Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中程序性死亡配体-1-程序性死亡-1的表达及其意义

目的 了解Ⅳ型狼疮肾炎(LN)患者肾组织中程序性死亡配体-1(PD-L1)、程序性死亡-1(PD-1)的表达及PD-L1与PD-1、肾小管间质病理损害程度的关系、方法 采用免疫组织化学、原位杂交染色法，观察正常肾和Ⅳ型LN患者肾组织PD-L1、PD-1的表达，以及PD-L1阳性强度与肾小管—间质PD-1阳性细胞数、小管—间质病理损害程度的关系。结果 Ⅳ型LN肾组织表达PD-L1、PD-1较正常组增强：狼疮组肾小管PD-L1阳性强度与肾问质PD-1阳性细胞数呈正相关，与肾小管间质病理损害程度呈负相关。结论PD-L1～PD-1信号通路在Ⅳ型狼疮性肾炎肾小管间质病理损害中起重要作用。     

Bcl-2、Bax在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及意义

目的研究细胞凋亡调节蛋白(Bcl-2及Bax)在狼疮肾炎(LN)患者肾组织的表达情况及与LN肾脏病理改变的关系。方法2003-012003-04对广西医科大学第一附属医院的44例活动期LN患者用免疫组化方法检测肾组织中Bcl-2、Bax的表达,观察它们与LN肾脏病理改变的关系。结果(1)LN肾小球Bcl-2及Bax表达均增高,与肾小球细胞增殖程度及增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数呈正相关。(2)LN肾间质Bcl-2表达增高,与间质炎症细胞浸润程度正相关。(3)LN肾小管Bax表达增高,与肾小管间质病变呈正相关。结论LN肾组织存在Bcl-2、Bax蛋白异常表达。Bcl-2高表达在LN肾小球细胞增殖及肾间质炎症细胞浸润过程中可能起重要作用。Bax在肾小管过度表达与肾小管间质病变有关。     

狼疮性肾炎患者肾组织白介素-10的表达与巨噬细胞浸润的关系及其意义

目的:研究白介素-10(IL-10)在狼疮性肾炎(LN)患者肾组织中表达及巨噬细胞的浸润与肾脏病理和功能损害的关系.方法:采用微波免疫组织化学双重染色法测定正常肾组织和20例LN肾组织巨噬细胞浸润和IL-10的表达及与狼疮肾组织活动指数、肾脏组织学指标和功能损害的相关关系.结果:①正常肾小球及肾小管间质仅个别巨噬细胞存在,几乎无IL-10表达,而在各型LN,肾小球和肾小管间质见浸润的巨噬细胞及IL-10阳性细胞明显增多,且病变严重的Ⅳ型LN尤为明显.②肾小球KP1 巨噬细胞与肾小球细胞数增多,LN活动指数、慢性指数均呈显著相关,IL-10 细胞数也与这些指标相关.肾小管间质中KP1 巨噬细胞数及IL-10 细胞与小管损害、狼疮肾组织活动指数和慢性指数(特别是慢性指数)显著正相关.③肾小球肾小管间质中KP1 细胞数与24h尿蛋白排泄量、尿NAG排泄量有关,IL-10 细胞也与上述指标有关,而与血清学免疫指标无关.④肾小球KP1 与IL-10 细胞呈高度相关性,r=0.79(P＜0.001),小管间质中KP1 与IL-10 细胞也呈高度相关性:r=0.76(P＜0.001).70%KP1 细胞聚集在肾组织损害严重部位,同时IL-10阳性染色物主要存在于KP1 细胞中.结论:肾脏IL-10表达增加与巨噬细胞浸润在LN病理与功能损害中起重要作用.     

狼疮性肾炎患者白细胞介素-13的表达及其临床意义

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)患者血浆及肾组织白细胞介素-13(IL-13)的表达及其临床意义。方法 采用ELISA法检测血浆IL-13水平，采用免疫组化ABC法检测肾组织IL-13的表达。结果 LN患者血浆IL-13水平、肾小球及肾小管间质区IL-13表达较对照组和非LN肾脏病对照组增高，以Ⅳ型LN患者肾小球区IL-13表达最高，而不同病理类型的LN肾小管间质区IL-13表达无显著性差异。LN患者血浆及肾小管间质区IL-13表达与Ccr和血清C3呈负相关，与肾小管间质病变活动指数和肾小球病变活动指数呈正相关。结论 IL-13参与LN的分子病理机制，血浆及肾组织IL-13水平可能有助于判断狼疮活动程度。     

