其机制。方法培养HUVECs,分为阴性对照组和THSG 1,10,100 μmol&#8226;L－1组,用分光光度比色法检测HUVECs上清液中NO含量和eNOS活性,RT PCR法检测HUVECs eNOS mRNA水平,Western Blot检测HUVECs eNOS蛋白表达。结果与阴性对照组比较,THSG各剂量组HUVECs中NO含量和NOS活性显著提高,eNOS mRNA和蛋白表达上调（P＜0.05）,并呈剂量依赖性。结论THSG可通过上调血管内皮细胞中eNOS表达来增加NO量,从而发挥舒张血管作用。     

利拉鲁肽对缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞释放NO的影响及机制研究

摘 要 目的：观察利拉鲁肽对缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞释放一氧化氮NO）的影响,并探讨其可能机制。方法: 采用体外分离和培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立缺氧和高糖模型,分别以利拉鲁肽、利拉鲁肽+exendin(9-39)孵育 HUVECs,通过MTT法测定各实验组细胞增殖活力、比色法测定乳酸脱氢酶(LDH )漏出量、硝酸还原酶法检测NO含量,以半定量RT PCR技术检测各组细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因表达情况。结果: 利拉鲁肽能促进缺氧和高糖状态下HUVECs细胞增殖活力,减少LDH的漏出量,促进NO的释放和eNOS基因的表达(P＜0.05或P<0.01)。胰高血糖素样肽-1（GLP-）受体阻断药exendin(9-39)可以部分抑制利拉鲁肽的上述作用（P＜0.05）。结论:利拉鲁肽能够改善缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞的内皮功能,其机制可能与上调eNOS基因表达、促进NO分泌有关。     

六味地黄方含药血清对H_2O_2致HUVECs损伤的保护作用

目的研究六味地黄方(LWDHF)含药血清对过氧化氢(H2O2)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并阐明其可能的机制。方法采用400μmol·L-1H2O2复制HUVECs损伤模型,LWDHF含药血清分为3个剂量干预组(体积分数为5%、10%、20%);MTT法测定细胞活力,Hoechst染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态,Annexin VFITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bax、Caspase-3等基因mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3、Bax等蛋白表达。结果 LWDHF含药血清能明显促进H2O2损伤后的HUVECs增殖;Hoechst染色和Annexin V-FITC/PI双染法结果均显示LWDHF含药血清抑制血管内皮细胞凋亡;RT-PCR和Western blot结果提示LWDHF抑制H2O2所致的血管内皮细胞凋亡可能是通过降低Caspase-3、Bax mRNA和蛋白的表达,升高Bcl-2 mRNA和蛋白表达实现的。结论 LWDHF含药血清可以抑制H2O2诱导的细胞凋亡,对血管内皮细胞具有一定的保护作用。     

丹皮酚对高脂血清损伤的人内皮细胞的保护作用(英文)

目的观察丹皮酚对高脂血清损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并探讨其作用机制。方法 20%高脂血清作用于HUVECs细胞24 h制备高脂血清损伤模型。丹皮酚组细胞加入20%高脂血清24 h后再分别加入丹皮酚124,247和495μmol.L-1。采用倒置显微镜观察HUVECs形态学变化;MTT法检测细胞存活率;用硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量;用RT-PCR法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。结果与正常对照组相比,模型组中大部分细胞出现片状分离和脱落,然而丹皮酚干预后细胞形态趋于正常。丹皮酚能够显著提高细胞存活率(P<0.01)。经丹皮酚124,247和495μmol.L-1干预后,细胞存活率从模型组的(53.0±10.1)%依次升高至(68.4±9.1)%,(84.5±6.7)%,(98.1±7.5)%。丹皮酚能够显著提高NO含量和eNOS mRNA水平(P<0.01)。NO含量从模型组的(54±4)μmol.L-1依次升高至79±6,115±5和(136±6)μmol.L-1;eNOS mRNA的表达水平由模型组的0.215±0.060增加至0.451±0.045,0.563±0.013,0.704±0.068。结论丹皮酚可能通过上调高脂血清损伤人脐静脉内皮细胞eNOS的表达促进NO的合成,从而发挥其对高脂血清损伤内皮细胞的保护作用。     

