微量板法与试管法检测ABO血型抗体效价的比较

目的比较微量板法与试管法检测ABO血型Ig M抗体效价的差异。方法使用微柱凝集法对129例健康供者和91例造血干细胞移植患者进行ABO血型正反定型鉴定,根据反定型结果,同1标本同时经试管法与微量板法进行ABO血型Ig M抗体效价测定并进行比较。结果 220例被研究者中,162例标本需要进行抗体效价检测。抗-A/抗-B效价在不同病例群体中,2种方法检测的一致性差异不具有统计学意义(P0.05);2种方法检测造血干细胞移植患者ABO血型抗体效价、健康供者抗-A效价的差异不具有统计学意义(P0.05);微量板法测得的健康供者抗-B效价明显低于试管法(17.78±3.02 vs 19.05±2.95,P0.05)。结论全自动微量板法微量板法可广泛用于造血干细胞移植患者ABO血型Ig M抗体效价的检测,而用于健康供者抗-B效价检测时抗体效价低于试管法,必要时需要增加试管法。     

ABO血型不合的异基因造血干细胞移植骨髓空虚期血型的血清学特性研究

目的:探讨ABO血型不合的异基因造血干细胞移植血型血清学转化规律,为患者输注血液成分的选择提供依据。方法:在干细胞移植前对受者和供者用盐水介质试管法和微柱凝胶法进行ABO及RhD血型鉴定移植后定期检测患者ABO血型抗原强度及抗体滴度的变化。结果:33例ABO血型不合的异基因造血干细胞移植血型转变后ABO血型主要不合组正反定型结果相符率为100%,血型次要不合组正反定型相符率为33.3%,不符率为66.7%,ABO主次要血型不合组正反定型相符率为20%,不符率为80%。结论:ABO血型不合的干细胞移植后,患者血型抗原转变为供者血型,但次侧不合和双向不合血清学血型转换后与正常人比较有明显的统计学差异。     

微柱凝胶法检测ABO血型正反定型不符的影响因素分析

目的探讨微柱凝胶法检测ABO血型时出现正反定型不符的影响因素与处理方法。方法选取2015年1月至2016年10月于该院进行ABO血型检测的患者20 157例,采用微柱凝胶法检测ABO血型正反定型不符的标本,分析试验技术原因、患者临床资料,以及针对性辅助试验进行ABO血型鉴定。结果微柱凝胶法检测出ABO正反定型不符共165例,检出率为0.82%,在1 642例恶性血液病患者中出现ABO正反定型不符19例,检出率为1.16%。165例患者中ABO血型不合造血干细胞移植患者有87例,剩余78例ABO正反定型不符患者中抗原减弱或缺失患者36例(46.2%),抗体减弱或缺失6例(7.7%),正定型额外反应5例(6.4%),反定型额外反应27例(34.6%),正、反定型同时额外反应4例(5.1%)。结论引起ABO正反定型不符的主要原因有ABO血型不合造血干细胞移植、恶性血液病及自身抗体(假阳性),通过排除人为因素、试验操作技术问题,了解患者临床资料以及进行针对性辅助试验可以正确鉴定血型。     

422例ABO正反定型不符的原因分析及处理对策

目的分析422例患者ABO正反定型不符的原因及处理对策。方法随机使用GRIFOLS ERYTRA、BIO-RAD IH-1000全自动血型仪采用微柱凝胶法检测患者ABO血型26 923例,检出ABO正反定型不符的标本422例。联合分析实验技术原因、患者临床资料以及针对性辅助实验进行ABO血型鉴定。结果 422例检出ABO正反定型不符,其中325例为ABO血型不合造血干细胞移植患者。除造血干细胞移植患者外,正反定型不符的患者有97例,正定型减弱或缺失患者40例,其中恶性血液病患者24例,在正定型减弱或缺失中占60%(24/40);反定型减弱或缺失者9例,正定型额外反应者6例,反定型额外反应者36例,正定型、反定型同时额外反应者6例;检出自身抗体患者21例,在正反定型额外反应中占43.8%(21/48)。结论本研究病例中引起ABO正反定型不符的主要原因有ABO血型不合造血干细胞移植、恶性血液病以及自身抗体(假阳性)。根据ABO正反定型不符的实验室技术原因、患者临床资料以及针对性辅助实验可以正确鉴定血型,明确患者的ABO血型,从而指导临床输血的选择。     

