益气活血化瘀方药对血管胶原转换及相关基因表达的影响

目的：观察益气活血化瘀中药对大鼠血管细胞外基质(ECM)重塑的影响并探讨其分子机制。方法：采用^3H—TdR和^^3H—Pro掺入实验和血管壁羟脯氨酸含量测定检查血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性及胶原合成与降解程度;应用Northern印迹和Ⅳ型胶原酶(MMP-2)酶图分析检测MMP-2和骨桥蛋白表达的变化。结果：益气活血化瘀中药可显著抑制bFGF对VSMC的促胶原合成作用,降低血管内皮剥脱大鼠血管壁胶原转换速率,下调MMP-2和骨桥蛋白在体外培养的VSMC及血管壁中的表达水平,抑制VSMC增殖。中药血清去蛋白后对VSMC的影响不发生明显变化。结论：益气活血化瘀中药通过调节MMP-2和骨桥蛋白基因表达及降低胶原转换速率可抑制和(或)减缓ECM重塑。     

丹参对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶和骨桥蛋白基因表达及细胞增殖的影响

目的：探讨丹参（SAL）对氧化低密度脂密度（ox-LDL)诱导体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）基质金属蛋白酶（MMP）和骨桥蛋白（OPN）基因表达的影响，以提示SAL抑制VSMC增殖和迁移的作用机理。方法：应用Northern,Western印迹和斑点杂交检测SAL对MMP-2，MMP-9和OPN表达的影响；采用^3H-TdR掺入实验，检测VSMC增殖活性。结果：SAL或复方丹参（SALC）注射液对ox-LDL诱导的MMP-2和MMP-9表达以及OPN的合成与分泌具有明显的下调作用。且可显著抑制VSMC的DNA合成；将ox-LDL与SAL或SALC注射液共孵育1h后再处理VSMC，ox-LDL对上述基因表达和VSMC增殖的诱导作用基因消化。结论：SAL抗VSMC增殖与迁移的作用与其调整基质代谢有关。     

丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响研究

目的：研究丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）迁移的影响。方法：用组织贴块法培养血管平滑肌细胞，将H2O2和丹参作用于100％FCS趋化作用下的VSMC，采用改良的Boyeen chamber方法检测VSMC的迁移活性。结果：丹参剂量依赖性地抑制H2O2诱导的VSMC的迁移活性。结论：提示丹参对冠状动脉腔内血管成形术后再狭窄的防治可能具有应用前景。     

黄芪、当归对血管平滑肌细胞粘着斑激酶表达和细胞凋亡的影响

目的：探讨黄芪,当归对体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）粘着斑激酶（FAK）表达和细胞凋亡的影响。方法：应用RT-PCR,Western blot检测黄芪,当归对FAK表达的影响;应用Greiss试剂检测VSMC培养液中NO2^-含量;应用流式细胞仪检测细胞凋亡及bcl-2和caspase-3表达活性。结果：黄芪,当归注射液可以显著抑制由碱性成纤维细胞生长因子所诱导的FAK表达。增加细胞培养液中的NO2^-含量,诱导cas-pase-3表达,下调bcl-2表达,促进体外培养的VSMC凋亡。结论：黄芪,当归诱导VSMC凋亡与其促进NO合成,抑制FAK表达,诱导促凋亡基因caspase-3表达及下调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

枸杞、黄芪对大鼠睾丸支持细胞抑制素合成的影响

目的：探讨中药枸杞、黄芪对大鼠睾丸支持细胞功能的作用及机制。方法：对18—22d的大鼠睾丸支持细胞进行分离培养,用MTT法检测枸杞、黄芪对支持细胞增殖的影响，用免疫组化方法检测枸杞、黄芪对正常状态和过氧化物（H2O2）损伤状态下支持细胞抑制素βB亚基（INHβB）合成的影响。结果：枸杞、黄芪及杞芪合剂对支持细胞的增殖有促进作用；在正常培养状态下，枸杞、黄芪及杞芪合剂对支持细胞INHβB合成具有促进作用；在过氧化物（H2O2）损伤状态下，枸杞、黄芪及杞芪合剂对支持细胞INHβB合成具有保护作用。结论：枸杞、黄芪及杞芪合剂对体外培养的支持细胞抑制素βB亚基合成具有促进和保护作用。     

丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响研究

目的 :研究丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)迁移的影响。方法 :用组织贴块法培养血管平滑肌细胞。将H2 O2 和丹参作用于 10 0 %FCS趋化作用下的VSMC ,采用改良的Boydenchamber方法检测VSMC的迁移活性。结果 :丹参剂量依赖性地抑制H2 O2 诱导的VSMC的迁移活性。结论 :提示丹参对冠状动脉腔内血管成形术后再狭窄的防治可能具有应用前景。     

