短发夹状RNA对卵巢癌细胞survivin mRNA表达及紫杉醇药物敏感性的影响

目的观察表达短发夹状RNA(shRNA)的mU6/survivin质粒转染卵巢癌细胞株OVCAR3细胞后,对OVCAR3细胞survivin mRNA表达的抑制作用,以及对OVCAR3细胞紫杉醇药物敏感性的影响。方法将表达绿色荧光蛋白的pEGFPC2质粒与脂质体按不同比例转染OVCAR3细胞,流式细胞仪检测其转染效率。根据转染效率最高时pEGFPC2质粒与脂质体的比例,将mU6/survivin质粒转染入OVCAR3细胞。实验分为3组未转染组、脂质体组、转染组,RT-PCR技术检测3组OVCAR3细胞中survivin mRNA的表达,流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率的变化。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测3组OVCAR3细胞对紫杉醇的50%抑制浓度(IC50)。结果pEGFPC2质粒与脂质体按1∶2比例转染OVCAR3细胞时其转染效率最高,达23.6%。将mU6/survivin质粒与脂质体也按1∶2比例转染OVCAR3细胞24h后,未转染组、脂质体组、转染组细胞survivin mRNA的相对含量分别为0.81±0.05、0.79±0.12、0.26±0.04,转染组survivin mRNA相对含量下降至未转染组的32%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。转染组转染24h后,细胞凋亡率为(31.9±1.2)%,明显高于未转染组的(4.9±0.7)%和脂质体组的(5.6±0.5)%(P=0.000);转染组细胞周期被阻滞于G0/G1期,G2/M期减少,分别与未转染组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MTT比色法检测结果显示,未转染组、脂质体组、转染组OVCAR3细胞对紫杉醇的IC50分别为(0.305±0.032)、(0.157±0.031)、(0.019±0.001)μmol/L,转染组OVCAR3细胞对紫杉醇的IC50降低为未转染组的1/16,两组比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论shRNA可有效抑制卵巢癌细胞survivinmRNA的表达,并显著提高了卵巢癌细胞对紫杉醇的药物敏感性。     

短发夹状RNA干扰对子宫颈癌细胞中Pin1基因表达及细胞增殖和凋亡的影响

目的研究短发夹状RNA(shRNA)干扰对宫颈癌细胞中Pin1基因表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法构建靶向Pin1基因的shRNA真核表达质粒pSIREN-Pin1,在脂质体介导下转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞(HeLa/p-shRNA组),同时以对照质粒pSIREN-Con(HeLa/p-Con组)和无血清培养基转染HeLa细胞(HeLa组)作为对照,分别应用RT-PCR技术及蛋白印迹法检测Pin1mRNA及蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和软琼脂细胞克隆实验检测细胞增殖状况,流式细胞仪分析细胞凋亡情况。结果转染后48h,HeLa/p-shRNA组Pin1mRNA及蛋白表达水平分别为0·19±0·05和0·33±0·14,HeLa/p-Con组分别为0·84±0·16和0·79±0·17,HeLa组分别为0·89±0·11和0·81±0·15,前组Pin1mRNA及蛋白表达水平分别与后两组比较,差异均有统计学意义(P<0·05);转染pSIREN-Pin1质粒后HeLa细胞中Pin1mRNA及蛋白表达抑制率分别为77%和58%。MTT比色法检测显示,HeLa/p-shRNA组细胞增殖率明显下降(P<0·05)。软琼脂克隆实验显示,HeLa/p-shRNA组细胞克隆小而稀疏,细胞克隆形成率为(12±3)%,明显低于HeLa/p-Con组的(20±5)%和HeLa组的(24±4)%(P<0·05)。流式细胞仪分析显示,HeLa/p-shRNA组细胞凋亡率为(24·3±5·7)%,明显高于HeLa/p-Con组的(5·0±1·4)%和HeLa组的(1·8±0·4)%(P<0·05)。结论shRNA干扰技术能有效抑制靶基因Pin1的表达,进而可抑制宫颈癌细胞增殖并诱导细胞凋亡增加,为宫颈癌的基因研究及治疗提供新思路。     

