嗜肺军团菌在武钢青山地区的发现及其检测和防治对策

军团病是因1976年在美国费城退伍军人年会中首次发现急性发热性肺部疾患而被命名的。患者以呼吸道感染为主，死亡率较高。嗜肺军团菌（Legionella pneumophila，Lp）是军团菌属的代表种，是近20年来新发现的传染病之一。我们对武钢青山地区10家单位使用1个月后中央空调系统冷却塔水中的嗜肺军团菌进行检测调查，首次发现嗜肺军团菌的存在，并了解其分布特征和菌型特征，制定出相应的防治策略。     

茂名市公共场所中央空调冷却水中军团菌污染状况调查

目的调查茂名市公共场所大型中央空调冷却水中军团菌的污染状况及主要血清型。方法于2006年8月至2007年7月．共采集茂名市区部分商场、酒店等中央空调冷却水24份，应用GVPC、BCYE、BCY培养基进行军团分离培养、生化鉴定及血清分型。结果冷却塔冷却水中军团菌的污染率达37．5％（9／24），血清型有LP1、U两种，以LJ（6／9）为主。结论茂名市公共场所大型中央空调冷却水中军团菌检出率较高，对市民健康构成了威胁。     

上海市集中式中央空调冷却塔水嗜肺军团菌污染状况分析

目的了解上海市宾馆、大型商场、超市及写字楼中央空调系统嗜肺军团菌的污染状况。方法采集上海市100家公共场所集中式中央空调冷却塔水100份,经酸处理,以GVPC、BCYE、血平板进行菌落筛选,并应用生化反应鉴定,最后进行血清学分型。结果100份冷却塔水检出嗜肺军团菌的样本数为75份,检出率达75％（75／100）,其中宾馆、大型商场、超市、写字楼阳性率分别为80．6％、72．7％、72．7％、70％。75份检出水样中分离到76株军团菌,血清型别呈多样化,但以LPl为主,同一份水样同时检出2个型别的占总检出水样的1．3％（1／75）。结论上海市公共场所中央空调冷却水中嗜肺军团菌污染严重,血清型别呈多样化,对人群健康构成潜在威胁,需要引起重视,以防军团菌病的暴发流行。     

空调冷却水军团菌污染调查

目的 调查某市城区空调系统军团菌(Lp)污染的现状,为军团菌肺炎的预防和控制工作提供参考.方法 采取随机抽样研究方法,抽取某市城区空调冷却塔水样32份,作军团菌污染情况检测.结果 在32份冷却塔水样中,有13份水样检出了军团菌(Lp1型和Lp2-14型),其阳性检出率为41%.结论 该市空调冷却塔水军团菌污染较普遍,应当引起高度重视,加强空调系统的定期和不定期的清洗、消毒工作非常必要.     

嗜肺军团菌mip基因联合疫苗诱导的小鼠免疫应答

<正>军团病主要由嗜肺军团菌引起,嗜肺军团菌共有15个血清型,其中血清1型在人军团菌病中最常见,约占80%[1],可引起严重肺炎[2]。军团菌污染的水源通过加湿器、喷雾器、淋浴器、水龙头等载体形成气溶胶。人体吸入气溶胶后引起军团菌感染[3-4]。随着人们生活水平的提高,人工冷热水系     

无锡市冷却塔水军团菌污染状况及菌型分析

目的了解无锡市不同场所冷却塔水中军团菌污染状况和血清型别。方法按照无锡市地理分布抽取32家公共场所和8家工厂作为监测点,共抽取冷却塔水529份,按照卫生部《集中空调通风系统卫生规范》附录A＂空调系统军团菌的检验分析方法＂进行检测。结果 529份冷却塔水军团菌的检出率达14.18%（75/529）,阳性率以商场和医院为高,分别为27.45%（14/51）和24.00%（18/75）。公共场所以7、8月份的阳性率为高,分别为18.75%（9/48）和25.25%（25/99）;工厂工艺性冷却塔水军团菌在全年各月份均有检出。军团菌血清型以LP1为主,占78.67%（59/75）。结论无锡市不同场所冷却塔水中存在军团菌污染,对人群健康构成潜在威胁,需引起重视。     

嗜肺军团菌分子生物学检测及流行病学分型方法

军团菌病主要由嗜肺军团菌引起。与传统的军团菌检测方法相比，分子生物学检测技术灵敏度高、特异性强、快速有效。分子分型对军团菌流行病学调查及监控具有非常重要的意义。本文对嗜肺军团菌分子生物学检测及流行病学分型方法作一综述。     

