LC-MS/MS 测定大鼠血浆中香柑内酯及其药代动力学研究

目的:建立测定香柑内酯(berg)血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-ESI-MS)联用的分析方法,并探讨其在大鼠体内的药动学。方法:采用Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相甲醇-水(77.5∶2.5),流速0.8mL.min-1,柱温30℃,检测波长300 nm。结果:Berg在8.12～162.4μg.L-1(r=0.999 9)线性关系良好。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于berg的体内定量分析,berg在大鼠体内药动学过程属于一级吸收二室模型。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸及其药代动力学研究

该研究建立大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸的LC-MS/MS测定方法,并用于大鼠体内的药代动力学研究。6只SD大鼠,单剂量静脉注射(4 mL·kg^-1)灯盏细辛注射液,以替硝唑为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中的药物浓度,并用DAS 1.0软件计算药动学参数。咖啡酸、绿原酸的线性范围分别为2~128 μg·L^-1(r = 0.998 1),3~384 μg·L^-1(r = 0.998 7)。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中咖啡酸药代动力学参数:t_1/2β为(130.91±38.77) min,AUC_0-t为(4.89±0.96) mg·min·L^-1,CL为(0.12±0.02) L·min^-1·kg^-1;绿原酸药代动力学参数:t_1/2β为(49.38±8.85) min,AUC_0-t为(9.54±0.95) mg·min·L^-1,CL为(0.09±0.003) L·min^-1·kg^-1。该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于咖啡酸、绿原酸的药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中莫诺苷血药浓度

莫诺苷是从中药山茱萸Cornus officinalis Sieb. & Zucc.中提取分离获得的环烯醚萜苷类化合物,具有神经保护等多种药理活性.本研究首次采用LC-MS/MS技术建立了大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定方法.血浆样品采用蛋白沉淀法,以金丝桃苷作为内标,色谱柱为Inertsil C8-3色谱柱(2.1 mm×50 mm,5 μm),流动相为水(含1 mmol·L^-1甲酸钠)-乙腈梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1.采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM).莫诺苷在2~5 000 μg·L^-1 (r= 0.995 7)线性关系良好,最低定量限为2 μg·L^-1.方法精密度、准确度、回收率和基质效应均符合生物样品测定的要求,适合大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定.应用该方法进行莫诺苷在大鼠体内的药代动力学研究,给药剂量为20 mg·kg^-1,绘制血药浓度-时间曲线,并采用DAS 2.0 计算得主要药代动力学参数:AUC_0-∞为(587.6±290.7) μg·min·L^-1,C_max为(334.2±148.0) μg·L^-1,T_max为(0.6±0.3) h,t_1/2为(0.7±0.3) h.     

LC-MS/MS同时检测大鼠血浆中芍药苷和芍药内酯苷的浓度及其药代动力学研究

目的:研究白芍中芍药苷和芍药内酯苷在大鼠体内的药代动力学。方法:应用高效液相色谱-串联质谱联用分析方法,测定大鼠灌胃给予白芍提取物后芍药苷和芍药内酯苷的时间-血药浓度,根据药-时曲线计算药代动力学参数。结果:芍药苷和芍药内酯苷线性范围分别为1.0~1000 ng·m L-1,2.0~2000 ng·m L-1,回收率均大于80%,日间RSD≤10%,日内RSD≤11%,RE在-4.9%~2.4%之间。芍药苷和芍药内酯苷药代动力学参数如下:Tmax为(0.89±0.27)、(0.97±0.37)h;t1/2为(1.97±0.63)、(2.25±0.59)h;Cmax为(301.3±96.8)、(122.9±42.2)μg·L-1。AUC0-t为(1495.1±521.2)、(688.5±222.9)μg·h·L-1;AUC0-∞为(1541.1±548.0)、(720.1±241.0)μg·h·L-1。结论:该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中芍药苷和芍药内酯浓度的测定。白芍中芍药苷和芍药内酯苷在大鼠体内药代动力学行为均符合二室模型。     

