口形红细胞增多伴巨大血小板辅助诊断植物固醇血症1例并文献复习

植物固醇血症是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,目前认为其发病机制为 ABCG5 和(或)ABCG8双等位基因突变导致的肠道对植物固醇吸收增加,同时胆汁对植物固醇排泄减少,使体内植物固醇水平升高,患者可无明显症状也可表现为高胆固醇血症、早发心血管病疾病、黄色瘤及血液学改变(口形红细胞增多、出现巨大血小板、血小板减少、脾肿...     

植物固醇血症的临床诊断现状及相关分子致病机制的研究进展

植物固醇血症是一种罕见的常染色体隐性遗传病,可导致多发性皮肤和肌腱黄色瘤,进一步可引发动脉粥样硬化、早发冠心病等心血管疾病,早期发现和治疗至关重要。遗传学分析推测植物固醇血症的发病率约1/20.7万,其携带的ABCG5/G8纯合或杂合突变均可能造成血浆胆固醇水平增高,并影响高胆固醇血症人群的临床表型和预后。深入研究和探索植物固醇血症的分子致病机制以及ABCG5/G8的生理功能及其相关调控因子,将有助于进一步了解人体对于胆固醇稳态的调节机制。提高临床对植物固醇血症的认知度和重视度,建立基于中国人群数据的植物固醇参考区间,并推广气相色谱等方法的血浆植物固醇水平检测,都将有望大幅提高该疾病的检出率和治疗达标率。     

3例植物固醇血症患儿临床表型、实验室检查、基因诊断及文献复习

目的观察3例植物固醇血症患儿的临床诊治特点。方法回顾性分析3例不同临床表型的植物固醇血症患儿(例1和例2,双胞胎姐妹,7岁2月龄,因频繁鼻衄、腹痛就诊;例3,男,5岁7月龄,因皮肤黄色瘤就诊)实验室检查特点,用气相色谱-质谱联用仪分析患儿血清植物固醇水平,二代测序分析其致病基因,Sanger测序方法对所发现的ABCG5基因变异及父母来源进行验证。结果 (1)例1、2患儿中度贫血,网织红细胞升高,总胆红素和间接胆红素升高,脾脏肿大。血涂片见较多口形红细胞等异形红细胞,大/巨大血小板增多,瑞斯托霉素诱导血小板聚集试验结果降低。尿液常规检查提示有泌尿系统出血,血脂检测结果基本正常。例3患儿轻度贫血,红细胞形态大致正常,脾脏未及肿大。大/巨大血小板增多,血小板聚集试验、胆红素、尿液常规检查结果未见异常,总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇明显升高。(2)3例患儿血清植物固醇含量均明显升高。(3)例1、2患儿ABCG5基因检出2个杂合变异,为复合杂合变异,c.904+1GA和c.751CT,变异分别来自父亲和母亲;例3患儿ABCG5基因检出1个纯合变异,c.751CT,变异来自父母。结论初诊患儿若表现为大/巨大血小板增多与溶血性贫血、口形红细胞增多或皮肤黄色瘤,血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇升高,需考虑植物固醇血症的可能,需尽早行血植物固醇含量和基因检测,以便及早干预和治疗,改善预后。     

3例植物固醇血症患儿临床表型、实验室检查、基因诊断并文献复习

目的观察3例植物固醇血症患儿的临床诊治特点。方法回顾性分析3例不同临床表型的植物固醇血症患儿(例1和例2,双胞胎姐妹,7岁2月龄,因频繁鼻衄、腹痛就诊;例3,男,5岁7月龄,因皮肤黄色瘤就诊)实验室检查特点,用气相色谱-质谱联用仪分析患儿血清植物固醇水平,二代测序分析其致病基因,Sanger测序方法对所发现的ABCG5基因变异及父母来源进行验证。结果 (1)例1、2患儿中度贫血,网织红细胞升高,总胆红素和间接胆红素升高,脾脏肿大。血涂片见较多口形红细胞等异形红细胞,大/巨大血小板增多,瑞斯托霉素诱导血小板聚集试验结果降低。尿液常规检查提示有泌尿系统出血,血脂检测结果基本正常。例3患儿轻度贫血,红细胞形态大致正常,脾脏未及肿大。大/巨大血小板增多,血小板聚集试验、胆红素、尿液常规检查结果未见异常,总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇明显升高。(2)3例患儿血清植物固醇含量均明显升高。(3)例1、2患儿ABCG5基因检出2个杂合变异,为复合杂合变异,c.904+1GA和c.751CT,变异分别来自父亲和母亲;例3患儿ABCG5基因检出1个纯合变异,c.751CT,变异来自父母。结论初诊患儿若表现为大/巨大血小板增多与溶血性贫血、口形红细胞增多或皮肤黄色瘤,血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇升高,需考虑植物固醇血症的可能,需尽早行血植物固醇含量和基因检测,以便及早干预和治疗,改善预后。     

