脂质过氧化在肺炎衣原体促进巨噬细胞泡沫化过程中的作用

目的：探讨肺炎衣原体促进Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化的机制。方法：取Ｃ５７ ＢＬ／６Ｊ小鼠腹膜巨噬细胞培养２４ｈ让其贴壁后分为对照组,ＬＤＬ组和ＬＤＬ加Ｃｐｎ组３组培养,然后测反应液中自由基、ＭＤＡ及ＳＯＤ含量。结果：反应液中自由基、ＭＤＡ、ＳＯＤ含量ＬＤＬ加Ｃｐｎ组比ＬＤＬ组高,存在显著性差异。结论：脂质过氧化是肺炎衣原体促进巨噬细胞泡沫化的机制之一。     

螺旋藻多糖对小鼠巨噬细胞及K细胞ADCC活性的影响

Ｃ（５７）ＢＬ／６Ｊ小鼠腹腔注射ＰＳＰ１００ｍｇ·ｋｇ（－１），连续１２ｄ，可明显促进小鼠Ｋ细胞ＡＤＣＣ活性，ＰＳＰ组Ｋ细胞毒指数（ＣＩ）比对照组升高５４．７％。在５ｍｇ／Ｌ～３２０ｍｇ／Ｌ浓度范围内，ＰＳＰ可促进体外培养的Ｃ（５７）ＢＬ／６Ｊ小鼠腹腔巨噬细胞ＡＤＣＣ活性，最适浓度为８０ｍｇ／Ｌ其ＣＩ值为对照孔的５．１４倍。     

不同品系小鼠对实验感染念珠状链杆菌敏感性的观察

本文通过念珠状链杆菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｕｓｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ，Ｓ．ｍ．）实验感染昆明、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、ＢＡＬＢ／ｃ、ＩＣＲ、ＮＩＨ、ＤＢＡ共６个品系小鼠，观察其对Ｓ．ｍ．敏感性的差异。其中昆明、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ两个品系在腹腔接种后表现出明显的临床、病理改变。昆明小鼠发病率和死亡率分别为９２％和８０％；Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ分别是８０％和１２％。昆明小鼠较之Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠起病急、病情严重，多数动物死于感染的急性期。其余品系的发病率为：ＮＩＨ８％、ＢＡＬＢ／ｃ和ＤＢＡ４％，没有动物死亡；ＩＣＲ在接种后无任何临床病理改变。在实验感染后临床病理改变方面，昆明小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠间有较大不同。昆明小鼠以末梢血管淤血、四肢尾部水肿、关节炎、截瘫、腹泻为主，而Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠则以注射部位和其它部位皮下脓肿、化脓性关节炎为主。本研究提示，中国昆明小鼠对Ｓ．ｍ．敏感性最高，可以将其作为“哨兵动物”用于实验大鼠Ｓ．ｍ．的常规监测；不同品系小鼠不仅对实验感染Ｓ．ｍ．的敏感性不同，而且表现出不同的临床病理改变。     

异基因骨髓移植存活小鼠发生"特异性"免疫耐受的研究

目的通过对异基因骨髓移植（ＡＬＬＯ－ＢＭＴ）存活小鼠及其皮片移植的观察,以判断ＡＬＬＯ－ＢＭＴ小鼠是否建立了特异性的兔疫耐受机制。方法（１）给Ａ组受者ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠注射生理盐水,给Ｂ组受者ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠移植供者Ｃ５７ＢＬ／６ｊ（Ｈ－２ｂ）小鼠的骨髓细胞;（２）将供者Ｃ５７ＢＬ／６ｊ（Ｈ－２ｂ）和ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ－２ｄ）小鼠的尾部皮片原位移植给ＡＬＬＯ—ＢＭＴ后存活６０ ｄ以上的受者ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠和未经任何处理的ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠,观察１００ ｄ。结果（１）Ａ组受者ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠平均存活时间（１０．６土１．３）ｄ显著短于Ｂ组的受者ＣＢ６Ｆ１（Ｈ－２ｂｄ）小鼠平均存活时间（３６．９±１０．８）ｄ（ｐ＜０．０１）。（２）ＩＩ组中进行ＡＬＬＯ－ＢＭＴ后存活６０ ｄ以上的受者ＣＢ６Ｆ１只接受来自Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠的皮片而排斥来自ＢＡＬＢ／ｃ／小鼠的皮片,而Ｉ组中未经任何处理的 ＣＢ６Ｆ１小鼠排斥来自 Ｃ５７ＢＬ／６ｊ和 ＢＡＬＢ／Ｃ ／ｃ小鼠的皮片。结论经 γ射线照射并移植有Ｃ５７ＢＬ／６ｊ 小鼠异基因骨髓且能长期存活的ＣＢ６Ｆ１小鼠建立了较完全的供者型免疫耐     