当归补血汤含药血清对内皮祖细胞功能及其PI3K/Akt通路影响的研究

目的 研究当归补血汤含药血清对人内皮祖细胞(EPCs)功能及其PI3K/Akt通路的影响.方法 体外培养并鉴定人外周血EPCs,制备当归补血汤含药血清,对EPCs进行不同血清或PI3K抑制剂的干预,检测EPCs的增殖、黏附、迁移、成小管功能及NO分泌量,RT-PCR检测eNOS mRNA的表达,Western blot检测Akt蛋白的表达.结果 与对照组比较,当归补血汤含药血清能促进EPCs的增殖、黏附、迁移及成小管功能(P＜0.05),促进EPCs分泌NO,上调细胞eNOS mRNA、总Akt和磷酸化Akt蛋白的表达,但这些作用均在PI3K抑制剂处理后明显减弱(P＜0.05).结论 当归补血汤可能通过PI3K/Akt通路调节EPCs的功能.     

血管紧张素Ⅱ和缬沙坦对血管内皮细胞AT_1/AT_2及eNOS表达的调节作用

目的研究缬沙坦在血管内皮细胞中对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体I型(AT1)和Ⅱ型(AT2)、一氧化氮合酶(eNOS)的表达和一氧化氮(NO)生成的影响。方法使用人脐静脉内皮细胞系ECV304(HUVECs),分为对照组、AngⅡ组、缬沙坦组和AngⅡ加缬沙坦组,作用不同时间,检测AT1AT2的mRNA和蛋白表达、eNOS的蛋白表达和NO的生成。结果在HUVECs细胞中未检测到AT2的蛋白表达,AngⅡ、缬沙坦均显著抑制细胞中AT1的mRNA和蛋白表达,且缬沙坦呈明显的剂量依赖效应,AngⅡ作用36h显著抑制NO的生成而合用缬沙坦可明显逆转该效应。结论在HUVECs中缬沙坦可通过自身的结合下调AT1,并能逆转AngⅡ长时间作用对NO生成的抑制作用,提示缬沙坦可改善血管内皮细胞的功能。     

血管紧张素Ⅱ和缬沙坦对血管内皮细胞AT1/AT2及eNOS表达的调节作用

目的：研究缬沙坦在血管内皮细胞中对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体Ⅰ型(AT1)和Ⅱ型(AT2)、一氧化氮合酶(eNOS)的表达和一氧化氮(NO)生成的影响。方法：使用人脐静脉内皮细胞系ECV-304(HUVECs)，分为对照组、AngⅡ组、缬沙坦组和AngⅡ加缬沙坦组，作用不同时间，检测AT1／AT2的mRNA和蛋白表达、eNOS的蛋白表达和NO的生成。结果：在HUVECs细胞中未检测到AT2的蛋白表达，AngⅡ、缬沙坦均显著抑制细胞中AT1的mRNA和蛋白表达，且缬沙坦呈明显的剂量依赖效应，AngⅡ作用36h显著抑制NO的生成而合用缬沙坦可明显逆转该效应。结论：在HUVECs中缬沙坦可通过自身的结合下调AT1，并能逆转AngⅡ长时间作用对NO生成的抑制作用，提示缬沙坦可改善血管内皮细胞的功能。     

桃红四物颗粒的初步药效学研究

目的 对复方桃红四物汤颗粒(TSG)的药效学作出初步评价并比较传统水煎液桃红四物汤(TSD)作用的差异。方法 通过复制急性血瘀证大鼠模型,治疗组通过给予不同剂量的桃红四物颗粒和一定剂量的阳性对照药,观察模型建立的情况,检测相关血液流变学和生化指标,探究桃红四物颗粒的初步药效学情况。结果 桃红四物颗粒能够降低模型大鼠的全血黏度和血浆黏度,有效改善其血流变的功能;有效降低模型大鼠血清中内皮素-1(ET-1)的水平,升高一氧化氮(NO)的水平。结论 根据试验结果,桃红四物颗粒能够有效改善急性血瘀模型大鼠的血液流变功能,可能通过降低大鼠血清中ET-1、升高NO而发挥作用。     