三个伴有巨大血小板和溶血性贫血的植物固醇血症家系研究

目的 研究3个以血液学改变为首发临床表现的植物固醇血症先证者及家系的临床表型和基冈诊断.方法 光学显微镜观察红细胞及血小板的形态;高效液相色谱法检测血浆中豆固醇、二氢胆固醇及谷固醇的含量;PCR法扩增先证者ABCG5和ABCG8基因外显子和侧翼序列,针对先证者的突变位点,对其家系成员进行相应片段基因的检测;同时在正常人...     

伴有红细胞和血小板异常的植物固醇血症临床及基因研究

目的研究一个伴有红细胞和血小板异常的植物固醇血症家系的临床、生物化学和分子生物学特征。方法用高效液相色谱方法检测血浆植物固醇含量;PCR法扩增ABCG5和ABCG8基因的所有外显子和侧翼序列,DNA测序确定基因异常,限制性内切酶(BfaⅠ)分析该家系及70名正常人相应序列的PCR产物。结果3例患者临床主要表现为溶血和巨大血小板,其血浆谷固醇、豆固醇和二氢胆固醇浓度明显增高而总胆固醇浓度正常。发现在ABCG5基因外显子1中18 802位碱基发生C→T突变,导致22位的谷氨酸(Q)变为终止密码子。3例患者均为纯合子,其父母及两个亲属为杂合子。ABCG8基因测序结果未见异常。限制性内切酶BfaⅠ分析70名正常人相应序列的PCR产物未发现相同的基因突变。结论血细胞是血浆植物固醇毒性作用的一个靶子,红细胞和血小板的异常是植物固醇血症的一种特殊的表型。     

同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的家族性高胆固醇血症一家系的临床及分子生物学特征

目的:探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1（LDLRAP1）及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8（ABCG8）基因异常的家族性高胆固醇血症（FH）一家系的临床及分子生物学特征。方法:2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者,采集该家系成员外周静脉血样本,检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（...     

同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的家族性高胆固醇血症一家系的临床及分子生物学特征

目的探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)基因异常的家族性高胆固醇血症(FH)一家系的临床及分子生物学特征。方法 2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者, 采集该家系成员外周静脉血样本, 检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);用高效液相色谱法检测血清豆固醇和谷固醇含量。二代基因测序检测先证者及家系成员基因变异情况。采用Pymol软件对基因变异位点进行致病性分析, 并使用Uniprot Modelling软件行蛋白结构建模。结果先证者表现为贫血合并多部位黄色瘤、早发急性冠状动脉综合征。冠状动脉造影示冠状动脉三支严重病变;腹部超声示脾肿大;血涂片示异型红细胞、大血小板散在可见;血清TC、LDL-C、豆固醇和谷固醇浓度均升高[分别为8.54 mmol/L(正常值2.3～5.7 mmol/L)、4.84 mmol/L(正常值1.3～4.3 mmol/L)、44 μmol/L(正常值1.0～10 μmol/L)、28 μmol...     

高甘油三酯血症患者脂蛋白脂肪酶基因检测意义

目的探讨脂蛋白脂肪酶（1ipoproteinlipase,LPL）基因突变与高甘油三酯血症的相关性。方法采用Primer5．0软件针对I。PI,基因分片段设计特异性引物。高甘油三脂血症患者12例,抽取外周静脉血提取基因组DNA,扩增LPI。基因1～9号外显子及相邻部分内含子,进行核苷酸测序,并与LPI。基因全序列进行比对分析。结果12例患者中1例LPL基因第4外显子存在错义杂合突变;1例I。PL基因第8外显子存在同义杂合突变;8例LPI。基因第6内含子5’端的几个位点处发生相同的碱基置换（1388＋73T〉G,1388＋108G〉A,1388＋82C〉A）;2例患者未检出核苷酸变化。结论I．PL基因缺陷与高甘油三脂血症密切相关,LPL基因检测可用于临床上有遗传倾向的严重高甘油三脂血症患者的基因诊断。     

