九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用

目的　观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法　九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0～ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca2 + 荧光探测剂Fluo 3 /AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2 + 分布情况。结果　光镜下体外培养的Hela细胞在九节龙皂甙作用 2 4h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征。 60、72h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征。诱导Hela细胞48、60、72h内Ca2 + 严重超载且维持在较高浓度水平。结论　九节龙皂甙对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + ]增加且维持在较高水平     

九节龙皂甙体内的抗肿瘤作用

[目的]观察川产九节龙皂甙二种新化合物(AR1，AR2)在动物体内的抗肿瘤作用。[方法]体内接种4株小鼠移植性肿瘤细胞(S180，EAC，B16，HEPA)于腋部皮下，次日分组给药，10日内每天腹腔注射给药一次，计算各组小鼠平均瘤重和抑瘤率。[结果]九节龙皂甙能抑制小鼠肉瘤和小鼠艾氏腹水癌肿瘤细胞的生长，抑瘤率25％～3896；AR1对小鼠黑色素瘤和AR2对小鼠肝癌有一定的抗肿瘤作用。[结论]川产九节龙皂甙能抑制S180、EAC、B16和HEPA小鼠移植性肿瘤的生长，具有抗肿瘤作用。     

川产九节龙皂甙对小鼠免疫功能的影响

目的　观察川产九节龙皂甙对动物免疫功能的影响。方法　采用腹腔注射给药进行碳粒廓清试验、巨噬细胞吞噬试验、E花结形成试验和迟发超敏反应试验。结果　九节龙皂甙明显增强小鼠单核细胞和腹腔巨噬细胞的吞噬能力 ;促进血清溶血素的生成和玫瑰花细胞的形成。结论　九节龙皂甙能增强小鼠的免疫功能。     

川产九节龙皂甙Ⅰ在小鼠体内的抗肿瘤作用

0　引言　川产九节龙皂甙 系从紫金牛科紫金牛属植物川产九节龙 (Ardisia pusilla A.DC)全草中提取得到的三萜皂甙单体 [1 ] .现就其急性毒性、抗肿瘤作用做了初步探讨 .1　材料和方法1.1　材料　九节龙皂甙 由本所植化室提供 ,用生理盐水配成适当浓度的溶液备用 (以下简称皂甙 ) ;氟尿嘧啶 (5 -FU) :天津市氨基酸公司人民制药厂生产 ,批号 970 815 ;动物 :昆明种小鼠 170只 ,BAL B/ c小鼠 30 0只 ,体质量 18～ 2 2 g;S1 80 ,S37系实体肉瘤 ,动物和瘤株均由本校实验动物中心提供 .1.2　方法　用改良寇氏法 [2 ]对皂甙 进行小鼠半数…     

九节龙皂甙对8株人癌细胞的抑制作用

0　引言　川产九节龙 (Ardisea pusilla A. PC)系紫金牛科紫金牛属植物的全草 ,九节龙皂甙 (Ardipusilloside)是从该全草中分离出的 C5 3 H86 O2 2 .2 H2 O,经初步药理试验表明具有提高免疫功能的作用 [1 ] .我们采用 MTT法观察九节龙皂甙对 8株人癌细胞的细胞毒作用 .1　材料和方法1.1　材料　肝癌 (SMMC- 772 1) ,本校西京医院中医科提供 ;肝癌 (HCC- 92 0 4) ,本校病理科提供 ;胃癌 (SGC- 790 1) ,本校西京医院消化内科提供 ;卵巢癌 (HO- 8910 )本校西京医院妇产科提供 ;宫颈癌 (Hela)本校 40 3研究所提供 ;肺癌 (A5 49)、食…     

DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测

目的 运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用. 方法 实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性. 结果 DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果 :随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI 双染法检测结果 :10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果 显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系. 结论 流式细胞术检测结果 表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡.     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。     