肥大细胞与狼疮肾炎肾间质纤维化关系的初步探讨

目的初步探讨狼疮肾炎(LN)患者肾间质中肥大细胞(MCs)与肾间质纤维化之间的关系。方法随机选取Ⅲ、Ⅳ、V型LN患者各10例作为研究对象,微小病变病(MCD)患者11例作为对照组。采用免疫组织化学、免疫荧光双重染色方法观察肾组织中类胰蛋白酶(Try)染色阳性MCs、蛋白酶活化受体-2(PAR-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及I型胶原(Col I)表达的变化。结果 3个LN组肾间质MCs数量、肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1及肾间质Col I表达面积均较MCD对照组明显升高,其中Ⅳ型LN组上述4项指标增加最明显,Ⅲ型LN组次之。MCs数量与肾小管上皮细胞PAR-2、TGF-β1及肾间质Col I阳性染色面积呈显著正相关;肾小管上皮细胞PAR-2与TGF-β1阳性染色面积间呈显著正相关;MCs数量与肾间质PAR-2和TGF-β1阳性染色细胞数量分别呈显著正相关;PAR-2阳性染色细胞数量和TGF-β1阳性染色细胞数量间也呈显著正相关;肾间质中Try阳性染色细胞与PAR-2或TGF-β1 阳性染色细胞存在部分重叠。结论 MCs可能参与LN肾间质细胞外基质蓄积,推测可能与释放Try、活化PAR-2、增加TGF-β1表达相关。     

狼疮肾炎患者肾组织中载脂蛋白E的表达及意义

目的 了解狼疮肾炎(LN)肾组织中载脂蛋白E(APOE)的表达,并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系.方法 用免疫组织化学方法对40例LN患者.肾组织APOE的表达进行检测,并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析.结果 健康肾脏组织有较弱的ApoE表达;LN肾组织APOE的表达较健康肾组织明显增高[肾小球(31.2±11.0)与(3.0±1.6);肾小管(71.64±8.90)与(0.60±0.06)],并且Ⅳ型LN患者肾组织APOE表达量高于非Ⅳ型LN患者[肾小球(38.4±4.5)与(18.0±4.6);肾小管间质(77.6±2.5)与(60.0±3.2)];Spearman相关分析显示LN肾组织ApoE的表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能呈显著相关(P＜0.01).结论 LN患者肾脏组织中ApoE的表达增高,尤以Ⅳ型LN为著,其表达量可反映LN肾脏活动性病变及肾脏损害情况.     

58例狼疮性肾炎病理与临床分析

目的 分析肾活检及相关实验室检测结果，探讨狼疮性肾炎（LN）病理类型与临床表现的关系。方法 对58例LN患者进行肾活检及常规实验室检查。根据WHO 1982年标准进行病理分型，并分别进行活动性指数（AI），慢性指数（CI）和肾小管间质病变（TIL）评分。结果 病理类型以Ⅳ型LN最多，占38％，其次Ⅱ型（26％）和Ⅴ型（24％），Ⅱ型与Ⅲ型多表现为肾炎综合征，Ⅳ型和Ⅴ型多表现为肾病综合征。Ⅳ型和LN的血,高血压，肾功能不全发生率最高，其AI亦显著高于其他类型。LN肾间质受累以Ⅳ型最为显著。血Cr水平与肾间质受累程度呈正相关。与TIL0－1级相比，2－3级病程相对要长。1－2级者尿蛋白排泄较0级与3级为高。结论 LN的病理类型与临床表现有一定关系，根据其临床表现和实验室检查可大致推测其病理类型。肾活检对判断疾病活动性，指导治疗与估计预后有重要意义。     

PPARγ在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及其意义

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在狼疮肾炎(LN)不同病变类型肾组织中的表达及其与肾脏病理改变之间的关系,探讨PPARγ在LN发病机制中的可能作用。方法根据临床及肾活检病理诊断,选择LN不同病变类型患者作为研究对象,其中Ⅱ型(6例),Ⅳ型(8例),Ⅴ型(7例)。以肾脏肿瘤切除术中远离肿瘤部位的正常肾组织(6例)为对照。光镜下观察并计数肾脏病变活动指数、间质病变指数；用免疫组织化学方法对各例肾组织PPARγ的表达进行检测,并对其与肾脏病变的相关性进行分析。结果LN患者肾组织。肾小管、肾小球及间质浸润细胞中PPARγ脚表达较正常对照组均显著上调,其中Ⅳ型LN肾组织肾小管、肾小球及间质浸润细胞PPARγ表达显著高于Ⅱ型、Ⅴ型；肾小球PPARγ染色阳性细胞数目与肾脏病理活动积分及间质病变指数之间呈显著正相关(r=0．94；P＜0．01)。结论PPARγ在LN肾组织肾小管、肾小球及间质浸润细胞高表达对于限制LN肾脏病变发展可能具有重要作用     

