红景天对低氧条件下内皮细胞HIF-1α、HIF-1β和VEGF表达的影响

目的:观察红景天对低氧条件下人脐静脉内皮细胞表达低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、低氧诱导因子-1β(HIF-1β)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:采用XTT比色法检测红景天不同干预时间、浓度对细胞增殖的影响,以确定最佳干预条件;采用SYBRGreenI荧光染料实时定量PCR法检测mRNA表达水平;WesternBlot法检测蛋白表达水平。细胞分3组:正常氧对照组,低氧对照组,红景天干预组。结果:红景天干预的最佳条件为24h、10μg/mL。与正常氧相比,低氧条件下内皮细胞HIF-1α、HIF-1β和VEGF蛋白表达均升高(P<0.01);红景天促进了低氧条件下内皮细胞HIF-1α和VEGF的基因和蛋白表达(P<0.01),而对HIF-1β的基因和蛋白表达没有影响。结论:红景天促进低氧条件下内皮细胞HIF-1α及VEGF的表达可能是红景天抗缺氧和促血管新生作用的机制之一。     

HIF-1α、VEGF表达对甲状腺乳头状癌预后的影响

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达对预后的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测50例PTC组织标本中HIF-1α、VEGF蛋白的表达,结合临床病理特征和随访资料进行分析。结果 HIF-1α主要表达于细胞核和细胞质,VEGF主要表达于细胞质,阳性表达率分别为76%和78%,两者存在显著正相关性。HIF-1α表达与临床分期和预后有关,与病理类型、病变长度无明显关系。HIF-1α,VEGF表达阳性组术后复发转移率均高于HIF-1α、VEGF阴性组。HIF-1α蛋白表达阳性和阴性组1,3,5 a生存率分别为77%,65%,50%和96%,75%,62%,Log-Rank检验2组生存曲线非常显著性差异(P<0.01)。结论 PTC中存在HIF-1α、VEGF蛋白高表达,HIF-1α蛋白高表达与PTC术后复发转移密切相关,是PTC患者预后不良的标志。     

比较红景天水提剂与红景天苷对细胞表达HIF-1α和VEGF的不同影响

目的:比较大花红景天(Radix et Rhizoma Rhodiolae crenulatae)水提剂与红景天苷(Salidroside)对低氧条件下ECV304细胞表达HIF-1α和VEGF的不同影响。方法:细胞分4组:正常氧对照组,低氧对照组,红景天水提剂组,红景天苷组。采用TaqMan探针实时定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测mRNA表达水平;Western Blot法检测蛋白表达水平。结果:与正常氧对照相比,低氧促进ECV304细胞HIF-1α和VEGF基因和蛋白表达(P<0.05);同在低氧条件下,红景天水提剂显著促进了ECV304细胞HIF-1α和VEGF的基因和蛋白表达(P<0.01),而红景天苷的促进作用较弱,没有提高低氧时HIF-1α和VEGF的蛋白水平。结论:红景天促进HIF-1α、VEGF表达时,红景天苷不是主要有效成分。     

藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜PKC-β、VEGF、HIF-1α表达的影响

目的：探讨藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜蛋白激酶C（PKC-β）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和低氧诱导因子（HIF-1ɑ）的影响。方法：SD 大鼠采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔内注射的方法造模,随机分为模型组、小檗皮低剂量、中剂量和高剂量组、二甲双胍组、羟苯磺酸钙组、小檗碱组和对照组。成模后开始灌胃给药,小檗皮低剂量组、中剂量组、高剂量组分别按成人剂量的5、10、20 倍给药,二甲双胍组和小檗碱组按成人剂量的10 倍给药,模型组和对照组予灌服蒸馏水。所有实验大鼠于灌胃6 周后处死。采用实时荧光定量PCR 和Western Blot 检测视网膜PKC-β、VEGF 和HIF-1ɑ表达,采用免疫组织化学法检测视网膜HIF-1ɑ蛋白表达。结果：与正常组比较,糖尿病大鼠视网膜中PKC-β、VEGF、HIF-1ɑ mRNA 和蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,小檗皮高、中剂量组视网膜PKC-β、VEGF 和HIF-1ɑ mRNA 表达显著降低（P<0.01）,PKC-β、VEGF 和HIF-1琢蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,小檗皮低剂量组大鼠PKC、VEGF 和HIF-1ɑ表达明显降低（P<0.05）。结论：小檗皮对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用,其作用机制可能与整体多点调控糖尿病大鼠视网膜的PKC-β、VEGF、HIF-1ɑ表达有关。     