流式细胞仪法检测4HPR诱导Hela细胞凋亡的百分率

目的：实验结果表明４ＨＰＲ抑制Ｈｅｌａ细胞生长的机理之一是诱导该细胞凋亡。本文用流式细胞仪检测不同浓度的４ＨＰＲ作用不同时间Ｈｅｌａ细胞凋亡的百分比及细胞周期变化。方法：体外细胞培养及流式细胞仪检测法。结果：２μｇ／ｍ的４ＨＰＲ作用２４、４８、７２ｈ后，Ｈｅｌａ细胞的凋亡百分比分别为４．１％、６．６％、２６％；４μｇ／ｍｌ的４ＨＰＲ分别为５．１％、８．３％、２８％、８ｕｇ／ｍｌ的４ＨＲ分别为５．０     

流式细胞术检测石见穿多糖诱导的肝癌细胞凋亡率

目的 探讨石见穿多糖抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的机制. 方法 利用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测经不同浓度石见穿多糖作用的SMMC-7721肝癌细胞的凋亡率.结果石见穿多糖各浓度组平均细胞凋亡率为(7.87±1.860)%、(13.63±2.87)%、(21.05±2.68)%,显著高于对照组(0.67±0.28)%. 结论 石见穿多糖能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,且凋亡率随着石见穿多糖浓度的增加而增高.     

流式细胞术检测细胞凋亡的分析软件比较

采用PI染色法 ,以流式细胞术通过检测DNA含量分析细胞凋亡 ,比较ModFitLT及CEL LQuest软件的分析数据。结果显示 :ModFitLT与CELLQuest软件均可分析细胞凋亡 ,ModFitLT软件更客观、准确。我们建议使用ModFitLT软件进行细胞凋亡相对定量分析 ,CELLQuest软件只用于细胞凋亡的定性分析。     

早期细胞凋亡的流式细胞术分析

目的：探讨多参数流式细胞术分析肿瘤细胞早期凋亡的方法。方法：采用Annexin V FITC／PI双染法及JC-1染色法标记食管癌EC6细胞，通过多参数流式细胞术分析X射线、顺铂诱导产生的细胞凋亡情况及线粒体膜电位的变化。结果：随着剂量的增加，凋亡细胞的百分率逐渐增加，线粒体膜电位下降，去极化细胞增多，并且有明显的剂量依赖性。结论：多参数流式细胞术具有广阔的应用前景，短时间内能够获得大量统计学意义上可靠的数据，为探讨细胞凋亡机制、寻找治疗靶点提供了有益线索。     

流式细胞术Annexin Ⅴ细胞凋亡检测方法探讨

目的:研究流式细胞术用Annexin Ⅴ/PI双染方法来检测细胞凋亡的合理的实验操作步骤.方法:将Annexin Ⅴ/PI中的抗体先加入到单个细胞样本中,再加入PI,最后加入Buffer工作液,反应30min后再加入Buffer工作液上机.结果:图像清晰,细胞凋亡率明显增加并与临床和科研的结果一致.结论:Buffer工作液必须在样本加入PI之后再加入,以避免出现所测细胞物理特性的改变.     

白藜芦醇对宫颈癌Hela细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨白藜芦醇对宫颈癌Hela细胞生长抑制及诱导凋亡的作用机制。方法:以不同浓度白藜芦醇处理Hela细胞,MTT法测定细胞增殖抑制率;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Bad、Caspase-9的表达。结果:经白藜芦醇处理的Hela细胞,增殖作用呈明显时效和量效关系,细胞凋亡率明显增高并呈浓度依赖性;Bcl-2、Bax、Bad表达下降,Caspase-9表达增加。结论:白藜芦醇对Hela细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制与下调Bcl-2、Bax、Bad蛋白、上调Caspase-9蛋白表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和顺铂对Hela细胞的诱导凋亡作用

目的 观察不同浓度的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和顺铂对Hela细胞的诱导凋亡作用.方法 采用不同浓度的TRAIL作用于Hela细胞24 h,TRAIL 100 ng/mL、顺铂10 μmol/L及两者联合作用于细胞24 h,应用ELISA方法检测细胞凋亡率.结果 不同浓度的TRAIL作用于细胞后,细胞凋...     

