化学发光法测定白果白蛋白的体外抗氧化活性

目的研究白果白蛋白的体外抗氧化活性、对DNA损伤的保护作用及其作用机制。方法以莲房原花青素和小牛血清蛋白为对照,分别采用邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系测定了白果白蛋白对超氧阴离子的清除作用,硫酸铜-邻菲啉-抗坏血酸-双氧水、硫酸亚铁-鲁米诺-双氧水和硫酸亚铁-鲁米诺3个体系测定了白果白蛋白对羟自由基的清除作用,双氧水-鲁米诺体系测定了白果白蛋白对体外双氧水的清除作用,采用硫酸铜-邻菲啉-抗坏血酸-双氧水-脱氧核糖核酸体系测定了白果白蛋白对体外DNA损伤的保护作用。结果白果白蛋白具有较好的体外清除活性氧和保护DNA损伤的活性,但在硫酸亚铁-鲁米诺-双氧水和双氧水-鲁米诺化学发光体系中表现出"促氧化"作用。结论采用化学发光体系衡量白果白蛋白的抗氧化活性具有选择性。     

金樱子总黄酮抗氧化及清除自由基的作用研究

[目的]探讨金樱子总黄酮抗氧化及清除自由基的作用.[方法]分别采用水杨酸法和邻苯三酚自氧化法观察金樱子总黄酮对羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)的清除作用,同时对金樱子总黄酮总还原能力进行测定.[结果]金樱子总黄酮具有良好的抗氧化能力,并对·OH和O2-·等自由基具有较强的清除能力,但对不同的自由基敏感程度不同.[结论]金樱子总黄酮具有良好的抗氧化活性,且对·OH和O2-·的清除能力与其浓度呈正相关关系,提示其具有一定抗衰老作用.     

高效液相色谱-DAD-化学发光法在线检测麦冬清除超氧阴离子活性

利用高效液相色谱-DAD-化学发光法(HPLC-DAD-CL)在线检测麦冬对超氧阴离子（O2^·-）的清除活性,追踪其抗氧化活性的物质基础。将麦冬水提物分成乙醚和正丁醇两个萃取部位,以化学发光的降低作为检测指标,测定麦冬中主要活性成分对邻苯三酚-鲁米诺-碳酸缓冲液体系产生的O2^·-的清除能力,并利用HPLC-DAD-MS/MS和对照品对其进行结构鉴定。采用槲皮素为阳性对照,通过标准效价方程分别评价了主要活性成分的抗氧化活性。研究结果表明,麦冬中直接清除超氧阴离子作用主要来自乙醚部位中的高异黄酮成分。HPLC-DAD-CL在线联用技术简单、快速,可用于中草药抗氧化活性成分的筛选。     

紫苏提取物对过氧化氢引起的溶血反应和小鼠肝匀浆脂质过氧化物生成的抑制作用

[目的]探讨紫苏提取物对组织细胞的抗溶血和抗氧化作用。[方法]研究紫苏提取物对过氧化氢(H 2O2)引起的兔血溶血反应和体外给药对温育时小鼠肝匀浆脂质过氧化物(LPO)生成的抑制作用。[结果]紫苏提取物抗溶血和抗氧化作用均强于抗坏血酸。[结论]紫苏提取物对组织、细胞具有抗氧化和保护作用。     

羟丙基芦丁及其铜(Ⅱ)配合物的SOD样活性

0　引言　从天然抗氧化剂及其衍生物中来寻找具有 SOD样活性的药物 ,是当今人们关注的热点 [1 - 4 ] .我们对羟丙基芦丁及其铜配合物的歧化 O2 · - 活性进行了测定 ,并以 SOD作为对照 .以期寻到一种具有 SOD样作用的防治心脑血管病的药物 .1　材料和方法1.1　材料　黄嘌呤氧化酶 (XO) ,Sigma公司产品 ,使用之前用 PBS(p H 7.8,0 .0 5 mol· L- 1 )稀释 2 0倍 ;黄嘌呤 ,E.Merck公司产品 ;鲁米诺 ,上海试剂一厂产品 ;羟丙基芦丁及其铜配合物由第四军医大学骆文博教授提供 ;超氧化物歧化酶 (SOD) ,甘肃夏河生化试剂厂产品 ,使用时分…     