血型不合的异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的探讨ABO血型不合异基因造血干细胞移植的疗效及并发症。方法回顾性分析14例ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者的红系恢复情况,以评价血型不合、HLA是否相合等对红系恢复、造血重建、并发症等的影响。结果14例ABO血型不合患者仅1例发生纯红细胞性再生障碍性贫血(简称:纯红再障),13例ABO血型不合的患者(1例发生纯红再障未计算在内)与同期进行11例ABO血型相同的异基因造血干细胞移植患者比较,血红蛋白恢复在血型不合组明显延迟,中性粒细胞和血小板恢复两组无差异;在血红蛋白恢复和血型转换的时间上血型不合的半相合造血干细胞组明显要迟于全相合,但其差异无统计学意义。结论ABO血型不合不影响造血干细胞移植的植活、相关合并症及预后。     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植后血型转换期的输血策略

背景:造血干细胞移植是目前临床治愈血液系统恶性肿瘤、先天性遗传性疾病以及自身免疫性疾病的重要手段,ABO血型不合的异基因造血干细胞移植并不影响造血干细胞的植活,但ABO血型不合在移植后血型转换期输血时应该制定何种输血策略值得研究。目的:研究ABO血型不合的异基因造血干细胞移植后血型转换期血型抗原抗体的变化及输血时血液的选择策略。方法:应用血型鉴定、抗体检测、抗体效价测定、交叉配血等方法,对24例ABO血型不合的异基因造血干细胞移植患者,在血型转换期进行血型抗原抗体的监测和输血前相容性检测,并与同期30例血型相合的异基因造血干细胞移植患者进行比较,选择适合的血液。结果与结论:24例ABO血型不合患者于移植后全部获得造血重建,但在红系恢复时间上,主要血型不合组和主次要均不合组的时间均有延长,差异均有显著性意义(P<0.05)。根据血型转换期监测的ABO抗原和相应抗体发生的变化,主要ABO血型不合移植者在血型转换期均输注了患者型红细胞;次要血型不合者根据抗原减弱的情况,从输患者型过渡到输供者型红细胞;主次要均不合的患者,从首先输注O型洗涤红细胞再过渡到输注供者型红细胞,24例患者均未发生任何溶血性输血反应。因此ABO血型不合的异基因造血干细胞移植后的输血策略,应根据患者血型转变情况及抗体效价动态变化,权衡所选血型对造血重建的影响,选择合适的血液成分输血,可避免溶血性输血反应且不影响干细胞植活及血型转换时间,保证患者移植安全。     

ABO血型不合的异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的探讨ABO血型不合异基因造血干细胞移植的疗效及并发症。方法回顾性分析14例ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者的红系恢复情况,以评价血型不合、HLA是否相合等对红系恢复、造血重建、并发症等的影响。结果14例ABO血型不合患者仅1例发生纯红再障。13例ABO血型不合的患者(1例发生纯红再障未计算在内)与同期进行11例ABO血型相同的异基因造血干细胞移植患者比较,血红蛋白恢复在血型不合组明显延迟,中性粒细胞和血小板恢复两组无差异。此外,在血红蛋白恢复和血型转换的时间上血型不合的半相合造血干细胞组明显要迟于全相合,但其差异无统计学意义。结论ABO血型不合不影响造血干细胞移植的植活、相关合并症及预后。     

采用全自动血型仪正反定型不一致的原因分析及对策

目的调查全自动血型仪在ABO血型鉴定中正反定型不一致的原因,并探讨相应对策。方法结合盐水介质试管法、抗体鉴定结果及病史资料,对全自动血型仪检测的ABO血型正反定不一致的标本进行分析。结果在5978例血型资料中有27例正反定不一致。其中婴幼儿12例,抗体干扰6例,ABO不相容的造血干细胞移植后4例,异型输血、类B、亚型、抗原减弱及原因不明各1例。试管法能纠正11例,其中婴幼儿8例,抗体干扰3例。结论血型仪结合试管法有利于纠正全自动血型仪中婴幼儿、冷抗体、M蛋白所致的正反定型不一致。     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