Bim对热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡的作用

目的研究Bim在热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用。方法用不同温度(41、42.5、43.5℃)水浴对Hela细胞加热刺激,处理后继续培养24 h。用Hoechst 33258染色细胞核,计数细胞凋亡率;采用Western blot方法检测Bim及Caspase-3蛋白的表达水平;用lipofectamine 2000转染干扰片段后观察干扰效率及对凋亡的保护作用。结果人宫颈癌Hela细胞受到不同温度(41、42.5、43.5℃)刺激后,分别引起约(16.81±0.23)%、(29.52±0.56)%和(31.22±0.67)%细胞凋亡。Bim mRNA及蛋白质呈温度依赖地表达上调。小分子干扰Bim的表达后,细胞凋亡率从(30.51±0.54)%下降到si-Bim-1(12.52±0.67)%、si-Bim-2(15.23±0.43)%。结论 Bim介导了热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡,可能在热疗治疗宫颈癌中发挥重要作用。     

松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

目的 研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制.方法 采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分.MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响.流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况.应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化.用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3,8,9的活性.结果 MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用.呈显著的时间和浓度依赖性.流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡,细胞表现出典型的凋亡特征,并且可见凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性.松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase-3被激活.Caspase-8,9活性增高,又有时间依赖性,且有时间顺序.结论 松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用,其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡.在诱导细胞凋亡的过程中,caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路.同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活,从而诱导凋亡的发生.     

流式细胞术分析顺铂对人卵巢癌细胞系HO─8910细胞凋亡的诱导作用

流式细胞术分析顺铂对人卵巢癌细胞系ＨＯ┐８９１０细胞凋亡的诱导作用马向东陈必良叶永清郑维国王德堂（第四军医大学西京医院妇产科西安７１００３３）关键词细胞凋亡卵巢肿瘤流式细胞术顺铂中图号Ｒ７３７．３１细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种生理性细胞程序化...     

蛇床子素诱导Hela细胞凋亡及其机制研究

目的：探讨蛇床子素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制。方法：采用MTT法检测各浓度蛇床子素对Hela细胞增殖的抑制作用;光学显微镜观察细胞的形态学变化;凝胶电泳分析DNA的片段化改变;采用RT-PCR检测Hela细胞fas和bcl-2基因mRNA的表达水平。采用10μg/mL的蛇床子素作用于Hela细胞24h后的培养上清称为ost-La;洗去蛇床子素,用新鲜培养液进行24h再培养的Hela细胞培养上清称为ost-Lb;不经蛇床子素处理的Hela细胞同步培养上清作为对照,称为control-L;定量Elisa法测定各上清中TGF-β1含量。结果：蛇床子素可显著抑制Hela细胞的体外增殖,诱导Hela细胞的凋亡,且均呈剂量依赖性。RT-PCR：凋亡相关基因fas的表达量升高,而bcl-2的表达量下降,表达量的变化与蛇床子素的浓度有关。Elisa：TGF-β1的含量在ost-La中为16.732±3.068 ng/mL（P〈0.01）;在ost-Lb中为2.031±0.112 ng/mL（P〈0.01）;在control-L中为385.282±42.613 ng/mL。结论：子素可诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能与促进Fas基因表达,抑制Bcl-2基因表达和TGF-β1含量改变有关。     

迷迭香精油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究

【目的】研究迷迭香精油对体外培养Hela细胞生长的抑制作用。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取迷迭香精油,气相色谱-质谱联用仪分析成份。以不同浓度的迷迭香精油作用于体外培养的Hela细胞,MTT法测定迷迭香精油抗肿瘤活性,透射电镜观察药物对细胞形态学的影响。流式细胞仪检测细胞凋亡率。【结果】MTT法证明迷迭香精油可显著抑制Hela细胞生长,抑制率与药物浓度正相关,呈现明显的量-效和时-效关系,细胞经药物作用48h后的IC50为0.0736mg/L,电镜下可观察到核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。流式细胞仪可以检测到细胞凋亡。【结论】迷迭香精油可抑制Hela细胞的生长,诱导Hela细胞凋亡。