延安市286例呼吸科患者血清嗜肺军团菌抗体的检测

目的了解延安市嗜肺军团菌的感染情况。方法采用微量凝集法对286份呼吸科住院患者血清标本进行嗜肺军团菌Lp1型军团菌抗体测定。结果抗体阳性率为17．13％,其中男为18．56％,女为15．13％;在各年龄组均有嗜肺军团菌Lp1型抗体阳性者,其中40岁年龄组的感染率（26．09％）最高;呼吸科疾病中肺结核患者合并嗜肺军团菌Lp1感染率较高,为26．56％,各疾病类型之间感染率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论延安市存在一定的嗜肺军团菌感染,需加强对军团病血清学的监测工作。     

162例婴幼儿非典型性肺炎患者抗MP、CP和LP抗体检测的临床意义

非典型肺炎(atyccal pneumonia,AP)是社区获得性肺炎(CAP)中的一种,引起AP病原体主要包括肺炎支原体、肺炎衣原体和嗜肺军团菌等.本研究应用间接免疫荧光法(IIF)对162例婴幼AP患者血清进行抗肺炎支原体(mycoplasma pnemnoniae,MP)抗体、抗肺炎衣原体(chlamydiapneumoniae,CP)抗体和抗嗜肺军团菌(Legionella pneumophile,Lp)抗体联合检测,现报道如下.     

PCR检测嗜肺军团菌的应用研究

ＰＣＲ检测嗜肺军团菌的应用研究李崇辉，杨瑞馥．李银太，郭兆彪，周方，高树德嗜肺军团菌（ＬＰ）是引起军团病的主要病原菌。作者将建立的用ＰＣＲ检测ＬＰ的方法，应用于环境水和临床标本中ＬＰ的检测，并建立了简便快速实用的标本处理方法。首先以环境水中的常见细菌...     

双重PCR检测气道肺泡灌洗液在军团菌肺炎早期诊断中的意义

为探讨采用双重PCR方法 (DPCR)检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)标本中军团菌DNA在早期诊断军团菌肺炎方面的意义 ,采用DPCR方法对军团菌肺炎组 (8例 )、临床表现类似军团菌肺炎组 (15例 )、普通肺炎组 (16例 )、肺结核组 (10例 )和肺癌组 (15例 )五组患者留取的BALF标本进行检测。军团菌肺炎组的DPCR阳性检出率为 10 0 % ,明显高于其它四组 (分别为 13 33% ,0 % ,0 % ,0 % ) ,(均P <0 0 1)。模拟BALF标本DPCR的最低检出限为 1× 10 3cfu mL。采用DPCR方法检测BALF标本中的军团菌DNA具有较好的敏感性和特异性 ,此法在临床早期诊断军团菌肺炎方面具有一定的价值     

南京地区肺科患者军团菌感染状况调查

了解南京市不同人群军团菌感染情况.选择南京市健康从业人员和肺科住院患者共计912份血清标本,采用微量凝集试验检测军团菌抗体效价,并对受检者进行流行病学调查.结果显示,南京市肺科患者军团菌抗体阳性率(46.3%,265/572)显著高于健康从业人员阳性率(39.4%,134/340)(P＜0.05).女性阳性率(45%)比男性阳性率(42.9%)稍高,但无显著性差异(P＞0.05).肺科患者中Lp 1型阳性率最高(14.2% ),其次为Lp 6型(8.9% ),Lp 10型最低(0.17%).健康从业人员中Lp 1型阳性率最高(12.4%),其次为Lp 3型(7.1%),Lp 6型(6.2%)和Lm型(5.0%)较低,Lp9未检出.结果提示,军团菌感染已经成为南京市肺科疾病重要的因素之一,并已对健康从业人员构成潜在危险.     

嗜肺军团菌Ⅳ型菌毛蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化

目的扩增编码Ⅳ型菌毛蛋白的嗜肺军团菌pilE基因,构建重组质粒pET32a（＋）-pilE并在原核系统中表达．纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE．为进一步探讨Ⅳ型菌毛蛋白的作用及其作为军团病的诊断抗原提供实验基础。方法采用聚合酶链式反应（PCR）从嗜肺军团菌扩增得到pilE基因,构建重组质粒pET32a（＋）-pilE,转化大肠杆菌BL21（DE3）并用聚合酶链式反应、限制性酶切分析、序列分析鉴定后,IPTG诱导表达PIIJE蛋白,用硫酸十二烷酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）、Western印迹鉴定。使用HisTrap^TM HP亲和层析柱纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE。结果扩增出430bp的pilE基因;构建了重组质粒pET32a（＋）-pilE;表达并纯化出35700Mr的目标蛋白。结论成功构建了嗜肺军团菌pilE基因的原核重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达。成功纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE。     