两种中药多糖对巨噬细胞超微结构影响的分析

目的：分析枸杞多糖（ＬＢＰＳ）和红毛五加多糖（ＡＧＰＳ）对小鼠腹腔巨噬细胞超微结构影响。方法：ＬＢＰＳ、ＡＧＰＳ分别腹腔注射于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠体内,１２０ｈ后取出腹腔液,分离巨噬细胞。常规扫描电镜（ＳＥＭ）、透射电镜（ＴＥＭ）标本制作,置ＪＳＭ－３５Ｇ扫描电镜和Ｈ－６００透射电镜下观察。结果：ＬＢＰＳ、ＡＧＰＳ组巨噬细胞表面微绒毛数目增多、增长、增粗,胞质内糖原颗粒增多,线粒体增大;出现大量初、次     

近交系NJS小鼠有关遗传性状的研究

为了解作者培育的近交系ＮＪＳ小鼠的生化、免疫、形态等遗传学性状，对该小鼠的生化标志基因、免疫标志基因、毛色基因进行测试，并作下颌骨形态分析。结果表明：ＮＪＳ小鼠是一株新培育的近交品系，具有独特的遗传特性。所检的分布在１２条染色体上的２６个生化标志基因未见与其它近交系小鼠完全相同。Ｈ－２位点基因为Ｈ－２Ｋｄ、Ｈ－２Ｄｋ。毛色基因型为ＡＡＢＢｃｃＤＤ。下颌骨形态判别函数ＤＦ１、ＤＦ２、ＤＦ３、ＤＦ４值分别为４．５１、－６．３１、０．１６、－０．８５。与近交系ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６、６１５、ＳＭＭＣ／ｃ的遗传距离分别为８３．１９、６２．８７、４１．３４、２２．４４。     

10个近交系小鼠的微卫星位点分析及其在遗传监测中应用的探讨（一）

选用不同染色体上的８个微卫星位点，应用ＰＣＲ技术对１０个品系的近交系小鼠进行遗传分析，研究结果表明：在无任何亲缘关系的近交系小鼠品系之间，该８个微卫星位点均具有不同的等位基因。含有不同等位基目的微卫星位点所占的百分比从ＭＳＭ／ＭＳ与Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ的１００％到（ＣｘＳ）Ｆ与Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ间的２５％，平均５６．７２％，在重组近交系间及重组近交系与亲本之间，此比率从（ＣｘＳ）Ｄ或（ＣｘＳ）Ｍ与ＢＡＬＢ／ＣＨｅＡ间的５０％到（ＣｘＳ）Ｄ或（ＣｘＳ）Ｍ与ＳＴＳ／Ａ，（ＣｘＳ）Ｄ与（ＣｘＳ）Ｍ间的２５％，此８个微卫星位点有可能做为在基因水平上进行近交系小鼠遗传监测的标记。     

NO在外源性自由基损伤内皮细胞中的作用

目的：探讨ＮＯ在外源性自由基损伤内皮细胞（ＥＣ）中的作用。方法：培养的家兔主动脉ＥＣ随机分为四组：１．对照组（Ｃ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ;２．自由基损伤组（Ｘ／ＸＯ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ中加入终浓度为１μｍｏｌ／ｍｌＸ,０．１ＩＵ／ｍｌ的ＸＯ;３．Ｌ－Ａｒｇ组：含终浓度为１０＾－３Ｍ的Ｌ－Ａｒｇ,余同２;４．ＳＮＰ组：含终浓度为１０＾－５Ｍ的ＳＮＰ,余同２。在观察Ｌ－ＮＡＭＥ对自由基损伤的作用时     