Defensinα1-3在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及意义

目的探讨defensin α1-3在不同病理类型狼疮肾炎(LN)肾组织中的表达及意义.方法收集47例LN患者的肾活检的肾组织,包括世界卫生组织(WHO)Ⅱ型7例、Ⅲ型6例、Ⅳ型29例、Ⅴ型5例,以及11例泌尿外科手术切除的远离肿瘤的肾皮质区的肾组织作为正常对照,使用defensin α1-3单克隆抗体进行免疫组织化学染色,定量分析defensin α1-3在各个病理类型LN肾组织及正常肾组织中的表达及分布,并分别与相应的增殖细胞核抗原(PCNA)、肾小球病变活动指数(GAI)和肾间质病变活动指数(TIAI)进行相关性的分析.结果各个病理类型LN肾组织及正常肾组织的肾小球、肾间质中均有defensin α1-3的表达,其中肾小球的defensin α 1-3的表达在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型LN组明显高于正常对照组,肾间质中defensin α1-3表达在Ⅳ型LN组高于其他类型的各组及正常对照组.Ⅳ型LN组的肾小球区域的defensin α1-3的表达与Ⅳ型LN组的肾小球区域的PCNA阳性细胞数(r=0.785,P＜0.05)、及GAI评分之间(r=0.749,P＜0.05)呈正性线性相关.Ⅳ型LN组的肾间质的defensin α 1-3的表达与其TIAI之间呈正性线性相关(r=0.767,P＜0.01).结论defensin α 1-3可能参与了Ⅳ型LN的发病.     

RANTES在狼疮肾炎吕的表达及其意义

目的：了解狼疮肾炎（LN）肾组织中化学趋化因子激活正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法：采用微波免疫组织化学染色（SP法）和原位分子杂交技术检测LN肾脏RANTS的表达，并进一步分析其与LN活动指数、肾脏病理和功能损害的关系。结果：狼疮肾炎组织中RANTES表达显著增高，以WHOⅣ型为显著。RANTES在肾小球和肾小管均有表达，但肾小管表达更显著。LN肾组织RANTES表达与肾组织活动指数、肾脏病理改变和肾功能损害显著相关。结论：RANTES可能参与了LN的发病机制，肾组织中RANTES的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变和进行性肾损害的参考指标。     

狼疮性肾炎肾组织CD80与CD86的表达及其意义

目的 研究T淋巴细胞活化分子CD80与CD86在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达变化及其与临床指标之间的相关性.方法 肾组织标本来源于2004年12月-2008年10月哈尔滨医科大学附属第一医院住院患者,其中女性44例,男性5例,年龄(28±16)岁.用免疫组织化学法检测狼疮性肾炎及微小病变患者肾组织中的CD80与CD86的表达情况,免疫比浊法检测24 h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测血尿素氮、血肌酐及血浆白蛋白等临床指标.结果 CD80在肾小管上皮细胞、肾间质有阳性表达,在肾小球无表达,而CD86在肾小管上皮细胞、肾间质及肾小球均有表达.CD80与CD86在肾小管间质中的表达水平随着狼疮性肾炎患者肾小管间质病变程度的加重而增强(r=0.574,P<0.001;r=0.534,P<0.001),且CD80的表达与CD86的表达成正相关.CD80与CDB6的表达与患者系统性红斑狼疮疾病活动指数积分(r=0.319,P=0.011;r=0.324,P=0.011)、24 h尿蛋白定量(r=0.424,P=0.003;r:0.408,P=0.004)、肌酐清除率(r=-0.535,P=0.000;r=-0.543,P=0.000)及抗dsDNA抗体滴度(r=0.353,P=0.012;r=0.359,P=0.013)具有明显相关性.结论 CD80与CD86在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达水平与肾间质病变具有明显相关性,并且与狼疮性肾炎患者肾活检时的肾功能及活动性明显相关.     