短发夹状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢上皮性癌细胞对紫杉醇敏感性的研究

RNA干扰（RNAi）技术是运用双链RNA引发的转录后水平基因沉默机制,特异性抑制靶基因转录,进而下调相应蛋白表达水平及功能.新近的RNAi技术,是利用DNA载体直接在体内表达短发夹状RNA（shRNA）,特异性封闭相应的靶基因mRNA,抑制mRNA的翻译.与早期的RNA干扰技术相比,该方法的特异性和干扰效率均有较大提高,已广泛应用于多种研究领域.利用RANi技术特异地抑制癌基因、癌相关基因或突变基因的过度表达,使这些基因保持在沉默或休眠状态,从而使肿瘤细胞增殖速度减慢,凋亡加快,显示了RNAi技术用于肿瘤基因治疗的可行性和有效性.     

稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化

目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2shRNA质粒分别转染HeLa细胞,对照组以空质粒pSUPER和不加质粒的脂质体分别转染HeLa细胞。稳定转染后,氨基糖苷抗生素(G418)筛选阳性细胞克隆,RT-PCR技术和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法分别检测HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达的变化。结果稳定转染后,G418筛选,实验组HeLa细胞有新的阳性细胞克隆形成,而对照组HeLa细胞最终全部死亡。实验组转染pE6-1shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA表达水平为0·76±0·28,明显低于对照组转染脂质体者(1·14±0·45)和转染pSUPER质粒者(1·12±0·23,P<0·05);HeLa细胞中HPV18E6蛋白阳性表达强度较对照组转染脂质体者弱。实验组转染pE6-2shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0·05)。结论稳定转染表达HPV18E6shRNA的质粒后,宫颈癌细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达明显受到抑制。     

米非司酮对离体异位子宫内膜细胞凋亡的影响

目的 :观察培养的异位子宫内膜细胞分组加入米非司酮后的生长情况及形态学变化 ,并检测其凋亡率 ,探讨子宫内膜异位症的药物治疗。方法 :对子宫内膜异位症14例的异位子宫内膜离体组织进行培养 ,在相同的生长期加入一定剂量米非司酮后 ,观察细胞的生长状况并用TUNEL法检测其凋亡率。结果 :加入米非司酮后 ,细胞生长速度减慢 ,其凋亡率较未用药组明显增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :米非司酮对异位细胞有抑制作用 ,并诱导异位子宫内膜细胞凋亡 ,应用于临床治疗子宫内膜异位症疗效良好。     

短发夹状RNA抑制MDR1基因表达逆转卵巢上皮性癌多药耐药的研究

多药耐药性的产生是导致肿瘤化疗失败的重要原因。多药耐药基因MDR1及其所编码的细胞膜P糖蛋白（P-gp）表达增加介导的耐药在化疗中最为主要、最为常见。在过去20多年中，学者们探求各种逆转多药耐药的方法，如反义寡核苷酸技术、核酶技术等，取得了一定的成果。RNA干扰（RNAi）技术抑制MDR1基因表达是研究逆转多药耐药的新途径。本研究设计并构建针对人MDR1基因特定位置的短发夹状RNA（shRNA）质粒pEGFP-H1／MDR1，观察其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）紫杉醇耐药细胞株MDR1基因和P-gP表达的抑制作用，探索耐药肿瘤基因治疗的有效方法。     

