受致死照射小鼠移植骨髓后造血与淋巴组织的重建

成年小鼠1000拉德照射后输注同种骨髓细胞(1×10⁶),照后30天约提高活存率40%。1100、1200与1300拉德照射后输注骨髓细胞(8×10⁶),则照后30天的活存率分别为31%、3%与3.4%。各平行对照组小鼠全部死亡。小鼠1000或1200拉德照射和输注等量同种骨髓细胞(2.4×10⁶)后,造血与淋巴组织的重建在两组之间是有差别的。表现在骨髓有核细胞量的增长与骨髓增殖的组织学状态,脾脏重量的增长与脾髓外造血的增殖程度,以及胸腺重量的恢复,前者都比后者好。文中对产生这些差别的原因进行了分析讨论。1000拉德组在移植骨髓后14～30天都见到一些小鼠出现宿主排斥移植物反应的病理变化。     

骨髓细胞数对照射小鼠移植效果的影响

本实验用CFU-S测定技术测定了LACA小鼠骨髓造血干细胞的剂量活存曲线以及正常小鼠骨髓造血干细胞的含量.观察了受1000拉德照射小鼠输注1.03 × 10⁵～1.03 × 10⁷个同种骨髓有核细胞后动物的活存率,周外血白细胞数.平均白细胞体积、动物体重的变化.结果表明,在不给任何支持疗法的条件下,当输注的骨髓有核细胞数少于4.15×10⁶个时,动物极少活存;输注8.25×106和1.03×10⁷个骨髓有核细胞时,移植效果较好,动物25天活存率分别为23.5%和31.6%.     

低剂量X线照射的受体小鼠脾造血灶的直径增大

作者研究了低剂量X线照射(1～15伦)对脾造血灶产生的影响。给12～16周龄CD-1雄性瑞士小鼠照射900伦X线,然后静脉注射5×10~4个同龄远亲雄性小鼠的骨髓有核细胞,注射72小时后受体鼠用1～15伦X线照射或假照射。动物在注后第9天活杀,取出脾并固定在包氏液中,计数脾结节(造血     

照射并骨髓移植的小鼠血清对小鼠脾器官培养中造血再生的调节作用

业已证实,造血微环境在调节造血干细胞及其子代的增殖、分化中起着重要作用。同时,关于某些体液因子在应激和再生条件下对造血的影响亦有阐述。本文利用脾器官培养体系,就造血微环境及体液因子对造血再生的调节作用进行了研究。实验将800拉德全身照射并移植10~7同系骨髓细胞后24小时的C57BL小鼠脾脏移出,放在含20%胎牛血清的16毫升EMEM培养浓中,在含有10%CO_2潮湿空气中,于37℃条件下培养,在培养后的一定时间,用琼脂法测定脾造血祖细胞(CFU)的再生情况。结果表明,将照射过的脾脏作培养时,其微环境细胞在     

消炎痛对小鼠造血组织的辐射防护作用

作者探讨消炎痛(INDO)对造血组织的辐射防护作用及其机理.方法:1.小鼠(雌性,C3Hf/kam,3月龄)受250kV的X线全身照射6.6～8.9Gy,剂量率为1.7Gy/min,分别测定INDO组(照前饮用35μg/ml INDO溶液6天)与对照组的LD50/30)2.小鼠X线照射6.5～9.5Gy,分INDO组(照前或照后饮用INDO溶液1～6天)与对照组,照前30min均腹腔注射WR-2721(400mg/kg),照后第9天测定内源脾结节数;3.INDO组(饮用INDO溶液6天)与对照组小鼠各照射1.5、2、3、4、5及6Gy,照后立即制备双侧股骨骨髓细胞悬液,以2×10~4～2.8×10~6的细胞数静脉注射给受8.5Gy照后1天的小鼠,注射后8天测定外源脾结节数.结果:1.INDO组与对照组内源脾结节数均随     