循环中内皮细胞损伤生物标志物在判断狼疮性肾炎肾脏血管病变中的应用

目的：观察狼疮性肾炎（LN）患者血液中血栓调节蛋白（TM）、血管内皮细胞粘附分子1（VCAM-1）和E选择素（E-selectin）表达情况,探讨内皮损伤生物标记物与肾脏血管病变的关系.方法：30例经肾活检证实为LN伴血管病变患者、30例LN不伴血管病变患者和25名健康志愿者,ELISA法检测血循环中可溶性TM、VCAM-1和E-selectin水平.结果：不伴血管病变组LN患者TM和VCAM-1水平与正常对照组无明显差别,伴血管病变组患者TM和VCAM-1水平均显著高于不伴血管病变组和正常对照组（P＜0.01）.伴血管病变患者的E-selectin水平与正常对照组无明显差异.伴血管病变组患者TM与肌酐水平呈正相关（r=0.625,P＜0.01）.在伴血管病变LN患者中,合并血栓性微血管病变（TMA）患者TM水平明显高于不伴有TMA患者（P＜0.01）.结论：结合肾组织病理检查,检测循环中的TM和VCAM-1对评估LN患者肾脏血管病变具有重要的临床意义.     

弥漫增生型狼疮肾炎和膜型狼疮肾炎的不同细胞因子表达谱提示不同的免疫学发病机制

目的 从系统生物学角度全面研究弥漫增生型狼疮肾炎(Ⅳ型LN)和膜型狼疮肾炎(Ⅴ型LN)患者血清细胞因子表达谱.方法 分离静脉血清,通过抗体芯片技术同时检测4种Th1和5种Th2细胞因子表达.结果 ①细胞因子表达谱:在检测的9种细胞因子中,Ⅳ型LN患者有7种明显升高,包括3种Th1细胞因子[干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α)]和4种Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-13);而Ⅴ型LN仅有4种细胞因子表达上调(IL-2、IL-4、IL-10和IL-13).②相关性分析:Ⅳ型LN患者细胞因子与临床表现之间相关性较强,如IL-5与抗dsDNA抗体滴度及血肌酐呈正相关、与C3呈负相关;IL-10与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动指数(SLEDA1)呈正相关、与尿蛋白及血红蛋白浓度均呈负相关;IL-13与尿蛋白浓度呈负相关,IL-1与SLEDAI呈正相关、与血红蛋白浓度呈负相关.Ⅴ型LN患者仅IL-1与血肌酐之间呈正相关,IL-4与尿蛋白之间呈负相关.结论 不同病理分型的LN患者体内细胞因子表达谱不同,提示不同病理分型的LN其内在的免疫学发病机制存在差异,也提示不同的细胞因子表达可能代表不同类型的LN.     

Toll样受体9在狼疮肾炎患者外周血B淋巴细胞和肾组织中的表达及临床意义

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)在狼疮肾炎(LN)患者外周血B淋巴细胞和肾组织的表达及其临床意义.方法 分别采用细胞内流式细胞术和免疫组织化学方法对对照组和LN患者外周血B淋巴细胞及肾组织中TLR9表达情况进行比较,并对TLR9表达与临床指标相关性进行分析.结果 活动期LN患者外周血CD19+B淋巴细胞TLR9的表达率高于非活动期LN患者及对照组(P＜0.01),且其表达率与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度呈正相关(P＜0.01).LN患者肾组织中肾小球、肾小管间质TLR9表达均较健康组织增高(P＜0.01),其中国际肾脏病学会/肾脏病理学会(ISN/RPS)的Ⅳ型LN肾组织TLR9表达水平较Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ型升高(P＜0.01),且肾小球TLR9表达水平与肾小球细胞增殖程度、肾脏病理活动指数、尿蛋白定量(24 h)呈正相关(P＜0.01).与估计的肾小球滤过率(eGFR)呈负相关(P＜0.01);肾小管间质TLR9表达水平与肾脏病理活动指数、肾小管问质损害程度、尿蛋白定量(24 h)也呈正相关(P＜0.01),与eGFR呈负相关(P＜0.01).结论 TLR9参与了LN患者B淋巴细胞的异常活化及肾脏病理损伤过程.     

慢性移植物抗宿主病狼疮样肾炎小鼠巨噬细胞移动抑制因子的表达及作用

目的：观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在实验性狼疮样肾炎小鼠肾组织中的表达及作用。方法：建立移植抗宿主病（GVHD）狼疮样肾炎小鼠动物模型，用原位杂交及免疫组织化学染色法，观察MIF mRNA及蛋白质在狼疮样肾炎小鼠组织中的表达，及其与肾组织中的表达，及其与肾组织病理变化、肾功能损害的可能关系。结果：随着狼疮肾炎的发展，MIF在肾组织中的表达增多；MIF的表达与狼疮肾炎组织的活动性病变有明显的相关关系，与肾脏病理及肾功能损害有一定的相关关系。结论：MIF在介导GVHD狼疮肾炎病损中起重要作用，其表达增多可反映狼疮肾炎活动性病变和肾脏损害。     