高压氧干预对大鼠脊髓继发性损伤中HIF-1α及VEGF表达的影响

目的观察大鼠脊髓损伤及高压氧干预后不同时期受损脊髓组织内血管内皮生长因子(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨高压氧干预对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护机制。方法将成年SD大鼠80只采用改良Allen’s方法制作脊髓损伤模型,然后将大鼠随机分为2组,损伤组不给予干预措施,干预组辅助以高压氧干预。2组分别于损伤后1,3,7,14 d随机抽取6只大鼠,采用BBB方法评价大鼠后肢运动功能,手术取出受损节段脊髓组织,采用荧光定量PCR法及Western-Blot法检测HIF-1α及VEGF的表达情况。结果 2组大鼠损伤后均表现为双下肢全瘫,BBB评分0~1分;干预组损伤后7,14d BBB评分明显高于损伤组(P均0.05),损伤后3,7,14 d HIF-1αmRNA和蛋白的表达均明显低于损伤组(P均0.05),术后7,14 d VEGF mRNA和蛋白的表达均显著高于损伤组(P均0.05)。结论高压氧干预能够抑制HIF-1α的表达,且不依赖HIF-1α的作用实现VEGF的高表达,延长VEGF高表达的时间,从而发挥神经保护作用。     

大鼠酒精性肝病形成中肝脏HIF-1α VEGF mRNA表达的变化

目的：观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其下游分子VEGF基因在酒精性肝病大鼠肝组织中的表达,分析它们与酒精性肝病发生发展的关系。方法：以白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃14周建立酒精性肝病动物模型,常规HE和Masson染色动态观察4、8、14周时肝组织脂肪变程度和炎症程度的变化;XOD法检测血清SOD活性,TBA法检测血清MDA含量;ELISA法检测肝组织中TNF-α含量;RT-PCR技术动态检测肝组织HIF-1α及其下游分子VEGF mRNA的表达。结果：随着饮酒时间的延长大鼠血清MDA含量和肝组织TNF-α水平、HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达逐渐增加,血清SOD活性逐渐降低,同时肝组织脂肪变程度和炎症程度逐渐加重;在造模4周,血清MDA和SOD水平、肝组织TNF-α含量、HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达与正常组差异无显著性（P〉0.05）;在造模8周MDA和TNF-α含量较正常组明显增高、SOD活性较正常组明显降低（P〈0.01、P〈0.05）,HIF-α、VEGF mRNA表达较正常组有增高趋势,但差异无显著性;至造模14周时MDA和TNF-α含量、HIF-1α和VEGF mRNA表达均较正常组及模型4周组显著增高（P〈0.01、P〈0.05）,SOD活性则明显降低;相关性分析显示,HIF-1αmRNA表达水平与肝组织脂肪变程度、炎症程度、VEGFmRNA表达、TNF-α含量及血清MDA水平均呈明显的正相关,而与血清SOD活性呈明显的负相关（P〈0.01、P〈0.05）。结论：HIF-1α及其下游因子VEGF参与酒精性肝病的发生发展。     

藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜PKC-β、VEGF、HIF-1α表达的影响

目的：探讨藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜蛋白激酶C（PKC-β）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和低氧诱导因子（HIF-1α）的影响。方法：SD大鼠采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔内注射的方法造模,随机分为模型组、小檗皮低剂量、中剂量和高剂量组、二甲双胍组、羟苯磺酸钙组、小檗碱组和对照组。成模后开始灌胃给药,小檗皮低剂量组、中剂量组、高剂量组分别按成人剂量的5、10、20倍给药,二甲双胍组和小檗碱组按成人剂量的10倍给药,模型组和对照组予灌服蒸馏水。所有实验大鼠于灌胃6周后处死。采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α表达,采用免疫组织化学法检测视网膜HIF-1α蛋白表达。结果：与正常组比较,糖尿病大鼠视网膜中PKC-β、VEGF、HIF-1αmRNA和蛋白表达显著升高（P〈0.01）;与模型组比较,小檗皮高、中剂量组视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α mRNA表达显著降低（P〈0.01）,PKC-β、VEGF和HIF-1α蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,小檗皮低剂量组大鼠PKC、VEGF和HIF-1α表达明显降低（P〈0.05）。结论：小檗皮对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用,其作用机制可能与整体多点调控糖尿病大鼠视网膜的PKC-β、VEGF、HIF-1α表达有关。     

祖师麻对巨噬细胞分泌VEGF和表达HIF-1a的影响

目的:观察祖师麻注射液对巨噬细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响并探讨其机制。方法:将巨噬细胞RAW264.7与脂多糖及不同浓度的祖师麻注射液共同培养,MTT法检测细胞的增殖,ELISA检测细胞培养液中VEGF的含量,Wstern blot检测缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达。结果:随着祖师麻浓度从218.7mg/ml下降至0.3mg/ml,其对RAW264.7细胞增殖的抑制率也从34.04%下降至2.28%;经218.7mg/ml、72.9mg/ml、24.3mg/ml祖师麻处理后,RAW264.7细胞分泌的VEGF从1895±155pg/ml分别减少至1029±175pg/ml、1575±186pg/ml、1550±217pg/ml,同时细胞内HIF-1a的表达也明显降低。结论:祖师麻注射液可抑制巨噬细胞RAW264.7分泌VEGF,其机理与抑制HIF-1a的表达密切相关。     

秦艽—威灵仙配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清学指标及HIF-1α、VEGF表达的影响

目的 观察秦艽威灵仙配伍对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)模型大鼠血清学指标及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达的影响。方法 将48只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、阳性药组(甲氨蝶呤组)、单味秦艽组、单味威灵仙组及秦威配伍组(秦艽配伍威灵仙)6组。除空白组外,其余5组构建RA模型,建模后各给药组给予不同的药液灌胃、空白组和模型组给予相应体积生理盐水。实验过程中观察记录大鼠的一般状态和足跖肿胀度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中类风湿因子(Rheumatoid factor, RF)、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-cyclic peptide containing citrulline antibody, Anti-CCP-Ab)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE₂...     

川芎嗪对大鼠腹腔巨噬细胞表达VEGF和HIF-1α的影响

目的：探讨川芎嗪对脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）和表达缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。 方法: 原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,给予脂多糖（LPS）刺激并加入不同浓度的川芎嗪共同培养。ELISA方法检测细胞培养液中VEGF的含量,MTT法观察巨噬细胞增殖情况。western blot检测巨噬细胞HIF-1α的表达。结果: 480,48 μmol·L^-1川芎嗪可抑制LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌VEGF,并抑制巨噬细胞表达HIF-1α,但对巨噬细胞增殖没有影响。 结论: 川芎嗪可抑制大鼠腹腔巨噬细胞分泌血管内皮生长因子,其机制与抑制巨噬细胞表达HIF-1α密切相关。这种作用不依赖于抑制巨噬细胞的增殖。     