抗沙眼衣原体主要外膜蛋白种特异性单克隆抗体

用人工合成沙眼衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）氨基端１／４肽链免疫８周龄雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠３只，第１４天用Ｌ１／４４０／Ｂｕ原体加强免疫，第２４天将免疫反应良好的１只小鼠脾细胞与ＮＳ－１瘤细胞融合。用１／４ＭＯＭＰ和Ｌ１原体抗原包被的聚丙乙烯板检测上清中抗体，淘汰与鹦鹉热衣原体种（ＥＡＥ株）、肺炎衣原体种（ＡＴＣＣＶＲ１３１０株）以及正常组织培养细胞（ＢＧＭＫ）有交叉反应的克隆，最后得到４株抗沙眼衣原体特异性单克隆抗体（ＭＡｂｓ），其抗体属ＩｓＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类。微量免疫荧光试验（ｍｉｃｒｏ－ＩＦ）发现４株ＭＡｂｓ均与本实验室制备的沙眼衣原体Ｌ１、Ｌ２、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ原体及Ｌ２包涵体抗原发生反应，并与沙眼衣原体所有１５个标准血清型结合，其腹水ＭＡｂｓ滴度≥１：１２８００。免疫印迹试验显示４株ＭＡｂｓ均与沙眼衣原体分子量为４００００的ＭＯＭＰ反应。     

抗肺炎衣原体种特异性单抗制备及初步鉴定

以纯化的肺炎衣原体ＡＴＣＣＶＲ１３１０原体兔疫８周龄雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，并于第１４天加强免疫，第２４天将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞ＮＳ－１融合。杂交瘤细胞进行细胞与克隆的直接选择，在淘汰与沙眼衣原体Ｌ１、Ｌ２、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ鹦鹉热衣原体ＥＡＥ以及未感染的ＢＧＭＫ细胞有交叉反应的克隆后，最终获得２株分泌抗肺炎衣原体种特异性单克隆抗体（ＭＡｂ９）杂交瘤（Ｐ１７Ｃ２和Ｐ３３Ｃ），其免疫球蛋白类型均为ＩｇＧ２ａ。Ｗｅｓｔｅｍ印迹发现两株ＭＡｂｓ均与三个种的衣原体主要外膜蛋白反应，但ｍｉｃｒｏ－ＩＦ显示它们系肺炎衣原体种特异性单抗其腹水ＭＡｂｓ滴度＞１：２５６００。     

冠心病外周血单核细胞肺炎衣原体病原体检测的意义

目的:探讨冠心病患者外周血单核细胞(PBMC)中肺炎衣原体(Cpn)病原体检测的方法及临床意义。方法:选择150例冠心病(冠心病组)及55例非冠心病(对照组)患者,使用低渗溶血法制备PBMC,直接免疫荧光(DIF)检测Cpn包涵体,巢式PCR(nPCR)法测定外周血单核细胞中肺炎衣原体DNA。结果:150例冠心病患者Cpn包涵体阳性20例,阳性率13.3%,55例对照组中仅1例阳性,阳性率为1.8%,CpnDNA两组间阳性率分别32.7%(49/150)及1.8%(1/55),冠心病组与对照组比较包涵体及DNA检测的阳性率明显增高,(相对危险度分别为26.2、8.3,95%的可信区间分别为3·52~194·98,1·09~63·46)。结论:Cpn病原体阳性反映患者体内存在Cpn感染状态,包涵体与DNA检测两者间具有一致的阳性检出,但包涵体检测更省时省力。     

克拉霉素对C57BL/6J小鼠动脉粥样硬化及炎症反应的影响

目的观察肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae,Cpn）与动脉粥样硬化的关系以及克拉霉素的抗炎作用。方法 60只健康雄性C57BL/6J小鼠根据喂养的饲料及是否感染Cpn分为4组：对照组（n=6）、高脂组（n=6）、感染组（n=24）和感染＋高脂组（n=24）。Cpn感染组于试验开始每隔2周1次,共6次,分别经鼻内接种0.05ml Cpn（6.6×106IFU/ml）。对照组及高脂组以同样方法接种链球菌蛋白G（SPG）缓冲液。感染Cpn后（感染组、感染＋高脂组）依据有或无克拉霉素的治疗及治疗的时间进一步分为未治疗、早期及延迟治疗亚组。全自动生化分析仪检测小鼠的血脂,免疫荧光法检测Cpn IgG抗体。12周后处死小鼠,放免法测定IL-6、IL-8的水平,并取升主动脉大血管检测主动脉动脉粥样硬化的情况。结果高脂组的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显高于对照组（P均〈0.01）。各组与对照组比较IL-6、IL-8的水平明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;未治疗组高于早期及延迟治疗组（P〈0.01）,且延迟治疗组高于早期治疗组（P〈0.01）。与延迟治疗组比较,克拉霉素早期治疗组可以延缓动脉粥样硬化的发生。结论 Cpn协同高脂血症与动脉粥样硬化的形成密切相关。克拉霉素治疗能够减轻Cpn感染所致动脉粥样硬化的炎症反应。     