孕三烯酮对体外培养异位子宫内膜细胞生长及凋亡的影响

目的　探讨孕三烯酮对体外培养的子宫内膜异位症(内异症)患者的异位子宫内膜细胞(异位内膜细胞)生长及凋亡的影响,及第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphataseandtensionhomologuedeletedonchromosome10,PTEN)基因在异位内膜细胞表达的变化。方法　以0、10. 6和10 .4 mol/L浓度的孕三烯酮,对体外培养的异位内膜细胞分别进行处理;采用四甲基偶氮唑蓝比色法,检测孕三烯酮对异位内膜细胞作用0 ~48h的细胞抑制情况并绘制细胞生长曲线;应用透射电镜观察孕三烯酮对异位内膜细胞作用24h时的细胞超微结构变化;采用流式细胞仪检测异位内膜细胞凋亡率及细胞周期变化;应用PTEN单克隆抗体,经流式细胞仪分析异位内膜细胞PTEN基因的表达。结果　孕三烯酮作用于异位内膜细胞8、16、24、32、40和48h的细胞生长率,在孕三烯酮浓度为10 .6 mol/L时,分别为99 .6%、87 .3%、79 .8%、62 .3%、51. 7%和44. 2%;在10 .4 mol/L时,分别为99 .2%、77 .1%、69. 6%、51 .1%、33 .7%和23 .6%。同一浓度各作用时间比较,差异均有统计学意义(P<0 .05)。孕三烯酮作用24h后,异位内膜细胞发生典型的细胞凋亡形态学改变。浓度为10 6、10 4 mol/L的孕三烯酮作用于异位内膜细胞后,凋亡率分别为1 3%、15 .0%;浓度为0mol/L的孕三烯酮     

脂联素对子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响

目的:研究脂联素对子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响及其信号的传导。方法:免疫细胞化学方法及RT-PCR法检测子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞AdipoR1/R2蛋白及mRNA的表达,不同浓度脂联素(2.5,5,10,20μg/ml)作用子宫内膜癌细胞30min,Western blot检测AMPK磷酸化程度,不同浓度脂联素作用细胞48h及AMPK抑制剂(复合物C)预处理后脂联素再作用48h后,MTT试验及流式细胞仪检测不同处理组细胞的增殖及凋亡。结果:子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞AdipoR1/R2蛋白呈棕黄色颗粒状表达,并可见AdipoR1/R2基因表达。除2.5μg/ml浓度外,其余浓度组脂联素均显著诱导AMPK磷酸化,不同浓度组AMPK活化差异有统计学意义(F=27.985,P0.01),脂联素以浓度依赖模式诱导子宫内膜癌细胞AMPK活化。脂联素以浓度依赖模式显著抑制子宫内膜癌细胞增殖(F=13.322,P0.01),诱导子宫内膜癌细胞凋亡(F=46.826,P0.01),复合物C可以阻断脂联素诱导的细胞增殖抑制及凋亡。结论:脂联素可能通过影响AMPK信号通路抑制子宫内膜癌细胞增殖,促进凋亡。     

胰岛素对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨胰岛素对子宫内膜癌细胞系Ishikawa3-H-12细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 应用免疫细胞化学方法和RT-PCR技术检测Ishikawa3-H-12细胞胰岛素受体（INSR）蛋白和mRNA的表达。以不同浓度胰岛素作用Ishikawa3-H-12细胞不同时间,采用四甲基偶氮唑蓝比色法、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和细胞周期。结果 （1）Ishikawa3-H-12细胞INSR蛋白呈棕黄色阳性表达,并可见INSR基因的表达。（2）胰岛素以浓度和时间依赖的方式促进子宫内膜癌细胞增殖,1×10^-4mol／L胰岛素作用48h时促增殖作用最显著,增殖率为（340．2±15．9）％,与对照细胞（以胰岛素浓度为0作为对照,为100％）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）胰岛素以浓度和时间依赖的方式使Ishikawa3-H-12细胞中G0／G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,1×10^-4mol／L胰岛素作用72h时最显著,G0／G1期细胞比例为（27．7±2．5）％,S期细胞为（55．2±1．4）％,分别与对照细胞[分别为（67．6±1．5）％、（15．7±1．0）％]比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;胰岛素对G2／M期细胞无影响（P〉0．05）。（4）随着胰岛素浓度的增加,Ishikawa3-H-12细胞凋亡率逐渐下降。1×10^-4mol／L胰岛素作用最显著,作用24、48、72、96h时的细胞凋亡率分别为（1．76±0．16）％、（1．70±0．15）％、（1．56±0．20）％、（1．31±0．24）％,分别与对照细[分别为（9．81±0．61）％、（9．93±1．44）％、（9．10±0．66）％、（10．30±1．20）％]比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 胰岛素对子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞具有促进增殖、抑制凋亡的作用。     