371植物多酚对基质金属蛋白酶的抑制活性

曾对各种药用植物含有的多酚类抑制与癌细胞浸润转移有关的基质金属蛋白酶(MMP)-2／-9的活性进行探讨，发现芍药中的丁香英(eugeniin)等具有显著的抑制MMP-2／-9的活性。此次对其类似物(19种)抑制MMP-2／-9活性(用明胶酶谱法检测对HT1080细胞在培养上清中分泌的MMP-2／-9活性的影响)及抑制细胞运动活性(对HGF刺激应答的MDCK细胞的细胞分散运动及HT1080细胞浸润能力的影响)进行测定，探讨其构效相关性。     

丹参酮ⅡA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及其机制研究

目的：观察丹参酮ⅡA（tanshinone ⅡA，TA）对10％胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞（RVSMC）增殖的抑制作用，并探讨其可能的作用机制。方法：体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞A7r5细胞株，以终浓度为10％的胎牛血清（FBS）作为刺激因素，用细胞计数法、噻唑蓝（MTY）比色法和5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）掺入法测定TA对细胞增殖的影响，用流式细胞术（FCM）分析细胞周期分布特征，用Western blot实验测定细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）磷酸化活性，用RT—PCR测定c—fos的表达水平。结果：细胞计数、MTY比色法和BrdU掺入实验表明丹参酮Ⅱ。能抑制10％FBS所诱导的VSMC增殖，作用强度呈剂量依赖性；细胞周期分析显示，TA处理组G0／G1期细胞百分比高于10％FBS组，而S期比例低于10％FBS组，表明TA可阻止10％FBS所诱导的细胞周期由G0／G1期向S期推进；Western blot结果显示与10％FBS组相比，TA处理组ERK1／2磷酸化活性降低；RT—PCR结果显示TA处理组c—fos表达水平降低。结论：丹参酮可抑制10％FBS诱导的体外培养大鼠动脉平滑肌细胞增殖，此作用可能与其阻止细胞周期由G0／G1期向S期推进，抑制MAPK信号转导通路激活，进而下调c-fos表达有关。     

黄芪抑制大鼠肝星状细胞增殖及胶原分泌的研究

目的：观察黄芪抑制大鼠肝星状细胞增殖及胶原分泌。方法：分离培养大鼠肝星状细胞,传一代后加入不同浓度的黄芪48h后,以MTT比色法检测对细胞增殖的作用,传一代细胞以2mg/ml作用48h后,以ELISA法检测I,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白分泌的变化。结果：0．75－50mg/ml黄芪（经0．45um滤膜过滤）可使MTT转化率下降,细胞增殖受抑,呈明显的剂量依赖性,2mg/ml黄芪可使Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原分泌量下降,结论：黄芪抗纤维化的部分机理在于抑制了活化肝星状细胞的增殖及胶原蛋白的合成,从而减少了胶原纤维在肝脏内的沉积。     

大黄虫丸对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的观察大黄[庶虫]虫丸对大鼠肝星状细胞间质胶原酶（MMP-1）基因表达及分泌到培养基中的明胶酶A（MMP-2）活性的影响。方法分离培养大鼠肝星状细胞（HSC）,制备大黄[庶虫]虫丸大鼠药物血清,温育HSC。逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法观察MMP-1的表达。酶谱法检测MMP-2的活性。结果大黄[庶虫]虫丸药物血清可明显促进HSC对MMP-1的基因表达,同时可明显增加HSC合成的MMP-2的含量和活性（P〈0．05）。结论大黄[庶虫]虫丸的抗肝纤维化作用与其促进HSC的MMP-1基因表达,增加MMP-2的含量和活性有关。     

(口山)酮体外抗氧化作用研究

目的:研究3种来自大籽獐牙菜的酮类化合物1,8-二羟基-3,7-二甲氧基酮(methylswertianin,MET)、1,5,8-三羟基-3-甲氧基酮(bellidifodin,BEL)和1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮(decussatin,DEC)的抗氧化作用。方法:采用H2O2和VC-Fe2 两种羟自由基发生系统;硫代巴比妥酸法测定大鼠肝匀浆及肝线粒体中脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量;分光光度法测定大鼠红细胞氧化溶血和肝线粒体膨胀程度研究酮的抗氧化效果。结果:3种酮均能有效抑制MDA的产生,减少大鼠红细胞氧化性溶血,减轻肝线粒体膨胀程度;其中BEL效果最好,其次是MET和DEC。结论:酮具有明显的抗脂质过氧化作用。     

布法灵体外透皮试验

目的：以蟾酥灵定量分析布法灵对皮肤的通透性及透皮吸收规律。方法：用紫外分光光度法测定了布法灵的透皮吸收量和吸收率。结果：布法灵体外皮肤吸收速度与浓度和时间之间均有依赖关系;吸收速度随时间的延长而由快变慢、高浓度大于低浓度。结论：布法灵外涂给药能通透皮肤屏障,从而发挥镇痛作用。     

金诃克林体外抑菌实验研究

金诃克林系藏医验方,由纯藏药提取的外用制剂,依据藏医的理论,该制剂有消炎、解毒、去腐生肌、止痛止痒的作用.主要用于各类急慢性皮炎,皮肤疼痛,对各种毒疮及性病有显著的疗效.对金诃克林的主要药效进行了实验研究,为临床应用提供依据.     

