Wnt通路激活的结直肠癌细胞抑制肿瘤浸润性树突细胞成熟的机制研究

目的大部分肠癌存在Wnt通路激活,基础研究发现Wnt通路可影响肿瘤免疫,但其在结肠癌中的作用不明。本研究主要探讨Wnt通路激活对结肠癌免疫微环境的影响以期发现结直肠癌免疫治疗新靶点。方法免疫荧光技术验证SW480和NCM460 Wnt通路状态;qPCR和Western blot技术对比Wnt通路激活的结肠癌细胞系SW480和正常肠上皮细胞NCM460 IL-1β表达水平的不同;分离人外周血单核细胞,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导形成未成熟树突细胞(i DC),再加入IL-1β刺激诱导成熟树突细胞(mDC),用流式细胞技术检测m DC细胞表面成熟分子表达量。结果 SW480细胞核表达beta-catenin,提示Wnt通路激活。使用Wnt通路抑制剂(ICG-001)处理SW480后IL-1βmRNA和蛋白表达水平均升高,且随浓度升高而升高,使用wnt通路激活剂(Licl)处理NCM460后IL-1βmRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且随浓度升高而降低,且IL-1β蛋白表达量均与非磷酸化β-连环蛋白(activeβ-catenin)表达量呈负相关关系。IL-1β可促进iDC成熟,IL-1β50 ng/mL组HLA-DR、CD86表达率分别为(69±3.62)%、(84.3±4.7)%,与RPMI组及TNF-a 10 ng/mL组相比,表达显著上调(P<0.001)。结论 Wnt通路激活的结直肠癌可能通过减少IL-1β的表达来阻碍肿瘤微环境中DC的成熟。     

结直肠癌中CAR-T细胞免疫治疗的研究现状及展望

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法是一种通过基因工程修饰来招募T细胞对抗肿瘤的新方法。CAR-T细胞免疫疗法在血液系统恶性肿瘤中已取得巨大的进展,因此,许多研究者提出将其用于诸如结直肠癌(CRC)这类实体肿瘤。但是,由于肿瘤特异抗原的缺乏,肿瘤细胞间的紧密连接和免疫抑制性的肿瘤微环境,以及治疗不良反应等问题,限制...     

结直肠癌癌变通路的研究进展

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,在全世界恶性肿瘤范围内其发病率居第3位,死亡率居第4位11]。在我国,结直肠癌的发病率和死亡率处于较低水平,但近年来却呈现不断上升的趋势,目前已位居我国恶性肿瘤死因顺位第4至第5位口]。现就结直肠癌的癌变通路的研究进展综述如下。     

泛素特异性肽酶22经Wnt/β-catenin通路调控结直肠癌化疗耐药的机制研究

目的探讨泛素特异性肽酶22（USP22）作用于Wnt/β-catenin信号通路参与结直肠癌的发生和化疗耐药的分子机制。 方法采用氟尿嘧啶（5-Fu）处理结直肠癌细胞株HT-29,建立耐药细胞株HT-29/5-Fu;构建USP22 siRNA稳定表达细胞株（表示为HT-29-sh USP22、HT-29/5-Fu-sh USP22）。CCK-8法检测HT-29/5-Fu细胞对5-Fu的敏感性、抑制USP22表达后结直肠癌细胞对5-Fu敏感性的影响;采用Western blotting检测不同质量浓度5-Fu诱导下HT-29细胞中USP22蛋白表达,HT-29和HT-29/5-Fu细胞中USP22和β-catenin蛋白表达,以及抑制USP22表达对结直肠癌细胞USP22、β-catenin表达的影响。 结果（1）HT-29与HT-29/5-Fu细胞对5-Fu的IC₅₀值分别为（1.58±0.23）mg/L和（14.58±0.94）mg/L,其中HT-29/5-Fu细胞对5-Fu的敏感性显著下降（n=6,t=8.476,P<0.01）。（2）在0.5、5.0 mg/L的5-Fu诱导后,HT-29细胞内USP22蛋白表达水平（USP22/β-actin）显著升高（0.5 mg/L vs 0 mg/L：t=7.618,P<0.05;5.0 mg/L vs 0 mg/L：t=6.992,P<0.05）。HT-29/5-Fu组中USP22蛋白表达水平为0.92±0.11,显著高于HT-29组的0.18±0.06（t=7.618,P<0.05）。（3）HT-29-sh USP22组对5-Fu的IC₅₀为（0.25±0.23）mg/L,显著低于HT-29组（t=6.662,P<0.01）。HT-29/5-Fu-sh USP22组对5-Fu的IC₅₀为（1.36±0.14）mg/L,显著低于HT-29/5-Fu组（t=7.002,P<0.01）,但与HT-29组相比,差异无统计学意义（t=1.586,P>0.05）,抑制USP22表达可增强结直肠癌细胞HT-29对5-Fu的敏感性。（4）HT-29-sh USP22组的USP22蛋白表达水平为0.07±0.01,与HT-29组相比下调（t=7.105,P<0.01）。HT-29/5-Fu-sh USP22组的USP22蛋白表达水平为0.33±0.02,与HT-29/5-Fu组相比,USP22蛋白表达水平下调（t=6.153,P<0.01）。HT-29-sh USP22、HT-29/5-Fu-sh USP22中β-catenin蛋白表达水平与相应对照组HT-29、HT-29/5-Fu相比显著下调（HT-29-sh USP22 vs HT-29：t=8.823,P<0.01;HT-29/5-Fu-sh USP22 vs HT-29/5-Fu：t=7.656,P<0.01）。 结论5-Fu可诱导结直肠癌细胞USP22表达增高。抑制USP22表达可增加结直肠癌细胞对5-Fu的药物敏感性,其机制可能是抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而有效逆转结直肠癌细胞对5-Fu的耐药。     

