SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的基因定位

目的了解SCCmec相关的psm-mec基因在血液来源人葡萄球菌中的基因定位特征,为深入研究psm-mec基因在人葡萄球菌中的功能奠定基础。方法收集临床血培养分离的人葡萄球菌25株,通过PCR扩增mecA基因和psm-mec基因,多重PCR对耐甲氧西林人葡萄球菌SCCmec分型,PCR扩增mecR1/psm-mec基因与psm-mec/xylR基因间隔序列及fudoh基因,探究psm-mec基因在SCCmec上的定位特点。结果 PCR检测显示,21株为耐甲氧西林人葡萄球菌,psm-mec基因的检出率为47.6%,4株为甲氧西林敏感人葡萄球菌,未检出psm-mec基因。多重PCR结果显示,10株psm-mec基因阳性菌株中,2株属典型SCCmecⅢ型,5株属类SCCmecⅢ型,3株属SCCmec新型别。基因间隔序列和fudoh基因检测显示,10株psm-mec基因阳性人葡萄球菌中,mecR1/psm-mec基因和psm-mec/xylR基因及fudoh基因均阳性。结论 SCCmec相关的psm-mec基因广泛存在于血液来源的人葡萄球菌中,主要分布在典型SCCmecⅢ型、类SCCmecⅢ型和SCCmec新型别上,定位于mecR1基因与xylR基因之间。     

鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的探讨鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点,明确本地区MRSA基因型别及其分布规律。方法收集2009年1月至2011年8月临床分离的MRSA菌株54株。应用多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA菌株进行葡萄球菌染色体mec(SCCmec)基因分型、杀白细胞毒素(PVL)毒力基因(pvl)和多位点序列分型(MLST)检测。结果 MRSA菌株的SCCmecⅠ~Ⅴ基因分型分别占0.00%、50.00%、46.30%、1.85%和1.85%;检测出1株pvl基因阳性;24株MRSA菌株MLST分型显示,ST239 13株(54.17%),ST59株(37.50%),ST5 9和ST7各1株(4.17%)。结论鄂尔多斯地区蒙古族人群MRSA菌株以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主。     

2005年我国多中心苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的多中心研究我国2005年苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）分子流行病学特征。方法收集2005年1—12月14个城市17家教学医院连续分离的非重复MRSA595株，通过多重PCR对MRSA进行葡萄球菌染色体mec（SCCmec）分型，脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行同源性分析。根据药敏结果、PFGE、SCCmec型别和分布地区选出53株进行多位点序列分型（MLST）。采用PCR检测毒素基因。结果595株MRSA中，SCCmecm型243株、占61．5％，不能分型菌株96株、占24．3％，Ⅱ型56株、占14．2％；沈阳SCCmecⅡ型占60．7％（17／28），远高于其他地区（0～42．9％）。PFGE共有24种分型，42种亚型，其中A型占50．1％，为12个城市13家医院所共有，R型占23．5％，存在于8个城市9家医院。MIST共有6种分型，其中序列分型（sT）239占75．5％，ST5占17．0％。595株MRSA中，pvl基因检出率为2．5％。结论我国MRSA主要获得Ⅱ型、Ⅲ型SCCmec基因，SCCmec的分布有地区差异。一些地区发生MRSA的暴发，并且地区间发生流行克隆的传播。有些流行克隆可能来源于某些世界流行克隆株的传播。     

社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型研究

目的研究社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)的分子生物学特性,为防控CA-MRSA感染提供依据。方法收集2007年1月-2008年9月间分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌共5株,采用PCR方法检测进行SCCmec分型,多位点序列分型(MLST),葡萄球菌A蛋白(SPA)分型。结果 5株CA-MRSA菌株SCCmecⅣ基因分型为3株,SCCmecⅤ型2株;MLST分型为SCCmecⅣ型菌株均为ST59型,SCCmecⅤ型中1株为ST7型,另1株未能成功进行MLST分型;SPA基因分型将3株SCCmecⅣ型菌株归属为t437,另2株分别为t163和t796。结论流行传播的CA-MRSA感染主要以SCCmecⅣ型菌株为主,应引起密切关注,并做好防控工作。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性研究