~(226)Ra和X线照射对小鼠造血干细胞增殖和分化能力的影响

小鼠经用~(226)Ra内照射及X线外照射后,将其骨髓细胞注射给800拉德照射的同系小鼠,观察其脾结节的生成量及脾结节内的细胞数,从而来反映照射对小鼠造血干细胞增殖和分化能力的影响。方法;采用ICR雌性小鼠,10～13周龄.体重25克,分成3组,前2组腹腔注射~(226)Ra(第一组为0.56微居里/鼠,第二组为0.46微居里/鼠),第     

裂变中子和γ射线照射小鼠骨髓增殖能力的比较

近年来利用~(125)碘-脱氧尿嘧啶核苷(~(125)IUdR)掺入测定造血系统功能已有不少报道,例如测定造血干细胞周期的不同参数,造血干细胞及祖细胞的增殖能力以及γ线照射小鼠造血系统残余损伤等。实践证明这种测试手段可以作为研究造血功能的一种工具。 Huber等给受致死剂量照射的受体小鼠输注适量小鼠骨髓细胞,在照后3—6天,每天测定增殖活力(脾中~(125)IUdR掺入量)。在一定限度内,输入骨髓细胞数与~(125)IUdR呈线性相关。作者认为本法可以用于测试造血     

小鼠脾脏辐射耐受性 T 细胞的免疫功能

成年的健康雄性 C 3Hf/HeMsNrs 系小鼠行胸腺摘除术,以后给注2×10~6绵羊红细胞,3天后受致死量(1050伦)照射,并给注入同系供体的骨髓细胞2×10~6个。1～6个月以后,用2×18~8绵羊红细     

间充质干细胞促进半相合骨髓移植治疗急性放射病小鼠的实验研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)促进半相合造血干细胞移植(haploid-SCT)治疗急性放射病小鼠的作用及机制。方法 ⁶⁰Co γ射线照射BALB/C(H-2^d)雌性小鼠8Gy,单独输注半相合CB6F1(H-2 bd) 雄性小鼠骨髓细胞1×10⁹/kg(I组),或联合CB6F1 雌性小鼠MSCs不同数量级1.5×10⁸/kg (a组)、5×10⁷/kg (b组)和2.5×10⁷/kg (c组)治疗,比较放射病小鼠的生存分析。同时,MSCs组小鼠尾静脉输注经cm-DiI膜染剂标记的CB6F1雌性小鼠MSCs和CB6F1雄性小鼠的骨髓细胞,与只输注CB6F1骨髓细胞的对照组比较,观察移植后不同时间供者细胞在受者骨髓的植入率、供者MSCs在受者体内发布、外周血象、T淋巴细胞亚群、胸骨骨髓病理和慢性移植物抗宿主病(GVHD)发生情况。结果 a组小鼠早期死亡率增加;b和c组存活率高于I组(P<0.05),但二组之间差异无统计学意义。移植后30 d,MSCs组受者骨髓的sry基因高于对照组。移植后MSCs主要集中在胸腺、骨髓、肝和小肠中,有形态改变。MSCs组的白细胞、血小板恢复较快。照射后15和30 d,MSCs组小鼠骨髓腔中的巨核细胞明显高于对照组。移植后7、14和30 d,MSCs组CD3高于对照组(P<0.05);移植后14和30 d,MSCs组CD4阳性细胞率和CD4/CD8值高于对照组(P<0.05)。MSC组慢性GVHD症状出现较对照组晚30 d。结论 MSCs通过促进干细胞植入,改善造血微环境,促进造血恢复,加快T淋巴细胞的恢复,延缓GVHD的发生时间和促进放射损伤的组织器官的修复,加强了半相合骨髓移植对急性放射病的治疗作用。     

低温保存对体内淋巴细胞与造血干细胞相互作用的影响

临床上为了治疗造血抑制的病人,常必须采用几个基因型不同的供体骨髓。然而,由于淋巴细胞能灭活不同基因的造血干细胞,故可明显地影响混合移植的疗效。致死量照射的动物实验研究表明,混合移植基因型不同的正常骨髓细胞,可导致某些供体干细胞的抑制或完全阻滞。本实验旨在阐明低温保存对致死量照射的动物受体中各系干细胞相互作用的影响。实验用计数灭活的非同基因干细胞方法判定淋巴细胞的免疫活性。将CBA和C57BL6品系小鼠的股骨骨髓制成细胞悬液,放在含15%甘油和10%血清的溶     