离体异位子宫内膜细胞ki-67、钙粘素-E的表达及自发凋亡测定

目的:检测原代培养异位内膜细胞ki-67、钙粘素-E的表达及自发凋亡率从而推测其增殖、凋亡特性及侵袭性。方法:对10例异位内膜组织(实验组)及10例正常内膜组织(对照组)进行原代培养,采用免疫细胞化学检测两组内膜ki-67及钙粘素-E表达水平,采用流式细胞术检测两组细胞的细胞凋亡指数。结果:1)腺上皮细胞和基质细胞的ki-67积分实验组与对照组均相当(P均 >0.05)。2)实验组的自发凋亡指数显著低于对照组(P <0.01)。3)实验组腺上皮细胞钙粘素-E表达积分(3.45±1.45)显著低于对照组(8.50±0.89)( P <0.01)。结论:1)异位内膜细胞并非高度增殖,而是表现为抗凋亡和抗侵袭性。2)异位内膜细胞的生物学特性在子宫内膜异位症的病理生理中可能起着重要作用。     

Extended effects of human papillomavirus 16 E6-specific short hairpin RNA on cervical carcinoma cells

Most cervical carcinomas express high-risk human papillomavirus (HPV) E6 and E7 oncogenes. Small interfering RNA can mediate sequence-specific inhibition of gene expression in mammalian cells. To find a most effective short hairpin RNA (shRNA) for HPV16 E6 messenger RNA (mRNA) and investigate the extended effects of the HPV16 E6 shRNA on cervical carcinoma cells, we stably transfected SiHa cells with four shRNA expression vectors (E6A-D). HPV16 E6A shRNA was found to be the most efficient in our study, which caused the reduction of HPV16 E6 mRNA to 10% in SiHa cells but did not reduce HPV18 E6 mRNA expression in HeLa cells. We subsequently demonstrated that E6A could stably express shRNA and effectively reduce HPV16 E6 and E7 viral genes expression in SiHa cells for more than 4 months. After E6 and E7 repression, there was a dramatic accumulation of p53, p21, and hypophosphorylated pRb proteins in cells. Furthermore, cell proliferation, colony formation ability, tumorigenicity, and in vitro cell invasive capability were suppressed substantially in E6A-transfected cells. These results suggest that the use of shRNA expression vector may be a potential approach for the treatment of persistent HPV infection and HPV-positive cervical carcinoma.     

Survivin gene RNA interference inhibits proliferation, induces apoptosis, and enhances radiosensitivity in HeLa cells