目的了解临床MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征。方法采用应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术对MRSA进行SCCmec基因分型;采用K-B纸片扩散法检测MRSA抗菌药物敏感性。结果 65株MRSA菌株中包括SCCmecⅢ型60株(92.31%),SCCmecⅣa型4株(6.15%),未分型1株(1.54%)。耐药性分析显示所有菌株对万古霉素、利奈唑烷、替考拉宁和奎奴普丁/达福普汀完全敏感,对氯霉素耐药率较低,各型别间无显著差异(P>0.05)。对其它非β-内酰胺类的抗菌药物,SCCmecⅢ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣa型,其中对加替沙星、庆大霉素,利福平,四环素的耐药率有显著差异(P<0.05)。结论 SCCmecIII型菌株为临床分离MRSA主要流行菌株,该型菌株对多种抗生素呈多重耐药。多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型适合临床实验室。     

临床分离耐甲氧西林表皮葡萄球菌SCCmec型别多样性分析

目的探讨临床分离耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)SCCmec型别。方法收集临床分离并经全自动微生物鉴定系统准确鉴定的表皮葡萄球菌84株,通过PCR扩增esp和mecA基因准确鉴定MRSE,采用多重PCR对MRSE SCCmec进行分型,分析其分布特点。结果 PCR扩增结果显示,84株临床分离表皮葡萄球菌均可扩增出esp基因,mecA检出率为76.19%(64/84),其中血液、痰液、尿液和伤口分泌物MRSE检出率分别为76.8%、68.8%、100.0%和71.4%。多重PCR扩增结果显示,64株MRSE中,SCCmec单一型别为22株,其中SCCmecⅠ型19株、SCCmecⅢ型3株;SCCmec混合型为42株,其中Ⅰ、Ⅱ混合型2株,Ⅰ、Ⅲ混合型14株,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合型12株,Ⅱ、Ⅲ混合型5株,Ⅲ、Ⅳ混合型9株。结论临床分离的MRSE SCCmec型别存在明显的多样性,以混合SCCmec型别为主。     

MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的 了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(staphyloccoccal cassette chromosome mec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况.方法 收集我院2005年10月-2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性).运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性.结果 30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株.6株MecA基因阳性菌株未能分型.PVL总阳性率36.7%(11/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株.SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药.SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感.结论 我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性分析

目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株（10.7%）,SCCmecⅢ型70株（83.3%）,SCCmecⅣ型5株（6.0%）.所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异（P＞0.05）,对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型（P＜0.05）.结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.     

上海市医院血流感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学特征研究

目的 分析上海市医院血流感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特征.方法 使用二代测序平台Illumina Hiseaxten PE150对29株MRSA进行全基因组测序,利用拼接序列进行多位点序列分型(MLST)、葡萄球菌染色体mec基因盒(SCCmec)、金黄色葡萄球菌A蛋白(spa)、毒力基因、耐药...     

携带Panton-Valentine杀白细胞素基因金黄色葡萄球菌所致感染类型研究

目的 研究携带Panton-Valentine杀白细胞素（Panton-Valentine leukocidin，PVL）基因金黄色葡萄球菌所致感染类型。方法利用多重PCR检测金黄色葡萄球菌临床分离株的PVL基因，应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing，MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的SCCmec基因分型采用多重PCR。结果 26株携带PVL基因的金黄色葡萄球菌有13株为ST88，5株为ST239，5株为ST398，ST25、ST30和ST59各1株。20株为医院获得株，主要引起肺部感染和术后伤口化脓性感染；6株为社区感染株，主要引起软组织化脓性感染。7株MSSA全部为ST88，主要引起化脓性感染。而19株MRSA分布在6种ST型中，主要有ST88-SCCmecⅢA、ST239-SCCmecⅢ、ST398．SCCmecⅣ和ST398-SCCmecⅢ。26株菌株分布于14个病区，在产科发生过携带PVL基因的ST88．SCCmecⅢA．MRSA克隆株的播散。结论 本院分离的携带PVL基因的金黄色葡萄球菌的序列型主要为ST88、ST239和ST398，既可造成医院感染也可造成社区感染且可能引起克隆株的播散。     