家族性高胆固醇血症家系低密度脂蛋白受体基因突变分析

目的:对1例临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症(FH)先证者及其3代家系成员进行基因检测和系谱分析,探讨其发病机制.方法:先证者家中收集该家系3代共10例血标本及临床资料.对其家系成员进行血脂测定,酚氯仿法提取患儿及家系成员基因组DNA并鉴定,应用多聚酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析结合DNA直接测序方法,检测其低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因的全部18个外显子和启动子及载脂蛋白B(ApoB100)26外显子,核苷酸序列分析结果与GeneBank比对寻找突变.结果:(1)先证者右锁骨下动脉起始,双侧颈总动脉分叉处,中段内一中膜轻度增厚,左房轻度增大,二尖瓣、三尖瓣及主动脉瓣轻度返流,冠脉血流储备减低;(2)该家系排除ApoB100基因26外显子3500附近位点突变;(3)核苷酸序列分析证实先证者LDL-R基因第13外显子发生D601Y纯合突变,为1864位G→T碱基置换,导致天冬氨酸改变为酪氨酸,先证者父亲和母亲LDL-R基因第13外显子均发生D601Y杂合突变.结论:该先证者LDL-R基因存在D601Y纯合突变,其父母LDL-R基因存在D601Y杂合突变,可能为该家系中FH的致病突变.     

一个重症vWD家系临床与基因分析

目的：研究重症血管性血友病（ｖＷＤ）患者家系成员临床表型特征，并分析血管性血友病因子（ｖＷＦ）基因缺陷的传递规律。方法：应用ｖＷＦ多聚体分析和ＥＬＩＳＡ法检测重症ｖＷＤ患者父母家系四代２６位成员临床表型。在此基础上针对ｖＷＦ基因内多个ＲＦＬＰ和ＶＮＴＲ位点，对所有家系成员进行缺陷基因遗传分析。结果：患者血浆ｖＷＦ∶Ａｇ＜２％，检测不到多聚体条带。基因分析表明两条ｖＷＦ等位基因分别来自父方和母方家系，且均有缺陷。部分家系成员携有一条缺陷基因，ｖＷＦ水平正常或有轻度下降，多聚体图谱正常。结论：①先证者可能为复合杂合子型的３型ｖＷＤ患者，携带者的缺陷基因可被正常基因弥补。②应用ｖＷＦ基因多种多态性标志行ＤＮＡ分析对重症ｖＷＤ家系遗传咨询有实用意义。     

一例Ⅰ型神经纤维瘤病患者的NF1突变检测及家系分析

目的 对1例临床拟诊为Ⅰ型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 1,NF1)患者进行致病基因突变研究. 方法 提取先证者及其家系成员外周全血基因组DNA,通过目标捕获二代测序技术(targeted next-generation sequencing,TNGS)对先证者Ⅰ型神经纤维瘤蛋白基因(neurofibromin 1,NF1)的全部编码区外显子及其侧翼序列进行高通量测序检测可疑突变,并用Sanger测序法进一步验证;对其家系成员NF1相同突变位点进行Sanger测序检测. 结果 基因检测发现先证者NF1第45号外显子1个已知致病突变c.6790_6791insA(p.Tyr2264Ter),有类似临床表现的父亲和姐姐检出相同突变,表型正常的母亲和妻子未检测到此突变,其4岁儿子也检测出该突变. 结论 NF1的c.6790_6791insA(p.Tyr2264Ter)突变存在与该家系NF1的发病密切相关.     

Molecular genetic mechanism analysis and pedigree investigation of rare Bweak subgroup

ObjectiveTo analyze the molecular mechanism of rare B_weak subgroup in the ABO blood group system and conduct pedigree investigations.MethodsThe blood group was detected by conventional serological method, and ABO gene of proband and her family was amplified and sequenced by polymerase chain reaction method.ResultsThe study showed that the proband was a B_weak phenotype by conventional serological method. Her family’s serological results were as follows, her father and eldest brother were B_weak subgroup while her mother and second eldest brother were O group. The proband’s ABO gene sequencing result was ABO*BW.27/ABO*O.01.02. Her father, mother and two elder brothers were ABO*BW.27/ABO*O.01.01, ABO*O.01.01/ABO*O.01.02, ABO*BW.27/ABO*O.01.02, ABO*O.01.01/ABO*O.01.02.ConclusionConventional blood group serology combined with molecular diagnostic technology can accurately identify the B_weak subgroup, and the pedigree investigation analysis showed that the proband's allelic mutation came from her father. She has gained a point mutation of c.905A>G on the basis of ABO*B.01.     