狼疮肾炎患者Ⅰ型干扰素诱导基因表达的研究

目的 了解Ⅰ型干扰素(IFN)诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3在狼疮肾炎(LN)患者的表达,并分析IFN积分与临床特征之间的相关性.方法 ①同步收集12例弥漫增生型LN患者.肾组织和外周血,抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3的表达水平.②收集119例LN患者的临床资料,计算每例患者的IFN积分,并与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)积分、抗dsDNA抗体、补体、蛋白尿水平等指标进行相关性检验.结果 ①弥漫增生型LN患者肾组织高表达OAS2[(1.46±1.15)与(0.60±0.59)]和OAS3[(2.16±1.63)与(0.93±0.95)],P<0.05;IFIT4[(1.68±1.76)与(0.96±0.71)]、IFI44[(3.23±2.67)与(1.65±1.95)]、Ly6e[(3.54±2.09)与(2.34±2.57)]、OAS1[(2.52±1.86)与(1.34±0.28)]的表达量高于对照组1个循环左右.狼疮患者外周血高表达IFIT4[(11.2±7.7)与(1.56±2.71)]、IFI44[(9.5±6.1)与(2.6±4.4)J、Ly6e[(17.5±13.7)与(7.1±10.3)]、OAS1[(8.68±6.36)与(1.15±1.89)]、OAS2[(10.41±7.71)与(0.66±0.82)]、OAS3[(8.75±4.34)与(0.89±1.34)],P<0.05.Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3在肾脏组织和外周血的表达呈同步增高趋势.②根据119例患者IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3的表达计算IFN积分,发现IFN积分与SLEDAI、抗dsDNA抗体呈正相关(r分别是0.216和0.394,P<0.05),与血清补体水平呈负相关(r=0.315,P<0.01).结论 Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3外周血表达的水平在一定程度上反映LN肾损害情况,IFN积分对监测LN患者的疾病活动有一定的特异性.     

骨桥蛋白及核因子-κB在狼疮性肾炎肾组织中的表达及意义

目的 探讨骨桥蛋白（OPN）及核因子-κB（NF-κB）与狼疮性肾炎（LN）患者临床及病理之间的关系.方法 应用免疫组化方法检测56例LN患者及10例对照组肾组织中OPN及NF-κB的表达,并与临床病理指标进行综合分析.结果 OPN及NF-κB在LN肾组织表达率高于对照组,以Ⅳ型显著,肾组织中OPN的表达量与血肌酐、24小时尿蛋白定量、狼疮性肾炎疾病活动指数、病理活动性指数呈正相关（P＜0.05）,但与血清C3、病理慢性指数无明显相关性;NF-κB与Scr、病理活动性指数、病理慢性指数、狼疮性肾炎疾病活动指数、24小时尿蛋白定量呈正相关（P＜0.05）.OPN及NF-κB在LN肾组织中的表达呈显著正相关（P＜0.01）.结论 LN肾组织中OPN及NF-κB的异常表达与肾脏病理改变及肾损害临床指标密切相关,其表达量与肾损害严重程度一致,且OPN和NF-κB具有协同作用,在LN发病机制中可能起重要作用.     

慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠肾组织RANTES表达及泼尼松的调控作用

目的 观察趋化因子RANTES（“regulated upon activation normal T cell expressed and secreted”）在慢性移植抗宿主病（VGHD）狼疮样小鼠肾组织中的表达及泼尼松的调控作用。方法 GVHD狼疮样小鼠模型参照有关文献建立。按随机设计原则将模型动物分两组：即模型组（A组）和泼尼松治疗组（B组）,另设正常对照组（C组）,每组均有8只动物。RANTES的蛋白表达采用免疫组织化学方法,mRNA表达采用原位杂技术检测。结果 ①模型组（A组）肾组织中RANKTES蛋白表达显著高于正常对照组（C组）（P＜0．05）,肾小球和肾小管间质中均有表达,尤以肾小管－间质表达更为丰富;而泼尼松治疗组（C组）RANTES在肾小球和肾小管－间质表达均显著减少（P＜0．05）。②A肾组织中RANTESmRNA表达显著高于C组（P＜0．05）,经泼尼松治疗后RANTESmRNA以到明显抑制。③A组中RANTES蛋白和mRNA表达呈正相关（r＝0．612,PO＜0．05）。结论 慢性GVHD狼疮样小鼠肾组织中RNNTES蛋白和mRNA表达均显著增高,泼尼松在改善肾组织病理改变的同时,对RANTES表达亦起抑制作用,提示RANTES可能参与了狼疮肾炎的发病机制,泼尼松抑制RANTES过度表达可能是其在狼疮肾炎中发挥治疗作用的机制之一。