土茯苓离体快繁研究

以土茯苓Smilax glabra Roxb根状茎侧芽的生长锥为外植体,以MS、3/2MS、B5和改良H等培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行离体培养研究.结果表明:外植体在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上芽的萌动速度较快;萌动芽在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L 10%CM(椰子汁)培养基上丛生芽诱导和增殖的效果最佳;3/2MS 6-BA 0.05 mg/L 4%蔗糖培养基的壮苗效果较好;H NAA 0.5 mg/L培养基的生根率可达94%以上;以沙和泥炭土各1/2为基质移栽试管苗,成活率达到95%以上.     

清咽袋泡剂的体外抗菌试验

目的：观察清咽袋泡剂的体外抗菌试验效果。方法：采用试管连续稀释法，对清咽袋泡剂进行了体外抗菌试验研究。结果：清咽袋泡剂对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、肺炎双球菌、乙型溶血性链球菌、白色念珠菌均有抑杀作用。结论：清咽袋泡剂具有较强的抗菌作用，为其临床应用提供了实验依据。     

杜鹃兰离体快繁技术研究

以杜鹃兰的种子和假鳞茎作外植体均诱导获得原球茎及再生植株。原球茎增殖培养基以B5 2%白糖 0.1%活性炭较好,增殖系数可达6~10倍;在原球茎继代增殖时分化出完整植株;移栽到全蛭石基质上,成活率可达到96.67%。     

尿路清合剂体外抗奈瑟淋球菌作用的研究

目的：评价中药复方制剂尿路清在体外抗奈瑟淋球菌的作用。方法：分别采用对淋球菌的体外抑制试验、抑菌时间观察试验、抑菌环试验,分别检测尿路清、八正散和壮观霉素的抗淋球菌作用。结果：对尿路清、八正散和壮观霉素进行比较,对淋球菌的体外抑制试验：尿路清作用最强,体外对产青霉素酶的奈瑟淋球菌（PPNG）和非产青霉素酶的奈瑟淋球菌（NPPNG）均有明显抑制作用。给药浓度为1：512（160mg／L）～1：1024（820mg／L）时可抑制淋球菌生长;抑菌时间观察试验：尿路清高浓度能快速杀灭淋球菌,当浓度为7．81mg／mL时,30rain可以对淋球菌有杀灭作用;当浓度为15．63mg／mL时,20min能杀灭淋球菌;浓度为31．25mg／mL时,10min即能杀灭淋球菌,而当浓度升为62．5mg／mL时,5min内即可杀灭淋球菌。抑菌环试验：尿路清对淋球菌的平均抑菌环为15—21mm,敏感菌株占63．63％,八正散平均抑菌环12～15mm／1,敏感菌株占54．55％。壮观霉素平均抑菌环为16—19mm,敏感菌株占72．72％。结论：尿路清有确切的体外抗淋球菌作用。     

金银花体外抗结核活性研究

目的：探讨金银花体外抗结核活性。方法：使用试管倍比稀释法测定金银花、绿原酸、异烟肼对结核分支杆菌标准株和金色分支杆菌的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）及最小杀菌浓度（Minimum Bactericidal Concentration,MBC）。结果：金银花对金色分支杆菌的MIC为0.83mg?mL-1,MBC为1.75mg?mL-1,对H37Rv的MIC、MBC均为0.18mg?mL-1;绿原酸对两种分支杆菌的MIC、MBC均为0.18mg?mL-1;异烟肼对两种分支杆菌的MIC、MBC均为10.5?滋g?mL-1,异烟肼配伍金银花使用,异烟肼对两种分支杆菌的MIC、MBC为5.25?滋g?mL-1。结论：金银花有抗结核活性。同异烟肼联合使用能显著降低异烟肼的MIC和MBC。     

金银花体外抗结核活性研究

目的：探讨金银花体外抗结核活性。方法：使用试管倍比稀释法测定金银花、绿原酸、异烟肼对结核分支杆菌标准株和金色分支杆菌的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）及最小杀菌浓度（Minimum Bactericidal Concentration,MBC）。结果：金银花对金色分支杆菌的MIC为0．83mg·mL^-1,MBC为1．75mg·mL^-1,对H37Rv的MIC、MBC均为0．18mg·mL^-1;绿原酸对两种分支杆菌的MIC、MBC均为0．18mg·mL^-1;异烟肼对两种分支杆菌的MIC、MBC均为10．5μg·mL^-1,异烟肼配伍金银花使用,异烟肼对两种分支杆菌的MIC、MBC为5．25μg·mL^-1。结论：金银花有抗结核活性。同异烟肼联合使用能显著降低异烟肼的MIC和MBC。     

活络舒腰颗粒的制备及质量标准

目的:介绍活络舒腰颗粒的制备及质量标准。方法:采用乙醇回流和水煎煮蒸馏法提取,用高效液相色谱法测定白芍中芍药苷的含量,以薄层色谱法对当归尾定性鉴别。结果:制备工艺合理可行,含量测定和鉴别方法简便、快速、准确,重现性良好,且阴性对照无干扰。结论:本制剂制备工艺合理,质量稳定可控。