益骨汤对体外培养成骨细胞增殖及分泌胰岛样生长因子I的影响

目的：探讨益骨汤含药血清对新生大鼠成骨细胞增殖及分泌的胰岛样生长因子I（IGF-I）的影响.方法：采用酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞,然后以益骨汤含药血清作用于成骨细胞,用Alamar Blue法检测成骨细胞增殖,ELISA法测定培养上清中IGF-I的含量.结果：益骨汤含药血清能促进成骨细胞的增殖,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.益骨汤含药血清作用于成骨细胞能使其IGF-I 分泌量升高,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.结论：益骨汤含药血清能够促进成骨细胞的增殖与分化,同时促进成骨细胞分泌IGF-I的作用.     

桃红四物汤辅助治疗儿童肱骨髁上骨折术后42例疗效观察

目的观察桃红四物汤辅助治疗儿童肱骨髁上骨折术后的临床疗效。方法将84例肱骨髁上骨折患儿按照随机数字表法随机分为对照组（n=42）和治疗组（n=42）,对照组给予常规手术治疗,治疗组在术后采用中药口服及熏洗。2组治疗均以30d为1个疗程。结果治疗组治疗后优良率（95．24％）显著高于对照组（78．57％）,2组比较差异有统计意义（P〈0．05）;治疗组平均住院时间及愈合时间显著短于对照组（P〈0．05）。结论中药内服及熏洗治疗儿童肱骨髁上骨折术后疗效显著,且疗程短,愈合时间短,有较好的临床研究价值,值得推广应用。     

桃红四物汤的药理学研究进展

该文从对心血管系统的作用、对骨骼的作用、对损伤血瘀证的作用、对肝脏的作用、抗肿瘤作用、对妇科疾病作用等几个方面综述了桃红四物汤的药理学研究进展,为桃红四物汤研究提供科学依据。     

基于EphrinBs/EphBs通路探讨桃红四物汤治疗带状疱疹后遗神经痛大鼠模型的作用机制 #br#

目的 观察桃红四物汤对带状疱疹后遗神经痛（PHN）大鼠模型的影响,探讨EphrinBs/EphBs通路在其中 的作用机制。 方法60只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组（采用水痘-带状疱疹病毒慢性感染法构建 PHN模型）、阳性组［建模后以普瑞巴林27 mg/ （kg·d）灌胃］、治疗组［建模后以桃红四物汤5 g/ （kg·d）灌胃］,治疗+ EphB2-Fc组［建模第3天鞘内注射EphB2-Fc 5 μg后以桃红四物汤5 g/ （kg·d）灌胃］和治疗+EphrinB2-Fc组［建模第 3天鞘内注射EphrinB2-Fc 5 μg后以桃红四物汤5 g/ （kg·d）灌胃］。采用行为学法分别在给药后1 d、7 d和14 d时检 测大鼠的机械痛阈值,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠脊髓组织中白细胞介素（IL）-1β 和肿瘤坏死因子 （TNF）-α水平,原位末端转移酶标记技术（TUNEL）法检测脊髓神经细胞凋亡,荧光法检测脊髓组织的半胱氨酸天冬 氨酸蛋白酶3（Caspase-3）活性,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测EphrinBs/EphBs通路相关蛋白EphrinB2和EphB2 的表达。 结果与空白组比较,建模后大鼠机械痛阈值明显降低,而大鼠脊髓中IL-1β、TNF-α水平、脊髓神经细胞 凋亡指数、Caspase-3活性以及EphrinB2、EphB2蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,给予桃红四物 汤治疗的大鼠在给药后7 d和14 d时机械痛阈值均明显升高（P＜0.05）,而大鼠脊髓中IL-1β、TNF-α水平、脊髓神经 细胞凋亡指数、Caspase-3 活性以及 EphrinB2、EphB2 蛋白表达水平均明显降低（P＜0.05）。给予 EphBs 阻滞剂 EphB2-Fc后大鼠脊髓组织中EphB2蛋白表达水平明显低于治疗组（P＜0.05）。以EphBs激动剂EphrinB2-Fc作用后 大鼠脊髓组织中EphrinB2蛋白表达水平明显低于治疗组,而EphB2蛋白表达水平明显高于治疗组（P＜0.05）。结 论 桃红四物汤可能通过抑制EphrinBs/EphBs通路减少炎性因子的释放和脊髓神经细胞凋亡,对PHN大鼠发挥镇 痛作用。     