肝卵圆细胞激活和增殖过程中Wnt/β-catenin通路的研究进展

各种类型的终末期肝病严重威胁着人类的健康.现有的常规治疗方法均不理想,原位肝移植亦因供体肝的短缺受到限制,而以肝干细胞移植为基础的新型疗法则具有光明前景.肝卵圆细胞是受损肝脏内的一种肝干/祖细胞,或称肝前体细胞.由于其细胞核呈卵圆形,核质比高等形态学特征,故而得名.经过几十年的探索,肝卵圆细胞研究已经获得了初步的成果.现在人们已将注意力逐渐转移到肝卵圆细胞激活、分化的调控机制方面,而调控机制中的信号通路又是研究的重点.肝卵圆细胞的激活和增殖过程有许多信号通路参与.Wnt/β-catenin信号通路作为Wnt信号通路的一个分支,对肝卵圆细胞的激活和增殖有重要作用,但其具体机制尚未阐明.本文就肝卵圆细胞激活和增殖过程中Wnt/β-catenin信号通路的作用做一综述.     

结直肠癌肝转移信号通路机制的研究进展

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,约15%~25%的结直肠癌患者在确诊时即出现肝转移,而且发生肝转移的患者预后一般较差,因此研究结直肠癌肝转移的机制非常重要。本文主要对结直肠癌肝转移信号通路的研究进行归纳总结,旨在对结直肠癌肝转移患者的诊治和预防提供新思路。     

树突细胞与肾肿瘤治疗研究进展

树突细胞作为目前功能最强的抗原提呈细胞其在抗肿瘤免疫中的作用已成为热点 ,本文就DC在肾肿瘤中的应用进行综述 ,包括DC的概况、TIDC及免疫逃逸、体外DC的制备方法、DC在肾肿瘤中的临床应用以及DC引起的免疫耐受、自身免疫反应等 ,并对各种形式瘤苗的可行性进行探讨。     

树突细胞用于肿瘤特异性免疫治疗的研究进展(文献综述)

肿瘤病人存在的免疫缺陷是肿瘤逃避宿主免疫反应的根本原因。本文对肿瘤抗原脉冲刺激树突细胞介导肿瘤的特异性免疫治疗的原理、方法和实验结果作了介绍。该方法的出现使肿瘤的免疫治疗提高到一个新水平。     

HMGA2通过Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌上皮间质转化的研究

目的：研究高迁移率蛋白A2(HMGA2)通过Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌上皮间质转化（EMT）的影响。方法：采用Real-time PCR法和Western blot法测定正常人结直肠上皮细胞和人结直肠癌HCT116细胞中HMGA2表达水平;将HCT166细胞转染GV144-HMGA2质粒过表达HMGA2后,测定过表达HMGA2对HCT166细胞活力、凋亡及迁移的影响;转染GV144-HMGA2质粒6 h后,加入重组转化生长因子（TGF）-β1蛋白继续培养48 h,测定EMT标志物和细胞周期蛋白（cyclin）D1表达水平。HCT166细胞中分别加入Wnt/β-catenin信号通路的激活剂（Li Cl）和抑制剂（XAV93920）,并加入TGF-β1和过表达的HMGA2,检测EMT标志物和cyclin D1表达水平。结果：HCT166细胞中HMGA2表达水平显著高于FHC细胞（P<0.05）;过表达HMGA2可以显著增加HCT166的细胞活力和迁移,降低细胞凋亡（P<0.05）;HMGA2可以显著降低E-caderin表达水平,降低TGF-β1诱导的cy...     