广西红腺忍冬与山东忍冬总黄酮提取物的抗氧化作用研究

目的:研究广西红腺忍冬及山东忍冬提取物总黄酮的抗氧化作用.方法:按总黄酮提取工艺提取总黄酮,通过烘箱储藏法以及H2O2-CTMAB-鲁米诺发光体系,比较两地总黄酮提取物抗氧化活性差别.结果:广西红腺忍冬与山东忍冬总黄酮提取物得率分别为1.209 g/100 g、2.096 4 g/100 g,两地提取物对油脂抗氧化作用呈量效关系,山东忍冬提取物抗活性氧作用强于广西红腺忍冬提取物.结论:广西红腺忍冬总黄酮提取物亦有很好的抗氧化作用.     

玄参环烯醚萜类成分的体外抗氧化活性研究

[目的]研究玄参环烯醚萜类成分的体外抗氧化活性.[方法]采用溶剂萃取法,提取玄参环烯醚萜类成分.采用分光光度法,测定玄参环烯醚萜类成分对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的清除能力,以及对H2O2诱导的小鼠血红细胞氧化溶血的抑制能力.[结果]玄参环烯醚萜类成分能显著地清除DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子,可抑制H2O2诱导的小鼠血红细胞氧化溶血.[结论]玄参环烯醚萜类成分具有较强的体外抗氧化活性.     

紫苏提取物对过氧化氢引起的溶血反应和小鼠肝匀浆脂质过氧化物生成的抑制作用

[目的]探讨紫苏提取物对组织细胞的抗溶血和抗氧化作用.[方法]研究紫苏提取物对过氧化氢(H2O2)引起的兔血溶血反应和体外给药对温育时小鼠肝匀浆脂质过氧化物(LPO)生成的抑制作用.[结果]紫苏提取物抗溶血和抗氧化作用均强于抗坏血酸.[结论]紫苏提取物对组织、细胞具有抗氧化和保护作用.     

麦冬皂苷对人软骨细胞增殖及其抗氧化作用的影响

目的:探讨麦冬皂苷对体外人软骨细胞增殖及其抗氧化作用的影响.方法:在成功分离培养人软骨细胞后,以MTT法检测软骨细胞活性及增殖情况.将浓度分别为1×10μmol/L及1×102μmol/L的麦冬皂苷作用于H2O2诱导后的软骨细胞,检测软骨细胞存活率以及培养液中超氧化物歧化酶的含量.结果:适宜浓度的麦冬皂苷可对抗H2O2降低软骨细胞生存率,并能升高培养液中超氧化物歧化酶的含量.结论:麦冬皂苷具有促进体外软骨细增殖及对抗H2O2损害软骨细胞的作用.     

酸枣仁化学成分研究

目的 研究酸枣仁的化学成分。方法 利用正、反相硅胶柱色谱分离纯化,通过化学及波谱分析方法鉴定化合物的结构。结果 从酸枣仁中分离并鉴定了1个新的酮基达玛烷型四环三萜皂苷H(jujuboside H,Ⅰ)及3个已知化合物原酸枣仁皂苷A(protojujuboside A,Ⅱ)、酸枣素(斯皮诺素,Ⅲ)、白桦脂酸(Ⅳ)。结论 化合物Ⅰ为新化合物,命名为酸枣仁皂苷H。     

超临界流体CO2萃取酸枣仁脂肪油化学成分的研究

中药酸枣仁为鼠李科植物酸枣 Zizyphus juju-ba Mill. var. spinosa Hu ex H. F. Chou的干燥成熟果仁 ,具有补肝、宁心、敛汗、生津的功能 ,多用于虚烦不眠 ,惊悸多梦 ,津伤口渴等症。酸枣仁主要含有酸枣仁皂苷类、三萜类、脂肪油、蛋白质、甾醇类、磷脂类等化合物。现代药理研究表明 :酸枣仁具有镇静催眠、镇痛、抗惊厥、降血脂、抗血小板聚集、增强免疫功能、降压、抗缺氧、抗心肌缺血、抗心率失常、抗衰老、抗辐射等作用 [1] 。其中酸枣仁油可明显降低鹌鹑总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL )和甘油三酯 (TG)水平 ,升高 HDL /LDL…     

