伊马替尼治疗后慢性髓系白血病患者ABL激酶区域点突变的检测

本研究主要探讨甲磺酸伊马替尼(IM)治疗的慢性髓系白血病(CML)患者ABL激酶区点突变的发生情况及其临床意义。应用巢式RT-PCR对328例伊马替尼治疗效果欠佳及10例初诊慢性期CML患者不同时期的51份骨髓标本进行ABL激酶区扩增,并对产物进行纯化、测序以及序列同源性比对,确定点突变的存在及类型。结果显示,12例检出点突变,其类型分别为M351T2例,Q252H7例,E279K1例,E255V及E355G各1例;慢性期、加速期和急变期的点突变发生率分别为17.6%(3/17)、45.5%(5/11)和44.4%(4/9);血液学和遗传学耐药患者的点突变发生率分别为50%(5/10)和44.4%(8/18),其95%的可信区间分别为12.3%-87.7%和19%-69.9%;有点突变的12例患者的疗效均欠佳,经过加量至600m g,随访3-24个月,在治疗过程中均出现疾病进展或死亡。结论:ABL激酶区点突变是伊马替尼耐药导致CML治疗失败的一个重要原因,监测点突变的发生及其类型有助于早期进行疾病预后评估及调整治疗方案。     

评价基线ABL激酶区点突变对尼洛替尼治疗伊马替尼耐药或不耐受慢性髓系白血病疗效影响

目的 评价基线ABL激酶区点突变对尼洛替尼治疗伊马替尼耐药或不耐受慢性髓系白血病(CML)患者的疗效影响.方法 34例伊马替尼耐药或不耐受CML患者口服尼洛替尼400 mg,每日2次,中位随访时间14(1.5 ～50)个月.于治疗前(基线时)及治疗后每6个月检测ABL激酶区点突变,同时评估血液学、细胞遗传学、分子生物学疗效及疾病进展情况.结果 34例患者中慢性期13例、进展期21例(加速期11例及急变期10例).慢性期与进展期患者获得主要细胞遗传学反应(MCyR)率分别为70％及30％ (P =0.027),完全细胞遗传学反应(CCyR)率分别为70％及20％(P=0.005).慢性期与加速期患者4年疾病无进展生存率分别为(81.8±11.6)％及(20.5±12.9)％(P＜0.01).17例(50％)患者基线时检出ABL激酶区点突变.基线时有突变患者完全血液学反应(CHR)、MCyR、CCyR及主要分子学反应(MMR)率分别为56％、43％、37％及31％;无突变患者分别为59％、53％、41％和18％(P值均＞0.05).具有体外对尼洛替尼高度敏感性突变[即半数抑制浓度( IC50)≤150 nmoL/L]、体外对尼洛替尼敏感性未知的突变及无突变患者的CHR、MCyR、CCyR率相当,而具有体外对尼洛替尼高度不敏感性突变(即IC5o＞ 150 nmol/L;Y253H、F359V/C、T315I)的患者CHR和MCyR率仅为17％,6例患者中无一例获得CCyR,治疗24个月内均疾病进展.结论 尼洛替尼对伊马替尼耐药或不耐受CML患者可产生持久性疗效,其疗效在CML慢性期优于进展期患者.尼洛替尼对基线时突变为Y253H、F359V/C、T315I的患者疗效不佳.     

伊马替尼耐药的慢性粒细胞白血病患者ABL激酶区点突变检测的意义

目的研究发生伊马替尼（IM）耐药的慢性粒细胞白血病（CML）患者BCR／ABL融合基因ABL激酶区发生点突变的情况。方法采集11例（血液学耐药7例，遗传学耐药4例）共计17份发生IM耐药的CML患者IM治疗前后的骨髓，采用半筑巢式扩增长片段逆转录-PCR（RT-PCR）的方法，应用分别位于BCR基因和ABL基因的引物进行2次PCR，扩增BCR／ABL基因ABL激酶区周围863bp碱基，进行纯化、测序序列同源性分析。结果本研究共发现3种突变，即G250E、E255K和1315I。其中，血液学耐药发生突变的频率为4／7，95％可信区间为18％-90％；而遗传学耐药发生突变的频率为1／4，95％可信区间为1％-81％。所有患者发生耐药前均未发生点突变。结论发生IM耐药的CML患者BCR／ABL基因ABL激酶区周围存在高频率的点突变。通过对影响与IM结合的突变情况进行早期检测，有利于在发生耐药前进行治疗干预，为患者提供更有效的治疗选择。     