作为治疗癌肿反应剂的树突细胞

来自血单核细胞的树突细胞与粒细胞-巨噬细胞菌落刺激因子（GM－CSF）、白介素（IL）－4和肿瘤坏死因子（TNF）－α等有关，可用作癌肿的免疫治疗。     

基质溶解因子基因与Wnt信号通道在结直肠癌中的作用研究进展

基质溶解因子(matrilysin)是基质金属蛋白酶(MMP)家族中的一员,具有广泛的溶解细胞外基质作用。越来越多的研究表明,基质溶解因子在肿瘤的浸润与转移中比其他MMP发挥着更为重要的作用,而且,基质溶解因子是Wnt信号通道的靶基因之一,Wnt通过上调基质溶解因子的表达促进结直肠肿瘤的浸润与转移。本文就基质溶解因子基因与Wnt信号通道在结直肠癌中的研究进展作一综述。     

树突细胞肿瘤疫苗用于治疗胃肠管恶性肿瘤的研究进展

胃肠管恶性肿瘤是人类最常见的恶性肿瘤.在目前以手术切除为主的综合治疗中,传统放、化疗由于其治疗模式的非特异性特点,常难以达到理想的结果.树突状细胞(dendritic cell,DC)肿瘤疫苗作为近年来兴起的一个免疫治疗新方法,被越来越多地应用到临床试验中,在用于治疗胃肠管恶性肿瘤中也取得了一些效果.虽然目前疫苗的设计尚无公认的标准,且其免疫学效果和临床预后也未能取得正相关的联系,但对DC免疫机制的深入了解和相应新方法的研究有可能在治疗恶性肿瘤方面发挥更大的作用.     

微小RNA在结直肠癌相关信号通路中的研究进展

目的 总结近3年微小RNA(microRNA,miRNA或miR)在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）相关信号通路中的最新研究进展,为miRNA靶向干预提供新思路或miRNA作为肿瘤分子标志物对CRC进行早期诊断。方法 检索miRNA在CRC相关信号通路中作用研究的文献并进行综述。结果 miRNA几乎涉及所有与癌相关的关键通路,它调控几乎所有与CRC相关的重要信号通路。目前,与CRC有关的信号通路及与此相关的miRNA主要有Wnt-β-连环蛋白（miR-520e、miR-8063、miR-576-5p、miR-142-3p、miR-19a-3p、miR-381、miR-411、miR-1205）、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(miR-19a、miR-493-5p、miR-3064-5p、miR-196b-5p、miR-3651)、丝裂原活化蛋白激酶（miR-1288-3p、miR-3651、miR-152-3p）、转化生长因子-β(miR-183-5p、miR-21-5p、miR-195-5p、miR-581、miR-2911、miR-128-3p、let-7a)...     

经典Wnt信号通路调控肿瘤微环境的研究进展

Wnt信号转导级联是整个动物界发育的关键调节因子, 主要参与调节细胞增殖、分化、迁移, 凋亡和干细胞更新等功能。肿瘤微环境是经典Wnt配体的重要来源, 可在肿瘤细胞和免疫细胞中诱导异常信号通路, 从而导致免疫反应的改变以及肿瘤的侵袭和转移。近年来, 已经确定Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对于肿瘤细胞的存活和维持是必不可少的, 异常激活的经典Wnt信号通路可能通过调控肿瘤微环境, 破坏肿瘤免疫监视, 从而发生免疫逃避和免疫治疗药物的耐药。这些发现使靶向Wnt信号通路的治疗方法成为抗肿瘤治疗方案中一个新方向。现就Wnt/β-catenin信号通路对肿瘤微环境调控及其对肿瘤进展的影响作一综述, 为肿瘤患者免疫治疗的发展提供新的思路。     

丹参多酚酸盐抑制Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smad3信号通路激活抗纤维化及肾脏保护机制研究

目的:本研究探讨丹参多酚酸盐对慢性肾脏病(CKD)肾脏保护作用,并探讨其对肾脏纤维化的作用及分子机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为四组,每组6只,随机分为：(1)假手术组(Sham);(2)5/6肾切除组(CKD);(3)5/6肾切除+丹参多酚酸盐组100 mg/kg(CKD+Salvianolate);(4)5/6肾切除+吡非尼酮组(250 mg/kg)(CKD+Pirfenidone)。建立5/6肾脏切除的CKD大鼠模型,分别给予丹参多酚酸盐以及吡非尼酮进行干预,检查肾脏功能、肾脏损伤和纤维化指标。免疫组化和western-blot检测大鼠肾脏中Wnt/β-catenin和TGF-β₁/Smad3以及α-SMA和E-cadherin的表达水平。结果:丹参多酚酸盐改善CKD肾功能,降低血清肌酐(Scr),血尿素氮(BUN)水平。组织病理显示丹参多酚酸盐减轻肾小管损伤和细胞外基质(ECM)成分的沉积。丹参多酚酸盐能显著抑制上皮-间质转化(EMT)的标志蛋白α-SMA的表达,促使E-cadherin恢复。Wnt/β-catenin和TGF-β₁     

Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调节成骨细胞分化的研究进展

在成骨细胞的分化增殖中,经典Wnt /β-catenin通路起着重要的调节作用;此通路中的任何一个因子都能影响成骨细胞的分化增殖。近几年里,大量研究证明R-脊椎蛋白家族巳成为Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子。本文就Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调控影响成骨细胞分化增殖的研究进展作一综述。     

FH535对结直肠癌肿瘤干细胞自我更新及侵袭迁移的抑制作用及机制

目的:探讨小分子药物FH535对结直肠癌肿瘤干细胞(CRC-CSCs)自我更新、迁移侵袭的影响及机制。方法:通过流式细胞术从人结直肠癌DLD-1细胞中分选CD133+CD44+的CRC-CSCs,不同浓度(20、30、40μmol/L)FH535作用CRC-CSCs并计算半数抑制率(IC50);用IC50浓度作用CRC-CSCs,以无处理的CRC-CSCs为对照组,然后分别采用成球实验及有限浓度稀释法检测细胞的自我更新能力,Transwell迁移侵袭实验及实时迁移侵袭实验(RTCA)检测细胞迁移侵袭能力,qRT-PCR及流式细胞术检测Wnt/β-catenin信号通路相关分子及下游分子的mRNA及蛋白质表达变化。结果:FH535对CRC-CSCs的IC50为40μmol/L。与对照组细胞比较,40μmol/LFH535作用后的CRC-CSCs成球能力明显减弱(57.33vs.313.67,P0.01),CSCs比例明显下降(11.60/100vs.75.50/100,P0.05),迁移(Transwell:10.66vs.90.00;RTCA:0.17vs.0.37)及侵袭(Transwell:8vs.20;RTCA:0.14vs.0.37)能力受到明显抑制(均P0.01);Wnt/β-catenin信号通路分子LEF1、AXIN1及下游分子c-myc、VEGF、cyclinD1、survivin的mRNA与蛋白表达均明显下调(均P0.01)。结论:FH535可能通过抑制Wnt/β-catenin通路的活性而削弱CRC-CSCs的自我更新、侵袭迁移能力。     

靶向Neddylation修饰通路抗结直肠癌作用及其机制研究进展

蛋白类泛素化修饰Neddylation是一种重要的蛋白质翻译后修饰。Neddylation修饰在结直肠癌中过度活化,并且与结直肠癌患者的预后不良密切相关。小分子抑制剂MLN4924通过阻断Neddylation修饰通路诱导结直肠癌细胞凋亡、自噬、DNA损伤及细胞衰老发挥抗肿瘤效应。此外,MLN4924还可作为化学增敏剂...     

阿司匹林对结直肠癌细胞株细胞凋亡的影响

目的：通过检测阿司匹林对结直肠癌细胞株的影响，以探讨其对结直肠癌化学预防的机制。方法：培养结肠癌细胞株Caco-2，用不同浓度阿司匹林进行干预，并观察、检测其对细胞生长、增殖周期、凋亡及细胞形态的影响。结果：高浓度阿司匹林组细胞大量死亡；低浓度阿司匹林促进细胞凋亡，但不影响细胞增殖周期；随浓度增高，凋亡比率增大。阿司匹林能改变细胞形态及细胞的骨架结构。结论：阿司匹林能抑制结肠癌细胞增殖，促进其凋亡，并改变其骨架结构。     

Wnt/β-catenin信号通路重要分子及其靶基因在原发性肝癌中的作用机制

肝癌是我国及某些亚非地区常见的恶性肿瘤之一,死亡率较高.近年来我国肝癌的发生率有上升趋势,因此了解肝癌的发生发展机制及其治疗刻不容缓.但目前对其发生机制仍不清楚.其中细胞信号转导对其发生、发展、转移起着至关重要的作用.如Notch信号通路、Wnt信号通路、Ras、Jnk信号通路、mTOR通路等,目前倍受关注的是Wnt/β-catenin转导途径.经典Wnt信号通路研究最多且相关机制解释较为清楚,其激活的重要标志是β-catenin于胞质稳定表达及核内定位.研究表明,Wnt信号通路各蛋白表达水平改变及相关基因突变参与了原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生.