背景:由于移植技术的提高,供受者ABO血型不合已不再是异基因造血干细胞移植的障碍,但是由于宿主血凝素抗体的持续存在,ABO血型不合异基因造血干细胞移植后常出现红细胞系统恢复的延迟.目的:观察ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者红细胞系统恢复情况,评价血型不合、人类白细胞抗原配型不相合对造血功能重建的影响.设计:回顾性分析.单位:南京大学医学院附属鼓楼医院血液科.对象:选择2002-05/2007-09在南京大学医学院附属鼓楼医院血液科行ABO血型不合异基因造血干细胞移植的恶性血液患者(受者)14例,男11例,女3例;年龄15～60岁.14例患者中7例供受者人类白细胞抗原配型完全相合.7例供受者人类白细胞抗原配型半相合.纳入同期ABO血型相合的造血干细胞移植患者11例为对照.受者在接受异基凶造血干细胞移植前签署移植同意书,供者为同胞姊妹、胞弟、儿子、母亲,均同意提供用于移植的骨髓.实验经医院伦理委员会批准.方法:①预处理方案:人类白细胞抗原配型全相合组采取马利兰和环磷酰胺为主的方案.人类白细胞抗原配型半不合组采用北京人民医院的GlAC方案.②造血干细胞输注:沉降供者骨髓.取上层有核细胞输给受者.主要观察指标:观察ABO血型不合异基因造血干细胞移植的副反应、并发症及造血重建情况.结果:14例ABO血型不合患者仅1例发生单纯红细胞再生障碍性贫血未进入结果分析.①造血功能重建情况:与对照组比较,ABO血型不合组血红蛋白恢复时间明显延迟(t=2.352,P＜0.05),ABO血型相同与ABO血型不合组中性粒细胞和血小板恢复情况差异无显著性意义(P＞0.05).ABO血型不合的人类白细胞抗原配型半不合造血干细胞组血红蛋白恢复和血型转换时间迟于全相合,但其差异无显著性意义(P＞0.05).②并发症:14例ABO血型不合患者移植后成分输血过程未出现溶血反应,移植后也均未发生迟发性溶血反应.结论:ABO血型不合不影响造血干细胞移植的效果,且较为安全.     

微柱凝胶技术在骨髓移植后血型转变观察中的个案分析

由于异基因骨髓干细胞移植受者ABO血型系统抗原的变化是一个逐渐改变的过程，所以它直接反映了移植后骨髓成活与否及造血功能的恢复状态，也可为患者正确选择输注血液成分治疗提供依据。国内对骨髓、造血干细胞移植血型转变多有报道，但微柱凝胶技术在观察血型转变过程的情况又怎样呢？近年来本院采用ABO血型不合异基因骨髓移植，治疗白血病获得成功。为了探讨微柱凝胶技术能否用于骨髓移植后血型转变的观察，笔者对1例ABO血型次要不合患者骨髓移植后的血型、抗体滴度、Coombs试验的转变进行了跟踪观察，现报道如下。     

两种方法鉴定老年人ABO及RH(D)血型的比较

目的比较微柱凝胶法和试管法鉴定老年人ABO血型和RH(D)血型的可靠性。方法选取400例老年人血标本,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型和RH(D)血型鉴定。结果在鉴定老年人ABO血型时,试管法正定型符合率92.0%,反定型符合率89.0%;微柱凝胶法符合率96.0%。RH(D)血型检测结果两法一致。结论微柱凝胶法检测老年人的ABO血型时优于传统试管法,在常规血型检查应推广应用。     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集

目的研究ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集方法,探讨不去除红细胞和/或血浆进行造血干细胞移植的安全性。方法 29例异基因外周血干细胞移植供者与受者HLA配型为全相合或1～3位点不合,其中ABO主要不合13例,次要不合7例,ABO血型相合9例。采用CS-3000Plus血细胞分离机的干细胞采集程序对ABO血型不合供者的外周血造血干细胞进行采集,不去除红细胞和/或血浆,直接回输给受者。结果 ABO血型主要不合、次要不合及血型相合的供者每次采集的外周血干细胞(PBSC)产品终体积为(59.11±1.19)ml,单个核细胞(MNC)采集物、MNC比例、CD34+细胞、RBC含量三组间的差异无统计学意义。结论应用CS-3000Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞,不仅对供者安全,而且采集产品中造血干细胞浓度较高,血型不合的红细胞污染较少,不需要去除红细胞和血浆,可安全地用于ABO血型不合的受者。     