透骨血竭散外敷对类风湿性关节炎大鼠滑膜VEGF、ApoA-1表达水平的影响

目的:探讨透骨血竭散外敷对大鼠类风湿性关节炎(RA)的治疗作用及机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠40只随机分成正常组、模型组、阳性对照组、透骨血竭散组,每组各10只。除正常组外,其余各组大鼠均予Ⅱ型胶原诱导性关节炎造模法建立RA模型。确定造模成功后第2天开始进行药物干预,阳性对照组予扶他林软膏外敷,透骨血竭散组予自制透骨血竭散外敷,连续14d,正常组、模型组不予处理。观察各组大鼠关节红肿情况;腹主动脉取血,采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达;滑膜免疫组化分析重组人血管内皮生长因子(VEGF)、血清载脂蛋白-1(ApoA-1)的阳性表达。结果:各造模组大鼠每周模型关节炎指数(AI)评分均≥6分,均有明显的RA临床症状和病理学改变;模型组IL-1β、TNF-α的表达量均高于正常组,差异有统计学意义(P <0. 05)。与模型组比较,阳性对照组、透骨血竭散组大鼠IL-1β、TNF-α表达量降低,透骨血竭散组低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05);各组大鼠滑膜APOA-1 mRNA表达量差异无统计学意义(...     

川芎嗪调控血管内皮生长因子与抗大鼠佐剂性关节炎的相关性研究

目的:探讨川芎嗪是否可通过调节血管内皮生长因子(VEGF)表达而影响大鼠实验性关节炎的发展.方法:建立大鼠佐剂性关节炎(AIA)模型,灌胃给药川芎嗪,检测大鼠足垫厚度的变化,免疫组化SP法染色CD34检测滑膜微血管密度(MVD),放射免疫法分析大鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,westem blot分析滑膜组织VEGF的表达.结果:与模型组相比较,100 mg·kg~(-1)川芎嗪组大鼠足垫厚度显著减小,血清中TNF-α的含量和滑膜组织VEGF的表达均明显降低.结论:川芎嗪抑制大鼠佐剂性关节炎的发展与抑制病变关节滑膜VEGF的表达密切相关.     

血管内皮生长因子在胎儿生长受限中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与胎儿生长受限(FGR)发病的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测30例FGR孕妇(FGR组)和30例正常孕妇(对照组)肘静脉血清、羊水和脐静脉血清中VEGF的表达。结果 FGR组肘静脉血清、羊水和脐静脉血清中VEGF的表达与对照组相比均明显降低,均有显著性差异(P均<0.01)。结论 VEGF水平显著下降可能是FGR发病机制中的一个重要因素。     

子宫内膜异位症患者血管内皮生长因子的测定

目的　探讨子宫内膜异位症 (内异症 )患者腹腔液及血清中血管内皮生长因子(VEGF)在内异症发病中的作用。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测 35例内异症患者 (Ⅰ期和Ⅱ期 16例 ,Ⅲ期和Ⅳ期 19例 )和 2 0例非内异症患者 (对照组 )腹腔液及血清中VEGF的含量 ,分析VEGF浓度及其与内异症分期R -AFS的相关性。结果　内异症患者腹腔液及血清中VEGF的浓度明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,2组腹腔液VEGF含量均高于同组的血清含量 (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ期和Ⅳ期内异症患者腹腔液及血清VEGF含量明显高于Ⅰ期和Ⅱ期患者 (P <0 .0 1) ,其中增生期患者又明显高于分泌期患者 (P <0 .0 5 ) ;而内异症患者R -AFS分期与腹腔液及血清VEGF含量无明显相关 ,腹腔液与血清VEGF含量无相关。结论　内异症患者腹腔液中VEGF升高是腹腔微环境改变导致内异症的原因。     

Ginsenoside Rg1 modulation on thrombospondin-1 and vascular endothelial growth factor expression in early renal fibrogenesis in unilateral obstruction