伊马替尼耐药的慢性粒细胞白血病患者bcr-abl基因ATP结合位点点突变的检测

慢性粒细胞白血病（CML）为一种起源于骨髓内异常多能干细胞的骨髓增殖性疾病，以持续表达bcr—abl融合基因为特征，这段融合基因的翻译产物bcr—abl蛋白具有较高的蛋白酪氨酸激酶活性，可激活一系列下游信号传导通路而导致CML的发生，因而成为CML治疗的明确靶向。伊马替尼（IM）可竞争性结合abl酪氨酸激酶催化部位的ATP结合位点，使该激酶不能与ATP结合，从而失去催化活性。应用IM治疗的几乎所有CML急变期患者和近15％～20％的CML慢性期患者在IM治疗开始2～3年后复发。产生IM耐药的主要原因是bcr—abl发生点突变，     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病出现脑水肿一例

患者,男,4 0岁,2 0 0 1年12月在我院门诊检查:WBC170×10 9/L ,骨髓:粒系占0 .80 0 ,中幼粒细胞以后阶段占0 .76 5 ,Ph染色体阳性。诊断为慢性粒细胞白血病(CML)慢性期,予羟基脲治疗。2 0 0 2年12月复诊,血常规:WBC 6×10 9/L ,原始细胞0 .0 1,Hb 12 9g/L ,BPC 113×10 9/L ,骨髓检查示:粒、红细胞比为2 .84∶1,粒系占0 .6 5 5 ,原始粒细胞占0 .2 15 ,诊断为CML急变期。给予伊马替尼(商品名格列卫)治疗,6 0 0mg/d。服药期间出现恶心、乏力、充血性皮疹、味觉异常及踝部轻度水肿。服用2 0d后,出现头痛、头晕、近期记忆减退、神志恍…     

伊马替尼诱发频发室性早搏一例

患者,女,48岁。既往体健,无冠心病、心律失常、高血压病史。2000年9月无明显诱因出现全身乏力。查体:胸骨轻度压痛,脾肋缘下约6 cm,浅表淋巴结未触及。血常规:WBC26×109/L,晚幼粒细胞0.15,杆状核粒细胞0.19,分叶核细胞0.49;Hb 120 g/L;BPC 350×109/L。骨髓象:有核细胞增生极度活跃,粒系占0.780,原始粒细胞0.050,早幼粒细胞0.080,中、晚幼粒细胞及杆状核粒细胞及细胞比例明显升高。粒细胞碱性磷酸酶阴性,染色体检查Ph染色体阳性。诊断为慢性粒细胞白血病(CML)。给予羟基脲1.0 g,每日3次口服,α干扰素(IFN-α)300万单位,隔日1次皮下…     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病26例临床观察

我们应用伊马替尼(商品名格列卫)治疗37例Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病(CML)患者,现将疗程在30d以上并随访资料完整的2 6例临床研究结果报告如下。对象和方法1　研究对象　2 6例白血病患者均符合FAB诊断标准,全部表现Ph染色体和bcr/abl融合基因阳性,其中CML慢性期(CP) 7例(诊断后病程平均3年) ,加速期(AP) 5例,急变期(BP) 1 4例,男性1 5例,女性1 1例,中位数年龄38(1 2～6 3)岁。CML BP的类型:急性非淋巴细胞白血病(ANLL) 1 3例,急性淋巴细胞白血病(ALL) 1例。急变前的中位病程1 9.5(7～1 1 2 )个月。应用伊马替尼治疗前曾隔日…     

尼洛替尼治疗伊马替尼耐药或不耐受慢性髓系白血病患者的临床研究

本研究目的旨在评价尼洛替尼治疗伊马替尼耐药或不耐受的慢性髓系白血病（CML）患者的疗效及安全性。23例伊马替尼耐药或不耐受的CML患者纳入本研究。患者每日口服尼洛替尼600-800 mg,对他们的疗效、总体生存和耐受情况进行评估。结果表明,23例接受尼洛替尼治疗的患者中,全部获得完全血液学缓解（CHR）,19例（82.6%）获得完全细胞遗传学缓解（CCyR）,13例（56.5%）获得完全分子学缓解（CMR）,中位尼洛替尼治疗时间13.5（1-44）个月,中位随访时间40（12-102）个月。尼洛替尼治疗后的不良反应大半为轻微的,而且可以逆转。结论：尼洛替尼治疗伊马替尼耐药的CML患者疗效佳,患者耐受性好。     