社区获得性军团菌肺炎39例临床分析

目的 了解社区获得性军团菌肺炎(LP)的临床特征,提高对本病认识.方法 收集确诊社区获得性LP的住院患者39例,对其临床资料进行回顾性总结分析.比较单纯军团菌感染组及合并其他病原菌感染组临床表现、实验室检查、胸部CT及治疗预后等方面的差异结果39例患者,共有34例(87.2％)合并基础疾病,主要为高血压(38.5％)、冠心病(33.3％)、2型糖尿病(25.6％)、恶性肿瘤(23.1％)、肾功能不全(35.9％)、脑血管病(20.5％)等.单纯军团菌感染18例(46.2％),合并其他细菌或真菌感染21例(53.8％).合并感染组的年龄及基础疾病(恶性肿瘤、冠心病、高血压、脑血管病)情况显著高于单纯感染组,差异有统计学意义(P<0.05).临床表现主要为发热(94.9％)、咳嗽(92.3％)、呼吸困难(20.5％)、肌肉酸痛(20.5％),两组间差异无统计学意义.39例患者中,肝功能异常占30.8％、低蛋白血症占76.9％、白细胞升高占43.6％、中性粒细胞百分比升高占79.5％、CRP升高占92.3％、PCT升高占71.8％.合并感染组中,低蛋白血症、白细胞及PCT升高所占比例显著增高,两组差异有统计学意义.39例患者均表现为斑片影,其中多发斑片影33例(84.6％),单发斑片影6例(15.4％),合并胸腔积液10例(25.6％),两组间差异无统计学意义.18例单纯军团菌肺炎患者均给予喹诺酮类抗菌素治疗2周并痊愈.21例合并感染组患者,给予喹诺酮类联合β内酰胺类药物,有4例(19.0％)死亡,17例(81.0％)痊愈.结论 社区获得性军团菌肺炎临床及影像学表现不典型,对于高龄合并基础疾病的老年人,需要警惕军团菌肺炎合并其他细菌及真菌感染的可能,早期诊断并尽早应用喹诺酮类联合β内酰胺类药物,对改善预后至关重要.     

军团病的流行趋势及防治措施

军团病是1976年发现的人类急性发热性细菌性呼吸道病,由嗜肺军团菌引起,以肺炎为主要表现,常伴有全身多系统损害,也可表现为一种非肺炎的急性发热。20多年来,全球多起爆发流行,由于症状不典型,容易误诊误治,病死率高达25%～30%,是21世纪值得重视的感染病之一。     

用军团菌McAb的ELISA测定抗原与抗体的实验研究

<正> 迄今发现嗜肺性军团病杆菌(LDB)有22个种。引起军团病的主要由第1种即嗜肺性LDB引起。鉴于军团病病人常起病重笃,死亡率高,建立快速的实验室诊断技术具有迫切的现实意义。目前建立的各种方法如协同凝集、反向血凝、放射免疫分析、ELISA等存在的一个共同问题是所用的多克隆抗体具     

应用单一和双重荧光定量PCR法快速检测军团菌

目的 建立单一和双重荧光定量PCR方法分别和同时进行军团菌属及嗜肺军团菌的检测.方法 利用军团菌属16 S rRNA基因和嗜肺军团菌mip基因设计引物和探针,两条基因探针分别标记FAM和HEX,并将相关反应体系和条件进行优化.分别应用单一基因探针(单一荧光定量PCR)和双重基因探针(双重荧光定量PCR)对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及非军团菌进行检测,并验证两种方法的特异度、敏感度.应用双重荧光定量PCR检测空调水样滤膜样品和DNA提取样品,比较两者结果的一致性.结果 针对军团菌属及嗜肺军团菌,应用荧光定量PCR,16 S rRNA基因和mip基因均能较好的检出,16S rRNA和mip的最低检出限分别为8和10个拷贝.经优化得到了最佳反应体系.单一荧光定量PCR方法所检的8株嗜肺军用菌及4株非嗜肺军团菌16 S rRNA基因均为阳性,嗜肺军团菌mip基因阳性,非嗜肺军团菌mip基因阴性.双重荧光定量PCR方法所检的23株嗜肺军团菌中有2株为假阴性,9株非嗜肺军团菌和非军团菌属中有1株为假阳性.49份空调水样滤膜直接检测和提取DNA后检测的结果一致,其中26份水样军团菌阳性,20份为嗜肺军团菌,6份为非嗜肺军团菌;1份弗朗西斯菌检测HEX阳性(假阳性),占实际培养分离的1/26.结论 单一及双重荧光定量PCR法特异、快速、敏感,一次同时检测嗜肺与非嗜肺军团菌,满足对空调和环境水样军团菌监测的要求.     