LC-MS/MS法测定石斛碱在大鼠体内药代动力学研究

目的:建立LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中石斛碱浓度,考察其体内药代动力学特征。方法:SD大鼠6只灌胃给予石斛碱(20 mg/kg),于给药前及给药后5、15、30、45、60、90. 120、180、240、420、600、1 440 min眼内眦静脉从取血,测定大鼠血浆石斛碱浓度。用DAS2. 0统计软件计算药动学参数。结果:石斛碱浓度在0. 5～50 ng/m L范围内线性关系良好(r2=0. 999 2),定量下限为0. 5 ng/mL,低(1 ng/mL)、中(5 ng/mL)、高(20 ng/mL) 3个浓度的回收率分别为(78. 86±4. 56)%、(85. 25±1. 23)%及(80. 56±2. 23)%;日内及日间RSD均小于10%。石斛碱给药后血药浓度-时间曲线符合二室模型,消除半衰期为t_(1/2)为(51. 27±2. 65) min,T_(max)为(10. 00±0. 17) min,C_(max)为(0. 12±0. 08) mg/L,AUC_(0-∞)为(7. 91±0. 25) mg/L·min。结论:本分析方法对石斛碱体内外检测具有专属性,且灵敏、可靠,适用于石斛碱药代动力学研究。     

UHPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中6种木脂素类成分及其药代动力学研究

目的建立利用UHPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中Gomisin D、Gomisin E、五味子醇甲、五味子甲素、Gomisin R和五味子乙素6种木脂素的分析方法,并研究大鼠灌胃给予五味子提取物后的药代动力学特征。方法采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果大鼠血浆中6种木脂素成分的校正曲线线性关系良好,日内、日间精密度和准确度符合要求,提取回收率75.76%⁸8.82%。结论该方法简便、快速、灵敏、稳定,适用于五味子提取物的体内分析,为其进一步研究奠定基础。     

GC-MS和LC-MS/MS分析苏合香有效成分及药代动力学研究

目的 探究气相色谱-质谱(GC-MS)和LC-MS/MS分析苏合香有效成分及药代动力学,在找出有效部位中的化学成分及其共性的同时研究其主要有效成分的药代动力学。方法 应用溶剂提取对苏合香中石油醚、乙醚中有效成分进行分析,通过GC-MS联用技术,对予以化学成分的鉴定。LC-MS/MS分析对苏合香中肉桂酸药代动力学研究考察样品制备方法和取血时间,并对大鼠血药浓度予以检测,绘制血药浓度-时间曲线图,并获取药代动力学相关参数。结果 经鉴定苏合香石油醚23个化合物,乙醚部位共存在11个化合物,肉桂酸的线性范围均为5～1000μg·L^-1,方法学考察符合实验要求。日内以及日间变异系数(RSD)低于15%,精密度以及准确度均符合生物样品分析要求。肉桂酸口服给药后的Tmax、Cmax、AUC0-t、衰期t1/2及平均驻留时间MRT分别为4 h、849.29μg·L^-1、10577.38μg·L^-1·h、5.20 h、9.50 h。结论 获得有效部位化学成分,研究发现GC-MS和LC-MS/MS分析应用于有效成分及药代动力学的检测准确灵敏...     