用分子生物学技术鉴定新生儿脐血ABO疑难血型

目的用分子生物学技术对新生儿脐血ABO疑难血型鉴定。方法新生儿产出后断脐带时留取脐血血样,先用传统的试管法对脐血标本作ABO血型鉴定,不能定出血型的标本用微柱凝胶技术鉴定,仍不能定出血型者再用分子生物学方法(聚合酶链反应-序列特异性引物分析PCR-SSP)作进一步鉴定。结果传统的试管法仅能对83.98%(4561/5431)的脐血血样正确定出ABO血型,用微柱凝胶技术仍有1.77%(96/5431)的标本不能定出ABO血型,对以上疑难标本用分子生物学技术容易地定出了ABO血型。结论微柱凝胶技术敏感,应取代试管法ABO血型定型方法,分子生物学技术鉴定新生儿脐血ABO疑难血型是一种有效的手段。     

Low rates of anti-recipient isohemagglutinins in ABO incompatible hematopoietic stem cell transplants

IntroductionIsohemagglutinins occur naturally and form in an 'opposite' (antigen-negative) pattern to a patient’s ABO blood type. Patients undergoing minor and bidirectional ABO incompatible hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) may demonstrate detectable antibodies against their native blood type. In this study, we sought to characterize the rates of such antibody formation and evaluate the clinical significance of our findings.Materials and MethodsAn internal database of HSCT patients at an academic medical center was queried for ABO incompatible transplant patients from 2009-2019. Serum typing results, clinical histories, and laboratory data were compiled and reviewed.ResultsA total of 182 minor and bidirectional ABO incompatible HSCT patients were identified. Anti-recipient isohemagglutinins were found in 9% (16/182) of the HSCT patients. The rate was higher in patients with minor incompatibility (12%: 15/127) versus bidirectional ABO incompatibility (2%: 1/55) (p = 0.04). No anti-recipient isohemagglutinins were identified in umbilical cord HSCT patients (0%: 0/7). Serologic agglutination reactions of recipient isohemagglutinins were overall mostly weak (13/16 weak + to 1+). There was a trend towards a higher rate of acute graft-versus-host-disease in patients with anti-recipient isohemagglutinins compared to those without (75% vs. 53%; p = 0.12), though not statistically significant. Rates of alloimmunization to minor red cell antigens were similar between the two groups. Few patients showed laboratory evidence of hemolysis at 12 months follow up.Discussion and conclusionsAnti-recipient isohemagglutinins occur at low rates in ABO incompatible HSCT and are significantly more common in minor ABO incompatible transplant compared to bidirectional transplants. Larger cohort studies are needed to better understand the relationship between anti-recipient isohemagglutinins and HSCT outcomes.     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用

目的 探讨微柱凝胶法(MGT)检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素.方法 应用(MGT)法检测38 600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37℃孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30 min,然后采用(MGT)法检测.结果 MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法.MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例.结论 纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果.增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全.     

应用血细胞分离机采集ABO血型不合供者的外周血干细胞

为了探索应用血细胞分离机采集ABO血型主要和(或)次要不合的供者外周血造血干细胞的得率及不去除红细胞或血浆用于干细胞移植的可行性,采用CobeSpectra(Version6.1)血细胞分离机的自动干细胞采集程序对9例异基因外周血造血干细胞供者进行采集,其中ABO血型主要不合4例,次要不合2例,主要次要均不合3例。对ABO血型主要不合及主要、次要均不合的供者每循环收集的细胞成分和血浆的量分别作相应调整。输注前从产品袋中留取标本检查有核细胞计数、单个核细胞比例、CD34 细胞计数和细胞的成活率(台盼蓝拒染率)。输入时对受者采取一系列保护肾功能的措施。液体总量控制在4000毫升/日。结果显示:除1例因供者体重远大于受者经1次采集即可满足移植所需细胞量外,其余供者均经2次采集收集到足够的有核细胞直接回输给受者或冰冻保存备用。共采集PBSC17次,平均每次获得有核细胞3.77×1010个,单个核细胞占97%-99%。CD34 细胞数平均为8.62×106/kg,细胞拒染率均为100%。ABO血型主要不合及主要、次要均不合的供者每次采集的PBSC产品中含压积红细胞8-10ml,ABO血型次要不合供者每次采集的PBSC产品中含血浆80-120ml,不去除红细胞及血浆,直接回输给受者。无1例出现溶血性输血反应,造血功能均获得重建。结论:采用CobeSpectra血细     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用及方法学探讨