Renal interstitial fibrosis is the major histopathological change seen in a variety of renal disorders and is closely related to renal dysfunction. Progressive interstitial fibrosis accompanied by the loss of renal tubules and interstitial capillaries typifies all progressive renal disease. Thrombospondin-1 (TSP-1) is a major angiogenic inhibitor. It is demonstrated that TSP-1 levels were correlated with the loss of glomerular and peritubular capillaries and TSP-1 could promote renal scarring by effects on the endothelium. It has been reported that ginsenoside Rg1 inhibited renal interstitial fibrosis in rats via suppressing the expression of TSP-1. The present study was designed to examine whether ginsenoside Rg1 could modulate the integrity of the microvasculature and hence affect the progression of renal fibrosis in a rat unilateral ureteral obstruction (UUO) model. In UUO control kidneys, associated with interstitial fibrosis, lower peritubular capillary densities were prominent. These changes were all improved by ginsenoside Rg1 treatment. Interestingly, ginsenoside Rg1 decreased the expression of TSP-1 and enhanced vascular endothelial growth factor (VEGF) expression. The results show for the first time that ginsenoside Rg1 can evidently inhibit renal interstitial fibrosis in rats with UUO. The mechanism might be related to suppression of the expression of TSP-1 and to repair of the peritubular capillary.     

血管内皮因子在小儿神经母细胞瘤中的表达

目的　观察神经母细胞瘤的血管形成及其影响因素,探讨血管内皮生长因子(VEGF)与神经母细胞瘤分型、转移及预后的关系。方法　用免疫组化法观察2 5例神经母细胞肿瘤患儿VEGF的表达情况,并行图像分析。结果　神经母细胞瘤血管密度高,VEGF在神经母细胞瘤中有高表达,二者均与临床分期和分类有关,且VEGF含量与组织学分型,临床分期以及转移情况显著性相关。结论　神经母细胞瘤生长具有血管依赖性,VEGF和神经母细胞瘤相关,测定VEGF含量对于及早诊断神经母细胞瘤,判断其预后有积极意义。     

当归散对骨折早期血管内皮生长细胞因子活性的影响

目的：探讨当归散对骨折早期局部血管内皮增长因子表达的影响。方法：72只雄性SD大鼠建立开放骨折髓内固定动物模型,分当归散组、生理盐水组。两组分别于术后第3、5、7、14、21d相同时间点每组各取6只处死,取股骨全长标本,观察大体标本骨折愈合情况,并在同一条件下摄正侧位X射线片,在无菌操作下快速取下骨折区组织,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达。结果：VEGF mRNA在大鼠骨折第3天表达开始增强,当归散组术后第3天VEGF表达较生理盐水组弱,差异无统计学意义（P〉0.05）;第5、7、14、21天当归散组表达较对照组强,第7天VEGF表达到峰值,与生理盐水组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：骨折早期当归散促进VEGF表达增强。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子及其受体Flk1的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Fetal liver kinase1,Flk1)的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补阳还五汤组,大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组织化学法和酶联免疫法检测各组动物脑内VEGF、Flk1的表达和蛋白水平,同时评价动物神经功能。结果在正常大鼠脑内有少量VEGF和Flk1阳性细胞,脑缺血后VEGF和Flk1阳性细胞增加;与模型组比较,尼莫地平、补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,增强VEGF和Flk1的表达,提高VEGF蛋白水平(P<0.05);于7、14d补阳还五汤作用强于尼莫地平(P<0.05)。结论补阳还五汤增强大鼠局灶性脑缺血后VEGF及Flk1的表达和提高VEGF蛋白水平,是其抗脑缺血的可能作用机制之一。     

米非司酮治疗子宫肌瘤后患者血清VEGF及VEGFR2水平的变化

目的探讨米非司酮对子宫肌瘤患者血清血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的影响。方法选择71例至少有1个瘤体≥3 cm的子宫肌瘤患者,自月经来潮第5天开始,口服米非司酮25 mg,每日2次,连续服用3个月。分别在服药前后测定血清VEGF、VEGFR2、促卵泡生成素、促黄体生成素、雌激素、孕激素的浓度,同时用B超检测服药前后子宫和最大肌瘤体积、肌瘤数量及子宫动脉搏动指数和阻抗指数。结果服药后患者血清VEGF及VEGFR2水平较服药前显著减低,子宫动脉搏动指数明显下降,而阻抗指数明显升高。结论米非司酮可通过抑制血清VEGF和VEGFR2水平及有效减少子宫动脉血流来缩减肌瘤体积。