四氢生物蝶呤对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用

目的：研究四氢生物蝶呤（Tetrahydrobiopterin,BH4）对db/db糖尿病小鼠心肌中氧化应激的影响及其可能机制。方法：给予糖尿病模型db/db小鼠磷酸盐缓冲液（Phosphate buffer solution,PBS）,低剂量BH4[10 mg/（kg·d）]、高剂量BH4[50 mg/（kg·d）]干预8周,并以C57小鼠为正常对照组,检测心功能指标,检测心肌组织H2O2水平、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活性。结果：糖尿病组心功能指标明显降低,心肌内H2O2水平明显增加,MDA含量增加,而SOD活性没有明显降低;而不同剂量的BH4能改善心功能指标,降低心肌组织内H2O2水平和MDA含量,并明显提高SOD活性。结论：BH4可以提高糖尿病小鼠心脏功能,降低心肌内氧化应激状态,提高抗氧化能力,提示改善氧化应激可能是BH4改善糖尿病心肌病的机制之一。     

珠子参总皂苷通过促进Nrf2转位拮抗新生大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制。方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200μg/ml)孵育24 h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响。结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500μmol/L),珠子参总皂苷(100、200μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参总皂苷抑制心肌细胞氧化应激损伤,与Nrf2抗氧化途径的激活和清除ROS有关。     

白藜芦醇与乳腺癌相关研究进展

白藜芦醇(resveratrol)是广泛存在于葡萄、虎杖、花生等多种植物中的一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物,以新鲜葡萄皮中含量最高,其化学名称为3,5,4′-三羟基二苯乙烯(3,5,4′-trihydrolystilbence),分子式为C14H12O3,相对分子质量228.25。研究表明白藜芦醇的药理作用广泛,具有抗突变、抗氧化等多种生物学活性和药理作用[1]。近年来,白藜芦醇的强大抗肿瘤活性受到广泛重视。研究发现白藜芦醇对肺癌、肝癌、前列腺癌等多种肿瘤具有显著抗瘤效应[2]。乳腺癌是女性     

生甘草与炙甘草的抗氧化能力比较研究

[目的]对生甘草与炙甘草的抗氧化能力进行比较。[方法]采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法、铁离子还原法、总抗氧化能力测试(ABTS法)以及福林试剂法测定药物的抗氧化能力。[结果]生甘草与炙甘草均具有DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力和总抗氧化能力。[结论]生甘草与炙甘草均具有良好的体外抗氧化活性,实验表明炙甘草的抗氧化能力大于生甘草并且具有统计学差异(P0.01)。     

健心方防治心力衰竭分子机理研究

[目的]探讨了健心方药物血清对于心肌细胞NF-kB活性的影响,阐明健心方保护心肌的作用机理。[方法]采用荧光素酶报告基因方法检测H2O2处理心肌细胞NF-kB活性的改变及丹参酮对损伤后心肌细胞NF-kB活性的影响。[结果]荧光素酶报告基因检测结果表明H2O2可明显增强心肌细胞NF-kB活性(P<0·05),而健心方药物血清可抑制这种激活作用(P<0·05);大小剂量的药物血清均可拮抗H2O2对心肌细胞的损伤作用(P>0·05)。[结论]心肌细胞损伤后NF-kB的激活是CHF发生发展中的重要过程,健心方可拮抗这种激活作用;健心方的心肌保护作用是通过对异常增高的NF-kB活性的拮抗产生的。     

三七总皂苷对过氧化氢诱导HT22 细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究三七总皂苷（PNS）对氧化氢H2O2 损伤后海马神经元HT22 细胞的保护作用。 方法 采用CCK-8 法检测作用PNSHT22 细胞后细胞生长活性的变化,并通H2O2 刺激HT22 细胞,观察 PNS 对HT22 细胞活性的影响及形态变化。采用乳酸脱氢酶检测细胞损伤情况,流式细胞仪检测细胞的凋 亡比例。结果 PNS 在有效浓度范围内对HT22 细胞无毒性,且能增加细胞活性,减轻H2O2 对其损伤程度。 结论 PNS 能通过增强细胞内抗氧化活性,提高HT22 细胞的存活率,从而保护细胞抗氧化损伤。     