用正常骨髓基质抗辐射成分纠正SL/SL~d鼠造血微环境的缺陷

SL/SLd 是造血微环境有缺陷的小鼠。因此,不论在体内或体外,都可见有成熟造血细胞生成减少。本文目的是研究多照射与不照射的正常小鼠骨髓基质纠正,这种缺陷并在体外支持SL/SLd 骨髓细胞长期造血的能力。将接种有16×10~6个正常WCB_6F_1小鼠(+/+)或WCB_6F_1-SL/SLd 小鼠骨髓细胞的培养物进行长期培养。在单独进行的15次实验中,SL/SLd 培养中产生的造血细胞数为+/+培养者的10%以下。当+/+培养形成融合贴壁其质层后,进行9、50或200Gy 照射,则见造血停止,观察到10周仍不见恢复。把新鲜SL/SLd骨髓细胞接种到受照9或50Gy+/+贴壁基质层上,     

rhG-CSF大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血功能重建的影响

目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血恢复的影响,为rhG-CSF的临床应用提供新的实验依据.方法 雄性C57BL/6J小鼠,经60Co γ射线6 Gy全身照射.于受照后0.5h给予rhG-CSF处理,通过检测接受不同骨髓移植时间(未移植组和照后0.5、6、24和48 h移植组)和rhG-CSF不同给药剂量(0、0.25、0.5和l mg/kg组)照射小鼠外周血象变化,摸索最佳接受骨髓移植时间和rhG-CSF最佳给药剂量.建立绿色荧光蛋白(GFP)小鼠非清髓骨髓移植小鼠模型,通过流式细胞仪检测受体小鼠外周血中GFP+白细胞占有核细胞总数的百分数,探究rhG-CSF大剂量单次给药对外源性干祖细胞植入的影响.结果 rhG-CSF大剂量单次给药对照后0.5～48 h内接受非清髓骨髓移植小鼠的造血恢复均有不同程度的促进作用,其中对照后24 h移植组小鼠的白细胞、红细胞和血小板的恢复最佳(F=17.76、14.75、8.66,P ＜0.05);0.25～1.0 mg/kg rhG-CSF单次给药可不同程度地促进非清髓骨髓移植小鼠的多系造血恢复,尤以大剂量rhG-CSF(1.0 mg/kg)给药时效果更为显著(F=5.34、8.92、16.54,P＜0.05);此外,照射小鼠接受GFP小鼠骨髓细胞移植后,在照后9～21 d,rhG-CSF组小鼠外周血白细胞数均明显高于移植对照组(F =35.61,P＜0.05),但GFP+细胞比例在给药组与移植对照组之间差异无统计学意义.结论 rhG-CSF大剂量单次给药可显著促进非清髓骨髓移植小鼠多系造血功能恢复,但对输入的外源造血干细胞植入率没有明显影响.     

自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤

目的 :探讨自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤的可行性及疗效并了解干细胞动员、采集时机、骨髓恢复时间等问题。方法 :16例经病理确诊的高危乳腺癌、淋巴瘤及小细胞肺癌等在经不同程度的化疗后 ,进行了大剂量化疗并自体外周血干细胞的移植。结果 :全部病人均获造血重建 ,中性粒细胞 (>0 .5× 10 9·L-1)造血重建中位时间 14 (10～ 2 1)d ,血小板 (>2 0× 10 9·L-1)造血重建中位时间约 16 (12～ 2 5 )d。本组中 10例 (6 2 .5 % )病人随访中位时间 4 8月 (2～ 84月 )无病存活 ,6 (37.5 % )例复发。结论 :大剂量化疗并自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤疗效好 ,且较安全 ,而骨髓恢复的快慢似和回输的单个核细胞的量有关 ,和年龄无关。     