50株临床分离金黄色葡萄球菌分子流行病学及药物敏感性分析

目的研究北京电力医院2009年10月至2010年3月连续分离的金葡菌的分子流行病学特征及药物敏感性状况。方法收集在此期间临床连续分离的金葡菌,采用多位点序列分型(MLST)和葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型技术进行分子生物学分型,同时进行Panton-Valentine(PVL)毒素基因检测,并对其中的33株甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)进行SCCmec分型;采用琼脂稀释法作MRSA对14种抗菌药物的药敏试验。结果 50株金葡菌中,检出MRSA33株,占66.0%,其中1株为社区获得性(CA)-MRSA。MRSA有6种克隆型,其中ST239-t030-Ⅲ型占绝对优势,并且发现了国内罕见的新克隆型(ST239-t2270-Ⅲ)的传播;相比较,MSSA分子分型则呈散在分布。药敏试验结果显示,糖肽类抗生素及替加环素对MRSA的抗菌作用最强。CA-MRSA携带PVL毒素基因,其耐药谱与医院获得性(HA)-MRSA有较大差异。结论相比于MSSA,MRSA的克隆型别相对集中,提示MRSA更容易引起医院内的传播。MRSA以ST239-t030-Ⅲ为最常见型别,与我国总体趋势一致。     

两种基因型的MRSA感染的危险因素分析

目的：通过研究本地区SCCmecⅡ及Ⅲ型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的相关危险因素,进而为治疗和预防不同基因型的MRSA感染提供依据。方法采用病例对照研究,对SCCmecⅡ及SCCmecⅢ型MRSA感染的相关危险因素进行统计分析。结果SCCmecⅡ、SCCmecⅢ型MRSA感染与是否入住ICU有明显统计学差异（P＜0．05）。而性别、年龄、住院时间、手术史、住院史、侵袭性操作、恶性肿瘤、严重皮肤损伤及预后情况在SCCmecⅡ和SCCmecⅢ型MRSA间并无明显的统计学差异（P＞0．05）。结论相比较与SCCmecⅢMRSA而言,入住ICU的患者更容易感染SCCmecⅡMRSA。而性别、预后、年龄、住院时间、手术史、住院史、侵袭性操作、糖尿病、严重皮肤损伤、恶性肿瘤、抗生素种类对于SCCmecⅡ、SCCmecⅢ型MRSA并无明显统计学差异。     

医院与社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

目的探讨医院与社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)产生耐药的分子流行病学特征。方法采用培养法分离出MRSA,PCR法检测mecA基因并分型。结果 189株MRSA标本甲氧西林决定因子(mecA)基因检测有178株为阳性,进行mecA基因分型,SCCmecⅡ型24株,SCCmecⅢ型101株,SCCmecⅣ型51株,其他2株未能分型,分型结果存在差异。结论 MRSA以SCCmecⅢ型为主,MRSA的产生与抗菌药物的使用具有相关性。     

62株临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的 了解医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因型别及耐药特征.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术检测MRSA菌株的mecA基因并对其进行分型,应用E-test法测试MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、左氧氟沙星和利福平5种药物的MIC值.结果 62株MRSA的mecA基因全部阳性,SCCmecⅢ型60株,SCCmecⅣa型1株,还有1株用本实验方法未能分型.药敏试验显示所检菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感,对左氧氟沙星和利福平的耐药率分别为96.8%和82.3%.结论 该院以SCCmecⅢ型为主要流行类型,治疗MRSA仍首选万古霉素等糖肽类抗菌药物.     

杭州市富阳区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的对杭州市富阳区临床分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)进行基因分型并分析其流行现状。方法收集临床送检标本中分离出的金黄色葡萄球菌,采用全自动细菌鉴定/药敏系统进行药敏试验,对所有MRSA菌株进行多位点序列分型(MLST)、葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型和葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)分型,同时应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。结果分离到金黄色葡萄球菌121株,其中MRSA 22株,占18.2%。药敏试验显示MRSA对β-内酰胺类、红霉素全耐药,对左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率85.0%,未发现万古霉素、利奈唑胺耐药株。SCCmec、spa、MLST分型表明以ST5-t311-SCCmecⅡ基因型为主,部分菌株之间同源性程度高。结论杭州市富阳区MRSA的检出率目前还处于相对较低的水平,流行克隆以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