OBJECTIVE: Survivin is a new member of the inhibitors of apoptosis (IAPs) family. It is upregulated in various malignancies including human cervical carcinomas. Reduction of this molecule has resulted in chemosensitization, but it is uncertain whether it can lead to radiosensitization. We observed the effect of survivin gene RNA interference (RNAi) on the proliferation, apoptosis, and radiosensitivity of the human cervical carcinoma cells HeLa. STUDY DESIGN: Human cervical carcinoma cells (HeLa) were transfected with the specific siRNA expression vector (pSilencer2.1-s2) designed to target survivin mRNA. A corresponding site-mutated vector was constructed as a negative control (pSilencer2.1-NC). The expression of survivin mRNA and its protein among the stable transfected cells and the untransfected ones was detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blotting respectively. The cell growth was examined by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The cell cycle distribution and cell apoptosis were measured by flow cytometry. The changes in cell radiosensitivity were observed by clonogenic survival assay. RESULTS: Three stable transfected cell lines: HeLa-s2 (with pSilencer2.1-s2), HeLa-NC (with pSilencer2.1-NC), and HeLa-U6 neo (with empty vector pSilencer2.1-U6 neo) were established. The expression levels of survivin gene mRNA and protein in HeLa-s2 were significantly lower than in HeLa-NC, HeLa-U6 neo, and those untransfected HeLa cells. The expression inhibitory rates were 62.8% and 60.1%. The cell proliferation of HeLa-s2 was inhibited, and the highest inhibitory rate was 57.8+/-2.1%. The changes in cell cycle distribution in HeLa-s2 compared with the other three cell lines were obvious, many cells were blocked in the G(0)/G(1) phase 72.7+/-3.1% (P<0.05), reduced sharply in the G(2)/M phase (5.1+/-2.9)% (P<0.05), and also the apoptotic rate was 29.2+/-1.4%, obviously increasing (P<0.05). At the same dose of radiation, the cloning efficiency of HeLa-s2 declined notably (P<0.05); the cell survival curve showed a significant decrease in D(0) and D(q), which were 3.15 and 1.21, respectively (P<0.05), and the radiation enhancement ratios were 2.01 (a ratio of D(0)) and 1.77 (a ratio of D(q)). CONCLUSIONS: Survivin gene RNAi not only could inhibit the proliferation of human cervical carcinoma cells (HeLa), but also could significantly enhance the radiosensitivity of those cells through the reduction of its mRNA and protein. Therefore, an RNAi-targeted survivin gene strategy would be a potential approach to radiosensitization therapy in human cervical carcinomas.     

GnRHa对子宫内膜异位症内膜间质细胞生长增殖及血管形成的影响

目的:研究GnRHa对子宫内膜异位症异位及在位内膜间质细胞增殖、凋亡及血管形成的影响。方法:体外原代培养人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞,用不同浓度的GnRHa分别干预,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定内膜间质细胞的生长增殖活力;Annexin V-FITC和PI双染、流式细胞仪(FCM)检测异位及在位内膜间质细胞凋亡及周期变化;免疫细胞化学检测血管内皮生长因子(VEGF)表达的改变。结果:GnRHa可抑制内异症异位及在位内膜间质细胞增殖且呈剂量依赖关系;GnRHa能明显增加异位及在位内膜细胞的凋亡率(P<0.05),且异位内膜细胞凋亡率明显高于在位内膜(P<0.05);不同浓度的GnRHa作用后,内膜间质细胞均发生细胞周期阻滞,G1期细胞增加,S期细胞减少,此作用随浓度增加而增强(P<0.05);免疫细胞化学测定表明,GnRHa可降低异位及在位内膜间质细胞VEGF的表达(P<0.05),且随GnRHa浓度增加而增强(P<0.05)。结论:GnRHa可明显抑制人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞的生长并促进其凋亡,降低异位及在位内膜间质细胞VEGF的表达。     

子宫与卵巢异位内膜细胞凋亡和增殖特性的研究

目的　探讨子宫腺肌病与卵巢异位囊肿异位内膜的细胞凋亡和增殖特性及发病机制。方法　 2 0 0 2年 6月至 2 0 0 3年 6月南方医科大学珠江医院采用免疫组化S P法 ,检测子宫腺肌病 (46例 )和卵巢异位囊肿 (6 0例 )的在位及异位子宫内膜中凋亡调控基因蛋白bcl 2、bax及细胞增殖标记物Ki 6 7蛋白的表达。结果　bcl 2蛋白、bax蛋白及Ki 6 7蛋白在两症的在位内膜以及子宫腺肌病异位内膜中均呈现周期性改变 ,而bcl 2蛋白及Ki 6 7蛋白在卵巢异位囊肿异位内膜中呈持续性增强 ,较在位内膜差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　子宫腺肌病异位内膜的细胞凋亡和增殖受卵巢性激素周期性的调节 ,卵巢异位囊肿异位内膜则相反 ,两者细胞凋亡和增殖特性有着明显的不同 ,是两种不同的疾病。     