造血干细胞(CFU)增生状态的研究

用Till和McCulloch(1961)的方法,能定量地测定小鼠的多能造血干细胞(CFUs)。一种方法是移植少量骨髓或脾细胞进入超致死剂量照射的受体鼠,8～10天以后计数脾脏内的集落数(外源性-CFUs)。另一种方法追查亚致死剂量照射     

白血病人外周血造血干细胞分离及其临床应用(附3例报告)

本文报告应用Haemonetics-30血细胞分离机分离3例急性白血病CR期外周血造血干细胞。每例分离3～7次,每次历时1 1/2～2h,共获得2.93×10~9～4.28×10~9单个核细胞,用于急性白血病自身移植治疗,获得较满意的骨髓造血及免疫功能恢复效果。     

白藜芦醇促进γ射线照射小鼠造血系统损伤修复的作用

目的观察白藜芦醇对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤修复的影响。方法 ICR小鼠随机分成5组,即正常对照组、照射对照组以及白藜芦醇50、100、200 mg.kg-1照射组,照射前3 d灌服给药,每天1次。除正常对照组外,所有小鼠60Co射线全身5.5 Gy辐照1次,照射后第7天小鼠取骨髓细胞和脾脏,对骨髓单个核细胞和脾集落形成单位进行计数,测定骨髓细胞DNA含量和细胞周期。结果与正常对照组比较,照射对照组小鼠骨髓单个核细胞数和骨髓细胞DNA含量显著降低（P〈0.05）,脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）;与照射对照组比较,白藜芦醇100、200 mg.kg-1照射组小鼠照射骨髓单个核细胞数、骨髓细胞DNA含量、脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）,白藜芦醇50 mg.kg-1照射组有增多趋势。结论白藜芦醇可以促进60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤的恢复,防护效果与给药剂量相关。     

培养小鼠骨髓细胞半同系移植研究的补充材料

用体外培养不同时间的C57BL/6雄性小鼠骨髓细胞移植到受致死剂量γ线照射的DBF_1雌性小鼠,记录受照射小鼠30天和60天的活存率,并分析造血和免疫功能的主要指标.对部分长期活存小鼠(60～110天)的骨髓细胞和淋巴细胞的染色体核型作细致观察,了解移植进去的造血细胞是否已被植入,结果表明移植培养骨髓细胞的受照射小鼠活存率远较照射对照组为高,造血与免疫功能明显地重建,这无疑是由于移植骨髓在照射动物中形成稳定的辐射嵌合体所致.     

91合剂加速放射损伤小鼠功能的恢复

小鼠于一次全身γ射线照射前１周或者照射后３周内连续服用９１合剂，可加速小鼠免疫功能的恢复。９１合剂的作用表现为：①加速骨髓造血功能的恢复，给药组小鼠的ＣＦＵ－Ｓ／５×１０＾４ＢＭＣ和ＣＦＣ／５×１０＾４ＢＭＣ分别高于未给药组１．４－２倍和１．４－３．１倍，骨髓细胞对ＬＰＳ的增殖反应及Ｂ细胞含量都明显增高，②增强脾细胞对有丝分裂素的反应性。③提高照射小鼠的免疫应答能力。抗体水平及ＤＴＨ反应性同于对照     

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。     

甾体激素对致死剂量照射小鼠骨髓移植疗效的影响(摘要)

Laca纯系成年雌雄小鼠,受了~(60)Coγ线950rad(剂量率82R/min)一次全身照射后,移植5×10~6同系而性别不同的小鼠骨髓细胞,60天活存率54.4％,照射对照组于12～15天内全部死亡。在移植前3天或移植后即刻分别肌肉注射0.25mg和0.05mg 3,17β棕榈酸椎二醇(简称“棕二”)或0.5mg丙酸睾丸酮(简称“丙睾”),可使活存提高到76.2％～86.4％。对造血组织脾脏,也有促进其恢复重量的趋势。若单纯应用“棕二”或“丙睾”对950rad照射小鼠未见有明显的防治作用。