LC-MS/MS法同时测定犬血浆中延胡索乙素和欧前胡素及其在元胡止痛片药动学研究中的应用

目的建立同时测定Beagle犬血浆中的延胡索乙素和欧前胡素的LC-MS/MS分析方法,并应用于元胡止痛片的药动学研究。方法采用液-液萃取方式进行样品处理,萃取剂为甲基叔丁基醚,内标为乙氧苯柳胺;采用XDB-C18(50 mm×4.6 mm,5μm)柱色谱分离,柱温40℃,体积流量0.4 m L/min;流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI)、正离子扫描、多反应离子监测(MRM)进行测定,延胡索乙素:m/z 356.2[M+H]+→m/z 192.1,欧前胡素:m/z 271.1[M+H]+→m/z 203.0,内标乙氧苯柳胺:m/z 258.1[M+H]+→m/z 121.1。应用Win Nonlin 6.3软件非房室模型统计矩方法计算药动学参数。结果延胡索乙素在0.05~20 ng/m L线性良好,欧前胡素在0.005~2 ng/m L线性良好,延胡索乙素和欧前胡素的定量下限分别为0.05 ng/m L和0.005 ng/m L;批内和批间精密度均小于14.4%,准确度均在–7.19%~5.89%;提取回收率在82.8%~108%,基质效应在88.2%~109%。Beagle犬po给予元胡止痛片后,延胡索乙素的主要药动学参数tmax、Cmax、AUC0~t、AUC0~∞、MRT0~t、MRT0~∞、Vd、CL和t1/2分别为(1.08±0.20)h、(48.70±18.10)ng/m L、(170.00±75.70)h·ng/m L、(178.00±77.50)h·ng/m L、(6.41±1.13)h、(8.09±1.85)h、(133.00±63.00)L、(11.90±5.54)L/h和(7.71±1.07)h;欧前胡素的主要药动学参数tmax、Cmax、AUC0~t、AUC0~∞、MRT0~t、MRT0~∞、Vd、CL和t1/2分别为(1.17±0.26)h、(0.063 4±0.023 5)ng/m L、(0.176 0±0.091 9)h·ng/m L、(0.204 0±0.097 3)h·ng/m L、(2.550±0.669)h、(3.640±0.818)h、(22 351±7 990)L、(7 917±6 030)L/h和(2.390±0.877)h。结论该分析方法专属性强,灵敏度高,能同时测定犬血浆中延胡索乙素和欧前胡素,可用于元胡止痛片给药后犬的药动学研究。     

甘草提取物对瑞香素大鼠体内药代动力学特征的影响研究

目的:研究甘草提取物对祖师麻主要活性成分瑞香素大鼠体内药代动力学特征参数的影响,探索其配伍用药的合理性.方法:大鼠分别灌胃给药瑞香素和含有同等剂量瑞香素的甘草提取物,LC-MS分析测定血浆中瑞香素浓度,经DAS2.1.1程序处理数据.结果:甘草提取物能够减小瑞香素t(1/2),t(max)和Ke,增加Ka和AUC(0～∞).结论:甘草能促进祖师麻中瑞香素的口服吸收,减慢其消除,提高其生物利用度.     

LC-MS/MS法检测健康人血浆淫羊藿苷及药动学探索研究

目的:建立健康人血浆淫羊藿苷的LC-MS/MS分析方法,探索淫羊藿提取物临床药动学特点。方法:色谱柱为Agilent ZORBAXSB-C18(2.1 mm×30 mm,3.5μm);流动相为乙腈:水(含0.1%甲酸)=22:78;流速0.3 mL/min;ESI离子源;定量离子对淫羊藿苷m/z:677.3→369.0,内标非那西丁m/z:180.1→110.0。健康受试者2例,单次口服含淫羊藿苷40.16 mg的淫羊藿提取物片剂制剂12片,分别于给药前和给药后0.5,1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、10、12、24 h采血,检测血浆中淫羊藿苷。结果:血浆中内源性物质不干扰样品的测定,定量下限为0.05μg/L,方法符合生物样品分析要求。在本试验血浆浓度线性范围0.05²1.48μg/L内,人血浆中未测到淫羊藿苷原型。     

Beagle犬口服雷公藤片血浆中雷公藤红素LC-MS/MS测定及药动学研究

建立Beagle犬血浆中雷公藤红素的LC-MS/MS检测方法,用于Beagle犬口服雷公藤片的药代动力学研究。血浆样品经二氯甲烷提取,色谱条件为Phenomenex Luna C8色谱柱(2.0 mm×50 mm,3μm),流动相为甲醇-乙腈异丙醇溶液(1∶1)-0.1%甲酸15∶55∶30;多反应监测(MRM)雷公藤红素([M+H]+,m/z 451.3/201.1)和内标泼尼松龙([M+H]+,m/z 361.1/147.1);DAS 1.0软件对雷公藤红素药-时曲线进行拟合,并计算药代动力学参数。在0.680 0~136.0μg·L-1,雷公藤红素与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好,定量限为0.680 0μg·L·(-1),日内日间精密度小于6.15%,提取回收率为50.42%~51.65%。Beagle犬口服雷公藤片(1片/kg),血浆中雷公藤红素经时变化符合一室模型(w=1/cc),主要药动学参数分别为Cmax(35.64±9.540)μg·L~(-1),Tmax(2.62±0.69)h,T1/2(2.93±0.29)h,CL(0.308±0.056)L·kg~(-1)·h~(-1),AUC0-12(131.16±31.94)μg·L·h~(-1),AUC0-∞(142.83±37.57)μg·L·h~(-1)。建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于雷公藤片中雷公藤红素药代动力学研究。     