葡萄籽提取物抗动脉粥样硬化形成的实验研究

目的：探讨葡萄籽提取物对C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法：将48只C57BL／6J小鼠，随机分为正常对照组（饲普通饲料）、高胆模型组（饲高脂饲料：含2％胆固醇、0．4％胆酸盐、10％猪油）、葡萄籽提取物低，高剂量组（在饲高脂饲料的同时，分别添加葡萄籽提取物0.2,0.6mg/g体重）。实验至第21周末，眼球放血处死小鼠，检测血清甘油三酯（TG）、胆固醇（Chol)、氧化型低密度脂蛋白（OX－LDL）和红细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时取主动脉作病理形态学观察。结果：与高脂模型组比较，葡萄籽提取物组小鼠血清TG、Chol、OX－LDL、MDA含量明显降低，而红细胞SOD活性明显提高（P＜0．01）。同时葡萄籽提取物组小鼠主动脉壁厚度和泡沫细胞数量明显较高脂模型组减轻，小鼠主动脉损伤评分差异显著P＜0．01。结论：葡萄籽提取物具有减缓C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的作用，其作用可能与降低TG、Chol、OX－LDL水平，抗脂质过氧化作用有关。     

枸杞籽油对2型糖尿病C57BL/6J小鼠血清SOD、MDA及GSH的影响

目的研究枸杞籽油对2型糖尿病C57BL/6小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及还原型谷胱甘肽（GSH）的影响。方法将实验动物随机分为正常对照组、糖尿病模型组、枸杞籽油0.025、0.05、0.1 mL/10g剂量干预组5组,除正常对照组外,其余以高脂饲料饲喂4周后的雌雄各半C57BL/6小鼠腹腔注射链尿左菌素（STZ,125mg.kg-1）,诱导2型糖尿病模型。检测各组血糖水平及血清SOD、MDA及GSH的变化。结果枸杞籽油各组与糖尿病模型组相比较,SOD都有所升高（P〈0.05）;枸杞籽油中剂量干预组GSH明显升高（P〈0.05）;MDA明显下降（P〈0.05）。结论枸杞籽油能改善2型糖尿病C57BL/6小鼠的抗氧化能力并有助于降低其血糖水平。     

沙棘原花青素对糖尿病小鼠心肌保护作用机制的研究

目的:初步探讨沙棘原花青素(Sea buckthom procyanidins,SBPC)对糖尿病小鼠心肌组织氧自由基的影响。方法:6月龄ICR小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)150mg/kg制备糖尿病小鼠模型,小鼠随机分为糖尿病心肌病变组(DC)、SBPC高、中、低剂量组和二甲双胍阳性药物对照组(Metformin,MET),每组20只。以正常小鼠为对照,每周测体重和血糖一次,4周后形成早期糖尿病心肌病变,持续4周给药,第5周应用分光光度计法测定各组小鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总一氧化氮合酶(NOS)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与糖尿病心肌病变组比较,SBPC高、中、低剂量组MDA含量、NOS活性明显降低,GHS-Px和SOD活性明显增强。结论:SBPC对6月龄糖尿病心肌病变小鼠心肌组织氧化损伤有减轻作用。     

肺癌与慢性阻塞性肺疾病患者肺炎衣原体感染状况分析

目的探讨肺癌和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中肺炎衣原体(Cpn)的感染状况.方法应用固相酶联免疫吸附法,对确诊的128例肺癌和126例COPD急性加重期患者进行血清肺炎衣原体抗体IgM,IgG检测,以70例健康人为正常对照组(简称对照组).结果COPD组肺炎衣原体IgM抗体阳性率(36.5%,46/126)及IgM和/或IgG阳性率(32.8%,42/126),均较肺癌组(分别为21.8%,28/128和23.1%,30/128)及对照组(分别为1.4%,1/70和2.8%,2/70)明显升高(P＜0.005),肺癌组IgM阳性率较对照组明显升高(P＜0.005)IgM和/或IgG阳性人数为74例,总感染率为22.8%(74/324).结论肺癌和COPD患者都是Cpn易感染人群,其Cpn感染主要表现为急性感染.Cpn可能是COPD急性加重和肺癌合并肺部感染的主要病原.     