目的探讨微柱凝胶法（MGT）检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素。方法应用（MGT）法检测38600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37~C孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30min,然后采用（MGT）法检测。结果MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法。MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例。结论纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果。增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全。     

聚合酶链式反应-特异性序列引物基因定型在新生儿溶血病ABO血型定型中的应用

目的研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PCR-SSP)基因定型在新生儿溶血病(CHDN)ABO血型定型中的应用。方法收集20例来自广东省肇庆市第一人民医院新生儿溶血病(HDN)的样本,对这些样本进行ABO血型鉴定等一系列血型血清学方法进行检测,然后用PCR-SSP基因定型技术进行样本的基因分型。结果与其血型的血清学分型结果进行比较,新生儿溶血病ABO血型的定型是新生儿输血的必要保障,而PCR-SSP基因分型较血型血清学方法更快捷、准确。结论 PCR-SSP基因正型技术将不再局限于疑难血型的鉴定中,并会越来越多地应用于HDN的鉴定中。     

A practical strategy to reduce the risk of passive hemolysis by screening plateletpheresis donors for high‐titer ABO antibodies

BACKGROUND: Hemolytic transfusion reactions (HTRs) can occur from ABO‐incompatible platelet (PLT) transfusions. After a series of cases at our institution, a procedure to screen all plateletpheresis donors for high‐titer ABO antibodies was implemented. STUDY DESIGN AND METHODS: Plasma samples from plateletpheresis donors were screened using pooled 0.8% A1 and 0.8% B red blood cells (RBCs) in buffered gel. Dilutions of 1 in 150, 1 in 200, and 1 in 250 were sequentially evaluated. A component testing positive for high‐titer ABO antibodies was restricted to ABO‐identical or group O recipients or washed. RESULTS: At the initial dilution of 1 in 150, half of group O components were labeled as high titer. At the current dilution of 1 in 250, 25% of group O components are labeled as high titer. No PLT‐associated HTR has been reported since screening began. CONCLUSION: Universal screening for high‐titer ABO antibodies in plateletpheresis donors can be implemented efficiently to reduce the risk of HTRs. The cutoff for classifying a unit as high titer depends on the serologic method used and may be customized by the individual facility. Our screening method uses one gel test per donation regardless of blood group and a plasma dilution of 1 in 250 with pooled A1/B RBCs in buffered gel.     

40例ABO血型鉴定出现弱凝集的结果分析及处理

目的分析40例采用玻片凝集法和试管离心法检测ABO血型出现弱凝集的结果分析及处理。方法 40例弱凝集样本分别经37℃水浴10min、9%生理盐水清洗血细胞3次处理,做盐水试管法的正反定型试验,直接抗人球蛋白试验,送输血科进行微柱凝胶法鉴定,不能确定血型者最后送广州市血液中心鉴定。结果 40例ABO血型鉴定出现弱凝集者共有6例出现直接抗人球蛋白试验阳性。进行水浴、生理盐水洗血细胞处理后,弱凝集现象分别减少40%和52%。在35例标本中盐水试管法正反定型鉴定和微柱凝胶法鉴定一致性达到100%,另有5例正反定型不符,微柱凝胶法鉴定亦不能确定血型者,送广州市血液中心鉴定,结果4例为ABO亚型,1例为存在不规则抗体影响。结论鉴定血型时,当发现ABO血型鉴定试验出现弱凝集时,首先应重复做试验一次,严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察结果,按步骤一步一步排除弱凝集的可能性,对一些疑难问题必须及时请示上级主管,并送上级医院进一步检查。