LC-MS/MS同时测定窝儿七中10种成分的含量

目的:建立LC-MS/MS同时测定不同批次窝儿七中山柰酚葡萄糖苷,山荷叶素葡萄糖苷,arabeline,鬼臼毒素葡萄糖苷,4'-去甲基鬼臼毒素,山柰酚,鬼臼毒酮,山荷叶素,槲皮素,鬼臼毒素10种成分含量的分析方法,分析不同批次窝儿七化学成分间相似性及差异程度,为建立窝儿七药材质量的综合评价体系,提供新的科学依据。方法:采用COSMOSIL-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱(0~30 min,30%乙腈;30~40 min,30%~32%乙腈;40~40.5 min,32%~50%乙腈;40.5~50 min,50%~60%乙腈;50~85 min,60%乙腈;85~85.5 min,60%~30%乙腈;85.5~95 min,30%乙腈),流速0.3 m L·min-1,检测波长300 nm,柱温30℃;采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式多反应监测,对不同批次窝儿七中10种化学成分进行含量测定。结果:10种成分进样质量浓度与峰面积现良好的线性关系(r0.999 1),线性范围分别为0.07~2.23,0.39~12.40,0.05~1.68,0.12~3.88,0.05~1.73,0.08~2.70,0.05~1.00,0.04~1.10,0.04~0.58,0.18~5.67 mg·L-1,精密度、重复性、稳定性的RSD都低于2%,平均回收率为98.61%~99.93%,不同批次间窝儿七药材化学成分的含量差异明显。结论:该方法快速、灵敏、准确度高,可用于检测不同批次窝儿七成分含量,为建立和完善窝儿七药材质量的综合评价体系提供了重要数据。     

LC-MS/MS测定6种丹参主要有效成分及其脑靶向分布研究

建立测定大鼠血浆及脑匀浆中原儿茶酸、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的LC-MS/MS分析方法。实验采用液液萃取的方法对血浆及脑匀浆样品进行处理,采用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),以0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。质谱条件为电喷雾电离源(ESI),多反应监测(MRM)。正离子模式下检测的离子对(m/z)为297.4/254.3(隐丹参酮),295.5/249.3(丹参酮ⅡA),285.2/154.0(内标地西泮);负离子模式下检测的离子对(m/z)为154.3/153.1(原儿茶酸),137.3/108(原儿茶醛),493.0/295.2(丹酚酸A),718.0/520.0(丹酚酸B),321.4/152.3(内标氯霉素)。血浆及脑匀浆中隐丹参酮、丹参酮ⅡA、原儿茶酸、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B的线性范围分别为:0.15~1 000,0.625~1 000,0.625~1 000,0.625~1 000,1.25~1 000,2.5~1 000μg·L-1;定量下限分别为0.15,0.625,0.625,0.625,1.25,2.5μg·L-1。建立的方法稳定、灵敏,可用于研究丹参6种成分的脑及血浆药物代谢动力学特性。通过动物实验比较了6种成分之间的血脑分配系数,初步评价其跨越血脑屏障的能力。     