Experimental Study on Therapeutic Effect of Combined Administration of Radix Salviae Miltiorrhizae, Ligustrazine and Radix Sanchi on Late Hemorrhagic Shock of Rabbits

Duringhemorrhagicshock,allthetissuesofthewholebodywereundertheischernicstate.Whenthebloodandoxygensupplyoftissuesarerestored,alargeamountoffreeradicalswouldbeproducedandcausedamageonorganismbylipidperoxidation(').RadixSalviaeMiltiorrhizae(RSM),ligustrazine(I-TZ)andRadixSanchi(RSC),etc.haveananti--shockeffectbyscavengingfreeoxygefl.adicals(25).Inordertoobservethetherapeuticeffectofcombinedadministrationofabove-mentioneddrugsintreatinghemorrhagicshock,thefollowingexperimentsweredonebytheaut…     

自由基清除剂联合亚低温对急性脑缺血大鼠氧自由基的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉联合亚低温对急性脑缺血大鼠氧自由基的影响。方法取40只Wistar大鼠,随机分为假手术组、脑缺血模型对照组、依达拉奉组、依达拉奉联合亚低温组,每组10只,依达拉奉组大鼠在脑缺血模型成功后,给予依达拉奉腹腔注射,依达拉奉联合亚低温组在依达拉奉腹腔注射后,给予亚低温,检测各组大鼠SOD、MDA含量变化。结果依达拉奉联合亚低温组SOD水平显著高于依达拉奉组,MDA水平均显著低于依达拉奉组(P<0.001)。结论依达拉奉可以有效改善脑缺血大鼠的SOD、MDA水平,依达拉奉联合亚低温治疗效果优于依达拉奉的单独应用。     

慢病毒载体表达外源PON1对小鼠巨噬细胞的影响

目的:为探讨对氧磷酯酶1(PON1)在机体代谢性疾病中的作用及机制,本实验构建含人源性PON1基因的慢病毒表达载体,研究其表达分泌PON1的能力及对小鼠巨噬细胞的影响。方法:根据人肝cDNA文库的PON1序列设计特定引物,定点诱变PCR获得两端为PmeⅠ内切酶位点的目的基因,经酶切连接到pWPI-GFP载体上,筛选及DNA测序鉴定。磷酸钙法瞬时转染293T细胞,荧光显微镜观察GFP表达反映转染效率,Western Blotting检测细胞培养基中PON1分泌表达量,采用对氧磷为底物检测PON1活性。含PON1的培养基与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育,ELISA法检测氧化条件下细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果:构建的pWPI-PON1慢病毒表达载体序列正确,高效转染293T细胞(转染效率可达到80%-90%)可有效分泌表达PON1至培养基,显著提高培养基PON1活性,与对照组相比,培养基中PON1可明显抑制巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-6的分泌(P<0.01)。结论:pWPI-PON1慢病毒载体高效表达分泌的外源PON1能有效降低巨噬细胞的炎症反应。     

异丙酚与安氟醚或七氟醚静吸复合麻醉对氧自由基的影响

目的:观察异丙酚与安氟醚、七氟醚静吸复合麻醉对氧自由基的影响.方法:32例择期手术的全麻病人,随机分为4组(每组8例),分别给予安氟醚麻醉(A组)、七氟醚麻醉(B组)、异丙酚-安氟醚麻醉(C组)、异丙酚-七氟醚麻醉(D组).其中A、B组为对照组,C、D组为观察组.分别于麻醉前及麻醉诱导后15min、1h和2h采集静脉血测红细胞超氧化物岐化酶(SOD)、血清丙二醛(MDA).结果:麻醉后,A、B两组SOD值均逐渐下降,MDA值均逐渐升高,麻醉诱导后2hSOD、MDA值较麻醉前差异均有显著性(P<0.05),但A、B两组相比较,SOD、MDA值差异均无显著性(P>0.05);C、D两组SOD值较麻醉前均有下降趋势,但差异均无显著性(P>0.05),MDA值较麻醉前均逐渐下降,并于麻醉诱导后2 h差异均有显著性(P<0.05),但C、D两组相比较SOD、MDA值差异均无显著性(P>0.05).A与C组之间相比较及B与D组之间相比较,SOD值在麻醉诱导后2h差异均有显著性(P<0.05);MDA值在麻醉诱导后1 h及2 h差异均有显著性(P<0.05、P<0.01).结论:安氟醚和七氟醚均能产生自由基使MAD升高、SOD下降;临床麻醉剂量的异丙酚能有效地清除自由基、降低MDA.