酸枣仁提取物与酸枣仁皂苷A促进骨骼增高作用比较研究

目的:比较酸枣仁提取物和酸枣仁皂苷A促进骨骼增高的作用及其机制研究。方法:将酸枣仁皂苷A 0.016 mg·g~(-1)和含相同酸枣仁皂苷A含量的酸枣仁提取物0.320 mg·g~(-1)给予小白鼠灌胃,观察药物促进骨骼增高作用。同时给予大白鼠酸枣仁皂苷A 0.011 mg·g~(-1)和酸枣仁提取物0.220 mg·g~(-1)灌胃,检测脑组织5-羟色胺受体蛋白1A (5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)含量和活性、生长激素分泌情况及对慢波睡眠时间的影响。结果:①酸枣仁提取物组、酸枣仁皂苷A组小白鼠体长明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.01),但两组药物比较作用相当;②用药组较对照组总睡眠时间明显延长,清醒时间减少,但两组药物比较作用相当;③药物可以明显促进大白鼠体内生长激素分泌,明显高于对照组(P0.01),但两者比较作用相当;④药物可以显著促进脑组织5-HT1AR活性,酸枣仁提取物较酸枣仁皂苷A效果更好,但差异无统计学意义。结论:酸枣仁提取物可以替代酸枣仁皂苷A促进骨骼增长,降低治疗成本。     

青葙皂苷对过氧化氢诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究青葙皂苷（Celosins,CES）对H2O2诱导的H9c2凋亡的保护作用。方法 噻唑蓝检测各组细胞活力以确定CES的最佳作用浓度,以及对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用。细胞分组为：空白对照组、H2O2处理组、低剂量青葙皂苷+H2O2处理组、中剂量青葙皂苷+H2O2处理组、高剂量青葙皂苷+H2O2处理组。利用流式细胞术检测心肌细胞凋亡比例、ROS的产生情况。蛋白印记法（WB）检测凋亡信号通路相关蛋白的表达和Nrf2 /ARE 信号通路相关蛋白表达。结果 （1）青葙皂苷可升高H2O2处理的H9c2细胞活力,差异具有统计学意义(P＜0.05)。（2）青葙皂苷可降低H2O2处理的H9c2细胞凋亡率(P＜0.05)。降低ROS的产生(P＜0.05)。（3）青葙皂苷可降低蛋白细胞质细胞色素C、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、Bax的表达(P＜0.05),升高蛋白Bcl-2、Nrf2 核转位与HO-1的表达(P＜0.05)。结论 CES通过激活Nrf2 /ARE信号通路抑制H2O2诱导的H9c2细胞损伤。     

和营安心方对胚胎心肌细胞氧化应激性损伤的影响

[目的]研究和营安心方对过氧化氢(H2O2)所致大鼠胚胎心肌细胞氧化应激损伤的影响。[方法]用70%乙醇冷凝回流提取和营安心方,采用H2O2建立大鼠胚胎心肌细胞氧化应激损伤模型。实验分为5组,分别为:正常对照组、H2O2(200μmol/L)模型组、和营安心方高、中、低剂量组,其中和营安心方高、中、低剂量组分别加入和营安心方提取物500、250、125mg/kg,24h之后加入与模型组同浓度的H2O2(200μmol/L),共同作用2 h。观察心肌细胞四甲基偶氮唑盐(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)含量、丙二醛(MDA)含量及各组细胞培养液中过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。[结果]H2O2组MTT代谢率显著性降低(P0.01),LDH及MDA含量显著性升高(P0.01),CAT及SOD含量显著性降低(P0.05);和营安心方可使H2O2损伤的心肌细胞MTT代谢率提高,MDA含量减少(P0.05),LDH活性降低(P0.05),并且显著性提高心肌细胞的CAT和SOD含量(P0.05)。[结论]和营安心方对受损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,其机制可能与抑制氧化损伤有关。