子宫内膜癌SREBP1表达及SREBP1 shRNA对内膜癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1)在子宫内膜癌中的表达情况及SREBP1 shRNA对子宫内膜癌细胞AN3-CA生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学染色、实时定量逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹、Transwell体外细胞侵袭试验等方法分析SREBP1在子宫内膜组织中的表达及其对细胞生物学行为的影响。结果:SREBP1在正常子宫内膜组织中低表达,在子宫内膜癌组织中高表达,且免疫组织化学染色H-Score评分在子宫内膜癌高分化组和中、低分化组之间具有统计学差异(P<0.001);SREBP1 shRNA可减慢子宫内膜癌细胞AN3-CA的增殖速度并降低AN3-CA细胞的侵袭能力,均具有统计学差异(P<0.001)。结论:SREBP1的表达与活化参与子宫内膜癌的进展;SREBP1 shRNA可降低子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭能力,表明内源性SREBP1参与子宫内膜癌的进展与转移,为子宫内膜癌潜在的分子靶向治疗提供了一定的理论基础。     

HOXA10 gene expression in human fallopian tube and ectopic pregnancy

OBJECTIVE: The molecular mechanisms underlying ectopic implantation have not been well characterized. Here we investigate HOXA10 gene expression at the site of ectopic implantation as compared with the endometrium and with the normal fallopian tube. STUDY DESIGN: Northern blot analysis was used to evaluate HOXA10 gene messenger RNA level in various segments of normal pregnant and nonpregnant human fallopian tube, ectopic pregnancy, and endometrium. RESULTS: Normal human fallopian tube expressed minimal levels of HOXA10 gene messenger RNA in the nonpregnant state. A trend toward a greater expression of HOXA10 gene was observed in the normal fallopian tube during pregnancy, but the difference was not statistically significant (P =.075). HOXA10 gene messenger RNA expression was up-regulated significantly at the site of implantation in ectopic pregnancy (P <.001), and its expression approached that of the endometrium during normal pregnancy (P =.33). CONCLUSION: HOXA10 gene expression is up-regulated at the ectopic implantation site in the fallopian tube, approaching that of the endometrium in normal intrauterine gestation. Inherently increased HOXA10 gene expression in the fallopian tube or dysregulation of HOXA10 gene expression by an abnormally implanting blastocyst may play a role in ectopic implantation.     

PinlsiRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响

目的：通过小干扰RNA（siRNA）栽体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶（Pinl）表达,探讨Pinl对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响。方法：构建pGPU6／GFP／Neo—PinlsiRNA表达载体,脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中;实验设3组：实验组（SiHa／pGPU6-PinlsiRNA组）、阴性对照组（SiHa／pGPU6-con组）和空白对照组（Si-Ha）。采用RT—PCR、Western blot法检测Pinl的表达;M1Tr法检测细胞增殖活性;原位末端标记法（TUNEL）和流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡。结果：转染SiHa／pGPU6．PinlsiRNA的SiHa细胞中,PinlmRNA和蛋白表达分别下调68．1％和54．8％,细胞增殖显著抑制。TUNEL显示典型细胞凋亡特征,SiHa／pGPU6-PinlsiRNA组的凋亡指数（AI）为（29．6±14．58）％,显著高于SiHa／pGPU6-con组[（8．44±5．65）％]和空白对照组[（5．34±4．47）％]（P〈O．05）。SiHa／pGPU6．PinlsiRNA组的细胞凋亡率为（30．95±16．47）％,显著高于SiHa／pGPU6-COIl组[（6．18±6．10）％]和空白对照组[（5．95±4．99）％]（P〈0．05）。结论：RNA干扰技术能特异高效的抑制Pinl基因的表达,Pinl基因的下调能抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示Pinl可能成为治疗宫颈癌的新靶点。