伊马替尼与干扰素联合治疗慢性粒细胞白血病的疗效分析

目的：探讨伊马替尼与干扰素联合化疗治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效。方法：2004年6月-2009年7月新诊断的58例Ph染色体阳性CML慢性期患者,随机分为伊马替尼组和干扰素联合化疗组,比较两组临床疗效。结果：两组总有效率差异无统计学意义（P〉0．05）;伊马替尼组完全血液学缓解率,完全细胞遗传学缓解率、完全分子学效应率、5年总生存率均明显高于干扰素联合化疗组（P〈0．05）。结论：伊马替尼和干扰素联合化疗都可作为CML慢性期的有效治疗方法,应依据不同情况实施个体化治疗。     

应用变性高效液相色谱检测伊马替尼治疗后慢性髓性白血病患者ABL激酶区点突变

目的应用变性高效液相色谱（DHPLC）检测伊马替尼治疗后慢性髓性白血病（CML）患者ABL激酶区点突变。方法采用巢式PCR扩增27例伊马替尼治疗的加速／急变期或慢性期后期的CML患者的31份骨髓标本，扩增得到BCR／ABL融合mRNA的ABL激酶区的相互重叠的两段扩增片段：ABL-B（393bp，相应于206～335氨基酸）和ABL-C（482bp，相应于262～421氨基酸）。应用DHPLC在不同温度及洗脱条件下对此两扩增片段进行突变分析，并与测序结果进行比较。结果27例伊马替尼疗效不佳的加速／急变期或慢性期后期的CML患者中，13例（48％）患者的DHPLC检测显示异常峰型，提示存在点突变，与直接测序的结果完全一致。本研究中DHPLC检测ABL激酶区点突变的检出限可达5％～10％。结论DHPLC可以高效、经济、准确地检测ABL激酶区点突变，适合于伊马替尼治疗后慢性髓性白血病患者ABL激酶区点突变的常规、临床大规模检测。     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病疗效分析

目的分析伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效,进一步探讨影响伊马替尼疗效的因素。方法63例慢性粒细胞白血病患者,给予口服伊马替尼治疗;其中慢性期（CP）51例,加速期（AP）5例,急变期（BP）7例。结果完全血液学缓解率（CHR）：CP94．1％（48／51）,AP40．0％（2／5）,BP28．6％（2／7）,累计82．5％（52／63）;完全遗传学缓解率（CCR）：CP60．8％（31／5]）,AP20．0％（1／5）,BP14．3％（1／7）,累计52．4％（33／63）;部分遗传学缓解率（MCR）：CP82．4％（42／51）,AP40．0％（2／5）,BP28．6％（2／7）,累计73．0％（46／63）。可评估分子效应的21例患者中,8例达完全分子效应（38．1％）,4例发生主要分子效应（19．0％）,累计57．1％（12／21）。血液学不良反应主要为不同程度的血细胞减少和骨髓抑制,可通过调整剂量或药物治疗控制。非血液学不良反应（如恶心、水肿等）发生率较高,但大多程度轻微且可耐受或自行消失。结论伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病有较高的完全血液学缓解率和遗传学缓解率及分子效应,不良反应轻微。常见血液学不良反应为中性粒细胞减少、血小板减少,非血液学不良反应为消化道反应及轻度水肿,大多程度轻微,患者能够耐受。个体化正规治疗有望进一步提高疗效。     

Therapeutic drug monitoring of imatinib in chronic myeloid leukemia: experience from 1216 patients at a centralized laboratory

This study set out to examine in a large real‐life cohort of patients with chronic myeloid leukemia (CML) the impact of imatinib threshold of 1000 ng/mL on molecular response, as suggested in a small subset of patients. Patient plasma samples were submitted from around France to a central facility, free of charge under the auspices of the European Treatment and Outcome Study (EUTOS) for CML. Submitting physicians were required to complete an ‘imatinib monitoring request form’, including details of why therapeutic drug monitoring (TDM) was requested, dose and duration of imatinib treatment, cytogenetic and molecular response, adverse events, and concurrent medications. Imatinib trough plasma concentration (C_min) was measured at the central facility. Among 1985 eligible plasma samples analyzed, from 1216 CML patients, imatinib C_min correlated positively with reported imatinib dose, but interpatient variability in C_min was high (60%). A logistic regression analysis revealed that treatment duration and imatinib C_min > 1000 ng/mL were significantly associated with major and complete molecular responses with odds ratios of 1.69 and 2.08, respectively. These data support in real‐life setting that imatinib C_min threshold of 1000 ng/mL is associated with major and complete molecular response and that TDM could play an important role in dose optimization.     