实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌的研究

目的 建立TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌技术,为临床和环境样品检测嗜肺军团菌提供可实用工具.方法 在对嗜肺军团菌mip序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过实时荧光PCR反应条件和反应体系的优化,实现对嗜肺军团菌的快速检测;用克隆到pMD-19T载体上的嗜肺军团菌mip基因阳参片段和不同菌株验证方法的敏感性和特异性.结果 当用热裂解法提取DNA,25μl的反应体系中包括上、下游引物(20μmol/L)各0.6μl,探针(20μmol/L)0.4μl,模板DNA 6.0μl,反应条件为预变95℃20 S,变性95℃10 s,退火50℃ 40 s,40个循环时,TaqMan-MGB探针实时荧光PCR技术对嗜肺军团菌mip基因阳参片段最低检测浓度为0.71拷贝/μl,其循环阈值(Ct值)与模板浓度具有极好的对应关系(r=0.999);1株嗜肺军团菌标准株、12株嗜肺军团菌分离株的Ct值在13.23～16.04之间,而包括金黄葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺菌共计76株其他菌PCR Ct值均大于30;整个检测过程仅需1.5 h.结论 TaqMan-MGB探针的嗜肺军团菌实时荧光PCR检测方法具有特异性和敏感性、易操作、结果准确可靠等优点,可用于嗜肺军团菌检测.     

应用单一和双重荧光定量PCR法快速检测军团菌

目的 建立单一和双重荧光定量PCR方法分别和同时进行军团菌属及嗜肺军团菌的检测.方法 利用军团菌属16 S rRNA基因和嗜肺军团菌mip基因设计引物和探针,两条基因探针分别标记FAM和HEX,并将相关反应体系和条件进行优化.分别应用单一基因探针(单一荧光定量PCR)和双重基因探针(双重荧光定量PCR)对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及非军团菌进行检测,并验证两种方法的特异度、敏感度.应用双重荧光定量PCR检测空调水样滤膜样品和DNA提取样品,比较两者结果的一致性.结果 针对军团菌属及嗜肺军团菌,应用荧光定量PCR,16 S rRNA基因和mip基因均能较好的检出,16S rRNA和mip的最低检出限分别为8和10个拷贝.经优化得到了最佳反应体系.单一荧光定量PCR方法所检的8株嗜肺军用菌及4株非嗜肺军团菌16 S rRNA基因均为阳性,嗜肺军团菌mip基因阳性,非嗜肺军团菌mip基因阴性.双重荧光定量PCR方法所检的23株嗜肺军团菌中有2株为假阴性,9株非嗜肺军团菌和非军团菌属中有1株为假阳性.49份空调水样滤膜直接检测和提取DNA后检测的结果一致,其中26份水样军团菌阳性,20份为嗜肺军团菌,6份为非嗜肺军团菌;1份弗朗西斯菌检测HEX阳性(假阳性),占实际培养分离的1/26.结论 单一及双重荧光定量PCR法特异、快速、敏感,一次同时检测嗜肺与非嗜肺军团菌,满足对空调和环境水样军团菌监测的要求.     

广州市亚运接待宾馆酒店淋浴热水军团菌污染状况分析

目的对广州市亚运接待宾馆酒店淋浴热水的军团菌污染状况进行调查分析,提出相应的对策。方法采集广州市48间亚运接待宾馆酒店淋浴热水108份,按照卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范》2006年附录A进行军团菌的检测。结果 108份淋浴热水中,10份淋浴热水共检出11株嗜肺军团菌,阳性率为9.3%;其中LP1、LP3、LP6血清型分别占45.5%、18.2%、36.4%;三星级、四星级和五星级宾馆酒店淋浴热水军团菌的阳性率分别为15.2%、11.1%和2.6%。结论广州市亚运接待宾馆酒店的淋浴热水存在嗜肺军团菌的污染,建议定期清洗消毒淋浴设施,并加强对淋浴热水中军团菌的监测,以防范军团菌病的发生。