LC-MS/MS测定人尿液中阿德福韦及其排泄动力学研究

 目的建立测定人尿液中阿德福韦的LC-MS/MS,进行阿德福韦酯po给药排泄动力学研究。方法志愿者尿样经离心、稀释后直接进样,色谱柱为Diamonsil C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(20:80:0.1),流速0.6mL·min^-1,采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应监测方式测定样品浓度,监测离子对为m/z274→m/z162。结果在0.05～8.0 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9978,n=5),最低定量限为0.05mg·L^-1。低、中、高浓度质控样品的日内、日间精密度小于10%,方法回收率96.3%～99.3%。志愿者分别服用10,20,40mg阿德福韦酯,尿中阿德福韦排泄率分别为(34±4)%,(36±10)%和(35±14)%,排泄速率常数k_e分别为(0.055±0.028),(0.066±0.016)和(0.06±0.04)h^-1。结论该方法符合生物样品分析要求,可用于阿德福韦尿液浓度的测定,阿德福韦排泄率ke中国人与国外文献报道一致。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中脱水葛根素浓度及其药代动力学研究

目的：建立快速测定大鼠血浆中脱水葛根素浓度的液相色谱-串联质谱分析方法,并探讨脱水葛根素在大鼠体内的药代动力学。方法：血浆样品加入甲醇沉淀蛋白后,用LC-MS／MS进行测定分析。色谱柱为Zorbax SB-C18 column（4．6mm×150minI．D．5．0μm,Agilent,USA）,流动相为甲醇（含10mmol·L^-1乙酸胺）-0．1％甲酸溶液（20：80,V,V）,流速0．6mL·min^-1,温度40℃。检测应用三重串联四级杆质谱仪的多重反应监测模式（MRM）,选择的检测离子如下：脱水葛根素399．1-281．O,染料木素（内标）271．0-215．0。结果：在大鼠血浆样品中,脱水葛根素浓度在1．5-5400ng·mL^-1之间线性关系良好,最低检测限为1．50ng·L^-1。准确度在95．73％-103．18％之间,精密度RSD在4．33％-7．86％之间。结论：建立的LC-MS／MS联用方法简单准确,灵敏度高,适用于大鼠血浆中对脱水葛根素的药代动力学研究。     

LC-MS/MS同时测定蓝萼香菜中4种二萜类成分及其聚类分析

建立高效液相色谱串联三重四级杆质谱法(LC-MS/MS)同时测定蓝萼香茶菜中蓝萼甲素、冬凌草甲素、河北冬凌草素K和延命草醇4种二萜类有效成分的含量。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1。采用电喷雾离子源(ESI)负离子条件下检测,多反应离子监测(MRM)进行定量。结果上述4种待测成分在测定的质量浓度范围内均具有良好的线性关系(r0.998 7);加样回收率92.40%~105.9%,精密度RSD 1.7%~6.5%。建立的HPLC-MS/MS同时测定蓝萼香茶菜中4种有效成分的定量分析方法简便、快速、准确、重复性好,可以为综合评价蓝萼香茶菜的质量提供参考,并且根据含量测定结果表明不同药用部位和不同采收期的蓝萼香茶菜质量存在一定差异,从而得出该中药材的最佳药用部位及采收期,用于指导合理的采收,以便于更好的利用植物资源。同时对所有批次药材进行聚类分析,结果表明不同产地蓝萼香茶菜药材质量也存在一定差异。     

祖师麻总香豆素纯化工艺优选

目的:优化祖师麻总香豆素的纯化工艺.方法:以总香豆素含量为指标,采用静态和动态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,通过单因素试验考察最大上样量、洗脱剂浓度和用量、洗脱速度对纯化工艺的影响.结果:AB-8型大孔树脂对总香豆素的吸附性能和解析效果最佳,其最佳纯化工艺为最大上样量3 BV,加去离子水洗脱杂质,用75％乙醇10 BV洗脱,洗脱流速2 BV·h-1.结论:优选的纯化工艺稳定可靠,能满足祖师麻总香豆素渗透泵控释片需求.     

UPLC-MS/MS快速同时测定犬血浆中补骨脂的10个活性成分及补骨脂犬药代动力学研究

建立了同时测定犬血浆中补骨脂的10个活性成分——补骨脂素、异补骨脂素、5,7,4'-三羟基黄酮、5,7,4'-三羟基异黄酮、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂苷、异补骨脂苷的UPLC-MS/MS分析方法,并对比格犬灌胃给药补骨脂水提取物后不同时间点血浆中的各成分的浓度进行了测定,绘制了血药...