A novel mutation of SETBP1 in atypical chronic myeloid leukemia transformed from acute myelomonocytic leukemia

To investigate an oncogenic mutation of SETBP1 in the evolution from acute myelomonocytic leukemia (M4) to secondary aCML. Clinical data and molecular studies were analyzed of paired aCML and 'normal'DNA from a case with M4. We identified a mutation in SETBP1 (encoding a p.Asp868Ala alteration). The analysis of paired sample indicated that SETBP1 mutation was acquired during leukemic evolution.     

费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病ABL激酶区突变的特征分析及其临床意义

目的：探讨酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）耐药的费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病（philadelphia chromosome positive acute lymphoblastic leukemia,Ph+ALL）ABL激酶区突变的特征及其临床意义。方法：回顾性分析99例Ph+ALL患者临床特征、预后、分子遗传学以及ABL激酶区突变的特征。结果：99例Ph+ALL患者共发生TKI耐药38例，发生耐药的中位时间为治疗后8个月。发生TKI耐药的患者5年总生存率（overall survival,OS）和无复发生存率（relapse free survival,RFS）均较未耐药者低［(34.2±8.0)%vs(61.4±6.7)%，P=0.044；(6.7±4.5)%vs(68.6±6.8)%，P<0.001］。32例患者于移植前发现TKI耐药，13例接受异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）；移植组与未移植组耐药后1年OS差异有统计学意义［(68.4±13.1)%vs(17.8±9.2)%，P<0.001］，RFS差异无统计学意义。38例患者中检测到ABL激酶区10个位点12种突变，突变比例为52.63%（20/38），其中T315I突变比例最高，占突变患者的45.00%（9/20），其次为E255K/V［40.00%（8/20）］和Y253H/F［15.00%（3/20）］。结论：Ph+ALL发生TKI耐药的主要机制为ABL激酶区突变，最常见的突变为T315I突变；发生ABL激酶区突变后，allo-HSCT仍是较为理想的治疗选择。     

急性和慢性髓系白血病患者中螺旋酶抗原基因表达的研究(英文)

本研究旨在探讨螺旋酶抗原基因(HAGE)在急性髓系白血病(AML)和慢性髓系白血病(CML)中的表达状况和临床意义。应用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测AML和CML患者骨髓单个核细胞中HAGE cDNA的表达。结果表明:74例AML患者中11例(14.8%)存在HAGE过表达(117.12%-9842.70%,中位434.96%);HAGE过表达患者年龄显著高于HAGE阴性者(中位年龄分别为67和45岁,p=0.001)。HAGE表达在单核细胞亚型AML(M4和M5,7/20,35.0%)中明显高于其它亚型AML(4/54,7.4%)(p=0.007)。28例核型正常的AML患者中8例(28.6%)呈HAGE过表达,而40例核型异常的AML中仅3例(7.5%)存在HAGE表达(p=0.041)。9/26例(34.6%)CML患者存在HAGE过表达,加速期和急变期患者中HAGE表达率(4/4,100%)明显高于慢性期患者(5/22,22.7%)(p=0.008)。结论:HAGE cDNA表达与AML单核细胞亚型类别相关,且与CML疾病进展相关。     

移植性慢性髓系白血病裸鼠模型的初步建立

慢性髓系白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病,CML干细胞被认为是导致疾病发生、发展并最终急变的根源,目前尚缺乏稳定的动物模型证明CML干细胞的存在。本研究旨在通过建立CML裸鼠模型,探讨人CML细胞在BABL/c裸小鼠体内的生物学行为,并使CML干细胞在裸鼠体内富集成为可能。对4至6周龄的BALB/c裸鼠进行切脾（splenectomy,S）,环磷酰胺腹腔注射（cytoxan intrap-eritoneal injection,C）及全身亚致死剂量照射（sublethal irradiation,I）等预处理（SCI）后,经尾静脉接种（5-8）×10^7个人CML慢性期患者单个核细胞。对4至6周龄的BALB/c裸鼠进行全身致死剂量照射（lethal irradiation）后,经尾静脉接种5×10^6同源裸鼠骨髓细胞和（5-8）×10^7个人CML慢性期患者单个核细胞。应用RT-PCR、塑胶包埋病理切片以及流式细胞术等检测裸鼠各脏器及骨髓中人CML细胞浸润情况,并比较两种建模方法的优劣。结果表明,CML细胞能浸润至经SCI预处理的裸鼠骨髓体内,但目前成功率还很低,仅为通过BABL/c裸鼠建立人CML动物模型的一个开端。而经致死剂量预处理裸鼠,CML细胞未能浸润至骨髓。结论：人CML慢性期白血病细胞能在经SCI预处理的裸鼠体内形成白血病,为建立CML动物模型寻找到新的方向。