一个遗传性全白甲中国家系FZD5、LOC729607基因突变分析

背景：遗传性全白甲是一种少见的常染色体显性遗传病，其致病基因目前尚未发现。目的：对一个中国汉族遗传性全白甲家系的2个候选基因进行突变筛查检测，研究遗传性全白甲的分子遗传基础。设计、时间及地点：候选基因突变筛查检测，于2007—01／06在中国人类基因组北方研究中心实验室完成。材料：搜集一遗传性全白甲家系患者静脉血，制备基因组DNA。方法：采用定位候选克隆法，在已经定位的致病基因区域内，选择FZD5，LOC729607基因进行突变筛查。应用PCR扩增、PCR产物直接测序的方法检测和对比遗传性全白甲家系内3例患者和一个正常人候选基因的外显子区及邻近内含子区域碱基顺序，并将测序结果与NCBI数据库内标准系列对比。主要观察指标：检测和对比遗传性全白甲家系内患者和正常人候选基因的外显子区及邻近内含子区域碱基顺序，并将测序结果与NCBI数据库内标准系列对比，发现患者、正常人、标准系列碱基顺序的差异，分析这些差异的意义。结果：FZD5基因exon706位碱基A→G：LoC729607基因exon5下游51661位缺T，exon6上游57257位C→T，exon7上游71187位AG杂合。所检测到的变异在家系中患者和正常人中都存在，在NCBI数据库中能查到相应的位点，是单核苷酸多态。结论：在FZD5（frizzled5），LOC729607基因编码区域及邻近非编码区域中未发现遗传性全白甲家系的致病突变。     

抗凝血酶基因杂合突变导致的抗凝血酶缺陷症

目的 对1例先天性抗凝血酶（AT）缺陷症患者及其家系成员进行AT表型及基因突变检测。方法 采用发色底物法和免疫比浊法分别检测先证者及其家系成员血浆AT活性（AT：A）和AT抗原含量（AT：Ag），并采用PCR法对先证者AT基因的7个外显子及其侧翼内含子序列进行扩增，PCR产物纯化后直接测序检测基因突变。结果 先证者的AT：Ag正常，但AT：A为正常值的65％，表现为Ⅱ型AT缺陷，其AT基因外显子6区第13830位核苷酸发生了G—A杂合突变，引起Arg393His错义突变。同样突变也见于该家系其他3名成员。结论 该家系成员的Ⅱ型AT缺陷由AT基因G13830A杂合突变所致，可致血栓形成。     

多发性骨性连接综合征大家系的临床观察及遗传学研究

目的:探讨多发性骨性连接综合征(SYNS)大家系的临床及遗传特征。方法:采用家系分析法探讨SYNS大家系的遗传规律,采用全基因组扫描和连锁分析法定位该家系的致病基因。结果:排除由NOG和GDF5基因突变导致的SYNS1和SYNS2型,发现1个新的SYNS致病基因位点。结论:SYNS存在一种新的遗传异质性,该致病基因定位于13q12。     

遗传性蛋白S缺陷症一个新的基因突变

目的 研究一个遗传性蛋白S（PS）缺陷家系的遗传表型及基因型特征。方法 PS活性用凝固法测定,PS抗原用ELISA方法测定。用聚合酶链反应扩增5代家系34个成员中9个PS活性及抗原减低的PS1－15号外显子片段,用单链构象多态性（SSCP）分析cDNA变性后的差异,用测序方法检测突变点。结果 该家系5代9名成员游离PS抗原在10％－45％（正常值为55％－128％）。PS活性在13％－37％（正常值为70％－130％）,较正常参考范围明确降低,二者呈平行下降,但总PS抗原均在正常范围。在这些成员中均检测到10号外显子第163位核苷酸G→T突变,使AGT→ATT,在mRNA转录时,转录为终止密码子,阻断蛋白质的合成。结论 本家系的Ⅲ型PS缺陷症基因分析证明,先证者为杂合子型。在PS10号外显子上第163位核苷酸发生G→突变,在蛋白质合成过程中丝氨酸被终止密码子替代,为目前文献中尚未报道的一个新的基因突变点。     

遗传性多发性骨软骨瘤EXT基因的一种新突变

目的：对1个遗传性多发性骨软骨瘤（HME）家系的EXT1和EXT2基因编码序列进行突变检测，寻找引起该家系HME的致病基因突变。方法：应用PCR扩增先证者EXT1和EXT2各外显子及其侧翼序列，产物经割胶纯化后，直接测序分析。结果：DNA测序分析发现，先证者EXT1基因第7外显子区有一杂合缺失突变，为1564．7delC，导致522位后编码氨基酸发生移码突变，并在546位引入终止密码，使编码的EXT1蛋白为截断型蛋白。经家系调查发现．该突变来自先证者的母亲。先证者EXT2基因未发现突变。结论：EXT1基因1564—7delC杂合突变是引起该家系HME的分子机制。     

1例谷固醇血症患儿的护理

总结1例8岁谷固醇血症患儿的护理经验。护理要点包括：制订个性化饮食清单,限制植物固醇和动物固醇摄入;监测患儿生长发育指标,评估其营养状况;观察并记录黄瘤变化情况,减少黄瘤带来的困扰;密切观察病情,预防并发症;加强心理护理,缓解患儿及其家属的消极情绪;定期随访,开展延续护理,提升患儿及其家属对疾病的管理能力。持续随访20个月,患儿症状改善,未发现相关并发症。