六年间血流感染的金黄色葡萄球菌的分子特征分析

目的 分析上海三级甲等医院2004-2010年血流感染的金黄色葡萄球菌克隆分型特点以及随时间的变化趋势,检测不同克隆株耐药和毒力基因携带情况.方法 收集上海华山医院2004-2010年从不同患者血液样本中分离鉴定的金黄色葡萄球菌103株,通过苯唑西林MIC测定和SCCrnec基因分型等方法对MRSA进行检测;按照国际通用的多位点保守基因测序(MLST)以及葡萄球菌A蛋白序列分析(spa typing)方法进行克隆株的鉴定分析,采用PCR方法对103株细菌的耐药以及毒力基因携带情况进行分析.结果 103株金黄色葡萄球菌共检出MRSA66株(64.1%),其中SCCmecⅡ型35株,SCCmecⅢ型29株,SCCmecⅣ型2株,MSSA 37株(35.9%).66株MRSA的克隆分型以ST5(33株)和ST239(29株)为主,另外还包括2株ST59.1株ST641,1株ST6;其他克隆型均为MSSA.从2009年开始ST5和ST239克隆株在血流感染中的分离率明显下降(ST5从52.9%降至15.4%;ST239从61.1%降至15.4%),而其他类型以及新出现的MSSA克隆株分离率明显增加(如2009年ST7分离率为41.7%;2010年新出现ST188及ST15等),2010年血流感染的MSSA为84.6%.103株金黄色葡萄球菌mupA耐药基因阳性19株(18.4%),qacA/B耐药基因阳性41株(39.8%),70.6%的ST239杀菌剂耐药基因qacA/B阳性.在这103株血流感染的金黄色葡萄球菌中发现5株动物来源的克隆株,分别为4株ST398以及1株ST9.22个毒力基因除了sasX、lukSF以及arcA外,同一克隆株无论MRSA还是MSSA其毒力基因携带情况无明显差异,但是不同克隆株携带毒力基因有明显的差异.结论 以ST5和ST239为主的MRSA在血流感染中的分离率明显下降,新的MSSA克隆株分离率明显增加,不同的克隆株耐药以及毒力基因的携带情况存在明显差别.     

广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

目的 对广州地区2008年分离的132株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行基因分型研究,以了解当年广州地区MRSA的流行情况.方法 联合采用多位点序列分型(MLST)以及金黄色葡萄球菌染色体mec盒分型(SCCmec)方法对以上菌株进行基因分型.结果 132株MRSA中有123株是ST239-MRSA-III型;另外,也分别检测到3株是ST239-MRSA-IIIA型、2株是ST865-MRSA-III型、1株是ST864-MRSA-IV型、1株是ST188-MRSA-I型以及ST217-MRSA-IV型1株.结论 ST239-MRSA-III型是广州地区2008年MRSA分布的主要菌型.     

重庆地区金黄色葡萄球菌临床株的分子型别与耐药性检测

目的了解重庆地区金黄色葡萄球菌临床菌株的分子型别及其对常用抗菌药物的耐药情况,为防控该地区金葡菌感染提供理论依据。方法收集2013年6月至2014年12月期间重庆地区西南医院临床分离的110株金黄色葡萄球菌,利用特征性基因扩增区分甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),再采用多位点序列分型(MLST)、spa分型、SCCmec分型、agr分型等方法检测金葡菌的型别,采用PCR检测pvl毒力基因,药敏试验分析菌株对苯唑西林、万古霉素、四环素等13种临床常用抗菌药物的耐药性,分析菌株的耐药谱。结果 110株金葡菌中有59株为MRSA,51株为MSSA,MRSA阳性率为53.6%。59株MRSA分为11种spa型和8种ST型,优势流行克隆为ST239-MRSA-Ⅲ(57.6%,34/59),pvl毒力基因检出率为23.7%(14/59)。51株MSSA分为27种spa型和18种ST型,agrI型占68.6%(35/51),pvl检出率为7.8%(4/51)。药敏结果显示59株MRSA均为多重耐药(MDR)菌株,51株MSSA中有24株为MDR菌株。结论重庆地区流行的MRSA以ST239-MRSA-Ⅲ为主,而MSSA表现出较高遗传多样性,发现ST121等高毒力、高耐药性菌株,值得高度重视。     

新型多重聚合酶链反应对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因的分型研究

目的 用一种新型的多重聚合酶链反应(PCR)方法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)基因进行分型研究,以了解该地区流行株的主要型别.方法 收集136株经MicroScan Walkaway-40微生物鉴定和药敏系统鉴定的MRSA;头孢西丁纸片扩散法和mecA,femB基因复合扩增法进行确证试验;用新型多重PCR方法对确证的MRSA进行SCCmec基因分型.结果 127株被确证为MRSA;SCCmec分型显示,125株为SCCmec I型,与以往报道相同;其余两株均为ScCmec Ⅳa,结合病例资料判定该两株菌为社区获得性MRSA.结论 该研究中的MRSA主要携带SCCmec II型基因,携带SCCmec Ⅳa型基因的社区获得性MRSA为该地区首次报道;新型多重PCR方法是适用于临床实验室进行MRSA SCCmec分型研究的更为简单有效的方法.