高糖对HUVEC功能的影响及机制研究

目的观察葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能的影响及机制研究。方法内皮细胞培养液体外培养HUVEC,用不同浓度(10、20、30、40、50mmol/L)的葡萄糖作用于HUVEC,用NO含量、eNOS活性检测、细胞凋亡测定和细胞内ROS检测方法,观察不同浓度葡萄糖作用后的HUVEC功能活性的影响。结果高糖对HUVEC的增殖活性具有剂量依赖性抑制作用。高糖剂量依赖性抑制HUVEC细胞eNOs活性、NO的产生,增强细胞凋亡和细胞内ROS的生成。结论葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能具有抑制作用,其机制与增强细胞凋亡和增加细胞内ROS有关。     

Screening of active ingredients of Taohong Siwu Decoction on platelet membrane receptor

OBJECTIVE To screen the active ingredients preventing platelet aggregations from Taohong Siwu Decoction. METHODS Fresh blood from healthy adult volunteer was collected with vacuum tube for preparation of platelet suspension. Platelet suspension was incubated with Taohong Siwu Decoction for one hour at 37℃,then centrifuged. The precipitate was washed and desorbed with buffer solutions.The differences of chemical constituents between incubated and unincubated were identified with high performance liquid chromatography-diode array detector. RESULTS According to the chromatograph at 254 nm,at least three kinds of different components were detected in Taohong siwu decoction before and after incubated with platelet. CONCLUSION Platelet suspension can be used for screening active ingredients on platelet membrane receptor from the traditional Chinese medicine.     

超高压液相色谱法同时测定桃红四物汤中四种主要有效成分的含量

目的建立同时测定桃红四物汤(taohong siwu decoction,TSD)中芍药苷、羟基红花黄色素A、梓醇和阿魏酸的方法。方法超高压液相色谱法。结果四种成分能达到基线分离。芍药苷、羟基红花黄色素A、梓醇和阿魏酸在0～300 mg.L-1范围内浓度与响应值均呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6);平均回收率:芍药苷为99.4%,RSD=1.69%(n=6);羟基红花黄色素A为99.8%,RSD=1.83%(n=6);梓醇为99.6%,RSD=1.90%(n=6);阿魏酸为99.9%,RSD=1.58%(n=6)。结论该法简便、灵敏、准确,可作为桃红四物汤的质量控制方法。     

Activation and up-regulation of nitric oxide synthase in human umbilical vein endothelial cells by polycyclic aromatic hydrocarbons

PAHs, including naphthalene, fluoranthene and fluorene rapidly induced extracellular Ca(2+) influx and hence elevation of intracellular Ca(2+) concentration and NO production. The effect can be inhibited by Ca(2+) channel blocker but not by P450 inhibitor. In addition to the rapid effect, we have also found that the eNOS mRNA and protein expression were augmented in HUVECs treated with PAHs at concentration as low as 0.1 microM for 24 h. These effects were abolished when the HUVECs were pretreated with the BAPTA, NiCl(2) and SKF96365, as well as SKF525A. Our results revealed that, for the first time, PAHs induce the activation of eNOS and enhance eNOS protein expression in HUVECs both in a Ca(2+)-dependent manner.